平菇液体菌种培养条件的研究

表2、表 3。
表 2 正交试验因素水平
水平
A
装 量 /mL
1
100
2
125
3
150
B 温 度 /℃
20 25 30
因素 C
转 速 / （r·min-1） 120 150 180
D 接 种 量 /%
5 10 15
表 3 正交试验结果
因素
处理 A
B
C
装量/mL 温度/℃ 转速/（r·min-1）
1
1
1
1
表 3 不同区域中试栽培结果 试验 出耳 平均每袋 采收 抗杂 耳片 耳片大 耳片厚 耳片 鲜耳总 生物学 区域 袋数 干料重/kg 潮次 能力 颜色 小/cm 度/mm 展开性 重/kg 效率/% 桂中 5 000 0.305 5 较强 棕褐 未测 未测 正常 1 820 119.34 桂南 3 130 0.305 5 较强 棕褐 6.1×4.1 1.64 正常 1 149 120.36
后，随机选取 15 个 菌 球 ，排 成 一 排 ，皿 下 衬 坐 标 纸 测 量 15 个
菌球直径，然后计算单个菌球平均直径。
1.3.5 正交试验 根据培养基筛选得到的最佳培养基做正交
收 稿 日 期 ：2008-02-07 基 金 项 目 ：山 西 省 科 技 攻 关 项 目 （2006031037 ）。
（120±10）r/min 条 件 下 培 养 5 d，测 量 菌 丝 量 、菌 球 密 度 、菌 球
大小筛选最佳培养基。
1.3.3 菌种培养 以筛选的最佳培养基为培养基。 一级摇瓶
培 养 500 mL 三 角 瓶 装 100 mL 培 养 基 ，培 养 同 1.3.2；二 级 摇
瓶培养 500 mL 三 角 瓶 装 培 养 基 以 及 培 养 条 件 按 正 交 试 验 设
食用菌液体菌种具有生产周期短、菌龄一致、生命力旺 盛、接种方便、用种量少、接种后恢复生长迅速等优点，适宜作 为配套技术应用于工厂化生产。
平菇是我地栽培量最大的食用菌，平菇栽培是否稳产高产 直接影响着菇农的经济效益和积极性。 为此，对我地栽培中常 用的 1 个平菇菌株高邮 918 的液体菌种培养条件进行试验。
北 虫 草[Cordyceps militaris （L. ）Link]与 冬 虫 夏 草 （Cordyceps sinensis Berk.Sacc）同 属 异 种 ，均 系 我 国 传 统 滋 补 强 身 名 贵 药 材, 特 别 是 虫 草 素 （Cordycepin ）即 3'- 脱 氧 腺 苷 抗 肿 瘤 的药用价值受到广泛的关注。 北虫草有效成分的种类及含量 与后者接近,而人工培养又较后者成功。 因此, 近年来北虫草 人工栽培尤为活跃，由于虫草菌种在所有真菌中变异退化最 快，所以对菌种的选育和生产面临着巨大的挑战。 现有文献 报道虫草菌种的生产主要集中摇瓶发酵和发酵罐发酵两种， 有关利用细胞悬浮培养瓶生产北虫草菌种的方法尚未见报 道。 试验在利用自然条件的基础上, 重点研究了利用细胞悬 浮培养瓶生产北虫草菌种的工艺过程, 结果表明该技术方法 对北虫草栽培种植户具有明显的实用价值。
④
0.5029
59
1.4221
⑤
1.5512
210
1.4222
2.2 正 交 试 验 试 验 中 影 响 菌 丝 生 长 的 因 素 主 要 有 培 养 基
的装量、培养温度、摇床转速、菌种接种量，将这四因素设置
3 水平，以 L9（34）作正交 试 验 对 培 养 条 件 进 行 了 调 配 筛 选 ，见
3结论试验结果表明：平菇高源自 918 菌株液体菌种最佳培养基为 玉米粉 6%，KH2PO4 0.05%，MgSO4 0.05%，蔗糖 1%，VB1 10 mg/L， pH 自然； 摇床发酵培养条件最佳组合为装量 150 mL， 温 度 30℃，转速 150 r/min，接种量 15%。
参考文献 [1] 张 玉 林 ，谭 永 忠．平 菇 液 体 菌 种 栽 培 菌 株 筛 选 试 验[J]. 中 国 食 用
其次是配方⑤，配方②，配方①，配方④最差。综合菌球密度和
菌球直径指标，最佳培养基为配方③。
表 1 不同培养基菌丝生长情况
培养基 平均干重/（g·100 mL-1） 平均密度/（个·mL-1） 平均直径/mm
①
0.7451
222
1.5111
②
1.3643
93
1.2667
③
1.6233
109
1.2887
2
1
2
2
3
1
3
3
4
2
1
2
5
2
2
3
6
2
3
1
7
3
1
3
8
3
2
1
9
3
3
2
K1 5.0980 6.0135
5.1230
K2 6.0526 5.2572
6.2000
K3 6.2119 6.0918
6.0395
R 1.1139 0.8346
1.077
D
菌丝干重 /（g·100 mL-1）
接 种 量 /%
1
1.3912
注：耳片大小、厚度系随机取样 50 片，用游标卡尺进行测量的平 均值。
结果表明：桂中、桂南两地域的中试栽培所表现的各项 指标比较优良及稳定；中试栽培的生物学转化率还超过小试 栽培 4%。
3小结
通过分离和驯化，获得 1 株较适应于桑枝秆人工代料栽 培 的 优 良 云 耳 菌 株 — — — Au-6-⑧， 经 过 小 试 栽 培 、 中 试 栽 培 试 验表明，该菌株的各项栽培性能指标及生物学转化率均优于 传统的杂木屑配方（评比试验结果）；正常条件下，桂中、桂南 两地域中试的生物学转化率没有明显差别， 分别达到 119.34%和 120.36%。 综合结果分析，该菌株完全可以在桑蚕 区进行推广应用。 为此，根据该菌株分离源的属地，特将 Au6-⑧菌株暂定名为“百云 6 号”。
1 材料与方法
1.1 供试菌株 高邮 918， 由 江 苏 高 邮 食 用 菌 研 究 所 提 供 。
母种为 PDA 培养基。
1.2 液 体 培 养 基 ① 玉 米 粉 3% ，KH2PO4 0.3% ，MgSO4 0.15%， 蔗 糖 1%，pH 自 然 ； ②玉 米 粉 5% ，KH2PO4 0.05% ， MgSO4 0.05%，蔗 糖 1%,VB110 mg/L，pH 自 然 ；③玉 米 粉 6%， KH2PO4 0.05%，MgSO4 0.05%，蔗糖 1%，VB1 10 mg/L，pH 自然； ④玉 米 粉 1%，酵 母 膏 0.5%，豆 饼 粉 2%，KH2PO4 0.1%，CaCO3 0.2%，pH 自 然 ；⑤玉 米 粉 6%，麸 皮 2%，KH2PO4 0.1%，MgSO4 0.05%，VB1 10 mg/L，pH 自然。 1.3 试验方法
1 材料与方法
1.1 供 试 材 料 ①培 养 基 原 料 ：虫 草 培 养 基 ；葡 萄 糖 ，蛋 白 胨，磷酸二氢钾，硫酸镁，柠檬酸氨，琼脂粉购自沈阳化学试 剂公司。 去离子水为自行处理制备。 ②供试菌株： 北虫草 （Cordyceps militaris）菌 种 由 沈 阳 中 天 生 物 工 程 有 限 公 司 李 春 燕教授惠增，菌种药号：国家食品药品监督管理局审批的人 工 北 虫 草 药 材 研 究 （批 件 号 2003L01393、 药 物 临 床 研 究 号 2003L01394）。③仪器： 26504-1L 细胞悬浮培养瓶：（CORNIG 股份有限公司，挪威），78-1 型磁力加热搅拌器：（杭州仪表电 机厂，中国）， H2-9211K 恒温震荡器：（太仓市科教器材厂，中 国），LRH-250-G 生化培养箱：（广东医疗机械厂，中国），SWCJ-2FD 超 净 工 作 台 ：（江 苏 苏 州 安 泰 空 气 技 术 有 限 公 司 ，中 国）。 1.2 试验方法 1.2.1 培养基的配制与灭菌 ①菌种分离 ： 平板马铃薯 、葡
图 1 桂中大棚人工代料栽培 图 2 桂南室内床架人工代料栽培
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供金顶榆黄蘑、黄绿盖元蘑、丰收木耳菌 ①金顶黄菌株： 是长白山特产，色艳、形美、味鲜。 原料广，生产工艺简单，全国 大部分地区四季可栽。 ②黄绿盖元蘑：东北林区特产，无柄、迭 瓦状、盖特厚，低温型。 生产工艺及原料同栽培黑木耳。 ③丰收 牌黑木耳：该菌株每年由当地众多种植户推荐，现场优中选优 分 离 获 得 ， 不 断 推 陈 出 新 。 上 述 菌 种 价 格 ： 邮 购 2 支 30 元 ， 递 增 1 支加 6 元，多购预订更优惠。 地址：吉林蛟河市白石山林 业 局 联 系 人 ： 杨 儒 钦 邮 编 ：132503 电 话 ：0432 -7053818 13039174529 15105476453
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食用菌
EDIBLE FUNGI
2008（6）
试验，得出最佳培养条件。 因素主要有培养基的装量、培养温 度、摇床转速、菌种接种量。
2 结果与分析
利用细胞悬浮培养瓶培养 北虫草菌种
2.1 培养基筛选 由表 1 可见培养基配方③菌丝干重最重，
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平菇液体菌种培养条件的研究
王 芳 张玉萍 孟丽君
（山西省生物研究所，太原 030006）
摘 要 通过对平菇高邮 918 菌 株 进 行 培 养 基 筛 选 ，筛 选 出 最 佳 培 养 基 为 玉 米 粉 6%，KH2PO4 0.05%，MgSO4 0.05%，蔗 糖 1%， VB1 10 mg/L，pH 自然。 并 对 发 酵 条 件 进 行 正 交 试 验 ，得 出 最 佳 组合装量 150 mL，温度 30℃，转速 150 r/min，接种量 15%。 关键词 平菇 液体菌种 培养条件 文章编号 1000-8357（2008）06-0021-01