医学检验·检查项目：载脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)_课件模板
载脂蛋白PPT课件
④免疫印迹分析
取出转移后的NC膜在洗涤液中洗3次后，置封 闭液中室温封闭3h（或37℃1h
在洗涤液中洗3次
加入1：100稀释的第一抗体并充分混匀，37℃ 温浴6h（或过夜）
用洗涤液洗5次（10min×5）甩干
加入1：500稀释的第二抗体，混匀，37℃作用 2h
洗涤同上
加入新配制的底物溶液于室温下摇动直至出现 紫色（或紫褐色）并看到背景（1～5min）时 用蒸馏水冲洗终止反应，空气干燥封于塑料袋
Marcovina等
应用SDS-1.5%agarose凝胶电泳结合 免疫印迹技术，首次报道人类至少 有35种Apo（a）异构体，此法是在 Kamboh等法基础上发展起来的一种 高分辨的分析方法。
上述两类方法有许多共同点，即首先 采用电泳技术将Apo（a）与其他载 脂蛋白分离，然后Western blotting，灵敏而特异地显示Apo （a）多态区带的位置，最后根据其 与ApoB100电泳速率比较或根据其分 子量大小而确定Apo（a）表型。
免疫印迹反应中也可选用鼠抗人Apo（a） 单克隆抗体作为一抗，用酶标兔抗鼠IgG 作为二抗。
应用酶标抗体反应作为二抗时，底物以 脂溶性4-氯-1-萘酚或联茴香胺较水溶性 DAB溶液为好
金标、I125标抗体作为二抗，通过银染或 放射自显影技术显示Apo（a）蛋白区带
将生物素标记的抗体作为二抗，通过生 物素-亲和素系统放大信号，可大大提高 检测敏感性
③电转移
取此凝胶，切下分子量蛋白带放入SDS洗脱 液中过夜，以固定凝胶大小并洗脱掉未与蛋 白结合的SDS，0.01%考马斯亮蓝G-250染色 室温1h，7%乙酸脱去背景颜色。
剩余凝胶铺在已浸过转移电泳缓冲液的NC膜 上，搭建滤纸/凝胶/NC膜/滤纸一同放在电 泳转移支架上，按层次相夹置于装满转移电 泳缓冲液的电泳槽中。120V电泳6h（30℃以 下）或4℃30V转移过夜
载脂蛋白A1APOA1免疫透射比浊法作业指导书
载脂蛋白A1APOA1免疫透射比浊法作业指导书1、前言试验名称：载脂蛋白A1测定，英文名称：APOA1，方法：免疫透射比浊法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在科华KHB450全自动生化分析仪上测定血清、血浆样本中的APOA1浓度，以保证测定结果的准确可靠。
本试验用体外定量测定人血清或血浆样本中APOA1的浓度。
载脂蛋白A1是一个抗动脉粥样硬化的指标，它与冠心病的危险因素负相关。
本实验在临床上常和载脂蛋白B、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、甘油三酯等同时测定，用于对受检者脂代谢状态和动脉粥样硬化发病风险的评价。
2、测定原理本方法基于样品中的人APOA1与特异抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm波长处测出该不溶性复合物的浊度，通过标准品建立的一个吸光度对APOA1的标准曲线测定出样品中的APOA1的浓度。
3、试剂试剂生产商：上海科华公司。
剂型：液体双试剂。
包装量：R1：4*40ml R2：3*35ml注册号：沪食药监械（准）字2011第2400011号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：试剂1聚乙二醇≤4%Tris/HCL缓冲液15mmol/l试剂2抗人APOA1抗体106mmol/l储存条件和有效期：试剂储存于2―8℃，开启和未开启试剂均可稳定致试剂盒标注的有效期。
注意：试剂用过后应加盖保存。
4、标准品：使用试剂盒附带标准品。
用1ml蒸馏水复溶，放置30分钟后使用。
5、质控品：生产商：英国Randox公司。
剂型：干粉试剂，用5ml去离子水复溶，完全溶解30分钟后使用。
保存条件：未溶解时2―8℃稳定至有效期，复溶后2―8℃稳定一周。
6、、样品要求：样品采集前病人宜清淡饮食，禁酒至少三天以上，空腹用肝素锂抗凝管或促凝管常规方法肘静脉采血，血标本4000转离心3分钟，分离血清或血浆样品，室温可稳定1周，2－8℃可稳定4周。
-20℃冷冻标本可稳定两个月。
载脂蛋白A1(APOA1) 免疫比浊法
目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理APO A-1与特异的抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm测定该不溶性复合物的浊度。
通过测定标准品，建立一个吸光度对APO A-1浓度的标准曲线就可以测定出样品中的APO A-1浓度。
2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司APOA1试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
医学检验·检查项目：脑脊液载脂蛋白A1,B100,CⅡ,CⅢ,E_课件模板
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临床意义：
poB100分子量大不能透过，故脑膜炎、脑 血管病，脑囊虫患者ApoA1、ApoE在CSF中 的水平均升高。载脂蛋白的测定可为诊断 某些神经系统病提供有价值的信息。
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医学检验·各论 脑脊液载脂蛋白A1，B100，
CⅡ，CⅢ，E 内容课件模板
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简介：
组成脂蛋白的特殊蛋白称为Apo。Apo 是决定脂蛋白性质的主要蛋白成分。在不 同的脂蛋白中，Apo的种类、含量和功能 也不同。Apo的主要功能有：①构成脂蛋 白，使血浆脂质成为可溶性。②激活或抑 制脂蛋白代谢有关的酶。③识别脂蛋白受 体，与特异性脂蛋白受体结合。④结合和 转运脂质，稳定脂蛋白结构等。
正常值：
(1)单向免疫扩散法：未测出ApoB100、 CⅡ，而ApoCⅢ含量极微;ApoA1为 0.01±0.0054g/L，ApoE为 0.0069±0.0016g/L与22.2%。 (2)火箭免 疫电泳法：ApoA1 0.04±0.01g/L。 (3)ELISA法：ApoE 0.008±0.001g/L。。
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临床意义：
脑脊液中载脂蛋白含量远低于血液水 平，免疫组化试验证明大脑额叶的星形胶 质细胞及某些神经元能合成ApoE，而CSF 中的ApoA1与ApoCⅡ可能从血中渗入。但 当患神经系统疾病时，可致血脑屏障功能 受到损害。使其通透性增高，血液中 ApoA1可更多渗入CSF中，ApoA1含量增加; 因A
血清载脂蛋白A1APOA1测定
血清载脂蛋白A1APOA1测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理血清中的ApoA1与试剂中特异性的ApoA1抗体结合，形成抗原抗体复合物而产生浊度，其浊度高低与血清中ApoA1成正比。
通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中ApoA1的含量。
3标本：3.1 病人准备:应禁食12小时抽血。
3.2 类型：血清3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。
在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天，-20℃保存至少可以稳定3个月。
3.4 标本运输室温条件下运输。
3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。
4 实验材料4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司APOA1测定试剂盒（浙械注准20142400111）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液0.1mol/L聚乙二醇（PEG）表面活性剂，稳定剂 40g/LTriton X-100 0.1ml/L试剂2（R2）：羊抗人APOA-Ⅰ血清（效价大于1:16） 50～60ml/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
缓冲液（R1）和抗体试剂（R2）可避光密封保存可稳定一年。
打开后抗体试剂（R2）稳定2个月。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂4.2 校准品：使用宁波美康生物科技有限公司提供的载脂蛋白A-Ⅰ/B标准品血清进行全点校准操作。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。
6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
载脂蛋白a-1模拟肽_用途_概述说明以及解释
载脂蛋白a-1模拟肽用途概述说明以及解释1. 引言1.1 概述载脂蛋白a-1模拟肽（ApoA-1 mimetic peptides）是一类具有广泛应用前景的生物活性肽段。
它们可以模拟载脂蛋白a-1（ApoA-1）的结构和功能，参与胆固醇运输和代谢调节过程，从而在治疗心血管疾病等领域展现了潜在的应用价值。
1.2 文章结构本文将全面介绍载脂蛋白a-1模拟肽的用途、作用机制以及临床应用价值与前景。
首先，在第二部分中，我们将定义和描述载脂蛋白a-1模拟肽，并探讨其在临床应用中的特点和优势。
然后，在第三部分中，我们会详细说明载脂蛋白a-1模拟肽的作用机制，包括相关背景知识、分子结构解析以及生物活性等方面。
接下来，在第四部分中，我们将解释载脂蛋白a-1模拟肽在心血管疾病等领域中的应用前景，并探讨其在其他相关疾病领域中的潜在应用价值。
同时，我们还将分析合成与改良策略对进一步提高其临床应用价值的影响。
最后，在第五部分中，我们将总结本文的主要内容并得出结论。
1.3 目的本文的目的是全面介绍载脂蛋白a-1模拟肽的用途、作用机制以及临床应用价值与前景。
通过对相关研究和实践的概述和解释，旨在增加读者对该领域的了解，并为进一步研究和应用提供参考和启示。
同时，希望通过本文的撰写和传播，促进载脂蛋白a-1模拟肽在医学领域中更广泛地应用以造福人类健康。
2. 载脂蛋白a-1模拟肽用途2.1 定义和特征载脂蛋白a-1模拟肽是一种类似于载脂蛋白a-1（apoA-1）的分子，在结构上与apoA-1相似，并且具有类似的生物活性。
apoA-1是高密度脂蛋白（HDL）的主要成分之一，对于调节胆固醇代谢以及促进胆固醇外排至肝脏起着重要作用。
载脂蛋白a-1模拟肽通常由20到80个氨基酸残基组成，具有特定的序列和空间结构。
这些模拟肽可以通过人工合成或者基因工程技术来制备。
与天然载脂蛋白不同，载脂蛋白a-1模拟肽具有较长的半衰期，更强的稳定性，并且在体内表现出更高的生物效应。
ApoA-I
载脂蛋白A-Ⅰ测定操作规程（SOP文件）1实验原理和检验目的本试剂用于人血清或血浆中载脂蛋白A-Ⅰ(APOA1)的体外定量测定。
血清中的ApoA1与试剂中特异性的ApoA1抗体结合，形成抗原抗体复合物而产生浊度，其浊度高低与血清中ApoA1成正比。
通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中ApoA1的含量。
2标本采集和处理2.1标本种类和采集方法标本：新鲜无溶血血清。
受检者（体检对象或病人）的准备：对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯。
静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布。
2.2标本处理方法标本要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
样品采集后要离心标本，吸出血清。
标本应立即测定。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3试剂3.1试剂组成3.2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用，用后及时置于2～8℃避光保存。
3.3试剂稳定性缓冲液（R1）和抗体试剂（R2）在2～8℃避光密封保存可稳定一年。
打开后抗体试剂（R2）稳定2个月。
4校准4.1校准品每日进行试剂空白校准操作。
使用宁波美康生物科技有限公司提供的载脂蛋白A-Ⅰ/B 标准品血清进行全点校准操作。
4.2校准品准备载脂蛋白A-Ⅰ/B标准品复溶30分钟，充分溶解混匀后即可使用。
4.3校准品稳定性载脂蛋白A-Ⅰ/B标准品冻干校准物2～8℃密闭保存稳定至有效期，复溶后分装于小瓶于2～8℃避光保存可稳定1个月。
4.4试剂校准周期推荐校准周期为2天。
当试剂批号更换时应重新校准。
5质控5.1质控品采用宁波美康生物科技有限公司提供的特种蛋白高低值两个水平的血清进行室内质控。
5.2可接受性判断质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。
5.3质控操作每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。
如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。
医学检验·检查项目：血清脂蛋白-α_课件模板
医学检验·各论：血清脂蛋白-α >>>
简介：
脂蛋白α主要功能是阻止血管内血块 溶解，促进动脉粥样硬化形成。脂蛋白α 水平持续升高与心绞痛、心肌梗死、脑溢 血有密切关系。
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临床意义：
(1)降低：见于严重肝病。 (2)升高： 见于动脉粥样硬化、脑梗死、脑动脉硬化、 急性心肌梗死、急性风湿性关节炎、外科 手术等。
医学相关疾病：
胆汁性肝硬化、老年人肝硬化、营养不良 性肝硬化、心原性肝硬化、妊娠合并肝硬 化、小儿肝硬化、药物性肝硬化、肝硬化 性肾损害、肝硬化、先天性梅毒性肝硬化、 原发性胆汁性肝硬化。
谢谢！
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正常值： 免疫透射比浊法：0～1g/L。
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相关检查：
肝脏疾病超声诊断、肝、胆、胰、脾的 MRI检查、核磁共振成像(MRI)、肝病四项、 乙肝两对半（定量）、乙肝两对半（定 性）。
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相关症状： 胃纳差症状、高血脂性血管损害、上腹部 肿块及腹胀、黄疸、消瘦、纳差。
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临床意义：
增高：见于酒精性肝炎、高α脂蛋白 血症等。 减低：见于冠心病、动脉硬化 性疾病、未控制糖尿病、缺血性脑血管疾 患、肾病综合征、活动性肝炎、营养不良 等。明显降低，亦见于ApoA-Ⅰ缺乏症、 肝实质损害(如肝硬变失代偿期)。
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医学检验·各论 载脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)
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别名： 血清载脂蛋白A-Ⅰ。
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简介： 脂蛋白中的蛋白质称为载脂蛋白
（apo）。脂蛋白AⅠ主要在肝脏和小肠合 成，90％存在于高密度脂蛋白中。
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相关疾病： 高脂蛋白血症、病毒性肝炎、I型糖尿病、 肾病综合征、糖尿病、冠心病、营养不良、 营养不良性肝硬化。
谢谢！
正常值： 男：0.96～1.76g／L（96～176mg／
dL）； 女：1.03～2.03g／L（103～ 203mg／dL）。
Байду номын сангаас
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相关检查： 血清胆固醇、血清甘油三脂。
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相关症状： 心脏杂音、心脏震颤、心音异常、猝死、 恶心与呕吐、胸痛。