斐林试剂热滴定定糖法
实验八糖类的定量测定1
1
实验目的
1、了解3，5-二硝基水杨酸比色法测定糖的原 理。 2、掌握还原糖及总糖测定的操作方法。
糖类包括多糖、寡糖、单糖。还原糖是指含有 自由醛基（如葡萄糖）或酮基（如果糖）的单 糖和某些双糖（如乳糖和麦芽糖）。多糖和蔗 糖等为非还原性糖。 糖类的测定方法有物理方法和化学方法两类。 物理法是通过糖的折光率、比旋度的变化、比 重计进行测定。化学测定法主要是利用自由醛 基或酮基的还原性质，与试剂（氧化剂）进行 氧化还原反应作为测定基础。由于化学方法比 较精确，常常用于还原糖和总糖的测定。
（3）砷钼酸比色法（Somogyi铜试剂比色法） 还原糖将铜试剂还原生成氧化亚铜，在浓硫酸存在 下，砷钼酸试剂可与氧化亚铜生成蓝色复合物，蓝色 产物砷钼酸在560nm下的吸光度与还原糖含量呈正比关 系，适用于测定测定范围为25-200ug的还原糖含量。 （4）蒽酮比色法 糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物，该衍生物 与蒽酮发生反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620nm处有 最大吸收。该法灵敏度高、简便快速，适用于测定动 物组织中糖原、葡萄糖的含量，也可用于测定植物材 料中可溶性糖的含量。 （5）3，5一二硝基水杨酸比色定糖法 该法是半微量定糖法，操作简便、快速，杂质干扰较 少，是糖定量测定的一种基本方法。
二、标准葡萄糖浓度梯度和样品待测液的测定
取10根25 ml比色刻度管，从0-9编号后，按下表顺序操作
空 白 管号 1mg/ml葡萄糖标 准液 样品待测液（ml） 蒸馏水（ml） DNS试剂 2.0 2.0 1.8 2.0 1.6 2.0 1.4 2.0 1.2 2.0 1.0 2.0 0 0 还原糖 （A） 5 1.0 1.0 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0 1.0 1.0 2.0 6 7 总糖 （B2） 8 9
总糖和还原糖的测定——斐林氏法
总糖和还原糖测定方法较多，如3，5—二硝基水杨酸法、碱性铜试剂法、蒽酮比色法、斐林氏法等。
这里只介绍斐林氏法。
一、目的学习掌握生产实践中常用的快速定糖方法。
二、原理还原糖在碱性溶液中能将Ag+，Hg+，Cu2+，Fe（CN）3-等金属离子还原，而糖本身则氧化成各种羟酸，利用这一特性可以对还原糖进行定量测定。
本实验采用斐林试剂热滴定法，氧化剂是斐林试剂，它是由甲乙两种溶液组成，甲液中含有硫酸铜、次甲基蓝；乙液中含有氢氧化钠、酒石酸钾钠和亚铁氰化钾（黄血盐）。
当甲乙两液混合时，硫酸铜和氢氧化钠作用形成氢氧化铜沉淀，由于溶液中存在酒石酸钾钠，它和氢氧化铜形成了可溶性络合物。
酒石酸络铜（Ⅱ）钾钠盐在与还原糖共热时，二价铜离子即被还原成一价的氧化亚铜红色沉淀。
此氧化亚铜与试剂中亚铁氰化钾反应生成可溶性的亚铁氰酸络铜（Ⅰ）钾盐。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + 3 H2O →K2Cu2Fe(CN)6 + 2 KOH + 2 H2O亚铁氰化钾亚铁氰酸络铜（Ⅰ）钾盐斐林试剂中二价铜的还原力比次甲基蓝强，因此所滴入的标准葡萄糖溶液首先使二价铜还原，只有当二价铜被还原完毕后，才能使次甲基蓝（甲烯蓝）还原为无色，测定中以此作为滴定终点。
在测定时先做一对照管（不加样品），用标准葡萄糖滴定求知一定体积斐林试剂中二价铜和次甲基蓝的量，即测定对照管消耗的标准葡萄糖量（A）。
再做样品管，样品中还原糖消耗斐林试剂中一部分二价铜，剩余的量再用标准葡萄糖来滴定，即样品消耗的标准葡萄糖量（B）。
将（A）减去（B）就可求得样品中还原糖量。
三、器材及试剂：1．器材：①山芋粉②广范试纸pH1～12。
③吸管5毫升（×4），10毫升（×2）④容量瓶100毫升（×3）⑤烧杯150毫升（×1），100毫升（×1）⑥三角烧瓶250毫升（×6）⑦滴定管25毫升（×1）⑧双孔橡皮塞⑨电炉300W（×1）⑩天平。
斐林试剂热滴定定糖法
费林试剂热滴定定糖法xx 生科四班201100140120 同组者：xx【实验目的】1. 初步掌握费林试剂热滴定定糖法的原理和方法。
2. 正确掌握滴定管的使用方法和热滴定的终点。
【实验原理】1. 还原糖还原糖（reducing sugar ）：羰基碳（异头碳）没有参与形成糖苷键能够还原斐林(H.von Fehling)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂(银氨溶液)的糖称为还原糖，所有的单糖（除二羟丙酮和五碳糖，即核糖和脱氧核糖），不论醛糖、酮糖都是还原糖。
大部分双糖也是还原糖，蔗糖例外。
斐林试剂是含 Cu2+络合物的溶液，被还原后得到砖红色 CuO的沉淀。
托伦斯试剂被还2原后（银镜反应）能生成单质银，在试管壁上可看到“银镜”。
分子结构中含有还原性基团（如游离醛基`半缩醛羟基或游离羰基）的糖，叫还原糖，如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。
一般情况下，单糖的还原能力主要来自它的醛基，如葡萄糖，而多糖则大多因为半缩醛羟基的存在。
还原后，自己会变成糖酸。
如葡萄糖就会变成葡萄糖酸。
2. 费林试剂费林试剂由氢氧化钠的质量分数为 0.1 g/mL 的溶液和硫酸铜的质量分数为 0.05 g/mL 的溶液，还有酒石酸钾钠配制而成的。
它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
因此，斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。
3. 实验方法本实验采用费林试剂热滴定法，费林试剂是氧化剂，由甲、乙两种溶液组成。
甲液含硫酸铜和次甲基蓝(氧化还原指示剂)；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。
当甲、乙两溶液混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。
在碱性溶液中，酒石酸钾钠与沉淀的氢氧化铜作用形成可溶性的络合物。
【实验仪器】1. 移液管(5、10 毫升)2. 100 毫升容量瓶3. 水浴锅4. 铁架台5. 胶头滴管【实验材料】1.面粉2. 酚酞试剂3. 菲林试剂（甲、乙液）4. 10%氢氧化钠5. 标准葡萄糖（1mg/ml）6. 6M HCl7. 烧杯8. 玻璃棒9. 碱式滴定管10. 电炉11. 分析天平【实验操作】1. 总糖的提取准确称取面粉 1 克，加入 6mol/L 盐酸 10 毫升，蒸馏水 15 毫升，混匀。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法嘿，朋友们！今天咱就来聊聊总糖含量的测定方法。
这可真是个有趣又重要的事儿呢！你想想看，糖在我们生活中那可是无处不在呀！从甜甜的糖果到美味的糕点，从可口的饮料到日常的食物，哪哪儿都有糖的影子。
那怎么知道这里面到底有多少糖呢？这就需要我们掌握测定总糖含量的方法啦！常用的一种方法就是斐林试剂法。
这就好像是一个神奇的魔法，能把看不见的糖给变出来让我们看到。
先把样品处理好，然后加入斐林试剂，经过一系列反应，就能根据产生的现象来推算出糖的含量啦。
就像侦探在破案一样，通过一点点线索找到真相！还有一种方法是蒽酮比色法呢！这个方法也很有意思，就好像是给糖穿上了一件特别的“衣服”，让它在特定的条件下显现出来。
通过测量颜色的变化，就能知道糖有多少啦。
另外啊，还有一些其他的方法呢，就像武林中有各种不同的武功秘籍一样，各有各的厉害之处。
测定总糖含量可不仅仅是为了好玩哦，它的用处大着呢！比如在食品行业，厂家得知道自己生产的东西里糖有多少，这样才能保证产品的质量和口感呀。
不然，太甜了或者不够甜，那可不行！在科研领域，研究人员也需要准确测定总糖含量来进行各种研究，这就像是给他们的研究搭起了一座坚实的桥梁。
那有人可能会问了，测这个难不难呀？其实呀，只要掌握了方法，也没那么难啦！就像学骑自行车一样，一开始可能会摇摇晃晃，但多练习几次就熟练啦。
咱就说，要是不知道这些测定方法，那不是像在黑暗中摸索吗？所以呀，了解总糖含量的测定方法真的很重要呢！这能让我们更清楚地了解我们吃的东西，也能在很多方面帮助我们做出更好的选择。
总之，总糖含量的测定方法是个很实用的知识，大家可得好好记住哦！学会了它，就像是掌握了一把打开甜蜜世界大门的钥匙，能让我们更深入地了解糖这个奇妙的东西呢！怎么样，是不是很有意思呀？赶紧去试试吧！。
斐林试剂知识点总结
斐林试剂知识点总结一、斐林试剂的原理斐林试剂包含的化学成分为磷钼酸铵和磷钼酸六水合物，其工作原理是基于这两种物质和还原性实验物质发生反应。
当斐林试剂与蛋白质、葡萄糖等还原性物质发生反应时，会产生一种蓝色物质，其吸光度与被测物质的浓度成正比。
这种蓝色物质的形成是由于还原性物质在碱性条件下与磷钼酸铵和磷钼酸六水合物发生反应，生成了一种可溶的蓝色化合物。
斐林试剂作为一种常用的生化分析试剂，其工作原理是基于还原性物质和酸性条件下进行的化学反应。
因此，在使用斐林试剂进行实验时，需要注意保持酸性条件和避免有色干扰物质的干扰。
此外，还需要根据被测物质的性质选择合适的实验条件和操作方法。
二、斐林试剂的应用由于斐林试剂具有灵敏度高、稳定性好、操作简便等优点，因此被广泛应用于生化学领域的蛋白质、葡萄糖、总胆固醇等物质的测定。
下面将对其应用进行详细介绍。
1. 蛋白质测定斐林试剂可以用于测定蛋白质的含量，其原理是基于蛋白质与碱性条件下发生的化学反应。
当蛋白质溶液与斐林试剂发生反应后，会生成一种蓝色物质，其吸光度与蛋白质的浓度成正比。
这种方法具有灵敏度高、稳定性好等优点，因此被广泛应用于测定蛋白质的含量。
2. 葡萄糖测定斐林试剂也可以用于测定葡萄糖的含量，其原理是基于葡萄糖在酸性条件下与斐林试剂发生的化学反应。
当葡萄糖溶液与斐林试剂发生反应后，会生成一种蓝色物质，其吸光度与葡萄糖的浓度成正比。
这种方法同样具有灵敏度高、稳定性好等优点，因此被广泛应用于测定葡萄糖的含量。
3. 总胆固醇测定斐林试剂还可以用于测定总胆固醇的含量，其原理是基于总胆固醇在酸性条件下与斐林试剂发生的化学反应。
当总胆固醇溶液与斐林试剂发生反应后，会生成一种蓝色物质，其吸光度与总胆固醇的浓度成正比。
这种方法同样具有灵敏度高、稳定性好等优点，因此被广泛应用于测定总胆固醇的含量。
以上介绍了斐林试剂在生化分析中的应用，其原理和操作方法。
斐林试剂具有灵敏度高、稳定性好、操作简便等优点，因此被广泛应用于蛋白质、葡萄糖、总胆固醇等物质的测定。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法嘿，朋友们！今天咱们就像探险家一样，去探寻一下总糖含量的测定方法，这可就像是在糖果王国里寻找宝藏的秘密地图哦。
首先呢，有一个超级经典的方法，就是斐林试剂法。
这斐林试剂啊，就像是一个超级侦探，专门去揪出那些藏起来的糖分子。
把斐林试剂和含有糖的溶液混合在一起，就像是一场盛大的舞会开始了。
溶液里的糖分子就像一个个穿着华丽舞裙的舞者，迫不及待地要和斐林试剂中的铜离子共舞呢。
然后通过加热，这个舞会就进入了高潮，糖分子和铜离子在热热闹闹的氛围中发生反应，最后生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
这沉淀就像是舞会后留下来的精美纪念品，我们根据这个沉淀的量就能大致算出总糖的含量啦，是不是很神奇呢？就好像通过舞会后的垃圾量能算出来了多少宾客一样夸张。
还有一个方法是蒽酮比色法。
蒽酮就像是一个有着神奇魔法的小巫师，它能把糖变成有色的物质。
当把蒽酮试剂加入到含糖溶液里，就像是小巫师挥动魔法棒一样，溶液瞬间就发生了变化。
糖分子就像是被施了魔法的小木偶，乖乖地变成了一种有着特殊颜色的化合物。
然后我们把这个有色溶液放到比色计里，就像是把小木偶放在舞台上展示一样。
比色计通过检测颜色的深浅，就能知道糖的含量了，这感觉就像是看木偶戏的观众通过木偶的大小来判断它的年龄一样有趣。
另外，DNS法也很有趣哦。
DNS试剂就像是一个超级贪婪的大胃王，它遇到糖分子就“吃”个不停。
糖分子和DNS试剂发生反应后会变色，这就好比大胃王吃了不同的食物后脸上会沾上不同颜色的酱料一样滑稽。
我们再根据颜色的变化来确定总糖的含量，就像是通过大胃王脸上酱料的颜色来判断他吃了多少食物呢。
在这些测定方法里，每一个步骤都要小心翼翼的，就像走钢丝一样。
要是哪个环节出了差错，那就像是在演奏交响乐的时候突然弹错了一个音符，整个结果就会变得乱七八糟。
比如说加热的温度不对，就像是把烤箱的温度调错了，烤出来的蛋糕要么没熟要么焦了，测出来的总糖含量也就不准了。
总糖含量的测定虽然听起来有点复杂，但是当我们把它想象成一场有趣的游戏或者一个奇妙的故事，就会觉得充满乐趣啦。
葡萄酒酿制过程中糖酸和酒精度的检测
葡萄酒酿制过程中还原糖、总酸及酒精度的测定方法一、还原糖的测定在葡萄酒发酵前，测定葡萄的还原糖含量，以确定要添加的糖含量；发酵之后测定酒中的残糖含量。
1、测定方法：裴林试剂热滴定法（1）裴林氏A 、B 液标定预备试验：取裴林氏A 、B 液各5.00mL 于250mL 三角瓶中，加50mL 水，摇匀，在电炉上加热沸，在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定，当溶液的蓝色将消失呈红色时，加2滴甲基蓝指示液，继续滴至蓝色消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积(V1ml)。
正式试验：取裴林氏A 、B 液各5.00mL 于250mL 三角瓶中，加50mL 水和比预备试验少1ml 葡萄糖标准溶液，加热至沸，并保持2min ，加2滴次甲基蓝指示液，在沸腾态下于1min 内用葡萄糖标准溶液滴至终点(消耗葡萄糖标准液，记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。
（2）样品的测定预备试验：裴林试剂A 、B 液各5ml 250ml 三角瓶中 加水50ml 加入7.5ml 试样 在沸腾状态下用5g/l 的葡萄糖标液滴定至 蓝色消失成红色时 加2滴亚甲基兰指示剂 继续滴定至蓝色消失，记录体积。
正式试验：裴林试剂A 、B 液各5ml 250ml 三角瓶中 加水50ml 加入7.5ml 试样＋比预备试验少1ml 的葡标液，在沸腾状态下用5g/l 的葡萄糖标液滴定至 蓝色消失成红色时 加2滴亚甲基兰指示剂 继续滴定至蓝色消失，记录体积。
结果计算：总糖或还原糖含量g/l ＝稀释倍数）（取样体积测定试样消耗的葡标液标定消耗的葡标液葡标液⨯-⨯V V V C 2、试剂的配制及仪器需求（1）斐林试剂配制方法将36.4g CuSO4.5H2O 溶于200mL 水中，用0.5mL 浓硫酸酸化，再用水稀释到500mL 待用；取173g 酒石酸钾钠KNaC4H4O6.4H2O ，71g NaOH 固体溶于400mL 水中，再稀释到500mL ．使用时取等体积两溶液混合。
斐林试剂配制,标定以及还原糖测定
斐林试剂配制，标定以及还原糖测定糊精溶液中还原糖含量测定(DE值测定)A斐林试剂(碱性酒石酸铜溶液)的制备1)斐林试剂甲液称取69.28g的硫酸铜(CSO.5HO)溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过U42滤2)斐林实际乙液分别称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g，溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过滤B斐林试剂标定精确称取已在105?下干燥至恒重的分析纯葡萄糖0.8g，用蒸馏水稀释，移入250ml容量瓶并稀释至刻度，摇匀。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中(预备数份)，于电炉上煮沸，用上述葡萄糖溶液(置于25ml滴定管中)滴定至蓝色消失时，加入1%的亚甲基蓝指示剂两滴，继续用糖液滴定至蓝色刚好消失。
此操作在1min内完成。
再重复操作第二次标定过程，取两次葡萄糖溶液消耗体积的平均值(允许误差不大于0.1ml)，按下式计算斐林试剂常数(10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量)。
R=WG/V式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，mlG——葡萄糖的质量，gV——葡萄糖定容体积，250mlC测定步骤称取糊精溶液(液化)15g，移入250ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中。
其余步骤同斐林试剂标定法，即以样品稀释液代替葡萄糖溶液滴定斐林试剂。
计算还原糖含量按下式计算还原糖(%)=100RV/WG式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，ml;G——样品质量，g;V——葡萄糖定容体积，250ml。
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费林试剂热滴定定糖法
xx 生科四班201100140120 同组者：xx
【实验目的】
1. 初步掌握费林试剂热滴定定糖法的原理和方法。
2. 正确掌握滴定管的使用方法和热滴定的终点。
【实验原理】
1. 还原糖
还原糖（reducing sugar ）：羰基碳（异头碳）没有参与形成糖苷键能够还原斐林(H.von Fehling)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂(银氨溶液)的糖称为还原糖，所有的单糖（除二羟丙酮和五碳糖，即核糖和脱氧核糖），不论醛糖、酮糖都是还原糖。
大部分双糖也是还原糖，蔗糖例外。
斐林试剂是含 Cu2+络合物的溶液，被还原后得到砖红色 Cu
O的沉淀。
托伦斯试剂被还
2
原后（银镜反应）能生成单质银，在试管壁上可看到“银镜”。
分子结构中含有还原性基团（如游离醛基`半缩醛羟基或游离羰基）的糖，叫还原糖，如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。
一般情况下，单糖的还原能力主要来自它的醛基，如葡萄糖，而多糖则大多因为半缩醛羟基的存在。
还原后，自己会变成糖酸。
如葡萄糖就会变成葡萄糖酸。
2. 费林试剂
费林试剂由氢氧化钠的质量分数为 0.1 g/mL 的溶液和硫酸铜的质量分数为 0.05 g/mL 的溶液，还有酒石酸钾钠配制而成的。
它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下，能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
因此，斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。
3. 实验方法
本实验采用费林试剂热滴定法，费林试剂是氧化剂，由甲、乙两种溶液组成。
甲液含硫酸铜和次甲基蓝(氧化还原指示剂)；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。
当甲、乙两溶液混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。
在碱性溶液中，酒石酸钾钠与沉淀的氢氧化铜作用
形成可溶性的络合物。
【实验仪器】
1. 移液管(5、10 毫升)
2. 100 毫升容量瓶
3. 水浴锅
4. 铁架台
5. 胶头滴管
【实验材料】
1.面粉
2. 酚酞试剂
3. 菲林试剂（甲、乙液）
4. 10%氢氧化钠
5. 标准葡萄糖（1mg/ml）
6. 6M HCl
7. 烧杯
8. 玻璃棒
9. 碱式滴定管
10. 电炉
11. 分析天平
【实验操作】
1. 总糖的提取
准确称取面粉 1 克，加入 6mol/L 盐酸 10 毫升，蒸馏水 15 毫升，混匀。
沸水浴加热半小时后，取出几滴水解液用碘化钾-碘溶液检查水解是否完全，若已经水解完全，则不呈现蓝色。
冷却后用 10%氢氧化钠中和至中性溶液，定容至100 毫升。
准确吸取该溶液 10ml，移入 100ml容量瓶内并定容至刻度，即为测定总糖的样品液。
2. 空白测定
准确吸取费林甲、乙液各 5ml 和蒸馏水 5ml 放入 100 毫升的锥形瓶中，再用滴定管加入6ml 的标准葡萄糖液，混匀后加热，沸腾后，记录下滴定管的起始刻度，每滴 1-2 秒的速度由滴定管滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在30s 内颜色又变成深红色为止。
记录滴定完后滴定管的刻度，并同时记录滴定所需时间。
平行测定三次，直至所得的平均数与各组的差值＜0.05ml。
3. 总糖的测定
准确吸取样品液 5ml 放于 100ml 锥形瓶内，加入费林甲液、乙液各 5ml，为使测定的时间与空白测定的时间基本一致，向锥形瓶内加入 3ml 的标准葡萄糖液，然后按测定空白同样操作进行滴定（控制流速，使滴定时间与空白滴定的时间基本一致），记下耗用标准葡萄糖的毫升数。
平行测定三次，直至所得的平均数与各组的差值＜0.05ml。
2、3 步中所加试剂如下表：
空白滴定样品滴定
次数 1 2 3 平
均1 2 3 平
均
费林甲/ml 5 5 5 / 5 5 5 /
费林乙/ml 5 5 5 / 5 5 5 /
蒸馏水/ml 5 5 5 / / / / /
样液/ml / / / / 5 5 5 /
预加葡萄
糖/ml
8 8 8 / 4 4 4 /
消耗葡萄
糖/ml
1.75 1.50 1.45 1.57 1.25 1.30 1.15 1.23
【计算】
样品m=1.0025g V1=9.57
V2=5.23
还原糖(或总糖)%=
5
×
)
克
(
称取的
×)
毫升
/
克
(
标准葡萄糖液浓度
×
V2)
-
(V1
样品量
稀释倍数
=86.58%
【分析讨论】
1. 原理分析
本实验采用费林试剂热滴定法，费林试剂由甲、乙两种溶液组成。
甲液
含硫酸铜和次甲基
蓝(氧化还原指示剂)；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。
当甲、乙两溶液混合时，
硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。
在碱性溶液中，酒石酸钾钠与沉淀的氢氧
化铜作用形成可溶性的络合物。
热滴定中滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在 30s 内颜色
又变成深红色为止，记录下数据处理即可得面粉中的糖含量。
2. 步骤分析
1) 为使空白测定与样品测定的时间一致，在样品滴定之前应提前加入一定
量的葡萄糖；
2) 在滴定过程中，应注意在颜色由蓝色变为紫色时，应减慢滴速，当颜色
变为土黄色时，立
即停止加入葡萄糖，颜色会再度变回紫色时，不应再滴加葡萄糖；
3) 在水解面粉时应确保面粉完全水解，即加入碘液后不再出现特殊的蓝色，
此外，水解液应
中和为中性。
3. 误差分析
本实验至少有以下几种原因可能导致实验误差的出现：
1) 实验过程中容量瓶定容后，没有摇匀，导致局部浓度过高；
2) 全部滴定过程并没有完全在沸腾状态下快速进行，导致不断的还原、氧
化，而使滴定终点
延后。
3) 各组滴定的时间不一致，空气中的 O
2
对实验结果造成了影响；
4) 对滴定终点的把握不够精确，导致超过滴定终点，使得实验数据产生较
大偏差；
5) 面粉未完全水解成为葡糖，水解后的葡糖溶液不为中性，也会给实验结
果带来一定的实验
误差。
【注意事项】
1. 菲林试剂一般应现配现用，因为斐林试剂甲和斐林试剂乙混合后会因酒
石酸有一定的还原性而自发地缓慢产生氧化亚铜沉淀；
2. 总糖的提取步骤中，面粉应在液体加入三角瓶之后再加入，因为这样可以使面粉更容易溶解，沸水浴 30min 后检查是否水解完全，若未则应继续加热；
3. 用酚酞作指示剂时用 10%氢氧化钠调 PH 至 7，应先计算大概需加入氢氧化钠溶液的体积，然后在接近拐点处应一滴一滴甚至半滴半滴的加，因为此处突变很大，避免加入氢氧化钠过量后再用盐酸调 PH，因为这会使得葡萄糖溶液变得粘稠；
4. 空白滴定中一定以每滴 1-2 秒的速度由滴定管滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在30s 内颜色又变成深红色为止；
5. 平行三次后所得的平均数与各组的差值＜0.05ml。
6.称量面粉后及时记录数据，以免过后遗忘或记错。