自动生化分析仪试验参数设置
7180型自动生化分析仪仪器标准操作规程
五、HITACHI 7180型自动生化分析仪仪器标准操作规程（一）HITACHI 7180型自动生化分析仪开/关机程序1开机前检查1.1样品针、试剂针、搅拌棒是否沾有水滴、脏污；是否弯曲、堵塞；各清洗槽是否脏污或堵塞。
1.2检查2号试剂盘45号位的Hitergent清洗液，1D1、2D21位置以及仪器左前门下左管路和样品盘W1位置的Hialkali-D清洗液，1D2、2D2 位置以及仪器左前门下右管路Hicarrynon清洗液，是否需要添加。
1.3倒掉废液，清理废液桶。
1.4检查打印机及CRT开关是否处于（ON）位置上，打印纸是否足够。
1.5打开 UPS开关。
1.6打开供水龙头，接通水机电源。
1.7检查ISE系统的标本盘W2位置上电解质（N）清洗剂情况和仪器背面废液部有无结晶出和污染，注射器、SIP管无漏夜。
2开机2.1打开主机电源。
为保证试剂舱的冷藏作用，位于仪器右下方的电源总开关可长期处于（ON）状态。
2.2将仪器正面右侧的电源开关（粉红）从（OFF）扳至（ON）一侧，记录开机时间。
2.3打开中文电脑开关。
3开机后准备工作3.1试剂准备：检查各项目可测定数（Available Tests）和每种试剂剩余测定数（Remaining Tests）的余量。
如需追加或更换试剂，按试剂装载程序执行。
3.2清除以前结果及曾选项目：按3.3 ISE系统试剂准备：在ISE 3种试剂剩余毫升数（Remaining Tests）。
ISE系统内部校准液、稀释液、参考电极液均位于仪器左前门内右侧，不足时添加试剂。
4关机4.1工作结束后的每日维护与检查。
4.24.3清洗取走所有标本，清洗样品针和试剂针。
4.4关闭中文电脑。
4.5OK，待屏幕上出现“Safe to Turn Off Your Computer”时，将仪器正面右侧电源开关（红色）从（ON）扳至（OFF）状态，记录关机时间。
5 24h不关机运行5.1睡眠状态设置：按在预先设置的时刻被“唤醒”。
全自动生化分析仪校准规范
全自动生化分析仪校准规范全自动生化分析仪校准规范(湿式)全自动生化分析仪是临床诊断的重要手段之一 ,其检测结果是否准确对临床疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。
在仪器检测结果精密度良好的前提下，仪器校准是保证检测结果准确的关键步骤，为此结合国内的相关标准的基础上，就全自动生化分析仪校准的基本要求提出如下建议。
1杂散光的试验方法1.1设定两个单试剂项目，波长设为340nm;1.2设定上述项目的试剂位，分别以蒸馏水和亚硝酸钠标称溶液(50g/L)为试剂和样本，每个项目重复测定5测试;1.3查看反应曲线或反应数据，以最后一点的吸光度作为所测定溶液的吸光度，共得到5个蒸馏水和5个亚硝酸钠标称溶液的吸光度;1.4计算最小的亚硝酸钠溶液吸光度与最大的蒸馏水溶液的吸光度的差值，为杂散光。
1.5应符合标准的要求;当测定波长为340nm时，杂散光应不大于0.5%(或吸光度不小于2.3)。
2吸光度线性范围的试验方法2.1以340nm吸光度不低于2.0(以蒸馏水为空白)的重铬酸钾溶液为原液，用蒸馏水稀释出相对浓度分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9和10(原液)的系列溶液;2.2设定一个单试剂项目，波长为340nm，试剂和样本均为待测溶液;通过反应曲线或反应数据查找试剂空白段的吸光度;2.3按照浓度由低到高的顺序，每个浓度重复测定2次;2.4以相对浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，画出散点图;2.5用最小二乘法对所有数据进行线性拟合，按照公式(1)、(2)和(3)计算每一个点的相对偏倚;相对偏倚=100*(A-(a+b*C))/(a+b*C) (1)式中:A为实际测定的吸光度，a为线性拟合的截距，b为线性拟合的斜率。
22b=(nΣA*C-ΣAΣC)/( nΣC-(ΣC)) (2)a=(ΣA/n)-b*(ΣC)/n (3)式中:A为吸光度，C为相对浓度，n为总的测定点数。
2.6应符合标准的要求:线性范围不小于2.0，各测定值的相对偏移不大于?5,。
自动生物化学分析仪实验参数设置
自动生物化学分析仪实验参数设置全自动生化分析仪的参数就是仪器工作的指令，操作者通过设置正确的参数控制仪器完成一系列复杂而且有序的操作程序。
指挥仪器工作的参数很多，有些参数是在生产过程中设置好的，如机械操作、加试样时间、反应时间安排等，只需选择就可进行工作，我们简称为仪器指令。
操作者需进行的参数设置是指进行某个具体检测项目时的具体操作指令，我们简称为客户指令，主要包括样品量、试剂量、测定方法、校正方法、反应时间、测定波长、延迟时间、测定时间、控制因素等。
客户指令和仪器指令结合起来，共同完成整个测试。
各种品牌的仪器由各自的厂商设置了不同的仪器指令，我们在设置客户指令之前必须了解厂商设置的仪器指令，才能根据不同的试剂要求设置客户指令。
一、日立7170、7180、7600 P仪器指令0 5 10 15 0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50S T1 T2 T3 T4二、日立7060、7080仪器指令0 5 10 150 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45S T1 T2 T3 T4三、日立7150、7600 D仪器指令0 5 10 0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50S T1 T2四、奥林帕斯AU600 、AU400、AU640、AU2700、AU5400 仪器指令0 3 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27S T1 T2五、奥林帕斯AU800 、AU10000 3 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16S R1 R2六、东芝40 FR0 5 100 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62S T1 T2七、东芝120 FR仪器指令0 5 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33S T1 T2八、贝克曼CX4\5\7\90 320 620 920primary inject rnt SAMPLEsecondary inject rgtreagent blankreaction八、贝克曼LX20-180 0 300 600primary inject rnt SAMPLEsecondary inject rg t Third Inject rgtreagent blankreaction九、客户指令1.样品和试剂量样品和试剂量的确定一般按照实际说明书上的要求比例，并结合仪器特征进行设置。
浅谈自动生化分析仪的参数设置
５ 试 剂 的选 择
软件 的设 定等。
１ 波 长 的 选 择
１ ． １ 单 波长
单波长 是用一个 波长检 测物质 的光 吸收强度 的
方法 。 当测定 体系 中只有一 种组分或混合溶液 中待测组分 的吸
收峰与其他共存 物质的吸收峰无重 叠时 ，可用单波 长检测 。
综 合 医 学
健 康 大 视 野 ２ ０ １ ４ 年 ９ 月 第 ２ ２ 卷 第 ９ 期 Ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｈ ｏ ｒ ｉ ｚ ｏ ｎ ， Ｓ ｅ ｐ ｔ ｅ ｍ ｂ ｅ ｒ ２ ０ １ ４ ， Ｖ ｏ １ ． ２ ２ Ｎ ｏ ． ９
浅谈 自动 生化分析仪的参数设置
张汉乐 曹学英 宁夏第五人 民医院石炭井医院 （ 宁夏 石嘴 山７ ５ ３ ０ ０ ０ ）
电化学疗法 、微波热凝 疗法 、红外线凝 固治疗 ，较少用 。
痔 的初 期。 注意饮食 ， 忌酒 和辛辣 刺激食物 ， 增加纤维性食 物 ， 多摄人 果蔬 、多饮水 ，改变不 良的排便 习惯 ，保持大便 通畅 ， 必要 时服用缓泻 剂 ，便后清洗 肛门。对于脱垂 型痔 ，注意用手 轻 轻托 回痔块 ，阻止再脱 出。避免久 坐久立 ，进行适 当运动 ， 睡前温热水 （ 可 含高锰酸钾 ） 坐浴 等” 。 １ ． ２ 局部用药 治疗 已被 广泛采用 ，药物 包括栓剂 、膏剂 和
１ ． ２ 双 波 长 或 多 波 长 就 是 用 两 个 或 多 个 波 长 检 测 ，根 据 光
５ ． １ 单试 剂法
指在反 应过程 中只加一次试 剂的方法 。
５ ． ２ 双试 剂法 在反 应 过程 中试 剂 分开 配 制和 加 入反 应 系 统 ，可 消除干扰和非特异性 的反应 ，稳定试 剂 ，使检测结 果更 准确 。 ６ 分 析时间的选择 分 析时间的选择依据所 用分析方法 的不 同而异 ， 一点终点 法 的分 析时间应设在待测 物质反应即将完成 时 ， 过早会 由于反 应未达 到终点而影 响结果 的准确性 ， 过迟易受其他 反应物质 的
_Dimension_RxL型自动生化分析仪操作规程
DUPONT Dimension RxL型自动生化分析仪仪器标准操作规程本节的仪器标准操作规程是专为美国DUPONT公司的Dimension RxL型自动生化分析仪编写的由于Dimension系列生化分析仪中的AR型与ER型已经停产，且基本结构及功能与RxL型相似，所以没有人选。
专为DUPONT Dimension RxL型自动生化分析仪的分析项目编写的分析项目标准操作规程列在下一节中。
（一）DUPONT Dimension RxL型自动生化分析仪开/关机程序1 开机1.1 检查电源线、试剂及标本针等，然后打开UPS电源。
1.2 打开主机电源开关，打开屏幕开关。
1.3 等待仪器完成自检。
2 开机后准备2.1 在主屏幕“Standby”下，按→→→按返回主屏幕。
2.2 检查电解质系统（EMT）消耗品：在主屏幕下按→→IMT系统→按2.3 在主屏幕下按→检查各种试剂量→根据当天工作量补足试剂→按3、关机3.1 在主屏幕“Standby”下选操作菜单（Operating Menu）后按→调出“Consle Menu”，选择→按键，待屏幕显示“Y ou May Now Turn Off the Instrument”（可以关仪器了）后，关闭主机电源。
3.2 关闭计算机屏幕开关。
3.3 关闭UPS。
（二）DUPONT Dimension RxL型自动生化分析仪分析参数设置程序1 开放通道参数设置1.1 在主屏幕操作菜单下按→→调出用户自定义方法（User-Defined Method）屏幕。
1.2 输入密码（只有输入密码方可进行参数设置）。
1.3 在屏幕提示下输入通道、方法名称、测定模式、校准模式、各项参数、定义试剂的资料。
1.4 规定校准的方法与参数。
1.5 规定分析方法的参数（以上各项参数的形式均与仪器专用通道的参数相似）。
1.6 按→→输入检测模式（是连续监测法还是终点法），MeasuringFilter（主波长）及Blanking Filter（次波长）→按保存输入的资料，完成知编程序。
自动生化分析仪试验参数设置
COBAS常用波长：12个波段,从紫外线到红外线340~800nm
反应方向(Reaction Direction )
在一定反应时间内，吸光度是增大还是下降
表示方法
• • • • COBAS HITACHI OLYMPUS BECKMAN INC/DEC INC/DEC Reaction Slope Reaction Direction Reaction Mode
试剂量（Reagents Volume ）
最小反应体积 ：在仪器光度读数用于结果计算时，反应液液 面高度不低于光度计光径最小体积 ，保证仪器的正确读 数和计算，也是仪器测定精密度和经济性的指标之一 设定原则 在单试剂测定中：样本与试剂的总体积不得少于此参数 在双试剂测定中： R1与样本的反应读数不纳入结果计算：R1加液量可不考虑 此参数，如连续监测法； R1与样本的反应读数纳入结果计算：应考虑它对结果的影 响，用于两点终点法和带样本空白的速率法
• 不同仪器波长的表示方式
主波长 COBAS HITACHI OLYMPUS BECKMAN ABBOTT Wave(Main/ Wave(Main/ Wavelength pri Primary Wavelength Wavelength Primary 次波长 Sub) Sub) Wavelength sec Secondary Wavelength Wavelenght Secondary
试剂加入时间（Adding Time）
• 概念： COBAS和 HITACHI 第一试剂/第二试剂：试剂的成分的区别 R1/R2/R3/R4：试剂的加注时间，试剂一在样 本加入后即刻加入，试剂二可以在R2（1.5 分钟）或R3（5分钟）时加入
自动生化分析仪的分析参数设置
自动生化分析仪的分析参数设置自动生化分析仪是一种把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、恒温反应、自动监测、数据处理以及实验后清洗等步骤进行自动化操作的仪器，它完全模仿并代替了手工操作，目前已经成为医疗机构进行临床诊断所必可不少的仪器之一。
它的应用大大提高了生化检验的准确性、精密度和工作效率，适应了临床医学发展对检验医学的要求，然而这一切不仅需要生化分析仪的技术基础，也需要仪器内每个项目都有一组最优化的分析参数。
并且目前大多数生化分析仪为开放式，封闭式的仪器一般也会另外留一些检测项目的空白通道由用户自己设定分析参数，因此我们有必要了解生化分析仪各个分析参数的基本含义以及设置方法。
1.试验名称常以项目的英文缩写来设置，如总蛋白设置为TP，白蛋白设置为ALB等。
2.方法类型生化分析仪常用的方法有终点法、连续监测法、比浊法等，根据被检物质的检测原理等选择其中一种分析方法。
2.1终点法又称为平衡法，是基于反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其对光吸收强度的大小对物质进行定量分析的一类方法，有一点终点法和两点终点法两类。
一点终点法的特点是使用一种或两种试剂，当待测物与试剂反应达到终点时，测定混合溶液的吸光度来计算待测物的浓度，该法常用的有总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法、葡萄糖氧化酶法等，手工操作的大多数方法都是一点终点法。
两点终点法也称固定时间法，如果是单试剂分析，当测定波长同干扰物质的吸收光谱有重叠时，通过选用两点终点法可消除样品空白引起的干扰，其分析过程是在样品与试剂混合后经过一段延滞期读取一个点A1，一定时间后再读取A2，然后比较标准和测定的ΔA（ΔA=A2-A1）值，求得待测物的浓度。
肌酐苦味酸法就是一个典型的单试剂两点法的例子。
如果是双试剂分析，选用二点终点分析法除了可消除样品空白引起的干扰外，还可消除内源性干扰物质的干扰，其分析过程是加入试剂1后读取A1，加入试剂2后读取A2，A1相当于读出样品空白值，A2才是实际呈色反应，然后比较标准和测定的ΔA（ΔA=A2-A1）值，求得待测物的浓度。
全自动生化分析仪操作规程
全自动生化分析仪操作规程
《全自动生化分析仪操作规程》
一、操作前准备
1.1 确认仪器和相关设备处于正常工作状态。
1.2 准备好所需的试剂和标准品。
1.3 充分了解要测试的样本类型和相关信息。
二、开机操作
2.1 按照仪器说明书正确开启仪器。
2.2 确认仪器在开机自检过程中无异常情况。
三、准备样本
3.1 根据实验要求，采用适当的方法准备样本。
3.2 将样本按照仪器规定的方式装入样本架。
四、设置参数
4.1 根据测试要求，在仪器界面上设置相应的测试项目和参数。
4.2 确认参数设置无误。
五、开始测试
5.1 点击“开始测试”按钮，使仪器开始自动测试样本。
5.2 保持仪器在测试过程中不受外界干扰。
六、检查结果
6.1 测试结束后，查看仪器上显示的测试结果。
6.2 确认结果无误后，将结果记录。
七、清洁和关机
7.1 根据仪器说明书，将仪器内部和外部进行清洁。
7.2 关闭仪器，并根据要求进行仪器的维护和保养工作。
八、安全注意事项
8.1 在操作过程中，遵守相关的安全规定，避免造成身体和仪器损坏。
8.2 对于化学试剂的操作，必须做好相应的防护措施。
以上规程是全自动生化分析仪的基本操作流程，操作人员必须按照规程准确操作，以确保测试结果的准确性和安全性。
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张孝永
您遇到过这样的医疗纠纷吗？ 您遇到过这样的医疗纠纷吗？
A医院的生化室使用全自动生化仪器，每天早上做两 医院的生化室使用全自动生化仪器， 医院的生化室使用全自动生化仪器 个水平的质控合格后才开始测试标本。某天， 个水平的质控合格后才开始测试标本。某天，检测了一例 病人标本ALT（丙氨酸氨基转移酶）结果为 病人标本 （丙氨酸氨基转移酶）结果为20U/L。生化 。 室的检验人员没有仔细检查其它项目就匆匆发了报告。 室的检验人员没有仔细检查其它项目就匆匆发了报告。 此人是一个严重的肝炎患者， 此人是一个严重的肝炎患者，当他拿到一个正常的 ALT结果的报告单，大为疑惑，于是第二天到另一家权威 结果的报告单， 结果的报告单 大为疑惑， 医院抽血化验，得到2500U/L的ALT报告，一场医疗纠纷 报告， 医院抽血化验，得到 的 报告 产生了!结果 结果……. 产生了 结果 检测人员很不理解，两个水平的质控都在靶值上， 检测人员很不理解，两个水平的质控都在靶值上，说 明试剂和仪器状态均正常， 明试剂和仪器状态均正常，为什么病人结果却相差如此悬 而且仪器也没有报警。 殊，而且仪器也没有报警。
延迟时间(Delay Time)
• 概念：指试剂与样本混合后到监测开始之间的时 间 • 应用：连续监测法或两点速率法法用 • 原因：酶与底物混匀后需要一定的时间才被激活， 直到线性期的零级反应后才能开始监测；有的项 目需要用工具酶将内源性代谢产物耗尽后才能监 测 • 方式： 以S“秒”或P（Point）测定点设置 • 项目和方法学不同时差别很大:CHE/CREA/ALT/ALP/CK/TBA
HITACHI P800 C501 OLYMPUS ABBOTT
• 样本与试剂的比例 样本与试剂的比例(SV：RV)即样本体积分数： 定义：样本体积与反应液总体积的比值(SV／TV) • 比例选择原则
待测物质含量高，生理波动范围小，样本用量小： ALB 1:200， GLU、TCH等，样本试剂多为1:1OO，测定 血UA或HDL-C，常为1:50 待测物质含量低，生理波动范围大，样本用量大，应在 1:10％以下，如酶ALT/AST活力为1:10 ，肌酐Jaffe氏法 监测时间短、吸光度值较低，样本试剂比例多为1:10
COBAS常用波长：12个波段,从紫外线到红外线340~800nm
反应方向(Reaction Direction )
在一定反应时间内，吸光度是增大还是下降
表示方法
• • • • COBAS HITACHI OLYMPUS BECKMAN INC/DEC INC/DEC Reaction Slope Reaction Direction Reaction Mode
常用选择项 Rate A/2Pont rate/1 Ponit/2 Poinnit/2 Point end RATE/FIXED/END RATE1/2/END1/2 Rate /Flex Rate/End
• ABBOTT
Reaction defintion
• 2 从ALT的反应曲线分析：
仪器检测的正是底物耗尽后吸光度变化的平台期，造成了病人结果只有20U/L的现象，导致医疗纠纷的 产生，因此很有必要了解仪器和试验项目的参数设置的基本原理
试验代号（Test Code）
• 以数字表示 • 目的: 便于识别 为仪器通讯提供代码 注意事项：不能随意更改试验代号，原因： （1）：保证数据在LIMS中传输的正确性 （2）：保证结果显示时的顺序 （3）：保证试剂信息读取正确
试剂加入时间（Adding Time）
• 概念： COBAS和 HITACHI 第一试剂/第二试剂：试剂的成分的区别 R1/R2/R3/R4：试剂的加注时间，试剂一在样 本加入后即刻加入，试剂二可以在R2（1.5 分钟）或R3（5分钟）时加入
• 试剂加入方式及相应时间 分钟) 试剂加入方式及相应时间(分钟 分钟
试验名称（Test Name）： 以英文缩写表示
• 根据国际标准和习惯： ALT（GPT）；GSP（FRA）；CK（CPK） • 方法学不同时名称有区别： LDHIL/LDHL，反应原理不同，相应的参考范围不 同，室间质评报告结果时相差很大 GLUC2/GLUC3：200/800Tests 不同厂家的试剂不同： 如在BECKMAN CX/LX/DX系列应用名随厂家不同 而不同，CZALT/ZSALT等
可选择项
INC/DEC INC/DEC +/－ Positive/Negative Up/Down
• ABBOTT
样本量（Sample Volume ）
• Sample Volume （S.V）：可以选择的最 大和最小样本量，以微升（ul）计 • 样本量的递增数值：0.1、0.5、1ul，和仪 器的加样精确度有关 • 可以根据与试剂的比例增大或减少样本量
温度（Tem）
• 三种温度可选: 30℃、37℃、25℃/固定37℃ • 控制反应温度的方法：水浴/空气浴 • 温度选择意义：方法学不同，结果的溯源性 不同，靶值不同
波长 （Wave Length ）
• 选择原则：正确选择有利于提高测定的灵敏度和减少测定 误差 待测物质在该波长下的光吸收最大； 其吸收峰宜较宽而钝，而不是处于尖峰或陡肩，一般不选光 谱中末端吸收峰，即该吸收峰处吸光度随波长变化较小； 常见干扰物在该波长下的光吸收最小 • 双波长测定 ：选择一个次波长，因单波长测定易受样本 溶血、黄疸、脂浊等因素干扰 双波长测定的原则是根据干扰组分和待测物质吸收光谱的 峰形特征，选择两个波长，使干扰组分在这两个波长处的 吸光系数相等，而使待测物质在两波长处的吸光系数有显 著差别
试剂量（Reagents Volume ）
最小反应体积 ：在仪器光度读数用于结果计算时，反应液液 面高度不低于光度计光径最小体积 ，保证仪器的正确读 数和计算，也是仪器测定精密度和经济性的指标之一 设定原则 在单试剂测定中：样本与试剂的总体积不得少于此参数 在双试剂测定中： R1与样本的反应读数不纳入结果计算：R1加液量可不考虑 此参数，如连续监测法； R1与样本的反应读数纳入结果计算：应考虑它对结果的影 响，用于两点终点法和带样本空白的速率法
• 不同仪器波长的表示方式
主波长 COBAS HITACHI OLYMPUS BECKMAN ABBOTT Wave(Main/ Wave(Main/ Wavelength pri Primary Wavelength Wavelength Primary 次波长 Sub) Sub) Wavelength sec Secondary Wavelength Wavelenght Secondary
• 设定量（uL） 20 50 • 余 量（uL） 11 13 • 消费量（uL） 31 63
100 150 16 19 116 169
200 23 223
250 26 276
270 27 297
上海复星长征公司生产的ALT试剂规格 R1：4×50mL，R2：2×50mL R1：R2：S设定量为：200：100：15uL
注意事项：缩小试剂用量会降低线性范围，遇高浓 度样本会因酶量不足而使结果变低
稀释液量(Dilution Volume)
• 添加稀释液(水)：去离子水或指定的液体(0.9%NaCl) • 目的 一用于浓缩试剂的稀释：恢复原试剂浓度；避免试剂间的交叉 污染 二在样本加量小的时候用来冲洗样本探针内侧，洗出粘附在采 样针内壁上的微量血清，减少加样误差和避免交叉误差 注意：要把稀释水量纳入样本试剂比例和反应液总体积考虑
反应时间(Reaction Time)
• 指仪器的一个分析周期中，试剂和样本混合最后一点测定 读数时间 • 选择原则：保证测定项目在该时间内能完成监测，如ALB、 TG、CK GLU时间不同 • 常见仪器可以选择的时间 COBAS P800 :1~10、15、22分钟 C501: 3~10分钟 HITACHI ：3、5、8、10、15、22分钟 OLYMPUS固定时间： 8.3分钟 ABBOTT固定时间：9.6 分钟 BECKMAN可达时间：975秒
ALT的反应原理：
L-丙氨酸 + a-酮戊二酸 NADH + 丙酮酸 + H+ ALT LDH 丙酮酸 + L-谷氨酸 L-乳酸 + NAD+
ALT为降反应，其原理为通过监测NADH的消耗造成吸光度的降低速率，得到 ALT的含量。当ALT含量很高时，酶反应速度加快，NADH在30秒之内就可能 消耗完全，即底物耗尽
理论测试数 按照R1计算= 4×50mL/200uL=1000Tests 按照R2计算= 2×50mL/100uL=1000Tests 实际测试数 按照R1计算= 4×50mL/（200+23）uL=896Tests 按照R2计算= 2×50mL/（100+16）uL=862Tests
结果：R1剩余，R3不足
反应监测时间 (Reaction Monitor Time)
• 用途：该时间内的测定读数要用于结果计算 • 一般反应时间10分钟左右，6-30秒读数一次，有的仪器在整个反应周期全 程读数，有的读取指定时间(点)吸光度
• 监测时间： 终点法：达到反应终点的时间 速率法：酶至少90～120Ｓ或不能少于4个读数点即3个吸光度的变化(3个△A)
样本空白 (Sample Blank)
• 原因：溶血、脂血、黄疸等情况，会导致样本本 身的吸光度对测试结果造成影响。所以对样本本 身吸光度的测量，即样本空白，可以去除这方面 的影响 • 测量方法：按照正常测试的试剂和样本量，把试 剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量 • 终点法选YES 或NO • 影响速度：样本加空白试剂，要占用一个比色杯， 速度减慢
酶促反应过程
• 随着加入血清或底物启动反应后，在出现明显的变化前这一时期称为延迟期， 随着加入血清或底物启动反应后，在出现明显的变化前这一时期称为延迟期，此期从 几秒到几分钟，随后是底物和产物变化与时间成直线时期，形成产物的速率恒定， 几秒到几分钟，随后是底物和产物变化与时间成直线时期，形成产物的速率恒定，此 时期的速率为“反应初速度” 此期底物也下降，但实际上反应速度与底物浓度无关， 时期的速率为“反应初速度”。此期底物也下降，但实际上反应速度与底物浓度无关， 对底物浓度而言，这一时期的反应称为是零级反应，即产物增加的速度不变。 对底物浓度而言，这一时期的反应称为是零级反应，即产物增加的速度不变。在零级 反应区内，时间和吸光度的变化成线性，表现在反应曲线上，在一定的时间内， 反应区内，时间和吸光度的变化成线性，表现在反应曲线上，在一定的时间内，吸光 度的变化为一条直线。反应曲线的直线期时间长短相差很大。 度的变化为一条直线。反应曲线的直线期时间长短相差很大。紧跟着是反应速率持续 下降，进入速度依赖底物浓度的时期，这一时期称为一级反应期。在这一期中， 下降，进入速度依赖底物浓度的时期，这一时期称为一级反应期。在这一期中，底物 浓度下降，逆反应增加。抑制性产物积蓄，当底物耗尽或达到平衡时， 浓度下降，逆反应增加。抑制性产物积蓄，当底物耗尽或达到平衡时，反应停止