长双歧杆菌液态发酵条件的优化及生长曲线的测定

双歧杆菌 （bifidobacterium longum）是 人 体 消 化 道 内 具 有 益生作用的优势菌群，其具有的生理功能包括：调整肠道菌 群 [1-2]，增 强 免 疫 系 统 [3]，防 止 便 秘 ， 治 疗 溃 疡 性 结 肠 炎 [4-5]， 产 生 抗生素，提高蛋白质和维生素的代谢，抗衰老，治疗肝损伤， 抗肿瘤，降低胆固醇等[6]。 双歧杆菌对机体生理功能的重要作 用，促使了含双歧杆菌的食品工业和医药工业的发展。
FENG Weihua1 CHANG Yanlu2▲ 1.Department of Pharmacy, the Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University, Inner Mongolia Autonomous Re gion, Hohhot 010059, China; 2.Department of Pharmacy, Beijing Tiantan Hospital, Beijing 100050, China [Abstract] Objective To optimize the fermentation conditions for bifidobacterium longum. Methods By the single-factor test, the best initial pH, incubation temperature, inoculum size and incubation time of the culture medium for bifidobacteri um longum were investigated. Results The optimal fermentation conditions of bifidobacterium longum were as follow: the initial pH of fermentation broth was 7.0, the fermentation temperature was 39 ℃, the fermentation inoculation size was 6%, the best incubation time was 8-10 h. Conclusion This fermentation technology effectively improves the efficiency of the cultivation of bifidobacterium longum. [Key words] Bifidobacterium longum; Optimization of fermentation conditions; Growth curve
▲通 讯 作 者
2 方法与结果 2.1 发酵液活菌数的检测
采用平板混菌计数法， 即将发酵液菌浓度逐级稀释至 10-6 倍、10-7 倍、10-8 倍，然后吸 取 1 mL 稀 释液 加 入 到 灭 菌 的 空白平皿中，每个样平行做 3 块平皿，再倒入 50～55℃的 TPY 培 养 基 15～20 mL，摇 匀，待 培 养 基 凝 固 后 ，将 平 皿 倒 置 放 于 38℃恒温厌氧培养箱中，培养 48 h 后计数。 2.2 发酵条件的优化 2.2.1 发酵培养基的培养方法
TPY 液体培养基：葡萄糖 2%、酪蛋白胨 1%、酵母粉 1%、 牛肉 蛋 白 胨 1%、水 解 乳 蛋 白 2%、乙 酸 钠 0.5%、柠 檬 酸 三 铵 0.2% 、 吐 温 -80 0.1% 、MgSO4 0.05% 、MnSO4 0.02% 、K2HPO4 0.05%。 用 5%的 NaOH 调节 pH 为 6.8。 培养基 121℃灭菌 30 min， 至 4℃冰箱保存。
本实 验 以 长 双 歧 杆 菌 为 发 酵 菌 株 ，以 TPY 改良 培 养 基[7] 为基础培养基，通过对发酵条件（培养基初始 pH、培养温度、 接种量）的考察，确定了长双歧杆菌的最佳培养条件；ຫໍສະໝຸດ Baidu过对 长双歧杆菌生长曲线的测定，确定了长双歧杆菌的最佳发酵 培养时间，同时也验证了该菌的发酵工艺。 1 仪器与试药 1.1 试剂与菌种
2012 年 11 月第 9 卷第 31 期
· 制剂与技术 ·
长双歧杆菌液态发酵条件的优化及生长曲线的测定
冯伟华 1 常艳璐 2▲ 1.内蒙古医科大学附属医院药剂科，内蒙古呼和浩特 010059；2.北京天坛医院药剂科，北京 100050
[摘要] 目的 优化长双歧杆菌的液态发酵条件。 方法 通过单因素试验方法，考察长双歧杆菌液态培养基的最佳初始
长双歧杆菌：中国工业微生物菌种保藏管理中心。 氮源： 北京双旋微生物培养基制品厂。 1.2 实验设备
Primo Star 显微 镜 ： 德 国 卡 尔 蔡 司 公 司 （Zeiss）；Moticam 2306 显 微 摄 影 仪 ：Moticam 公 司 ；垂 直 层 流 洁 净 工 作 台 CA1390-1：上 海 上 净 净 化 设 备 有 限 公 司 ；LDZX-40SBI 型 立 式 自动电热压力蒸汽灭菌器：上海申安医疗器械厂。 1.3 液态发酵培养基
pH、培养温度、接种量和培养时间。 结果 长双歧杆菌的最佳发酵条件为 ：发酵液初始 pH 7.0、发酵培养温度 39℃、
发酵接种量 6%、最佳培养时间 8～10 h。 结论 本课题研究确定的发酵工艺有效地提高了长双歧杆菌的培养效率。
[关键词] 长双歧杆菌；发酵条件的优化；生长曲线
[中图分类号] TQ925
[文献标识码] A
[文章编号] 1673-7210（2012）11（a）-0115-03
The optimization of lipuid fermentation conditions and the determination of growth curve for bifidobacterium longum