革兰染色

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革兰氏染色名词解释

革兰氏染色名词解释

革兰氏染色名词解释
革兰氏染色是一种针对微生物的染色法,由彼得·革兰(Paul Ehrlich)于1883年发明。

它的主要原理是利用染料的化学色素物质在微生物细胞表皮上形成不同的染料沉积,从而使微生物细胞得到彩色,以此来对微生物进行分类和分析。

革兰氏染色法与其它染色方法相比有三大优势:1.可实现多种不同样式的染色,它可以在一次染色中实现多种染色方式,如单色、双色、三色染色等;2.染色效果很好,革兰氏染色能够将微生物细胞表面染得很彩艳,即使在低倍镜下也非常清晰,能更好的反映微生物的特征;3.染色速度快,革兰氏染色的染色速度比传统的染色方法快几倍,可以在几分钟内完成一次染色。

革兰氏染色是生物学实验中采用最多的染色方法之一,它的法则和技巧都相当成熟,应用范围也广泛。

革兰氏染色技术广泛应用于细菌生理学、药物耐药性研究、病原鉴定、细菌分类学研究以及细胞学研究等多个研究领域,它也被用于食品行业、环境污染检测、放射性检测、肿瘤检测等多个领域。

细菌革兰氏染色步骤

细菌革兰氏染色步骤

细菌革兰氏染色步骤
革兰氏染色是一种常用的细菌分类鉴定方法。

步骤如下:
1.准备细胞液片:将待染菌液滴在干净玻璃片上,并用火炉或灯火加热使其干燥。

2.固定菌液:用无定形火烧的镊子将玻璃片持在火炉/灯火上,烧过3-4次,让菌液固定在玻璃片上。

3.染色:将玻璃片浸入染色剂——紫晶染液中,静置1分钟。

4.漂洗:立即用水把紫晶染剂冲洗掉。

5.涂酒精:用乙醇涂抹菌液,使不产生色素复合物的细胞膜变性。

6.漂洗:用水把酒精冲洗掉。

7.染色:将玻璃片浸入染色剂——碘化钾液中,静置1分钟。

8.漂洗:用水把碘酸盐冲洗掉。

9.溶解:滴一两滴乙醚或丙酮,使不固定的染色剂冲出来,然后用热空气烘干涂片。

10.观察镜检:在显微镜下观察细胞的颜色和形态,区分不同的细菌群体。

革兰氏染色后,属于革兰氏阴性细菌的菌落呈现出红色或粉红色,而属于革兰氏阳性细菌的菌落呈现出蓝紫色或崩溃的黑色。

革兰染色的原理及意义

革兰染色的原理及意义

革兰染色的原理及意义
革兰染色是一种常用的细菌染色方法,原理是利用革兰氏染色剂对细菌细胞壁的结构差异进行染色。

革兰氏阳性菌染色后呈紫色或蓝色,革兰氏阴性菌染色后呈红色或粉红色。

革兰染色的原理是基于细菌细胞壁的不同构成。

革兰氏阳性菌的细胞壁主要由厚壁的胞外多聚糖和胞内的肽聚糖组成,其内部由大量的穿孔蛋白质穿过;而革兰氏阴性菌的细胞壁则相对薄且由较少的胞外多聚糖构成,胞内也缺乏穿孔蛋白质。

在革兰染色过程中,首先用碘溶液将革兰氏阳性菌的紫色染料紧密地固定在细菌细胞壁上,然后用酒精洗去多余的染料,再用蓝色染料对革兰氏阴性菌进行染色。

最终,经过适当的处理和洗涤后,革兰氏阳性菌呈紫色或蓝色,革兰氏阴性菌呈红色或粉红色。

革兰染色的意义在于对细菌进行初步分类和鉴定。

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在形态、结构和代谢特性上存在差异,例如革兰氏阳性菌通常较大、形状多样,而革兰氏阴性菌多为小杆菌状。

通过革兰染色可以快速地初步识别细菌的类别,并为进一步的鉴定提供重要的信息。

此外,革兰染色也对指导药物敏感性试验有一定的参考价值,因为革兰氏阳性菌对抗生素的敏感性通常较差,而革兰氏阴性菌相对较容易受到抗生素的影响。

总之,革兰染色是一种简单而有效的细菌染色方法,能够提供有关细菌类型和某些生理特性的初步信息,对微生物学和临床医学起着重要的作用。

简述革兰氏染色机理

简述革兰氏染色机理

简述革兰氏染色机理
革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,通过这种方法可以将细菌分为两大类:革兰氏阳性(G+)和革兰氏阴性(G-)。

以下是革兰氏染色的机理:
1、脱色:革兰氏染色过程中的关键步骤之一是脱色。

在经过结晶紫初染和碘液媒染后,G+菌和G-菌都呈现深紫色。

此时,通过在酒精或其他脱色剂中短暂停留,可以将G-菌的细胞壁中的脂质成分溶解,使得脱色剂更容易进入细胞内部,将其染成无色或浅色。

而G+菌由于其细胞壁结构较为坚韧,不易被脱色剂渗透,因此保持深色。

2、复染:在脱色后,通过施加沙黄或其他染料进行复染,使所有细菌都被染上颜色。

由于G-菌已被脱色至无色或浅色,因此沙黄会使其呈现红色。

而G+菌由于未被脱色或仅被部分脱色,呈现深紫色或蓝黑色。

3、结果观察:通过显微镜观察染色后的细菌,可以看到G+菌呈蓝紫色,而G-菌呈红色。

这一差异是由于革兰氏染色过程中对细胞壁脂质成分的处理和脱色剂的渗透能力不同所致。

革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的差异,特别是脂质含量的差异。

G+菌的细胞壁富含肽聚糖,不易被脱色剂渗透,而G-菌的细胞壁中含有较多的脂质,使得脱色剂能够更好地进入细胞内部。

此外,革兰氏染色还涉及到结晶紫和碘液等染料的结合和吸附性质的不同,进一步增强了G+菌和G-菌在染色过程中的颜色差异。

总之,革兰氏染色的机理主要基于细菌细胞壁的结构和化学成分差异,通过脱色和复染等步骤,将细菌分为G+和G-两大类,为后续的细菌鉴定和分类提供重要依据。

革兰氏染色法实验报告共5篇

革兰氏染色法实验报告共5篇

革兰氏染色法实验报告篇一革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法,可用于鉴定细菌的类型和形态。

以下是一份革兰氏染色法的实验报告范例,包含实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果和结论等部分。

实验目的: 1.了解革兰氏染色法的原理和步骤; 2.掌握细菌的革兰氏染色方法; 3.观察细菌在革兰氏染色中的反应,并进行鉴定。

实验原理:革兰氏染色法是根据细菌细胞壁的特性而设计的一种染色方法。

细菌细胞在染色过程中会根据细胞壁的结构不同,分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

革兰氏阳性菌具有较厚的细胞壁,含有较多的革兰氏染色阳性物质(如染色时用的紫檀碱),因此在染色后会呈现紫色。

革兰氏阴性菌细胞壁较薄,不含有革兰氏染色阳性物质,染色时使用的碘酒(革兰氏碘化酒)能使它产生复合革兰氏染色阳性物质(碘靛紫),再用酒精脱色,再用洋红着色,使其产生颜色变化,最终呈现红色。

实验步骤: 1.准备好菌液:选取需检测的菌株,用无菌盘收集少量菌落,用少量生理盐水悬浮,制备菌液。

2.片玻璃片:在清洁无菌玻璃片上滴上一滴菌液。

3.烘干:将玻璃片架起,自然风干。

4.固定:将玻璃片的细菌涂片在火焰上迅速烘烤,使其牢固地附着在玻璃片上。

5.染色:将烘烤后的玻璃片放入紫檀液中,染色1分钟。

6.脱色:用酒精脱色10-30秒。

7.洗净:用自来水清洗片上的超染色剂。

8.再染:将片浸入碘靛紫溶液中,染色1-2分钟。

9.脱色:用酒精脱色10-30秒。

10.洗净:用自来水清洗片上的超染色剂。

11.观察:利用显微镜观察和比较细菌的形态和染色情况。

12.记录:记录细菌的形态、颜色等观察结果。

实验结果:通过观察细菌的形态和颜色,我们可以得出以下结论:•革兰氏阳性菌在染色后呈现紫色;•革兰氏阴性菌在染色后呈现红色。

结论:革兰氏染色法是一种常用的细菌染色方法,通过染色反应可以初步鉴定细菌的类型。

本次实验中,我们成功地使用革兰氏染色法对细菌进行了染色和鉴定,观察到了不同细菌的染色结果,并且将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。

简述革兰染色的方法,结果和意义

简述革兰染色的方法,结果和意义

简述革兰染色的方法,结果和意义革兰染色的方法:取适量的细胞悬液,用酒精灯火焰高温加热。

当细胞处于离体状态时,会出现溶解度降低而溶解于酒精的情况,这是因为细胞内原生质中的水分减少,渗透压升高,使细胞发生质壁分离。

( 1)加热的方法要均匀、缓慢。

因为只有不断搅拌,使染液与细胞充分接触,并受到高温作用才能获得正确的结果。

( 2)此方法是用于对植物细胞进行细胞组织分离的。

其实质是通过玻片和盖玻片之间形成的气液界面来观察样品中所含的细胞成分,从而了解它们的形态结构。

结果:在电镜下观察:根据微生物大小来判断细菌类别及种,根据细胞壁有无和厚薄,细胞核有无及位置,以此来鉴别细菌。

意义:证明了根据细胞形态结构可以区别细菌种类的道理。

同时也揭示了一个道理,即一切微生物都具有与其形态相适应的结构。

( 1)取数滴菌液,滴在载玻片的水滴中。

若细胞核较小,且在细胞中央,说明该菌是单细胞菌落;若细胞核较大且居于细胞边缘,说明该菌是多细胞菌落;若细胞核居中,说明该菌是菌丝状菌落。

( 2)若菌落呈云雾状,则说明该菌是放线菌;若菌落呈绒毛状,则说明该菌是毛霉;若菌落呈结晶状,则说明该菌是曲霉。

( 3)由于某些环境条件的限制或人为的挑选,所得到的菌落形态往往不同于实际的形态。

本实验也证明了这个观点,如对比草莓上的草莓生长点细胞的结构和艾氏腹水瘤病患者的癌细胞结构就有许多不同。

还有大肠杆菌和枯草杆菌的抗药性等问题,在以后的学习中我们还会涉及。

革兰染色不仅在鉴定细菌方面有重要价值,而且在工业、医学和科学研究等方面也有广泛的应用。

1.分离和培养细菌有两种基本方法:从土壤或其他培养基中挑选单个的细菌;从液体培养基中分离和鉴定细菌。

2.检查菌种的纯度(1)目测法:把待检的细菌接种到培养基上,若产生的菌落周围无杂菌生长,而且菌落表面光滑、湿润、粘稠,这说明所检查的细菌纯度高;反之,所检查的细菌纯度低。

(2)化学法:将所需要的细菌挑选出来,分别接种到固体或半固体的营养培养基中,在37 ℃培养48 h,若发现有的细菌繁殖了,而有的没有,那么,用肉眼就可以看出哪种细菌繁殖了。

(新编)革兰染色法

(新编)革兰染色法

(新编)革兰染色法革兰染色法是一种常用的细菌分类方法,根据细菌的细胞壁成分和结构差异,将细菌分为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。

革兰染色法的原理是利用细菌细胞壁上的特异性染料——革兰染料,将细菌分为两类。

革兰阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖和磷壁酸组成,而革兰阴性菌的细胞壁则主要由外膜和脂多糖组成。

革兰染色法包括初染、媒染、脱色和复染四个步骤。

初染时,用结晶紫溶液对细菌进行染色,结晶紫能够与细菌的细胞壁结合,形成紫色的着色层。

媒染时,用碘溶液与结晶紫结合形成复合物,进一步增强着色层的颜色。

脱色时,用酒精或丙酮溶液处理细菌,去除染料和结晶紫,但不同与革兰阳性菌和革兰阴性菌的细胞壁结构和组成不同,酒精或丙酮溶液对革兰阳性菌的细胞壁影响较小,不能将其脱色,而革兰阴性菌的细胞壁则易被脱色。

最后进行复染,用稀释后的番红溶液将未被脱色的革兰阳性菌染成红色,而革兰阴性菌则呈现红色背景。

革兰染色法的具体操作步骤如下:1.初染:用结晶紫溶液滴加到涂片上,染色3-5分钟,然后用自来水冲洗。

结晶紫能够与细菌的细胞壁结合,形成紫色的着色层。

2.媒染:用碘溶液与结晶紫结合形成复合物,加强着色层的颜色。

媒染时需要注意控制媒染时间,时间过短会使着色层颜色过浅,时间过长则会使着色层颜色过深。

3.脱色:用酒精或丙酮溶液处理涂片,去除染料和结晶紫。

革兰阳性菌的细胞壁较厚,酒精或丙酮不易渗透进去将其脱色,因此革兰阳性菌保持紫色,而革兰阴性菌的细胞壁较薄,酒精或丙酮容易渗透进去将其脱色,呈现红色背景。

4.复染:用稀释后的番红溶液将未被脱色的革兰阳性菌染成红色,而革兰阴性菌则呈现红色背景。

复染时需要控制时间,避免出现过度染色或染色不足的情况。

革兰染色法具有较高的准确性和重复性,是细菌分类学中常用的方法之一。

通过革兰染色法可以将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌两大类,对于临床治疗、药物选择、食品工业等领域具有重要意义。

例如在医学领域中,医生可以根据感染菌的革兰染色结果来选择合适的抗生素;在食品工业中,革兰染色法可用于检测食品中的细菌种类和数量。

革兰氏染色名词解释

革兰氏染色名词解释

革兰氏染色名词解释革兰氏染色(Gram staining)是一种常用的细菌鉴定和分类方法,由丹麦细菌学家克里斯蒂安·格拉默(Christian Gram)于1884年首次提出,并被广泛应用于临床微生物学和实验室研究中。

革兰氏染色的原理是通过对细菌细胞壁的染色特性进行区分。

细菌的细胞壁在结构上分为两种类型:革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

革兰氏阳性菌具有厚实的胞壁,其细胞壁主要由多聚肽和多糖组成,对革兰氏染色染料结构相对稳定。

而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,含有一个内膜和一个较薄的胞壁,对革兰氏染色染料结构不稳定,容易被清洗脱色。

革兰氏染色方法通常由紫晶染液(crystal violet)、碘液(iodine)、酒精脱色液(ethyl alcohol)和洗净液(wash buffer)组成。

以下是革兰氏染色的步骤:1. 取一块无菌玻璃片,用手套或钳子夹住,然后在玻璃片上滴加一滴样本(可以是细菌培养物或分离纯培养的菌液),将细菌均匀涂抹于玻璃片上形成细菌涂片。

2. 将预先烘干的细菌涂片放置在静止的温和热环境中,使菌液完全固定在玻璃片上。

3. 将预热的紫晶染液倒在细菌涂片上,让染液覆盖整个细菌涂片,静置片上1分钟。

4. 倒掉多余的紫晶染液,用洗净液将染液冲干净。

5. 加一倍稀释的碘液在细菌涂片上,静置片上1分钟。

6. 倒掉多余的碘液,用洗净液将碘液冲洗干净。

7. 用酒精脱色液滴在细菌涂片上,进行制片人定时(通常为15-30秒),直到底色变得非常浅。

8. 倒掉酒精脱色液,用洗净液将细菌涂片冲干净。

9. 加入红粉溶液,让染料覆盖细菌涂片,静置片上1分钟。

10. 倒掉多余的红粉溶液,用洗净液将细菌涂片洗净,待片子晾干。

观察结果时,革兰氏阳性菌会呈现出紫色或蓝色,因为其细胞壁能够保留紫晶染料和碘复合物的结晶。

而革兰氏阴性菌则会呈现出红色或粉红色,因为其细胞壁无法保留紫晶染料和碘复合物的结晶,在酒精脱色过程中已经被去除。

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革兰染色
革兰染色原理
通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。

革兰染色步骤及结果
1. 涂片:首先在载玻片上滴一小滴蒸馏水,用灼烧过的接种针挑取少量细菌,置载玻片的水滴中与水混合并涂抹开,注意涂抹要均匀平坦,涂抹后直径约为1 cm的薄层。

2.固定:将载玻片在火焰上方快速来回通过一两次,以载玻片的加热面接触手背皮肤,不觉过烫为佳,待冷却后再在火焰上方来回通过一两次,再冷却,这样重复操作直到薄层干了为止。

3.染色:在制好的片上滴一滴草酸铵结晶紫,染色1 min后用水洗,注意水流不要直接对准薄层。

4.媒染:加碘液一滴,染1 min后用水冲洗,用过滤纸吸干。

5.脱色:用95%乙醇脱色,一般脱色时间大概为30 s。

这一步是革兰氏染色的关键,必须严格掌握好,如果脱色时间过长则会把阳性菌误认为阴性菌;如果脱色不够则容易被误认为是阳性菌。

水洗后用过滤纸吸干。

6.复染:滴加番红染色液一滴,染色10~30 s后,用自来水冲洗。

7.观察:干燥后,用油镜镜检观察,染成紫色的是革兰阳性菌,染成红色的是革兰阴性菌。

革兰染色的意义
1.鉴别细菌:用此染色法可将所有细菌分为两大类,便于初步识别细菌,缩小检查范围,并确定进一步的鉴定方法。

2.选择药物:革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌在细胞壁等结构上有很大差别,因而对抗菌素等药物的敏感性不同,如大多数革兰阳性菌对青霉素、红霉素、头孢菌素等敏感;而大多数革兰阴性菌对链霉素、氯霉素、庆大霉素等敏感。

可供临床实践中选用抗菌药物的参考.
3.与致病性的关系:大多数革兰氏阳性菌的致病物质主要为外毒素;而大多数革兰氏阴性菌的致病物质主要为内毒素.
革兰染色的影响因素
1. 涂片太厚在涂片时细菌挑的太多,没法分开,在脱色时就不能将第一步染上的结晶紫的颜色脱去,可能会使革兰阴性菌也出现紫色,误认为革兰阳性菌。

2.脱色时间阳性菌透性小,不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色;但这是在固定的时间条件下的结果,如果延长脱色时间,也会使脱色剂渗透进阳性菌的细胞壁中,使染上的结晶紫脱去颜色,最后染上复红的颜色,变成革兰阴性菌。

而脱色时间太短的话又会使阴性菌染上的结晶紫不能完全脱色,出现紫色,误认为革兰阳性菌。

3. 固定方法固定不仅能杀死细菌,改变细菌对染料的通透性,还能使细菌吸附在玻片上,保持原有的形态结构。

固定方法是将干燥后的细菌涂片以中等速度通过火焰三次,以玻片触及手背皮肤热而不烫为宜。

如果玻片在火焰上烤的太久、温度过高,改变了细菌原有的通透性,会使细菌的染色性发生变化。

影响了染色的结果。

4. 细菌培养时间细菌的典型形态、染色性是在对数生长期,取这时的细菌做革兰染色可以反应细菌的真实的染色性。

如果细菌培养时间太长,变成了老龄菌,
染色性就会发生变化,可能会使革兰阳性菌染成革兰阴性菌。

5. 碘液碘液作为媒染剂能增加染料与被染物的亲和力。

如果碘液放置时间太长,或经日光照射失效,失去媒染剂的作用,就可能使结晶紫与细菌结合的不牢固,容易被脱色,使革兰阳性菌染成革兰阴性菌。

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