Vero细胞无血清培养技术的研究与应用_陈天

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vero是什么意思

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Vero美[ˈvɛroʊ]【医】细胞毒素【一种志贺样毒素】;【地名】【法国】韦罗短语VERO MODA 维莎曼; 维沙曼; 专柜正品。

Vero Beach 弗隆滩; 维罗海滩; 维洛海滩; 维罗比奇。

Vero Cuoio 牛津皮鞋; 休闲鞋; 休闲球鞋; 真皮材质。

双语例句1、Study on Culture of Vero Cells with Low Concentration Calf Serum低浓度牛血清培养Vero细胞的研究2、Harvest effect on rabies virus under different vero cell culture conditions改变Vero细胞培养条件对狂犬病毒收率的影响3、Research and Application of Serum-Free Vero Cells Culture TechnologyVero细胞无血清培养技术的研究与应用4、Study on the Injury Mechanism of Chloroform to Vero Cells 氯仿对非洲绿猴肾细胞损伤机理的研究5、Vero cells are highly recommended by WHO for vaccine production.Vero细胞是WHO积极推荐用于疫苗生产的细胞基质。

扩展资料Vero细胞系是从非洲绿猴的肾脏上皮细胞中分离培养出来的。

这个细胞系由日本千叶大学的Yasumura 和Kawakita 于1962年3月27日扩增出来。

该细胞系取“Verda Reno”(世界语意为‘绿色的肾脏’)的简写而命名为"Vero",而"Vero"本身在世界语中也有“真相”的意思。

Vero细胞用途广泛:1.用于检查大肠杆菌毒素。

大肠杆菌毒素最初就因此细胞系而被命名为Vero毒素,后来被称为志贺菌素样毒素,因为它与在痢疾志贺菌中分离出来的志贺菌素很相似。

高二生物周练试题

高二生物周练试题

三门中学2021学年高二生物周练试题第二学期时间:2022.6.3一、单项选择题(每题3.5分,共70分)1.生物圈包括地球上所有生物及其生存环境,下列说法错误的是()A.生物圈中的生物在分子水平上存在统一性B.生物圈既可以在扩展至大气,也可以扩展至海底C.生物圈是地球表面不连续的薄层,而有生物生产力的部分则更薄D.生物圈需从外界获得物质补给来长期维持其正常功能2.在储藏过程中,红薯中的淀粉发生水解产生还原糖,随还原糖含量的升高,红薯甜度逐渐增加。

下列叙述正确的是()A.储藏环境的温度会影响红薯的甜度B.红薯中的淀粉储藏在叶绿体中C.检测红薯中的还原糖时,应将红薯匀浆直接与本尼迪特试剂共热D.红薯提取液与双缩脲试剂反应,溶液呈蓝色3.溶酶体内含多种水解酶,是细胞内消化的主要场所。

溶酶体的内部为酸性环境(pH≈5),与细胞质基质(pH≈7.2)显著不同。

以下有关叙述不正确的是()A.溶酶体内的水解酶是在核糖体合成的B.细胞质基质中的H+运入溶酶体不需消耗能量C.膜上的蛋白质不会被自身水解酶水解D.溶酶体内pH升高会影响其细胞内消化功能4.研究发现,能萌发的种子中均存在赤霉素(GA),而种子中是否存在脱落酸(ABA)、细胞分裂素(CTK)也影响着种子的休眠与萌发。

有研究人员据此提出“三因子调节假说”,该假说认为种子的萌发需要GA的诱导,ABA会抑制GA的诱导作用使种子保持休眠,而CTK能解除ABA的抑制作用。

只考虑以上三种激素的作用,根据此假说分析,下列推测合理的是()A.种子中存在GA就可以萌发B.种子中仅存在CTK就可以萌发C.种子中仅存在GA、ABA可以萌发D.种子中存在GA、CTK可以萌发5. 某研究小组发现生物体内空间结构呈棒状的磁感应受体是一种含有Fe、S 的蛋白质。

下列叙述正确的是()A.磁感应受体的元素组成只有C、H、O、Fe、SB.磁感应受体的形态与血红蛋白相同C.磁感应受体的功能与神经递质受体相同D.磁感应受体的合成需要核酸的参与6. 质壁分离和质壁分离复原是某些生物细胞响应外界水分变化而发生的渗透调节过程。

Vero细胞和脊髓灰质炎病毒在无血清条件下的培养探究

Vero细胞和脊髓灰质炎病毒在无血清条件下的培养探究
图2不同条件下接种脊髓灰质炎病毒sabin株型后vero细胞的生长情况fig2verocellsgrowthstatusafterinfectedwithtypesabinstrainunderdifferentcultureconditions表2不同条件下vero细胞接种脊髓灰质炎病毒sabin株型病毒滴度tab2verocellstitersafterinfectedwithtypesabinstrainunderdifferentcultureconditions组别病毒滴度lgccid50mljh201201jh201202jh201203jh201204珋xsdcv直降组988862888838894066737驯化组812925850938881060684对照组838950875912893048539表3不同条件下vero细胞接种脊髓灰质炎病毒sabin株型病毒滴度tab3verocellstitersafterinfectedwithtypesabinstrainunderdifferentcultureconditions组别病毒滴度lgccid50mljh201201jh201202jh201203jh201204珋xsdcv直降组925950862800884067761驯化组862900825850859031364对照组82576280078879402633012微生物学免疫学进展2013年第41卷第5期proginmicrobiolimmunoloct2013vol41no5表4不同条件下vero细胞接种脊髓灰质炎病毒sabin株型病毒滴度tab4verocellstitersafterinfectedwithtypesabinstrainunderdifferentculturecondition组别病毒滴度lgccid50mljh201201jh201202jh201203jh201204珋xsdcv直降组950825838950891069770驯化组950838838800857065757对照组9007888008258280506073讨论实验显示直接降至无血清培养直降组和逐步降至无血清培养驯化组的两种方法均能使vero细胞从有血清培养适应到无血清培养其生长速度比有血清略慢但完全可以满足细胞扩增的需要7

不同细胞工厂培养Vero细胞增殖效果

不同细胞工厂培养Vero细胞增殖效果

不同细胞工厂培养Vero细胞增殖效果马芳芳;康碧静;马春英;刘振斌;王明明;乔自林;张家友;乔永平;王家敏【期刊名称】《西北民族大学学报:自然科学版》【年(卷),期】2022(43)4【摘要】为建立细胞工厂筛选方法,比较市售三个厂家(Corning、Thermo、兰州百灵)细胞工厂培养Vero细胞的生长增殖情况.通过Vero细胞光学显微镜观察、生长曲线、贴壁率、流感病毒增殖对比指标,比较三个厂家细胞工厂培养Vero细胞增殖效果.结果显示,光学显微镜观察三个不同来源的细胞工厂培养的Vero细胞形态变化无明显生长差别,连续传代培养Vero细胞,细胞生长良好.三种不同细胞工厂均能较好促进细胞的生长增殖且细胞生长曲线均呈“S”型;贴壁率分别为(86.20±0.62)%、(94.50±0.70)%、(89.53±0.60)%.甲型H5N1流感病毒感染细胞48 h后,出现明显细胞病变,且血凝效价HA为1∶16,感染性滴度为2.5.三个不同来源的细胞工厂均能支持Vero细胞培养及甲型H5N1流感病毒的增殖,可为细胞工厂筛选提供参考.【总页数】7页(P70-76)【作者】马芳芳;康碧静;马春英;刘振斌;王明明;乔自林;张家友;乔永平;王家敏【作者单位】西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心;西北民族大学生命科学与工程学院;西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室;武汉生物制品研究所有限责任公司国家联合疫苗工程技术研究中心;兰州民海生物工程有限公司甘肃省生物工程材料工程研究中心;兰州百灵塑料制品有限公司【正文语种】中文【中图分类】Q28【相关文献】1.无血清微载体培养Vero细胞增殖传染性法氏囊病毒2.不同培养基及不同的葡萄糖浓度对VERO细胞生长状况的影响3.犬瘟热病毒在MA-104、Marc-145、Vero3种细胞内增殖效果的比较4.鸡新城疫Ⅰ系统苗株Vero细胞培养物的免疫试验及Vero细胞…5.不同培养条件对vero细胞的增殖及其检测病毒含量的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养

Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养

探索 V t细胞和流感病o
体, 在无血清条件下培养 V t eo细胞和流感病毒 。观察 V t e o细胞的生长 状况 , 并检测 流感病 毒 的血凝滴 度 。结果 病 毒后 , 7 , 在 2h时 培养上清病毒血凝滴度达到 最高。结论
在 V r 细胞上成功培养 。 eo
文献标识码

文章缩号
10 .53(0 7 0 -2 -4 0 45 0 2 O )2150
【 验技术 】 实
Veo细 胞 和 流 感病 毒在 无 血清 条 件 下 的微 载 体 培 养 r
何 春艳 陈列胜 吴 书军 唐 丽丽
在 搅拌 瓶 中, 选择 合适 的微载
Vt eo细胞
【摘要 】 目的
os C t eV t e sadi unav u e l -e du yui i oar r i srn ak O sretego t n d d u u eocl n e z i si 8nn f emeim b s gmc cres n tr gfs . bev rwhada- l r l l f n r n lY n r i i i l h
【 e od 】 Sm -e t eMc c r r e l ; una i s K yw rs e m f e u u ; io re; t c sI ez v u r c r l rai V o e n l f r
目前 的 流感疫 苗 均 以鸡 胚 为 基 质 生产 , 易 规 不 模化 , 一旦 发 生流感 大 流行 , 以在 短期 内提 供足 量 难 疫苗 。因此 ,9 5年 WH 呼 吁 采 用 细 胞 为 基 质 生 19 O 产 流感疫 苗 … 。对 流感 病 毒 敏 感 的细 胞 不 多 , 目前 用 于流感 病 毒疫 苗 开 发 的细 胞 主 要 有 MD K、V t C eo 细胞 和 PrC -] e. 6 6。MD K由 于其 潜 在 的致 瘤 性 , C 目前 尚未被 WH O允 许 用 于人 类 疫苗 生 产 。PrC e. 6 为转 染 了 5型腺 病毒 E 1细小 基 因 的原 代人 胚 视 网 膜细 胞 株 , 荷 兰 Cuel 司 开 发 的 , 所 有 的 流 是 rcl公 对 感病 毒都 敏感 , 能 在 短 时 间 内培 养 出高 滴 度 的病 并

Vero细胞无血清培养基的发展-医学工程论文-基础医学论文-医学论文

Vero细胞无血清培养基的发展-医学工程论文-基础医学论文-医学论文

Vero细胞无血清培养基的发展-医学工程论文-基础医学论文-医学论文——文章均为WORD文档,下载后可直接编辑使用亦可打印——商业化的无血清培养基由最初血清替代物的研究发展到了化学界定培养基的研究。

目前,无血清培养基的发展趋势有两个方向,一是完全化学界定培养基;二是不含任何动物来源组分的培养基。

无血清培养技术常用的培养基分类如下。

第一代,不含血清,添加替代血清的生物材料。

特点是培养基的蛋白含量高,增加了纯化工作的难度和成本。

第二代,无动物来源培养基,添加基因工程和重组蛋白或植物蛋白水解物。

不含动物源性蛋白衍生物,既可保证产品的安全,又能保障细胞生长。

第三代,无蛋白培养基,培养基完全不含蛋白。

利于纯化分离,培养基相对稳定,但应用局限.,化学鉴定培养基。

培养基所含成分都是明确的,有利于细胞体外培养的代谢研究。

无血清、无蛋白、无动物来源、成分明确的新型培养基是最理想、最安全的通用培养基,在细胞工程领域大规模生产病毒性疫苗、重组蛋白等制品方面应用广泛[3-4].1 Vero 细胞在病毒性疫苗中的广泛应用和优势1. 1 Vero 细胞的来源近年来随着生物技术的发展,动物细胞培养技术已从简单的试验研究拓展到了生物学研究和商业应用领域。

生物制品如生物基因工程疫苗、病毒性疫苗、医学治疗性抗体的研究与生产都用到了细胞培养技术。

应用最广泛最安全的动物细胞基质是Vero 细胞。

Vero 细胞是世界卫生组织(WHO)和《中国药典》认可的疫苗生产细胞系。

Vero 细胞(非洲绿猴肾细胞)是日本学者Ya-sumura 和Kawakita 两人在1962 年正式从非洲绿猴肾脏分离的,首个用于生产人用生物制品的异倍体贴附依赖性细胞,并建立了细胞系和不同代次的细胞库[5].在此之前,对生物制品的研究和生产只允许用原代细胞或二倍体细胞。

早在20 世纪60 年代,美国宾夕法尼亚大学威斯达研究所(Wistar In-stitute )选择人二倍体细胞WI-38 培养狂犬病毒,并用MRC-5 等二倍体细胞生产多种疫苗,如甲肝疫苗、脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)和风疹病毒疫苗。

Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白(HCP)检测研究简介

Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白(HCP)检测研究简介

发布日期20040709栏目生物制品评价>>生物制品质量控制标题Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白(HCP)检测研究简介作者田博部门正文内容Vero细胞疫苗中宿主细胞蛋白(HCP)检测研究简介生物制品组田博Vero细胞HCP是指疫苗中来源于宿主细胞的蛋白成分,其主要成分包括:宿主细胞结构蛋白和转化蛋白(细胞分泌的促生长蛋白),前者的危险性在于引起机体过敏反应,后者的潜在危险性在于引起细胞转化。

以Vero细胞为基质细胞生产疫苗的过程是将病毒接种于Vero细胞,病毒利用细胞环境复制自身,同时导致宿主细胞结构受损、死亡,释放大量的宿主细胞结构蛋白于疫苗中,这部分蛋白有可能成为疫苗中的过敏原;Vero细胞生长的同时向培养液中释放生长因子等促生长蛋白,可引起细胞增殖和分化,Vero细胞结构蛋白和促生长蛋白构成宿主细胞蛋白(以下简称HCP)。

目前,CHO细胞与Vero细胞被WHO和我国药品监督管理局认可,用于生物制品的生产的传代细胞。

Vero细胞(一种非洲绿猴肾的传代细胞系)是一种理想的疫苗生产基质:遗传背景清楚,核型稳定,无外源因子污染,160代以内没有致瘤性,适合大规模培养,可用生物反应器生产,保证了疫苗大批量细胞的均质性和安全性。

Vero细胞已经用于疫苗的生产:80年代法国率先使用Vero细胞生产脊髓灰质炎疫苗和狂犬病疫苗, 一亿二千万人份人群接种的结果证明Vero细胞作为疫苗的细胞基质是安全和有效的。

1994年维尔博狂犬病疫苗进入我国并投放市场。

目前,我国已正式生产Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗。

其它正在开发、研究和生产的疫苗有流感疫苗、出血热疫苗、甲肝疫苗、轮状病毒疫苗、SARS疫苗等等。

WHO推荐使用Vero细胞生产疫苗:WHO于1987和1998年分别组织制定了《使用传代细胞生产生物制品规程》和《使用动物细胞生产生物制品规程》。

在前者中提出:使用传代细胞生产生物制品,必须经过纯化,疫苗中残余DNA不得超过10ng/剂量,去除疫苗中毒性蛋白,但对HCP残留量没有提出明确要求。

HUVEC细胞培养心得

HUVEC细胞培养心得

HUVEC 培养交流讨论:各位仁兄,我查了一下,关于HUVEC 的贴子有几千篇,不知有那位知道的多的能给总结一下?我想应该有以下几1、讲清HUVEC 与ECV304区别2、HUVEC 原代与细胞株的关系、区别问题3、能否总结一下国内有哪些单位可以买到HUVEC ?是原代还是细胞株?4、培养中到底添加ECGS 还是ECGF ?5、有些推荐细胞的应该讲清自己的是原代还是细胞株,能养多少代。

希望能抛砖引玉。

票数+收藏2回帖16浏览2686我也要发帖举报∙浙江医院招聘浙江省老年医学研究所(临床医学) ∙请教关于HUVEC 细胞的培养 ∙求购HUVEC ∙【互助小组】正在养或已经养过HUVEC 的请进。

docter_zhao∙0 2004-08-03 15:14 消息 引用 分享 huvec 必需加ECGS 及肝素,否则很难生长增殖 举报 ∙zjqlucky∙15 ∙ 5∙7 2004-08-03 17:27 消息 引用 分享docter_zhao wrote: huvec 必需加ECGS 及肝素,否则很难生长增殖这个好像也未必吧,我养的原代的huvec 只用20%胎牛血清的RPMI1640也长的很好呀,只是传ecgs 能传这么多代吧票数+收藏1举报 ∙2004-09-08 00:20 消息 引用 分享我们曾试过用m199或DMEM 加20%胎牛血清原代培养,感觉效果不佳,后来加了ECGS 及肝素,发现细胞长得能有改变票数+收藏1举报引用 分享huvec 是脐静脉内皮细胞,不是那么难养,细胞可以从脐带自己提取,卖现成的细胞株也不贵,用内皮细胞的配套培email-sinian19988@∙∙细胞系查询培养基培养用常用试剂各品牌评定cairuiyanzi入门站友 ∙积分 ∙得票 ∙3粉丝加关注 2012-08-16 10:02 消息 引用 分享哪位大虾知道HUVEC 加肝素的目的?谢谢了! 我现在养着HUVEC ,第二代是用新配的GIBCO 的M19培养两天发现细胞状态不好,似大面积凋亡,并伴有部分脱落。

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综述doi:10.3969/j.issn.1009-0002.2009.03.032Vero细胞无血清培养技术的研究与应用陈天1,陈克平1,陈昭烈21.江苏大学生命科学研究院,江苏镇江212003;2.军事医学科学院生物工程研究所,北京100071[摘要]Vero细胞是世界卫生组织和我国生物制品规程认可的疫苗生产细胞系。

随着对疫苗质量和安全性要求的不断提高,用无血清培养基取代含血清培养基培养Vero细胞已成为病毒疫苗生产的一个重要发展趋势。

Vero细胞无血清培养的技术关键是研发或选择能支持细胞以贴附培养方式生长的无血清培养基。

微载体培养是贴附依赖性细胞系规模化培养和病毒疫苗生产的有效技术途径。

我们对Vero细胞无血清培养基的研发、Vero细胞无血清培养及病毒疫苗生产工艺做了讨论,对该领域存在的问题和发展策略进行了展望。

[关键词]Vero细胞;细胞培养;无血清培养基;微载体;疫苗[中图分类号]Q813.11[文献标识码]A[文章编号]1009-0002(2009)03-0417-05Research and Application of Serum-Free Vero Cells Culture TechnologyCHEN Tian1,CHEN Ke-Ping1,CHEN Zhao-Lie21.School of Life Science,Jiangsu University,Zhenjiang212003;2.Beijing Institute of Biotechnology,Beijing100071,China[Abstract]Vero cells are considered as an optimal substrate for the production of viral vaccines and are currently used in the manufacture of rabies,polio and Japanese encephalitis vaccines.With the increasing desire to maximize safety and quality of cell culture-based vaccine,the switch from serum containing media to serum-free media in Vero cells culture is a major trend in vaccine production.The critical issue in serum-free culture of Vero cells is the development or selection serum-free media supporting cells growth in attachment-dependent culture mode.Microcarrier cultures are known to sup-port efficient,scalable processes for attachment-dependent cell lines and are increasingly used in vaccine production.In this article,the development of serum-free Vero cells culture media,the processes of serum-free culture of Vero cells for vaccine production are reviewed,and the existing problems and new strategies in this area are also addressed.[Key words]Vero cells;cell culture;serum-free medium;microcarrier;vaccineVero细胞是日本学者Yasumura等于1962年从正常成年非洲绿猴肾分离获得的贴附依赖性细胞系[1],Vero一词由世界语中的verde(意为绿色的)和reno(意为肾脏的)两个词合并而成。

Vero细胞是世界卫生组织和我国生物制品规程认可的疫苗生产细胞系[2-3]。

与用作疫苗生产的原代细胞、二倍体细胞和其他一些传代细胞基质相比,Vero细胞具有以下特点:①来源方便,可连续传代,生长速度快;②对多种病毒的感染敏感、病毒增殖滴度高;③遗传性状稳定,恶性转化程度低,生物安全性较高;④培养条件要求不苛刻,易于在生物反应器实施大规模培养。

疫苗的接种对象主要是大范围的健康人群,其质量和安全性一直是备受关注的首要问题。

疫苗的质量和安全性在很大程度上取决于疫苗的生产方式和过程。

血清是一种组分复杂而尚不完全明确的混合物,至少含有1000种不同的蛋白质,总蛋白量高达60~150g/L[4],它能为细胞的体外培养提供必要的生长因子、激素、细胞贴附因子和营养成分。

受Vero细胞自身的贴附依赖生长特性和动物细胞培养技术发展进程的影响,本世纪之前的Vero细胞培养及病毒疫苗生产均存在着对血清的依赖。

血清组分的复杂性和不确定性,以及其中存在病毒等病原微生物污染的潜在风险,影响着病毒疫苗的生产工艺和疫苗质量。

从病毒疫苗生产工艺角度考虑,血清组分的复杂性和批次间的质量差异增加了病毒疫苗生产的不稳定性和产品质量控制的难度;从病毒疫苗的安全性角度考虑,血清中潜在的病原微生物,如引起牛海绵状脑炎的朊病毒,给疫苗的使用带来了不容忽视的安全隐患[5]。

由血清使用所造成的细胞培养过程和细胞表达产物安全性的不确定因素增加的现实问题,成为动物细胞无血清培养技术研究和应用的发展动因。

随着动物细胞无血清培养技术的不断进步,为包括Vero细胞在内的动物细胞大规模无血清培养技术的应用提供了必要的技术支撑,无血清培养已成为包括疫苗在内的生物技术药物生产的总趋势[6]。

2010年,美国、欧盟和日本等发达国家将全面停止在生物制药中应用血清,FDA将停止含血清细胞培养工艺生产的生物技术新药的申报受理。

[收稿日期]2008-12-05[作者简介]陈天(1983-),男,硕士研究生[通信作者]陈昭烈,(E-mail)chenzl23@hotmail.com1Vero细胞无血清培养基的研究和商业开发1.1Vero细胞无血清培养基的研究培养基是影响体外培养细胞生长代谢、增殖乃至生存的最直接和最重要的环境因素。

Vero细胞无血清培养的技术关键在于无血清培养基的设计和优化。

设计Vero细胞无血清培养基组成配方的技术核心是筛选和确定具有促进细胞贴附生长、维持细胞存活、提高病毒扩殖效果的培养基组成成分。

基于细胞生长和代谢的高通量分析及Plackett-Burman实验设计和Box-Behnken响应面设计是Vero 细胞无血清培养基设计和优化的主要技术。

Vero细胞的培养需要在适宜的介质表面贴附、铺展才开始有丝分裂、增殖,病毒的有效感染和增殖也有赖于细胞的贴附生长状态。

此外,在某些病毒疫苗(如流感病毒疫苗)的生产过程中,需要在培养基中加入一定浓度的胰蛋白酶以提高病毒的感染和增殖效率。

另一方面,病毒的感染和增殖不仅是细胞代谢负荷不断加大的过程,也是细胞病变、以致凋亡和坏死、甚至裂解的渐进性过程。

Vero细胞无血清培养基的设计和优化相对于应用于动物细胞悬浮培养工艺生产重组蛋白、特别是治疗性抗体生产的无血清培养基更具挑战性。

设计Vero细胞无血清培养基的较为便捷和有效的策略是以DMEM、F-12、M199和RPMI1640等商品化的合成培养基的单独使用或联合使用为基础培养基,以反映细胞生长和代谢的主要参数为评价指标,结合统计学方法确定向其中添加生长因子、激素、结合蛋白及黏附因子、微量元素、脂类和脂类前体物等的种类和浓度[7-9]。

无血清培养基中常用的黏附因子主要是存在于细胞间质和血清中的胞外基质(extracellular matrix,ECM)蛋白,如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、玻连蛋白和胶原等。

其中,纤粘连蛋白和层粘连蛋白不仅具有提高细胞的黏附力及活力的作用,同时在促进有丝分裂中也起着重要的作用。

某些含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列的短肽也能够有效地促进Vero细胞贴附到以聚苯乙烯和醋酸纤维素为材料的介质表面[10]。

Vero细胞无血清培养基的优化主要涉及以下两方面。

其一,从提高病毒疫苗安全性的需要出发,以非动物来源成分替代动物来源成分、化学组分明确成分替代化学组分不确定成分[11-12];其二,从提高病毒疫苗生产效率的目的考虑,根据细胞生长和代谢动力学特征优化培养基的组成[13-14]。

基因组学技术和蛋白质组学技术是近年来用于细胞培养研究的新工具,在分子水平对细胞培养过程认识的深入,可以更准确地预测和判断体外培养细胞的生长和代谢状态。

另外,通过抗体芯片遴选参与细胞培养调控过程的细胞表面受体、黏附分子及信号通路相关生物分子,可以相应地确定在培养基中添加配体或其他生物分子来调控细胞增殖、凋亡、分化、黏附和外源基因表达[15]。

分子生物学技术在动物细胞培养基优化设计中的应用,不仅为有针对性和预见性的无血清培养基组分筛选提供了理论指导,也为无血清培养基组分筛选提供了高通量和精确灵敏的高效技术手段。

目前,基因组学技术和蛋白质组学技术已成为国外大型培养基商业开发机构和生产商进行无血清培养基优化设计的主要技术手段。

1.2Vero细胞无血清培养基的商业化开发与添加血清的合成培养基相比,无血清培养基的细胞适用谱系窄,往往一种培养基只适用于一种细胞类型甚至某一特定的细胞系,适用于其他细胞系的商业化无血清培养基用于Vero 细胞培养往往不能获得满意的效果[16]。

受Vero细胞无血清培养基市场需求的驱动,商品化的Vero细胞无血清培养基从数量到质量都在不断提高,MDSS2、VP-SFM、OptiPro SFM和EX-CELL VERO是较具代表性的产品。

MDSS2是由AXCELL Biotechnologies公司推出的最早商品化的Vero细胞无血清培养基之一,该培养基也可用于BHK和MDCK细胞培养,其支持细胞生长和病毒增殖的效果与含血清培养基相当[17]。

由于MDSS2的蛋白含量高达40mg/L,且其中含有动物来源成分,其市场份额已基本丧失。

VP-SFM(virus pro-duction-serum free media)是由世界上最大的细胞培养产品生产商GIBCO/Invitrogen公司推出的产品。

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