耐甲氧西林的葡萄球菌(MRS)检测
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌实验室诊断方法
ＤＯＩ ： １ ０ ． １ １ ６ ５ ５ ／ ｚ ｇ ｙ ｗｙ ｌ ｅ ２ ０１ ５ 个菌落溶入 ５ ０ １ 蒸馏水 ， ９ ９℃干浴 １ ０
ｍｉ ｎ ， ３ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ 离心 １ ｍｉ ｎ ， ２ Ｉ ｘ ｌ 上 清液 用 于 ２ ５ ｌ 的Ｐ Ｃ Ｒ反
ＡＴ Ｃ Ｃ２ ９ ２ １ ３ 。
注： 头孢西丁结果可以预测苯唑西林敏感 或者耐药
２ ． １ Ｄ Ｎ Ａ提 取 ： 取冻存实验菌株在 ５ ％的哥 伦 比亚 羊 血 平 板
１ ． ２ 微量 肉汤稀释法 ： 微量肉汤稀释法培养基用阳离子校正
ＭＨ肉汤 （ Ｃ Ａ ＭＨ Ｂ ） ，检测苯唑西林的 ＭＩ Ｃ值需要添加 ２ ％
Ａ Ｔ Ｃ Ｃ ４ ３ ３ ０ ０ ． ｍ ｅ ｃ Ａ 阳性 （ 抑 菌 圈直 径 ≤２ １ ｍｍ） 。
表 １ 金黄色葡萄球菌对苯唑西林的折点
Ｓ Ｃ Ｃ ｍｅ ｃ 基 因型别 ： 一般来说 ． 甲氧西林耐药 的金黄色葡 萄球菌 都携 带有 ｍ ｅ ｃ Ａ基 因 ，但其 耐药 程度 却不 尽一 致 ， Ｍｅ ｃ Ａ基因位于一个可移动 的元件上 ，被称为金黄色葡萄球
郝 崇华 万艳红 裴世静 张燕军 王淑峰 戎建荣
252例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检测及相关性探讨
外科 烧 伤 患者 、有基 础疾 病 、抗 茵药物 等 的应 用等 呈现正 性 相 关。结 论 ＭＲ Ｓ Ａ 对 临床 应 用的 大部 分抗 菌 药的耐 药率 均很 高 ，仅对 小部 分 抗 菌 药较 为敏 感 ，磷 霉素 对其 敏 感率 占 ７ ６ ． ２ ％， 由于 不 良反应 小 ，建 议 临床 对 ＭＲ Ｓ Ａ 患者磷 霉素敏 感株 考 虑应 用磷 霉 素 ，未 发现 耐 万古 霉素 和替 考拉 宁 的茵株 ，表明万 古霉 素和 替考拉 宁 对 ＭＲ Ｓ Ａ仍 保持 很 高的抗 茵活 性 。 【 关键 词 】耐 甲氧 西林金 黄 色葡萄球 菌 ；检 测 ；抗 茵药 ；耐 药性 ；相 关性 中 图分类 号 ：Ｒ ９ ７ ８ ． １ 文献标 识码 ：Ｂ 文 章编 号 ：１ ６ ７ １ － ８ １ ９ ４（ ２ ０ １ ５ ）３ １ － ０ ０ ３ ８ － ０ ２
脊液１ 例。
霉素和替考拉宁Ｒ ￣ ＭＲ Ｓ Ａ 仍保持很高的抗菌活性，报道如下。
１资 料与 方法 １ ． １一般 资料 ：研 究对象 为２ ０ ０ ８ 年１ 月 至２ ０ ｌ ４ 年９ 月３ １ 日，在 我 院住 院 患者进 行微 生 物送 检患 者 １ ２ ５ ３ ７ 例 ，标本 中分 离 出的 致病 菌９ ９ ９ ８ 株 ，其 中金黄色葡萄 球菌５ ２ ５ 株 ，在金黄色 葡萄球菌 ５ ２ ５ 株 ￣ＭＲ Ｓ Ａ 感 染２ ５ ２ 株（ ４ ８ ． Ｏ ％） ，男 １ ８ ５ 例 ，女６ ７ 例 ｝年龄 １ ６ － ８ ９ 岁 ：＞６ ０ 岁的１ ６ ２ 例 （ ６ ４ ． ２ ９ ％），平均５ ６ ． ８ ２ 岁。
－
限公司） ；Ｘ Ｋ 型 细菌鉴 定／ 药敏 分析仪 及其 系统（ 山东 鑫科生 物科 技股
份 有限公 司） ；ＹＣ Ｐ ２ ０ ０ （ ５ ０ ） ￣ 氧化碳培养箱 （ ５ ０ 是北京 勤诚盛达科学 仪 器有 限公司） ；细菌药敏纸片 （ 英 国Ｏ Ｘ Ｄ Ｉ Ｄ 公 司）。
牛乳源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测与耐药性分析
牛乳 源 耐 甲氧 西林 金黄 色 葡萄 球菌 的
检测 与耐 药性 分析
姜 慧娇 ，苏 艳， 韦 海 娜 ，黄 莹
８ ３ ０ ０ ５ ２ ） （ 新疆农业大学 动物医学学院 ， 乌鲁木齐 摘
要： 从 新 疆 昌吉 、 伊 犁、 石 河 子 ３个 地 区 奶 牛 养 殖 场 乳 腺 炎 奶 样 中 共 分 离 １ ３ ４株 金 黄 色 葡 萄 球 菌 ， 对 其 中
呈现多重耐药现象 。
关 键 词 ： 牛乳 腺炎 ；金 黄 色 葡萄 球 菌 ；耐 甲 氧西 林 金 黄 色 葡 萄 球 菌 ；ｒ ｎ ｅ ｃ Ａ基因 ； 耐 药 性
中 图分 类 号 ：￥ ８ ５ １ ． ６ １ １ 文献标识码 ： Ａ
Ａｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｎ Ｄｅ ｃ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｍｅ ｔ ｈ ｉ ｃ ｉ ｌ ｌ ｉ ｎ — Ｒｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｔ Ｊ Ｓ ｆ ｐ Ｚ Ｄ ｃ Ｄ ｃ ｃ ａ ｕ ｒ ｅ ｕ ｓ
新 疆 农 业 大 学 学 报
２ ０ １ ３ ， ３ ６ （ １ ） ： １ ６ ～２ ０
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｘ ｉ ｎ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ
文 章 编 号 ：１ ０ ０ ７ — ８ ６ １ ４ （ ２ ０ １ ３ ） ０ １ － ０ ０ １ ６ — ０ ５
Ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｂｏ ｖ ｉ ｎｅ Ｍ ｉ ｌ ｋ ａ ｎｄ Ｉ ｔ ｓ Ｒｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｔ ｏ Ｄｒ ｕ ｇ ｓ
Ｊ Ｉ ＡＮＧ Ｈｕ ｉ — ｊ ｉ ａ ｏ，Ｓ Ｕ Ｙａ ｎ，Ｗ ＥＩ Ｈａ ｉ — ｎ ａ ，ＨＵＡＮＧ Ｙｉ ｎ ｇ
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 检测(荧光PCR法)
汇报人：XX
01
03
05
02
04
荧光PCR法是一种 基于DN聚合酶链 反应的检测方法
荧光PCR法通过荧 强弱来定 量分析DN序列
荧光PCR法具有高 灵敏度、高特异性 、快速、简便等优 点
灵敏度高：能够检测到极低浓度的MRS 特异性强：能够准确区分MRS和其他细菌 快速简便：操作简便，检测时间短 结果准确：检测结果准确可靠，重复性好
护公众健康
灵敏度高：荧光PCR法具有 较高的灵敏度，能够检测到 极低浓度的MRS
特异性强：荧光PCR法具有 较高的特异性，能够准确区 分MRS和其他细菌
快速高效：荧光PCR法具 有快速高效的特点，能够在 短时间内完成MRS的检测
自动化程度高：荧光PCR法 可以实现自动化操作，提高 检测效率和准确性
荧光PCR法在MRS检测中的前景展望：提高灵敏度和特异性，提高检测准确性和 可靠性，降低检测成本，提高检测效率，推动MRS检测技术的发展。
汇报人：XX
临床诊断：用于检 测MRS感染，快速 准确
科研研究：用于研 究MRS的传播、变 异和耐药性
公共卫生：用于监 测MRS的流行病学 和防控策略
食品检测：用于检 测食品中的MRS污 染，保障食品安全
样本类型：血液、 尿液、痰液等
采集方法：无菌操 作，避免污染
保存条件：低温、 干燥、避光
处理方法：离心、 过滤、稀释等
样品采集：采集患者样本，如血液、痰液等
核酸提取：使用核酸提取试剂盒提取样本中的DN或RN
荧光PCR反应：将提取的核酸与荧光PCR反应试剂混合，进行 PCR反应
荧光PCR检测：使用荧光PCR检测仪检测反应产物，判断样本 中是否存在MRS
五种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的比较
摘要 ： 目的 评价 快速 、 准确检测耐 甲氧西林 金黄色 葡萄球 菌 （ ＭＲ Ｓ Ａ） 的方法 。方法 收集上 海市第七 人
民医院临床分离的金黄色葡萄球菌 １ ５ ８株 、 表 皮葡萄球菌 １ ２株 、 溶血葡萄球菌 １ ０株 、 人 葡萄球菌 １ 株， 用 ＭＲ Ｓ Ａ Ｉ Ｄ产 色培养基法 、 苯 唑西林最 低抑菌浓度 （ ＭＩ Ｃ） 法、 头孢 西丁纸片扩散法 、 青霉 素结合 蛋 白（ Ｐ Ｂ Ｐ ２ ａ ） 乳胶凝集 法 ４种方法检测 ＭＲ Ｓ Ａ， 并与荧光 聚合 酶链 反应（ Ｐ Ｃ Ｒ ） 检测 ｍ ｅ ｃ Ａ基 因进行 比较。结果 ＭＲ Ｓ Ａ Ｉ Ｄ产色培养基法检 出 ＭＲ Ｓ Ａ １ ２ ４株 ， 敏感 性和特异性分别为 １ ０ ０ ． ０ ％、 ９ １ ． ９ ％， 头孢西 丁纸片扩 散法检 出 Ｍ Ｒ Ｓ Ａ １ １ ９株 ， 敏感性 和特
较好 的一 致性 。结论 头孢西丁纸片 扩散法 检 出 ＭＲ Ｓ Ａ的敏感性 和特 异性 最高 ， Ｉ Ｄ产 色培养 基法 检测 ＭＲ Ｓ Ａ
比常规方 法报告时间缩短 ２ ４ ｈ ， 是一种快速 、 简便 、 特异性好且 便于临床实验室检测 ＭＲ Ｓ Ａ的方 法。 关键 词 ： 耐 甲氧西林金 黄色 葡萄球菌 ； ｍ ｅ ｃ Ａ基 因 ； 头孢 西丁 ； 产色培养基
Ｓ ｅ ｖ ｅ ｎ ｔ ｈ Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ ｓ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ Ｚ ， ａ ｎ ｇ ｈ ａ ｉ ２ ０ ０ １ ３ ７， ｉ ｎ ａ）
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｐ ｉ ｄ ａ ｎ ｄ ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｔ ｅ ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｍ ｅ ｔ ｈ ｉ ｃ ｉ ｌ ｌ ｉ ｎ ． ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｔ
重症监护病房的MRSA
重症监护病房的MRSA重症监护病房的MRSA（甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌）是一种严重的医院感染问题，对患者的健康和生命构成威胁。
为了有效控制和预防MRSA感染，在重症监护病房中，需要采取一系列的预防措施和标准操作程序，以确保患者的安全和医疗质量。
以下是针对重症监护病房的MRSA感染的标准操作程序：1. 患者筛查：- 所有入住重症监护病房的患者应进行MRSA筛查，包括新入住患者和转入患者。
- 筛查方法可以采用鼻腔拭子样本，样本采集应遵循正确的操作步骤和无菌技术。
- 筛查结果应及时记录，并通知相关医护人员。
2. 隔离措施：- 对于MRSA阳性的患者，应立即采取隔离措施，如单间隔离或与其他MRSA阳性患者共享隔离间。
- 隔离间内应配备必要的隔离设施，如洗手设备、个人防护用品等。
- 所有进入隔离间的医护人员应佩戴适当的个人防护用品，如手套、口罩、护目镜等。
3. 感染控制手卫生：- 所有医护人员和访客进入重症监护病房前，应进行必要的手卫生，包括洗手或使用洗手液。
- 手卫生应遵循正确的手卫生程序，包括湿润双手、搓手至少20秒、彻底冲洗和干燥双手。
- 医护人员应定期接受手卫生培训，并进行手卫生合规性监测。
4. 环境清洁和消毒：- 隔离间内的表面、设备和器械应定期进行清洁和消毒，以确保无菌状态。
- 清洁和消毒应使用适当的消毒剂和方法，如含氯消毒剂或酒精消毒剂。
- 清洁和消毒操作应遵循正确的程序和操作步骤，确保彻底清洁和有效消毒。
5. 医护人员个人防护：- 所有医护人员在接触MRSA患者时，应佩戴适当的个人防护用品，包括手套、口罩、护目镜等。
- 个人防护用品应正确佩戴和使用，避免交叉感染的风险。
- 医护人员在接触MRSA患者后，应及时更换和处理个人防护用品，避免污染其他区域。
6. 患者教育和宣传：- 对于入住重症监护病房的患者，应进行MRSA感染的教育和宣传。
- 患者应了解MRSA感染的风险和预防措施，如正确的手卫生、个人防护用品的使用等。
重症监护病房的MRSA
重症监护病房的MRSA重症监护病房的MRSA（甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌）是一种常见的医院感染病原体，对抗生素具有高度的耐药性。
本文将详细介绍重症监护病房中MRSA的定义、病因、传播途径、临床表现、诊断方法、治疗原则以及预防措施等相关内容。
一、定义重症监护病房的MRSA是指在重症监护病房（ICU）环境中感染或者携带MRSA的患者。
MRSA是一种对甲氧西林类抗生素产生耐药性的金黄色葡萄球菌。
它通常会引起严重的感染，对治疗造成挑战。
二、病因MRSA的耐药性主要是由于其产生了一种名为PBP2a的特殊蛋白质，使其对甲氧西林等β-内酰胺类抗生素产生耐药性。
MRSA感染主要通过两种途径获得：一是通过医疗操作，如手术、导尿、静脉插管等；二是通过接触感染源，如患者、医护人员、医疗设备等。
三、传播途径重症监护病房中MRSA的传播主要通过接触传播和空气传播两种途径。
接触传播是指通过直接接触感染者的皮肤、伤口、分泌物等传播病原体。
空气传播则是指通过患者咳嗽、打喷嚏等方式将病原体悬浮在空气中，被他人吸入而感染。
四、临床表现重症监护病房的MRSA感染可表现为各种临床症状，如发热、皮肤红肿、脓液渗出、呼吸难点等。
对于重症监护病房的患者来说，MRSA感染可能导致严重的并发症，如败血症、心内膜炎、肺炎等。
五、诊断方法重症监护病房中MRSA感染的诊断主要依靠以下几种方法：1. 细菌培养：通过采集患者的分泌物、伤口渗出物或者血液等样本进行细菌培养，检测是否存在MRSA。
2. PCR检测：利用聚合酶链反应（PCR）技术检测患者样本中的MRSA DNA，快速准确地确定是否感染MRSA。
3. 荧光染色：利用荧光染色技术观察样本中是否存在MRSA，该方法快速简便，适合于临床实验室。
六、治疗原则重症监护病房中MRSA感染的治疗原则主要包括以下几个方面：1. 抗生素治疗：根据药敏试验结果选择敏感的抗生素进行治疗，如万古霉素、利奈唑胺等。
2. 外科处理：对于有明显脓液积聚或者局部坏死的病例，需要进行外科处理，如手术引流、切除坏死组织等。
下呼吸道耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性检测及分析
ＭＲ Ａ多 重 耐 药 导 致 临 床 治 疗 困难 ， 其 是 ＶＩＡ 和 Ｖ Ｓ 尤 Ｓ Ｒ Ｓ 的 出现 使 抗 菌 剂 的 选 择 需 更 加 慎 重 ， 根 据 药 敏 结 果 选 用 Ａ 应 其他 敏感 抗 菌 剂 或 联 合 应 用 两 种 抗 菌 剂 ， 防止 单 用 １ 抗 菌 剂 种 出 现 耐药 株［ １ 。实 验 表 明 ， 合 用 药 可 降 低 抗 菌 剂 的 最 低 抑 联
国际检 验 医学杂志 ２１ 年 ７月第 ３ 卷 第 １ 期 ０１ ２ ０
Ｉｔ ａ ｄＪｌ ２１， １３， ．０ ｎ Ｌ ｂＭｅ， ｙ ０１Ｖｏ ２Ｎｏ１ Ｊ ｕ ．
・
临床检 验研 究 ・
下 呼 吸道 耐 甲氧西 林 金 黄 色葡 萄球 菌 的耐 药 性检 测 及分 析
叶 振 东 乔 亚 峰 张 国雄 范 晓 怡 ， ， ，
国际检验 医学杂 志 ２１ 年 ７月第 ３ ０１ ２卷第 １ ０期
Ｉｔ ａ ｄＪｌ ０１Ｖ １ ２Ｎ ．０ ｎ Ｌ ｂＭｅ ， ｙ２１，ｏ． ， ｏ１ Ｊ ｕ ３
续表 １
ＭＲ Ａ 和 ＭＳ Ａ 对 常 规 抗 菌 剂 的 耐 药 率 （ ） Ｓ Ｓ
糖 肽 类 抗 菌 剂 成 为 治 疗 ＭＲ Ａ 感 染 的 最 后 一 道 防 线 。 １ ９ Ｓ ９６ 年 ５月 日本 出 现 了 对万 古 霉 素不 敏 感 金 黄 色 葡 萄球 菌 （ ＩＡ） Ｖｓ 之 后 ， 美 国 、 国 、 国等 亦 出 现 ＶＩＡ。而 美 国在 ２ ０ 在 法 英 ｓ ０ ２年 ６
ｌ ｗｅ ｅ ｐｉ ａ ｏ ｙ ｔ ａ ｔ ｉ ｆ ｃ ｉ ｎ ｏ ｒ ｒ ｓ ｒ ｔ ｒ ｒ ｃ ｎ ｅ ｔｏ
ＹｅＺ ｅ ｄ ｎ ， ａ ｈ ｎ ｏ ｇ Ｑｉｏ
检验科细菌耐药性监测标准操作程序SOP文件
检验科细菌耐药性监测SOP文件一、耐甲氧西林葡萄球菌（Methicillin-Resistant Staphylococci,MRS）MRS是引起临床感染的常见病原菌，同时也是引起医院感染的重要病原菌之一，其耐药特点是耐受甲氧西林的同时，还对临床广泛应用的多种抗生素呈现多重耐药，因而该菌所致感染已成为临床治疗的一大难题。
（一）MRS测定方法1、纸片扩散法接种物：直接悬液法从非选择琼脂平皿上挑取少许单个菌落至无菌生理盐水调至浓度0.5 McFarland,具体操作同常规纸片法药敏试验。
苯唑西林纸片，1R g/片，检测MRS平板应置于35℃ （而不是37℃）孵育24h （而不是16〜18h）。
结果判断：金黄色葡萄球菌：S：三13mm；I：11〜12mm；R:W10mm。
凝固酶阴性葡萄球菌：S：三18mm；R W17mm。
对于苯唑西林纸片周围的抑菌圈内有任何小菌落或稀薄“菌膜”生长都应列为MRS。
2、琼脂筛选法：如果纸片试验结果中介时，可做琼脂筛选法，培养基为MH琼脂+6R g/ml苯唑西林+4%NaCl,调整菌液浓度0.5McFarland,于35℃孵育24h,凡有任何生长即使一个菌落均报MRS。
（二）MRS监测意义对于MRS,应报告对所有头抱菌素类和其他B -内酰胺酶类耐药，喹喏酮类药物，除氟哌酸外，环丙氟哌酸，氟嗪酸有较好抗菌活性（耐药率10〜23%之间），利福平敏感率在90%以上，未见耐万古霉素菌株，但已有万古霉素中介金黄色葡萄球菌。
二、高水平耐药的肠球菌（HLAR）及耐万古霉素的肠球菌（VRE）（一）药敏测定方法1、常规测定方法：采用K-B纸片扩散法，头抱菌素不用做（均为耐药），氨苄，庆大霉素，替考拉宁，万古霉素一定要做。
2、高水平氨基糖甙类耐药性测定：⑴高含量纸片扩散法：通常测定庆大霉素和链霉素的高度耐药性，具体操作如常规纸片法药敏试验。
药敏纸片：庆大霉素：120R g/片；链霉素300p g/片结果判断：R：W6mm；I：7~9mm；S：三10mm⑵含单一高浓度抗生素琼脂平皿法：稀释法：庆大霉素：R：三500R g/ml；链霉素：R：2000p g/ml3、万古霉素耐药性测定：纸片扩散法，具体操作如常规纸片法药敏试验，万古霉素纸片为：30p g/片，检测平皿置35℃24h （而不是16〜18h）,并注意抑菌圈内有无小菌落或薄膜生长。
苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌
年） 抗菌药物 敏感 性试验执行标准 ： 金黄色 葡萄球菌 ： 抑菌 圈
直径 ≤ １ ０ ｍｍ 为 耐 药 ， １ １ ～１ ２ ｍｍ 为 中 介 ， ≥１ ３ ｍｍ 为 敏 感 ；
凝 固酶阴性葡萄球菌 ： 抑菌圈 直径≤ １ ７ ｍｍ 为耐药 ， ≥１ ８ ｍｍ
为敏 感 。
朱 兆宇 池 勇 信 阳职业技术学 院 ， 河南省信 阳市 ４ ６ ４ ０ ０ ０ 摘要 目的 ： 评 价苯唑西林纸 片扩 散法检测耐 甲氧西林 葡萄 球菌 （ ＭＲ Ｓ ） 在 临床 的应 用价值 。方 法 ： 以Ｐ Ｃ Ｒ法检 测 葡萄 球菌的 ｍｅ ｃ Ａ基 因为标 准 ， 评价 苯唑西林纸片扩散法 对耐 甲氧西林 葡萄球菌 的检 出率 。结果 ： 苯唑西林 纸 片扩 散法 与 Ｐ Ｃ Ｒ法检测 ｍｅ ｃ Ａ基 因的符合率为 ９ １ ． ６ ７ 。结论 ： 苯 唑西林 纸片扩 散法 与 Ｐ Ｃ Ｒ检测 ｍｅ ｃ Ａ基 因的符合 率 较高 ， 简便 易行 ， 但检测 敏感性不高 ， 特异性较弱 ， 可作为一个筛选试 验 。 关键 词 苯唑西林 纸片扩散法 耐 甲氧西林 葡萄球菌 检测
２ 结 果
２ ． １ ｍｅ ｃ Ａ 基 因检 测 结 果
从 临 床分 离 的 ４ ８株 葡 萄 球 菌 属
１ ． １ ． ３ 培养 基 ： 水解 酪蛋 白 （ Ｍｕ ｅ ｌ ｌ ｅ ｒ － Ｈｉ ｎ ｔ ｏ ｒ ， Ｍ－ Ｈ） 琼脂 ， 购
自广 东 省 江 门 市 凯 林 贸 易 有 限公 司 。 １ ． １ ． ４ 试剂： ｍｅ ｃ Ａ基 因实 时荧光定 量 Ｐ Ｃ Ｒ 检 测 试 剂 盒 系 达 安 基 因 股 份 有 限 公 司 生 产 。Ｄ ＮＡ 提 取 液 ： ＴＲ Ｉ ｚ ｏ ｌ ， 氯仿 ， Ａ 液； 上游 引物 ： ５ ’ 一 Ａ ＧＡＴ ＡＡＡＣ ＡＡ ＧＡＡ Ｃ Ｃ Ｔ Ｃ Ｔ ＧＣ Ｔ （ ）３ ’ ； 下 游引物： ５ ， ＿ Ｔ ＴＴＡＡ Ｃ Ｃ Ｃ ＡＡＴ Ｃ ＡＴ Ｔ Ｇ Ｃ ＴＧ Ｔ － ３ ’ ； 引 物探 针 ： ５’ 。 ＴＴ Ｃ Ｃ Ａ ＧＡＴ ＴＡ Ｃ Ａ ＡＣ ＴＴ Ｃ ＡＣ Ｃ ＡＧ－ ３’ 。 靶 基 因 为 ｍｅ ｃ Ａ基 因 ， 扩增终产 物的片段大小 为 ９ ２ ｂ ｐ 。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）检测
1、苯唑西林琼脂筛选试验
培养基：MH琼脂+4﹪ΝαCL和苯唑西林（6ug/ml）倾注成平板。
方法：对琼脂可进行“点”接种，或者用棉拭子蘸取相当于0.5麦氏单位的菌悬液进行“划线”接种。
35℃孵育24小时，为最好地从凝固酶阴性葡萄球菌中检测耐甲氧西林菌株，需要奖平板35℃孵育48小时。
结果判断：任何生长即为MRS
质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC29213——敏感株
2、纸片扩散法（K-B法）
苯唑西林和头孢西丁检测mecA基因介导的葡萄球菌耐药性解释标准
菌种头孢西丁纸片法（mm）苯唑西林纸片法（mm）
S I R S I R
金黄色葡萄球菌和路邓葡萄球菌≥22 －≤21 ≥13 11﹣12 ≤10
凝固酶阴性葡萄球菌≥25 －≤24
注：1、用透射光观察苯唑西林抑菌圈内如有任何可见的生长，都表示苯唑
西林耐药，而头孢西丁用反射光观察抑菌圈内如有任何可见的生长，都表示头孢西丁耐药。
2、根据此解释标准耐药者既为耐甲氧西林的葡萄球菌
药敏实验纸片扩散法的操作流程
于纯培养平板上挑取相同的菌落4-5个放入2ml无菌生理盐水中稀释呈0.5麦氏单位。
用无菌棉签蘸取菌液在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个MH平板表面，反复数次，每次旋转平板60度，使整个平板涂布均匀。
涂布后的平板于室温中干燥3-5分钟，用无菌镊子取药敏纸片贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。
每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm，90mm的平板上宜贴6张药敏纸片。
将贴好纸片的平板置35o孵育18-24小时后取出判断结果。
判断结果：根据（CLSI规则）抑菌环的大小，判断为敏感
（S）、耐药（R）、或中度敏感（I）。
不应报告为敏感抗生素和微生物组合
依据CLSI规则第十八版信息
下列抗生素/微生物组合在体外可表现活性，但在临床上无效，
不应报告敏感。