高中生物选修一专题二：课题微生物的实验室培养学案
【人教版】选修1生物：2.1《微生物的实验室培养》 精品导学案
专题2课题1 微生物的实验室培养一基础知识1.培养基（1）培养基的种类包括培养基和培养基等。
（2）培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分，（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件【思考】为什么各种营养基的具体配方不同，但一般都有水、无机盐、碳源和氮源？2.无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①②③④（2）消毒是指灭菌是指【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？（3）实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。
常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。
二实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：→→→→倒平板【思考】⑴培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。
你用什么方法来估计培养基的温度？⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？⑷在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？2.纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指。
稀释涂布平板法是指。
【思考】①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？②在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？（3）平板划线法和稀释涂布平板法的优缺点：（4）平板划线法和稀释涂布平板法的适用范围：1.菌种的保存为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。
对于频繁使用的菌种，我们可以采用法；对于需要长期保存的菌种，可以采用法。
2020-2021学年高二生物人教版选修1学案：专题2 课题1 微生物的实验室培养 Word版含解析
专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养知识点一培养基1．概念人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2．培养基的种类注意：(1)加入培养基中的凝固剂(如琼脂)，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。
(2)在选择培养基上一般只生长具有特定性状的微生物，鉴别培养基中可以存在其他微生物，而且能鉴别特定的微生物。
(3)病毒为非细胞结构生物体，专性活细胞寄生，目前不能利用人工培养基来培养，需接种在动植物组织中才能增殖。
常用于培养病毒的是活鸡胚。
3．培养基的成分培养微生物所需要的培养基其化合物组成可包括五大类营养成分：碳源、氮源、无机盐、水和生长因子，其来源和作用见下表。
营养物质定义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质构成生物体的细胞物质和一些代无机化合物：NaHCO3、CO2等谢产物，有些是异养生物的能源物质有机化合物：糖类、脂肪酸、花生饼粉、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子微生物生长必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含量很高不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定培养基、空气、代谢产物无机盐为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素，包括大量元素和微量元素细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能自养菌的能源，酶的激活剂培养基、空气等环境1．虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。
另外，还必须满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2．在微生物所需要的化合物中，需要量最大的是碳源。
新陈代谢同化作用类型的划分也是以是否能合成含碳有机物为依据：能合成含碳有机物的是自养型，反之则为异养型。
营养类型碳源氮源生长因子自养微生物CO2、NaHCO3等NH3、铵盐、硝酸盐等一般不需要异养微生物糖类、脂肪酸等铵盐、硝酸盐、蛋白质等有些微生物需要又是氮源、能源。
高二生物《微生物的实验室培养》学案
微生物的实验室培养导学案一、培养基：1．种类：（1）按物理性质可分：培养基和培养基。
（2）按培养基用途可分：培养基和培养基。
（3）按培养基成分可分：培养基和培养基。
2．组成：培养基一般含有、、和，要满足微生物生长对、以及的要求。
二、无菌技术——获得纯净培养物的关键1．含义：在培养微生物的操作中，所有防止的方法。
项目条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物不包括芽孢和孢子煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法的液体化学药剂消毒法用擦拭双手用消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括灼烧灭菌法工具干热灭菌法、金属工具高压蒸汽灭菌法及容器的灭菌三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）操作步骤：→→→→。
问题：①牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？。
②在上述培养基的称量操作中，动作要迅速，为什么？。
③溶化操作中要不断用玻璃棒搅拌，为什么？。
（2）倒平板：待培养基冷却至℃（原因？）左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
①用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：。
②甲、乙、丙中的灭菌方法是。
③丁中的操作需要等待才能进行。
问题：①锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？。
②倒平板的目的是什么？。
③配制斜面培养基作用是什么？。
④试管为什么要加塞棉塞？。
2．纯化大肠杆菌（1）原理：在培养基上得到由一个细菌繁殖来的肉眼可见的菌落，获得较纯的。
（2）纯化大肠杆菌的关键步骤是。
常用的微生物接种方法有以下两种。
①平板划线法：通过在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
系列稀释操作：a．取盛有mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。
b．用灼烧冷却的移液管吸取mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。
高中生物选修一学案2：微生物的实验室培养
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养1、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。
培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。
在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。
微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。
液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。
按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。
合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。
天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。
按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。
选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。
鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。
培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。
·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。
如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。
异养微生物只能利用有机碳源。
单质碳不能作为碳源。
氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。
如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。
只有固氮微生物才能利用N2。
培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。
例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH 调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件2、无菌技术: 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
人教版高中生物选修一：专题2 课题1 微生物的实验室培养(第2课时)导学案
专题五课题二一、选择题1．下列不属于PCR技术的优点的是()A．简单，易于操作B．可以完全无限制扩增C．实用性强，灵敏度高D．快速、高效，并可自动化[解析]PCR技术要设计引物，因此扩增具有特异性，灵敏度很高。
而应用Taq DNA聚合酶的PCR仪可自动化，操作简单。
PCR技术能在体外迅速扩增DNA片段，快速高效，往往被误认为可以无限制扩增，其实PCR的循环次数一般以25～35次循环为宜，当反应超过35次循环时，PCR产物也不再增加。
[答案]B2．关于DNA复制，下列叙述正确的是()A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5′端延伸DNA链B．DNA复制不需要引物C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D．DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸[解析]DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3′端延伸DNA链。
模板链首先复制的是3′端即复制方向为3′→5′；由于DNA分子是反向平行的，子链是依据碱基互补配对原则，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向从子链5′→3′。
[答案]C3．使用PCR仪具体实验操作顺序应为()①设计好PCR仪的循环程序②按配方准备好各组分③用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分④进行PCR反应⑤离心使反应液集中在离心管底部A．②③⑤④①B．①⑤③②④C．②③⑤①④D．④②⑤③①[解析]使用PCR仪进行DNA扩增前，首先按照PCR体系配方的各组分，依次将各组分加入微量离心管离心，使反应液集中于试管底部，然后再设计好PCR仪的循环程序进行PCR反应。
[答案]C4．引物的作用是()A．打开DNA双链B．催化合成DNA子链C．使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制D．提供模板[解析]DNA分子的复制具有方向性，即只能从引物的3′端开始，从子链的5′端向3′端延伸。
引物的作用是与DNA聚合酶结合促使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制。
[答案]C5．下面关于DNA对高温的耐受性的说法不．正确的是()A．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强B．超过80℃后DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复C．不同生物的DNA的“变性”温度不一定相同D．深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高[解析]80℃后DNA将变性，恢复到常温，生物活性还能恢复；深海温泉附近温度更高，生活的生物的DNA的稳定性也应更高。
《专题2课题1微生物的实验室培养》作业设计方案-高中生物人教版选修1
《微生物的实验室培养》作业设计方案（第一课时）一、作业目标本作业设计的目标是让学生掌握微生物实验室培养的基本知识、技能与操作流程，了解无菌操作的概念与重要性，并通过实际操作增强对微生物培养技术的掌握和运用。
二、作业内容作业内容是本次课程的核心部分，分为理论学习和实践操作两个环节。
1. 理论学习环节学生需预习并理解微生物实验室培养的原理和重要性，包括微生物的生长规律、无菌操作的原理以及微生物实验室安全准则等基本知识。
学生还需学习如何正确使用实验设备与工具，包括接种环、移液器、显微镜等。
2. 实践操作环节本环节分为三步：第一步，学生需自行设计一个实验方案，用于在实验室环境下对某一微生物进行分离与培养；第二步，学生在实验指导下，学会制作实验所需的培养基；第三步，学生进行实验操作实践，模拟培养所选微生物。
这一过程包括配置菌液、制备无菌操作环境、进行接种和记录等。
学生需要运用无菌技术来防止外界微生物污染。
同时，在实践过程中要规范操作，保证实验数据的准确性和可靠性。
三、作业要求1. 理论学习要求学生需将预习的内容进行整理并形成笔记，记录下对无菌操作和微生物培养的深刻理解。
同时，学生需在小组内进行预习内容的分享和讨论，加深对知识的理解和掌握。
2. 实践操作要求学生需按照实验指导书的要求进行操作，确保每一步都符合无菌操作的标准。
实验过程中应仔细观察并记录微生物的生长情况，如生长速度、菌落形态等。
同时，要认真填写实验报告，包括实验步骤、观察结果及个人感想等。
四、作业评价作业评价将从学生的理论学习成果和实践操作结果两方面进行。
教师将根据学生的笔记内容、小组讨论的参与度以及实验报告的完整性、准确性进行评价。
同时，教师还将观察学生在实践操作中的表现，如操作规范性、无菌意识等。
五、作业反馈作业完成后，教师将对学生的作业进行批改和点评，指出学生在理论学习和实践操作中的优点和不足。
对于存在的问题，教师将给出改进建议。
同时，教师还将组织学生进行经验分享和交流，让学生之间互相学习、互相进步。
人教版高中生物选修一专题2课题1微生物的实验室培养教学案含解析
人教版高中生物选修一专题2课题1微生物的实验室培养教学案含解析.微生物的实验室培养1.培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。
2．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
3．实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
4．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。
5．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
6．长期保存菌种可以采用甘油管藏法。
一、培养基1．概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2．种类：(按物理性质分)3．营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、无菌技术1．获取纯净培养物的方法.消毒灭菌较为温和强烈物体表面或内部的部分微生物物体内外所有的微生物不能能(2)常用方法：[连线]三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)操作步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板(2)倒平板的方法及注意事项：①请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。
②甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
③丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。
2．纯化大肠杆菌(1)纯化原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
.(2)接种方法：①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
..(3)培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中，培养12.h和24.h后，分别观察、记录。
四、菌种的保存[连线]1．不同培养基的具体配方不同，但一般都含(..)A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析：选C.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。
人教版高中生物选修一学案专题2 课题1 微生物的实验室培养
专题1 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养【学习目标】1.了解有关培养基的基础知识2.进行无菌技术的操作3.进行微生物的培养【重点难点】重点：无菌技术的操作难点：无菌技术的操作【预习案】任务一、基础知识1.培养基（1）培养基的种类包括培养基和培养基等。
（2）培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分，（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH 调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件2.无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①②③④（2）消毒是指灭菌是指（3）实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。
常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。
任务二、实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：→→→→倒平板2.纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指。
稀释涂布平板法是指。
【探究案】探究点一概括制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤。
认真阅读P17倒平板操作过程，并回答讨论的问题。
探究点二微生物纯化培养技术中的平板划线法和稀释涂布平板法的原理分别是什么？探究点三认真阅读P18平板划线法的操作过程，用红笔画出关键词，并回答讨论的问题。
探究点四认真阅读P19稀释涂布平板法的操作过程，用红笔画出关键词，并回答讨论的问题。
【训练案】1．下列有关培养基的叙述正确的是( )A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌落2.不同培养基的具体配方不同，但一般都含( )A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素3．获得纯净培养物的关键是( )A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B．接种纯种细菌C．适宜环境条件下培养D．防止外来杂菌的入侵4．下列常用的无菌操作中错误的是( )A．用酒精擦拭双手B．用氯气消毒水源C．验操作应在酒精灯火焰附近进行D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭5．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板6．有关倒平板的操作错误的是( )A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7．有关平板划线操作正确的是( )A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养8．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是( )A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．再放在适宜条件下培养D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落9．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是( )A．对比观察培养基有没有被微生物利用B．对比分析培养基是否被杂菌污染C．没必要放人未接种的培养基D．为了下次接种时再使用10．自养生物唯一碳源的是（）A．糖类B．石油C．二氧化碳D．花生粉饼11．菌种保存控制的条件是（）（1）湿度（2）低温（3）干燥（4）有光（5）隔绝空气（6）适当有氧A．（1）（4）（6）B．（2）（3）（6）C．（1）（5）（6）D．（2）（3）（5）12．下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（）A．含碳有机物B．蛋白胨C．含碳无机物D．花生粉饼等天然物质13．平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（）A．利于大肠杆菌的接种B．防止杂菌污染C．利于培养的冷却D ．防止皿盖冷却水倒流入培养基14．含C、H、O、N的大分子化合物可以作为（）A．异养微生物的氮源、能源B．异养微生物的碳源、氮源C．自养微生物的氮源、能源、碳源D．自养微生物的氮源、能源、碳源15. 关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量16. 下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前17．鉴定培养基的制作是否合格的方法是：将制备好的培养基放在中保温1-2天看有无，如果没有说明制作合格，反之则不合格。
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选修一：专题二：课题1微生物的实验室培养学案【课程目标】:了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
【课题重点】:无菌技术的操作【课题难点】：无菌技术的操作基础知识一、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一)获得纯净培养物的关键是，具体操作如下： 1．对实验操作的、操作者的和进行。
2．将用于微生物培养的、和等器具进行。
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
(二)消毒和灭菌1．消毒是指。
常用的方法有、、消毒法。
2．灭菌是指。
常用的方法有：、、灭菌。
分别适用于那些用具？〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止。
实验操作----大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。
一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是、、、、。
〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？2．倒平板：待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是：①在火焰旁右手拿，左手；②使锥形瓶的瓶口；③左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖。
④待平板冷却凝固后，将平板。
〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？〖思考8〗倒平板的目的是什么？〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么？，试管为什么要加塞棉塞？二、纯化大肠杆菌微生物接种：最常用的是法和法。
另外还有穿刺接种和斜面接种等。
1．平板划线法是的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
其操作步骤是：①将在酒精灯火焰上灼烧直至。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到的目的。
④将冷却的接种环伸入到。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环，盖上皿盖，不要划破培养基。
⑦灼烧接种环，冷却后从划线。
重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。
注意不要将相连。
⑧将平板 培养。
〖思考11〗取菌种前灼烧接种环的目的是什么？为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是？最后灼烧接种环的目的是？ 。
在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是？ 。
2．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将 进行培养。
当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
系列稀释操作：①取盛有 mL 水的无菌试管6支 ，编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取 mL 菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。
③从101倍液中吸取 mL 菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。
依此类推。
〖思考12〗系列稀释操作的注意事项是什么？〖思考13〗涂布平板操作的步骤是什么？结果分析与评价1 培养未接种培养基的作用是什么？，若有菌落形成，说明什么？2 在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？3 培养12h 和24h 后的菌落大小？ ；菌落分布位置？ 原因？ 〖思考14〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因？〖思考15〗频繁使用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什么？典例精析【例1】下列关于微生物营养的说法，正确的是……………………………………( )A ．同一种物质不可能既作碳源又作氮源B ．凡是碳源都能提供能量 c ．除水以外的无机物仅提供无机盐 D ．无机氮源也能提供能量【例2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌………( )A ．接种针、手、培养基B ．高压锅、手、接种针C ．培养基、手、接种针D ．接种针、手、高压锅【例3】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是………………( )A ．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B ．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯C ．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D ．待平板冷却凝固约5～10 min 后将平板倒过来放置【例4】下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前 ◇◇知识拓展3．消毒与灭菌的区别消毒是一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。
例如一些常用的对皮肤、水果、饮用水进行药剂消毒的方法；对啤酒、牛奶、果汁和酱油等进行消毒处理的巴氏消毒法，等等。
灭菌是采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
例如各种高温灭菌措施等。
4．微生物的营养类型异养微生物生命活动所需要的能源，主要靠有机物氧化分解释放能量，碳源是异养微生物的主要能源物质，碳源对异养微生物来说，不仅可为机体提供构成细胞物质，而且为机体提供完成整个生理活动所需能量。
某些异养微生物也可以光能作为能源，例如红螺菌，在环境中没有有机物的条件下，它可以利用光能，把环境中的CO 2合成为自身有机物；在有有机物存在的条件下，可以利用有机物进行生长，其代谢类型为兼性营养型细菌。
依微生物生长所需碳源的性质以及所需能源，将微生物的营养类型归纳如下：各类微生物所需碳源和能源的比较在生产实践和社会生活中，我们可以利用某些微生物碳源的特殊性来解决环境污染、粮食危机等问题。
我们可以利用某些细菌、放线菌、酵母菌以石油作为碳源的原理，消除石油污染。
运用某些细菌可以分解、利用氰化物、酚等有毒物质的原理处理有毒物质。
研究开发以纤维素、石油、CO 2等作为碳源和能源的工业微生物，缓解粮食危机。
自养微生物和异养微生物类型的划分，主要依靠能否以CO2作为生长的主要或唯一碳源，而不是决定于氮源。
例如异养微生物最常用的氮源是无机氮源中的铵盐和硝酸盐。
【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
【补充】培养基的配制原则：①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。
②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。
例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。
③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。
知识拓展题．为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基：（1）该培养基所含的碳源是-----------------，其功能是---------------------------。
（2）该培养基所含的氮源是-----------------，其功能是---------------------------。
（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是---------------------------。
（4）该细菌在同化作用上的代谢类型是---------------（5）该培养基用来鉴别的细菌是（）A霉菌 B大肠杆菌 C 酵母菌 D 乳酸菌微生物的实验室培养基础自测一、选择题、1．下列有关培养基的叙述正确的是……( )A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌2.不同培养基的具体配方不同，但一般都含( )A．碳源、磷酸盐和维生素 B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐 D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素3．获得纯净培养物的关键是……………( )A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B．接种纯种细菌C．适宜环境条件下培养 D．防止外来杂菌的入侵4．下列常用的无菌操作中错误的是……( )A．用酒精擦拭双手 B．用氯气消毒水源c．实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭5．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板6．有关倒平板的操作错误的是…………( )A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 c．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7．有关平板划线操作正确的是…………( )A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞c．将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养8．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是…( )A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．再放在适宜条件下培养 D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落9．涂布平板操作需要用到………………( )A．接种环、滴管、酒精灯 B．接种环、移液管、酒精灯C．涂布器、移液管、酒精灯 D．涂布器、接种环、酒精灯10．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是………( ) A．对比观察培养基有没有被微生物利用 B．对比分析培养基是否被杂菌污染C．没必要放人未接种的培养基 D．为了下次接种时再使用11关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量12．作为自养生物唯一碳源的是（）A糖类 B 石油 C 二氧化碳 D 花生粉饼13．大肠杆菌的代谢类型是（）A 自养需氧 B异氧严格厌氧 C异养需氧 D 异养兼性厌氧14．菌种保藏应控制的条件是（）（1）湿度（2）低温（3）干燥（4）有光（5）隔绝空气（6）适当有氧 A（1）（4）（6） B（2）（3）（6） C（1）（5）（6） D（2）（3）（5）15．下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（）A含碳有机物 B蛋白胨 C含碳无机物 D花生粉饼等天然物质16．平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（）A利于大肠杆菌的接种 B防止杂菌污染C利于培养的冷却 D 防止皿盖冷却水倒流入培养基17．含C、H、O、N的大分子化合物可以作为（）A异养微生物的氮源、能源 B异养微生物的碳源、氮源C自养微生物的氮源、能源、碳源 D自养微生物的氮源、能源、碳源二、非选择题18．鉴定培养基的制作是否合格的方法是：将制备好的培养基放在中保温1-2天看有无，如果没有说明制作合格，反之则不合格。