兽医药理学实验课件
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《兽医药理学实验》课件
数据记录与分析
对实验数据进行及时记录，并对结果进行分析和解释。
实验总结与报告撰写
对实验结果进行总结，并撰写规范的实验报告。
02
实验一：药物剂量的确定
实验目的
学会根据药物浓度计算给 药体积。
了解不同给药途径对药物 剂量的影响。
掌握根据动物体重计算药 物剂量的方法。
01
03 02
实验原理
01
药物剂量是指给药动物使用的药物数量，是影响药 物作用的重要因素。
观察实验现象
观察混合后的药物溶液是否出 现沉淀、变色、气泡等现象； 记录实验数据。
准备实验材料
选择需要研究的药物A、药物B 和适量的溶剂；准备好实验仪 器和试剂。
混合药物溶液
将药物A和药物B的溶液按一定 比例混合。
分析实验结果
根据观察到的实验现象和记录 的实验数据，分析是否存在药 物配伍禁忌，并得出结论。
药效学原理
药效学原理是本实验的核心原理， 通过药效学实验，可以了解药物对 机体的作用性质、作用方式、作用 强度等。
药代动力学原理
本实验涉及的药代动力学原理主要 涉及药物在体内的吸收、分布、代 谢和排泄过程。
实验步骤
实验准备
包括实验动物、实验试剂和仪器的准备。
实验操作
包括给药方式、给药剂量、实验观察指标等。
实验步骤
步骤一
样品采集与处理。采集动物组织、尿液、血液等样品，进 行匀浆、过滤、离心等处理，以制备待测溶液。
步骤三
测定方法选择与优化。根据药物残留的种类和限量标准， 选择合适的检测方法（色谱法、质谱法或免疫分析法）， 并对实验条件进行优化。
步骤二
样品净化与富集。根据药物残留的性质和检测方法的要求 ，选择合适的净化方法和富集技术，如液-液萃取、固相 萃取、凝胶渗透色谱等。
对实验数据进行及时记录，并对结果进行分析和解释。
实验总结与报告撰写
对实验结果进行总结，并撰写规范的实验报告。
02
实验一：药物剂量的确定
实验目的
学会根据药物浓度计算给 药体积。
了解不同给药途径对药物 剂量的影响。
掌握根据动物体重计算药 物剂量的方法。
01
03 02
实验原理
01
药物剂量是指给药动物使用的药物数量，是影响药 物作用的重要因素。
观察实验现象
观察混合后的药物溶液是否出 现沉淀、变色、气泡等现象； 记录实验数据。
准备实验材料
选择需要研究的药物A、药物B 和适量的溶剂；准备好实验仪 器和试剂。
混合药物溶液
将药物A和药物B的溶液按一定 比例混合。
分析实验结果
根据观察到的实验现象和记录 的实验数据，分析是否存在药 物配伍禁忌，并得出结论。
药效学原理
药效学原理是本实验的核心原理， 通过药效学实验，可以了解药物对 机体的作用性质、作用方式、作用 强度等。
药代动力学原理
本实验涉及的药代动力学原理主要 涉及药物在体内的吸收、分布、代 谢和排泄过程。
实验步骤
实验准备
包括实验动物、实验试剂和仪器的准备。
实验操作
包括给药方式、给药剂量、实验观察指标等。
实验步骤
步骤一
样品采集与处理。采集动物组织、尿液、血液等样品，进 行匀浆、过滤、离心等处理，以制备待测溶液。
步骤三
测定方法选择与优化。根据药物残留的种类和限量标准， 选择合适的检测方法（色谱法、质谱法或免疫分析法）， 并对实验条件进行优化。
步骤二
样品净化与富集。根据药物残留的性质和检测方法的要求 ，选择合适的净化方法和富集技术，如液-液萃取、固相 萃取、凝胶渗透色谱等。
兽医药理学课件(第1章)PPT课件
A A
2、影响生物膜的功能： 如局部麻醉药通过影响Na+的跨膜转运而发挥作用 3、影响体内活性物质： ASP抑制前列腺素合成而发挥解热、镇痛和抗炎 4、影响递质释放或激素分泌： 如麻黄碱促进末N梢释放(NE)治疗哮喘 5、影响生理物质转运： 如利尿药抑制肾小管Na+-K+、Na+-H+交换而发挥排钠利尿 6、影响免疫机制： 免疫增强药及免疫抑制药通过影响免疫机制发挥疗效。 7、影响受体功能： 阿托品阻断M受体使内脏平滑肌松弛
第一节
药物效应动力学 Pharmacodynamics
NE -R 激活腺苷酸环化酶பைடு நூலகம்
D作用
一.药物的基本作用(Basic Effects of Drugs)
(一)药物作用和药理效应的关系 (Drug action & Pharmacological effect)
药物作用:是指药物与机体细胞间的初始作用，
（二）特异性药物作用机制:（与D化学结构有关）
1、干扰或参与代谢过程：
①对酶的影响，多数药物能抑制酶的活性，如新斯的明竞争性抑制胆 碱酯酶，奥美拉唑不可逆性抑制胃粘膜 H+-K+ATP酶（抑制胃酸分泌）， 而有些药本身就是酶，如胃蛋白酶。 ②参与或干扰细胞代谢，如5-氟尿嘧啶结构与尿嘧啶相似，掺入癌细 胞DNA及RNA中干扰蛋白合成而发挥抗癌作用。 ③影响核酸代谢，许多抗癌药是通过干扰癌细胞DNA或RNA代谢过程而 发挥疗效的。许多抗生素（包括喹诺酮类）也是作用于细菌核酸代谢而 发挥抑菌或杀菌效应的。
（一）非特异性药物作用机制:（与D理化性质有关）
1.渗透压作用: 如甘露醇的脱水作用. 2.脂溶作用: 如全身麻醉药对中枢神经系统的麻醉作用. 3.影响PH: 如抗酸药中和胃酸,碳酸氢钠 氢氧化铝 4.络合作用: 如二巯基丙醇，络合汞、砷等重金属离子中毒. 5.膜稳定作用： 阻止动作电位的产生及传导，如局部麻醉药。
兽医药理学(全套课件341P)
等，以后随着经验的累积，便能利用这些有毒植物来解除疾苦，治疗疾病，如致泻植物可治疗便秘， 这些有毒的植物就成为药物，这就是药物的起源。
在古代，无论是中国还是外国，所用药物都来源于自然界，主要是植物药，其次是动物药和矿物药。
随着人类不断实践经验的积累及社会的进步与科学的发展，药物的种类不断的增加，药物的来源也 不断的扩大，药物的治疗经验等都不断的丰富和提高。这一时期从远古时代直到了19世纪初。
2020/12/30
13
生药中提取有效成分。到19世纪初，由于生物学、化学、生理学等科学的发展，人们能利用化学的
知识和技术，开始从生药中提取有效成分及化学合成药物。
德国化学家塞提纳（F.W.Ser turner，1783---1841）于1805年首先从鸦片中提出吗啡，通 过对狗的实验证明其有镇痛作用，而后，士的宁（1818年）由马钱子中提取的生物碱，咖啡因 （1819年）由茶叶（含1%—5%）或咖啡豆（1%—2%）中提取的生物碱，奎宁（1820年）由茜 草科植物金鸡纳树皮中提取的生物碱，阿托品（1831年）由茄科植物颠茄、曼佗罗、莨菪等中提取 的生物碱，以后有许多天然植物的有效成分先后被提取出来。
2020/12/30
20
➢ 兽医药理学阶段。国际兽医药理学创立于20世纪20年代，它以药物作用不同对象从药理学分化成
为独立学科。这一观点是于2000年8月北京全国药理毒理第七次学术讨论会，由兽医药理学会理 事长陈仗榴提出的，他认为1917年美国康乃尔大学兽医学院ks教授出版的 《Veterinary Pharmacology and Therapeutics》为标志。
2020/12/30
77
➢ “动物医药品”和“动物保健品”是近年来被世界许多国家使用的新词汇，它的职能是取代兽药或者 “兽用医药品”等词。
在古代，无论是中国还是外国，所用药物都来源于自然界，主要是植物药，其次是动物药和矿物药。
随着人类不断实践经验的积累及社会的进步与科学的发展，药物的种类不断的增加，药物的来源也 不断的扩大，药物的治疗经验等都不断的丰富和提高。这一时期从远古时代直到了19世纪初。
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生药中提取有效成分。到19世纪初，由于生物学、化学、生理学等科学的发展，人们能利用化学的
知识和技术，开始从生药中提取有效成分及化学合成药物。
德国化学家塞提纳（F.W.Ser turner，1783---1841）于1805年首先从鸦片中提出吗啡，通 过对狗的实验证明其有镇痛作用，而后，士的宁（1818年）由马钱子中提取的生物碱，咖啡因 （1819年）由茶叶（含1%—5%）或咖啡豆（1%—2%）中提取的生物碱，奎宁（1820年）由茜 草科植物金鸡纳树皮中提取的生物碱，阿托品（1831年）由茄科植物颠茄、曼佗罗、莨菪等中提取 的生物碱，以后有许多天然植物的有效成分先后被提取出来。
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20
➢ 兽医药理学阶段。国际兽医药理学创立于20世纪20年代，它以药物作用不同对象从药理学分化成
为独立学科。这一观点是于2000年8月北京全国药理毒理第七次学术讨论会，由兽医药理学会理 事长陈仗榴提出的，他认为1917年美国康乃尔大学兽医学院ks教授出版的 《Veterinary Pharmacology and Therapeutics》为标志。
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➢ “动物医药品”和“动物保健品”是近年来被世界许多国家使用的新词汇，它的职能是取代兽药或者 “兽用医药品”等词。
兽医临床药理学PPT课件
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【药物治疗】 （1）第1天：黄芪多糖注射液20ml稀释猪瘟细胞苗
50头份，每头猪注射10-20头份，同时，另外一侧 注射20%氟苯尼考注射液5-8ml； （2）第2-4天：一侧注射双黄连注射液10ml+硫酸安 普霉素0.2g,另一侧注射20%氟苯尼考注射液5-8ml ； (3)同时，在10000ml饮水中加入电解多维10：研究药物对动物机体生理与生化功能的影响和临床效
应，以及药物的作用原理。简言之，即研究药物对动物机体 的影响。 药效学研究目的：确定动物个体的治疗剂量，以便在每个动 物身上能得到最大的疗效和最少的副作用；观察剂量、疗程 和不同给药途径与疗效之间的关系。
.
2、药动学与生物利用度研究
仔猪身体１-2分钟，头部用药棉沾高锰酸钾水清洗 病灶，然后擦干、凉干涂上龙胆紫。
3、个体治疗：每头病猪用青霉素8万单位+地米
1mg进行肌肉注射，每天两次，连用３－５天。
.
二、仔猪红痢
[诊断要点]
1-3日龄子猪多发； 病理变化是肠坏死； 临床症状是出现血性下痢； 死亡率极高。
.
1、预防：注意生产前产房消毒；生产后对乳房、产
.
五、仔猪水肿病 [诊断要点]
多发于秋春季节断奶1-2周后的仔猪； 本病发生突然，而且多发于采食旺盛、个体肥胖的 小猪； 水肿病在临床上有两大病理特性，即皮下水肿和运动 麻痹。
.
本病的治疗相当困难。原因之一是病程过于急促，往 往来不及治疗即告死亡。 对已有早期病例发生的猪场，及时调整饲料的配比 和用法，减少投料量或改为麸皮粥； 亚硒酸钠-维生素E注射液（0.1ml/kg)+地塞米松磷酸 钠2-4mg+5%氧氟沙星注射液3-5ml；一日两次，连 续3-5天； 同时，经口灌服适量泻剂，如硫酸镁、硫酸钠，清理 肠道。一天一次，连续2-3天。
【药物治疗】 （1）第1天：黄芪多糖注射液20ml稀释猪瘟细胞苗
50头份，每头猪注射10-20头份，同时，另外一侧 注射20%氟苯尼考注射液5-8ml； （2）第2-4天：一侧注射双黄连注射液10ml+硫酸安 普霉素0.2g,另一侧注射20%氟苯尼考注射液5-8ml ； (3)同时，在10000ml饮水中加入电解多维10：研究药物对动物机体生理与生化功能的影响和临床效
应，以及药物的作用原理。简言之，即研究药物对动物机体 的影响。 药效学研究目的：确定动物个体的治疗剂量，以便在每个动 物身上能得到最大的疗效和最少的副作用；观察剂量、疗程 和不同给药途径与疗效之间的关系。
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2、药动学与生物利用度研究
仔猪身体１-2分钟，头部用药棉沾高锰酸钾水清洗 病灶，然后擦干、凉干涂上龙胆紫。
3、个体治疗：每头病猪用青霉素8万单位+地米
1mg进行肌肉注射，每天两次，连用３－５天。
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二、仔猪红痢
[诊断要点]
1-3日龄子猪多发； 病理变化是肠坏死； 临床症状是出现血性下痢； 死亡率极高。
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1、预防：注意生产前产房消毒；生产后对乳房、产
.
五、仔猪水肿病 [诊断要点]
多发于秋春季节断奶1-2周后的仔猪； 本病发生突然，而且多发于采食旺盛、个体肥胖的 小猪； 水肿病在临床上有两大病理特性，即皮下水肿和运动 麻痹。
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本病的治疗相当困难。原因之一是病程过于急促，往 往来不及治疗即告死亡。 对已有早期病例发生的猪场，及时调整饲料的配比 和用法，减少投料量或改为麸皮粥； 亚硒酸钠-维生素E注射液（0.1ml/kg)+地塞米松磷酸 钠2-4mg+5%氧氟沙星注射液3-5ml；一日两次，连 续3-5天； 同时，经口灌服适量泻剂，如硫酸镁、硫酸钠，清理 肠道。一天一次，连续2-3天。
《兽医药理学实验》PPT课件
• 实验设计基本原则
• 随机原则
• 使每一实验对象都有同等的机会抽到实验组或对照 组中，除处理因素外其他因素尽可能均衡一致，从 而抵消非实验因素的影响。
• 对照原则
• 组间对照：阴性对照，阳性对照，同因素不同水平 对照；
• 自身前后对照
• 重复原则
医学PPT
6
• 实验动物 •动物的选择
• 小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些 药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用于 避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统 药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。 • 大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测 定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性 和慢性毒性实验。
医学PPT
7
• 实验动物 •动物的选择
• 豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于 抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心 脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感，常用于抗结 核病药的实验。 • 家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对小肠的 作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温实验，用 于热原检查。 • 狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用 狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影 响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。
动物医学、动植检专业
兽医药理学实验
河南科技大学动物科技学院 主讲：赵振升 白东英 王国永
医学PPT
1
本课程实验内容
实验一 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 实验九
药理实验基础知识
药物的剂量与剂型对药物效应的影响
毛果芸香碱与阿托品对瞳孔及对光反射的影响
药物急性半数致死量的测定
斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾在 50'C热水中浸泡半分钟使血管扩张。左手拉尾端，右手持注射器 将针头刺入尾静脉，推入药液。
兽医药理学ppt课件255p
也有根据中草药的有效成分，用化学方法提取，
再分离精制而成。如盐酸麻黄素。硫酸阿托品等。 是由人工化学合成的或在天然化学物质的基础上， 加入某些化学基团后合成的药品。 如：磺胺内药物
21
（三）生物技术药物(biotech drug, Biopharmaceuticals)
利用微生物或动物脏器组织制得的药品。 如抗生素、V、H、生化药品及生物制品等。
实验药理学方法
实验治疗学方法 临床药理学方法
33
一 实验药理学方法
1 体内试验（In vivo test） 利用健康的标准动物，在麻醉或不麻醉状态 下，进行药效学和药动学分析。
2 体外试验（In vitro test ）
采用动物离体器官、组织、细胞或细胞器等 作为实验材料，观察药物的作用，亦称离体试验。
27
（二）药理学的任务
药效动力学 药代动力学
主要任务是研究和阐明以下两个方面的内容：
28
1 药效动力 Pharmacodynamics, PD 全称药物效应动力学，简称药效学。是研究 药物对机体作用规律的科学，既研究药物对机体 （或病原体）的作用和作用机制。换言之，研究 在药物的影响下，机体细胞功能如何发生变化。
（一）学习方法
1.紧密结合基础课
2.紧密联系临床实践
3.重视药理实验课
31
（二）学习目的
1.为临床有效、合理、安全地使用药物， 防治疾病奠定理论基础。从而避免盲目用药带 来的不良后果。
2.为寻找新药或老药新用提供线索。
3.为探索生物机体的细胞生理生化及病理 过程提供重要的实验资料。
32
第三节 药理学的研究方法
18
6、鞣质 内服;止泻、作为生物碱、重金属中毒的 解毒药。 外用：止血、烧伤。
《兽医药理学实验》课件
常见问题及解答
1 实验过程中出现的问题
解答实验过程中可能遇到的常见问题。
3 常见问题答疑
回答关于药理学实验常见问题的解答。
2 解决方案
提供解决问题的有效方案和建议。
总结
总结兽医药理学实验的目的、结果和意义。
参考文献
列出参考文献和学术资料来源。
《兽医药理学实验》PPT 课件
兽医药理学实验课件包括引言、实验步骤、实验结果及分析、实验注意事项、 常见问题及解答、总结和参考文献。
引言
本部分介绍了兽医药理学实验的目的、背景和原理。
实验步骤
实验前准备
包括实验材料和设备 准备。
药物制备
详细说明药物的配制 方法。
动物处理
讲述动物的选择和处 理步骤。
实验操作
介绍实验的示
图表和实验数据的展示。
数据分析
对实验数据进行分析和解读。
结果讨论
对实验结果进行讨论和思考。
实验注意事项
安全注意事项
强调使用实验室安全设备和遵守实验安全规范。
实验流程注意事项
提醒实验者注意实验过程中的关键细节和步骤。
用药注意事项
阐述使用药物的注意事项和剂量控制。
兽医药理学课件
兽医药理学课件
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兽医药理学课件
• 药效学
• 主要抑制脑干网状结构，阻滞神经冲动的传导，阻 抑觉醒反应。具有镇静、安定、肌松和抗惊厥作用。地 西泮镇静作用较强，能使兴奋不安的动物安静，使有攻 击性的狂躁动物变为驯服，易于接近和管理。如猪、牛 肌内注射1h或静脉注射5min后，即出现镇静、催眠与 肌松现象。 • 目前认为本类药物的作用可能是掩盖GABA（y-氨 基丁酸）受体的调控蛋白质结合，而使GABA受体活化， 活化后受体即可与抑制性神经递质GABA结合，从而增 强GABA神经的抑制作用。
• 3．混合麻醉 • 采用两种或两种以上的麻醉药混合在一起进行麻醉，以增强麻醉效果减低药物的毒性，如水 含氯醛—硫酸镁注射液。 • 4．配合麻醉 • 以某种麻醉药为主，同时配合其他药物进行麻醉。例如，先用水合氯醛以达到浅麻醉，在手 术时再用普鲁卡因，这样，可降低水合氯醛的用量和毒性。
• 中枢神经系统各个部位对麻醉药有不同的敏感性，其作用的顺序是大脑皮层、间脑、中 •脑、桥脑和脊髓，最后为延脑。麻醉结束后，血药浓度下降，中枢神经系统各个部位以相反 •顺序恢复其兴奋性，表现动物的苏醒。 • 由于吸人麻醉是通过吸气使药物进入循环，又经呼吸从循环排出体外。因此，只要机体的呼 吸与循环保持正常，麻醉药可迅速排出。由此可见，脑组织中血药浓度的上升产生的麻
•
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兽医药理学实验
３ 实验材料
【实验药品及菌株】 1.药品
氨苄西林（中国药品生物制品检定所，含量：86％） 阿米卡星（齐鲁制药有限公司， 效价：650u/mg） 四环素（中国药品生物制品检定所，含量：95%） 粘菌素（中国药品生物制品检定所，含量：99.5％）
兽医药理学实验
３ 实验材料
【实验药品及菌株】 2.培养基 MH营养肉汤、LB营养肉汤、麦康凯琼脂 生理盐水 3. 菌株 大肠杆菌标准菌株ATCC25922，由中国兽 医药品监察所提供。
兽医药理学实验
5 注意事项
2. 移液器的使用
① 调刻度。 ② 不倒立。 ③ 准确吸取液体。 ④ 换枪头。
3、其他注意事项
① 培养板上做好标记（班级、姓名、时间、药物名称及 浓度）。
② 每药做三个重复，每个板做一个阴性对照和一个阳性 对照。
③ 超净台内用过的不需要的东西都必须放到废液缸内。 ④ 实验完后要收拾好台面。
128，64，32，16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125，0.06
兽医药理学实验
4. 另外在同一块板上做一排阴性对照（仅加 空白肉汤不加菌液）和一排阳性对照（加 菌液肉汤不加药液）；
5. 将96孔板放入37℃恒温培养箱培养16~20 小时后，观察结果。
兽医药理学实验
1
ห้องสมุดไป่ตู้
A
①100µL肉汤
兽医药理学实验
３ 实验材料
【实验器材】 96孔细胞培养板、移液枪1mL、200μl 各 一支、枪头1mL、200μl、小试管、锥形瓶 、试管架、酒精灯、平皿、酒精棉; 分析天平、自动高压灭菌锅、超净工作台、 37℃恒温培养箱。
兽医药理学实验
４ 实验步骤 1. 在96孔板的前三排即A/B/C三排每孔中各 加入空白肉汤100μL
②100µL药物
最后加100µL菌液
B 同A
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL
C 同A
D
步骤同A， 更换药物
E
同D
F
同D
G
阳性对照100µL肉汤
+100µL菌液
空白肉汤100μl 药液100μl
空白肉汤100μl
空白肉汤100μl
空白肉汤100μl
空白肉汤100μl
兽医药理学实验
3. 再在每一孔中加入稀释好的菌液100μl,这样 就形成测定一个药物MIC值的三次重复（ A/B/C三排样品）。此时每孔药物浓度即最 终药物浓度从左到右依次为(浓度: 单位/mL 或µg/mL)：
兽医药理学实验
6 实验结果
【结果判定】 以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药
物浓度为MIC。当阳性对照孔内细菌明显 生长试验才有意义。当在微量肉汤稀释法 出现单一的跳孔时，应记录抑制细菌生长 的最高药物浓度。如出现多处跳孔，则不 应报告结果，需重复试验。
兽医药理学实验
【结果列表】
表1 四种药物对大肠杆菌的MIC值（μg/mL或IU/mL）
兽医药理学实验
2. 在A/B/C三排的第1孔加配好的药液(浓度为512单 位/mL或μg/mL)100μl，然后对药物进行二倍稀释。 此时每孔药物浓度从左到右依次为(单位:IU/mL或 μg/mL)：
256，128，64，32，16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125
取100μl
弃去100μl
抗菌药物最小抑菌浓度（MIC）的测定
兽医学院实验教学中心
兽医药理学实验
1 实验目的
1. 掌握微量肉汤二倍稀释法测定抗菌药物MIC 的基本步骤，能准确测出各种抗菌药物的 MIC值，了解单药的抗菌活性；
2. 为后面棋盘法设计棋盘做准备，求取棋盘法 的中心浓度。
兽医药理学实验
2 实验原理
最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）：药物在培养基中通 过连续两倍稀释，眼观可见待检测细菌在培 养基中生长受到抑制的最低浓度即为该药的 最小抑菌浓度。
受试菌株
药物（μg/mL或IU/mL） 氨苄西林 阿米卡星 四环素 粘菌素
大肠杆菌
兽医药理学实验
7 作业
1. 讨论微量肉汤二倍稀释法应注意哪些环节 才能准确测定MIC？
2. MIC试验对临床选药的意义以及它的局限 性？
兽医药理学实验
H 阴性对照200µL肉汤
操作完成后放于培养箱中培养16-24小时
兽医药理学实验
5 注意事项 1. 无菌操作
① 所有用具都需经过灭菌处理。 ② 超净台使用前后都需用新洁尔灭擦拭，开紫外
灯进行消毒；不能拿酒精棉球擦挡板。 ③ 操作前，用酒精棉球擦手。 ④ 每次枪头过瓶口，瓶口都要经火焰烧过；移液
枪和枪头不准在酒精灯上烤！ ⑤ 操作过程中尽可能不将96孔板盖完全打开 。
３ 实验材料
【实验药品及菌株】 1.药品
氨苄西林（中国药品生物制品检定所，含量：86％） 阿米卡星（齐鲁制药有限公司， 效价：650u/mg） 四环素（中国药品生物制品检定所，含量：95%） 粘菌素（中国药品生物制品检定所，含量：99.5％）
兽医药理学实验
３ 实验材料
【实验药品及菌株】 2.培养基 MH营养肉汤、LB营养肉汤、麦康凯琼脂 生理盐水 3. 菌株 大肠杆菌标准菌株ATCC25922，由中国兽 医药品监察所提供。
兽医药理学实验
5 注意事项
2. 移液器的使用
① 调刻度。 ② 不倒立。 ③ 准确吸取液体。 ④ 换枪头。
3、其他注意事项
① 培养板上做好标记（班级、姓名、时间、药物名称及 浓度）。
② 每药做三个重复，每个板做一个阴性对照和一个阳性 对照。
③ 超净台内用过的不需要的东西都必须放到废液缸内。 ④ 实验完后要收拾好台面。
128，64，32，16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125，0.06
兽医药理学实验
4. 另外在同一块板上做一排阴性对照（仅加 空白肉汤不加菌液）和一排阳性对照（加 菌液肉汤不加药液）；
5. 将96孔板放入37℃恒温培养箱培养16~20 小时后，观察结果。
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1
ห้องสมุดไป่ตู้
A
①100µL肉汤
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３ 实验材料
【实验器材】 96孔细胞培养板、移液枪1mL、200μl 各 一支、枪头1mL、200μl、小试管、锥形瓶 、试管架、酒精灯、平皿、酒精棉; 分析天平、自动高压灭菌锅、超净工作台、 37℃恒温培养箱。
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４ 实验步骤 1. 在96孔板的前三排即A/B/C三排每孔中各 加入空白肉汤100μL
②100µL药物
最后加100µL菌液
B 同A
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL 100µL
C 同A
D
步骤同A， 更换药物
E
同D
F
同D
G
阳性对照100µL肉汤
+100µL菌液
空白肉汤100μl 药液100μl
空白肉汤100μl
空白肉汤100μl
空白肉汤100μl
空白肉汤100μl
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3. 再在每一孔中加入稀释好的菌液100μl,这样 就形成测定一个药物MIC值的三次重复（ A/B/C三排样品）。此时每孔药物浓度即最 终药物浓度从左到右依次为(浓度: 单位/mL 或µg/mL)：
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6 实验结果
【结果判定】 以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药
物浓度为MIC。当阳性对照孔内细菌明显 生长试验才有意义。当在微量肉汤稀释法 出现单一的跳孔时，应记录抑制细菌生长 的最高药物浓度。如出现多处跳孔，则不 应报告结果，需重复试验。
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【结果列表】
表1 四种药物对大肠杆菌的MIC值（μg/mL或IU/mL）
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2. 在A/B/C三排的第1孔加配好的药液(浓度为512单 位/mL或μg/mL)100μl，然后对药物进行二倍稀释。 此时每孔药物浓度从左到右依次为(单位:IU/mL或 μg/mL)：
256，128，64，32，16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125
取100μl
弃去100μl
抗菌药物最小抑菌浓度（MIC）的测定
兽医学院实验教学中心
兽医药理学实验
1 实验目的
1. 掌握微量肉汤二倍稀释法测定抗菌药物MIC 的基本步骤，能准确测出各种抗菌药物的 MIC值，了解单药的抗菌活性；
2. 为后面棋盘法设计棋盘做准备，求取棋盘法 的中心浓度。
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2 实验原理
最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）：药物在培养基中通 过连续两倍稀释，眼观可见待检测细菌在培 养基中生长受到抑制的最低浓度即为该药的 最小抑菌浓度。
受试菌株
药物（μg/mL或IU/mL） 氨苄西林 阿米卡星 四环素 粘菌素
大肠杆菌
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7 作业
1. 讨论微量肉汤二倍稀释法应注意哪些环节 才能准确测定MIC？
2. MIC试验对临床选药的意义以及它的局限 性？
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H 阴性对照200µL肉汤
操作完成后放于培养箱中培养16-24小时
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5 注意事项 1. 无菌操作
① 所有用具都需经过灭菌处理。 ② 超净台使用前后都需用新洁尔灭擦拭，开紫外
灯进行消毒；不能拿酒精棉球擦挡板。 ③ 操作前，用酒精棉球擦手。 ④ 每次枪头过瓶口，瓶口都要经火焰烧过；移液
枪和枪头不准在酒精灯上烤！ ⑤ 操作过程中尽可能不将96孔板盖完全打开 。