银杏叶粗提物对猕猴桃灰葡萄孢霉的抑制_郭宇欢
猕猴桃采后致病菌的分离及中草药提取物对其抑菌效果初探
猕猴桃采后致病菌的分离及中草药提取物对其抑菌效果初探猕猴桃是深受消费者和果农喜爱的水果。
采收期在9-10月，很多地方正值气温较高的季节，加之猕猴桃是呼吸跃变型果实，在常温下极易软化和腐烂变质。
猕猴桃不耐贮藏很大程度上是因为贮藏期间有青绿霉或者软腐病状的病菌侵入引起了各种病害及腐烂。
因此采收后应尽快放在适宜的贮藏条件下，并采取有效的防腐保鲜措施。
随着湖南省猕猴桃产量的不断增加，猕猴桃的贮藏将成为一个迫切需要解决的难题。
为了让消费者吃到安全而又卫生的水果，各个国家的科学家都在致力于寻找一种新的保鲜技术、一种能够代替化学药物的保鲜产品。
同时，非化学性的杀菌剂用来控制果实采后的病害将成为以后长时间的研究热点并形成一个发展方向。
很多研究发现，植物的粗提物和它的挥发油等用于控制果蔬采后致病菌具有非常好的效果。
1 材料与方法1.1 供试材料猕猴桃病果来源于湖南省猕猴桃主产区及湖南省园艺研究所白有冷库；新鲜果实于湖南省园艺研究所果园摘取。
1.2 马铃薯葡萄糖琼脂（pda）培养基的配制取200g清洗干净并去皮的马铃薯，切成2cm的小块，放入干净的锅巾，煮沸30min，用纱布过滤至三角瓶中，随后加入20g葡萄糖和20g琼脂，待其充分融化后，加水至1000ml，121℃高压灭菌20min，冷却后储存备用。
1.3 感病猕猴桃病原菌的分离用试验专用刀将猕猴桃果实的感病组织切下，用接种针挑取放入70%的酒精巾浸泡30s 左右，迅速放人1%的次氯酸钠溶液巾浸泡lmin，随后用无菌水清洗2-3次，放入倒好pda 培养基的平板中，置于28℃培养箱黑暗培养3d左右。
分离纯化3次获得纯化菌种后移入试管中，放入4℃冰箱保存备用。
1.4 病原菌的回接验证及分析鉴定取分离到的病原菌，采取有伤接种的方式，将其接种到表面干净并消过毒的健康果实上。
接种过的果实放置于带有加湿功能的培养箱中常温培养。
如果重新接种后果实发病的病状与贮藏时病果的症状相符合，随后从发病的果实上再次分离得到病原菌。
桑叶提取物对体外_葡萄糖苷酶活性的影响_吕欢
收稿日期：2011-06-20；修订日期：2011-09-28基金项目：广东省自然科学基金（No．2008A030201031）作者简介：吕欢（1987-），女（汉族），河北石家庄人，现为华南理工大学轻工与食品学院在读硕士研究生，主要从事天然药物提取研究工作．*通讯作者简介：吴新荣（1959-），女（汉族），黑龙江绥化人，现任广州军区广州总医院主任药师，博士研究生导师，硕士学位，主要从事药物筛选及机制研究工作．桑叶提取物对体外α－葡萄糖苷酶活性的影响吕欢1，2，罗明琍1，3，方飞1，2，吴新荣1*（1．广州军区广州总医院药学部，广东广州510010；2．华南理工大学轻工与食品学院，广东广州510640；3广州中医药大学，广东广州510405）摘要：目的研究桑叶提取物对α－葡萄糖苷酶活性的影响。
方法采用葡萄糖氧化酶法，利用蔗糖为底物，以酵母产α－葡萄糖苷酶和大鼠小肠上皮细胞（IEC －6）中酶来研究桑叶提取物对酶活性的影响。
结果在酶－抑制剂模型上，不同浓度桑叶提取物（5，2．5，1．25，0．625mg /ml ）对α－葡萄糖苷酶抑制活性分别为54．62%，39．79%，8．51%，6．62%；5mg /ml 阳性药物（阿卡波糖）的抑制作用为65．60%；在IEC －6细胞模型上，不同浓度桑叶提取物（200，100，50μg /ml ）对α－葡萄糖苷酶的抑制活性分别为26．88%，12．76%，5．92%；250μg /ml 的阳性对照（阿卡波糖）抑制率为47．46%。
结论桑叶提取物对α－葡萄糖苷酶活性具有抑制作用，随抑制率浓度增加而增加，对桑叶提取物降糖药物开发具有指导意义。
关键词：桑叶提取物；α－葡萄糖苷酶抑制剂；降糖作用DOI 标识：doi ：10．3969/j．issn．1008-0805．2012．01．019中图分类号：R962文献标识码：A 文章编号：1008-0805（2012）01-0041-02In Vitro Inhibitory Effect of Mulberry Leaf Extract on Alpha －glucosidase ActivityL H uan1，2，LUO M ing-li 1，3，FANG F ei 1，2，WU X in-rong 1*（1．Department of Pharmacology ，General Hospital of Guangzhou Military Command of PLA ，510010，China ；2．College of Light Engineering and Food Science ，South China University of Technology ，Guangzhou ，510640，Chi-na ；3．Guangzhou College of Chinese Medicine ，Guangzhou ，510405，China ）Abstract ：Objective To study the inhibitory effect of mulberry leaf extracts on alpha －glucosidase activity．Methods The inhib-itory effects of mulberry leaf extracts on alpha －glucosidase derived from bakers yeast and small intestinal epithelial cells （IEC －6）were measured by using oxidase colorimetric method and using sucrose as the substrate．Results In the enzyme －inhibitor mod-el ，the inhibition rates of 5，2．5，1．25，0．625mg /ml mulberry leaf extracts were 54．62%，39．79%，8．51%，6．62%，respectively．The inhibition rate of 5mg /ml positive drug （acarbose ）was 65．60%．On the IEC －6cell model ，the inhibition of 200，100，50μg /ml mulberry leaf extracts were 26．88%，12．76%，5．92%，while the positive drug was 47．46%．Conclusion The results show that mulberry leaf extracts have a certain degree of α－glucosidase inhibitory activity and the inhibition increases with the increas-ing concentration．The results mean a lot to develop the diabetes drug．Key words ：Mulberry leaf extracts ；α－glucosidase inhibitor ；Hypoglycemic effect糖尿病是一种内分泌代谢紊乱性疾病，以血糖升高和尿糖为主要症状，所以控制血糖是关键，尤其是控制餐后血糖。
辽细辛提取物对灰葡萄孢菌的抑制效果
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谩 究ｌ 告 报
舡 扬保 第３卷第 ２ ２０） ４ 期（ ８ ０
Ｐ ＡＮＴ Ｐ ＯＴＥ ＴＩ Ｖｏ． ４ Ｎｏ ２ （ ０ ８ Ｌ Ｒ Ｃ ＯＮ １３ ． ２ ０ ） ・ ３ ５ ・
辽 细 辛提 取 物 对 灰葡 萄 孢菌 的抑 制 效 果
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（ ．Ｉ ｓｉｕｅｏ １ ｎ ｔｔｔ ｆ Ａｐｐ ｉｄ Ｅｃ ｌｇ ｌｅ ｏｏ ｙ，Ｃｈ ｎ ｓ ａ ｅ ｆ Ｓ ｉｎ ｅ ， ｈ ｎ ａ ｇ １ ０ ，Ｃ ｉａ； ｉｅｅＡｃ ｄ ｍｙ ｏ ｃｅ ｃｓ Ｓ ｅ ｙ ｎ ０ ６ ｈ ｎ １ １ ２ ｏ ｌｇｅ ｆＡｇｒ ｎ ｍｙ， ａ ｃ ｅ ｇ Ｕｎ ｖ ｒｉｙ，Ｌｉｏ ｈ ｎ ２ ２ ５ ，Ｃｈ ｎ ） ．Ｃ ｌｅ ｏ ｏ ｏ Ｌｉｏ ｈ ｎ ｉｅ ｓｔ ａ ｃｅｇ ５０ ９ ｉａ
中 图分 类 号 Ｓ４ ２ ２ ２ ８ ．９
Ｉ ｉ ｒ ｎｔｂ ｃ ｅ ｉ ｌｅ ｆ ｃ ｓ ｏ ｅ ｂ ｓ ｒ ｏ ｔ ｎ ｖ ｔ ｏ ａ ｉ ａ ｔ ｒ ａ ｆ ｅ ｔ ｆ Ｈ ｒ ａ ａ ａ ｉ ｒ ｏ
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对 引 起 黄 瓜 灰 霉 病 的灰 葡 萄 孢 菌 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 的作 用 。 结 果 表 明 ， 辛 不 同溶 剂提 取 物 和 精 油 对 灰 葡 萄 孢 细
菌 的 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 均 有 一定 的 抑 制 作 用 ， 对 孢 子萌 发 的 抑 制 效 果 好 于 对 其 菌 丝 生 长 的抑 制 效 果 ； 油醚 提 且 石 取 物和 精 油 的抑 菌 效果 较 好 ， 菌 丝 生长 的 Ｅ 分 别 为 １ ７ ４ ／ 和 １ ９ ９ ／ 对 孢 子 萌 发 的 Ｅ ｓ分 别 为 对 Ｃ。 ７ ．４ｍｇ Ｌ ５ ． ８ｍｇ Ｌ， Ｃ。 １ ３ ２ ／ ７ ． ３ｍｇ Ｌ和 １ ５ ２ ／ 试 验 还 显 示 细 辛 所 含 的 主要 抑 菌 活 性 成分 易被 极 性 小 的 有机 溶 剂 所 提 取 。 ． ９ｍｇ Ｉ； ２ 关 键 词 细 辛 ； 灰 葡 萄 孢 菌 ； 生 长 速 率 法 ； 孢 子 萌 发 法 ； 抑 菌 活 性
银杏叶中黄酮的提取及其抑菌性检测
目录第一章绪论 (3)1.1银杏叶功效成分简述 (3)1.2 银杏叶主要成分研究情况 (3)1.3黄酮类化合物 (3)（1）组成及结构 (3)（5）银杏黄酮类化合物的理化性质 (4)第二章理论分析 (5)2.1银杏叶采集分析 (5)2.2 提取分析 (5)第三章实验仪器及其材料 (6)第四章实验方法及其过程 (6)4.1银杏叶采集、干燥 (6)4.2银杏叶中黄酮等物质的提取 (6)4.3细菌培养 (7)4.4制作菌悬液 (8)4.5提取物的抑菌性检测实验 (8)第五章实验结果分析 .......................................................... 错误！未定义书签。
第六章结论. (9)银杏叶中黄酮的提取及其抑菌性检测摘要银杏是我国的特有植物，又称公孙树。
银杏叶为最古老的中生代孑遗植物银杏的干燥叶。
银杏有裸子植物活化石之称。
据《本草纲目》记载，银杏果具有敛肺平喘、止遗尿、白带的作用。
在医药上有很高的利用价值。
银杏所含黄酮类成分主要为银杏双黄酮、异银杏双黄酮，去甲基银杏双黄酮，其他还有二萜内酯、银杏内酯A、B、C等，其中黄酮类和二萜内酯类物质具有捕获游离基和抑制血小板活化因子、扩张脑血管、促进血液循环、抗氧化等功能，从而广泛用于治疗冠心病、心绞痛、治疗老年痴呆症和增强记忆功能、防治皮肤病、脱发等多种疾病，随着深入的研究银杏的开发和利用，银杏所特有的医药、经济价值逐步受到重视。
银杏叶的提取方法有有机溶剂萃取法、水提取法、碱性稀醇或碱性水提取法、超临界萃取法、超声波提取法、酶法等。
本文采用有机溶剂提取黄酮类化合物，结果表明实验证明提取银杏叶黄酮等物质用乙醚3小时提取70℃下2次回流最佳。
菌体浓度试验表明当实验用菌体浓度在OD值为0.557，稀释到10-5和10-6比较适合，涂布能够成为单菌落，便于以后进行试验。
提取抑菌性试验证明加入0.5ml 时对大肠杆菌就有明显抑制作用，其抑菌效果随着提取物浓度的增加而增强，当提取物加入2.0ml时具有完全抑菌效果。
不同方法提取银杏叶活性物质抑菌效果的比较研究
不同方法提取银杏叶活性物质抑菌效果的比较研究作者：曲晓华辛玉峰张克英来源：《山东农业科学》2010年第04期摘要：本试验采取常压煎煮、高压煎煮、乙醇冷浸渍、微波提取四种方法提取银杏叶活性物质，并选择金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌三种菌检测银杏叶提取物的抑菌效果。
结果表明，银杏叶提取物具有一定的抑菌效果，且其抑菌效果随提取方式、菌种和浓度的不同而有差异，温度对其抑菌效果没有影响，银杏叶活性物质显示出良好的热稳定性。
关键词：银杏叶提取物；抑菌效果；抑菌圈中图分类号：R282.710.5文献标识号：A文章编号：1001－4942(2010)04－0062－03银杏又名公孙树、白果树、鸭脚子树、灵眼等，为银杏科银杏属落叶高大乔木。
银杏中含有多种化学成分，其中具有药用价值的成分主要为黄酮类化合物、萜内酯类化合物和酚酸类化合物，另外还含有丰富的蛋白质、多种维生素、胡萝卜素和钙、磷、硼、硒等营养保健成分。
到目前为止已知其化学成分的银杏叶提取物多达160余种，主要有黄酮类、萜类、酚类、生物碱、聚异戊烯、奎宁酸、亚油酸、蟒草酸、抗坏血酸、a－已烯醛、白果醇、白果酮等。
此外，利用银杏叶研制的银杏叶饮料、银杏桃果汁、银杏啤酒、银杏茶等保健品已在市场上流通，并取得了良好效果。
近年来，银杏叶提取物(以下简称EGb)的药用和临床治疗价值，推动了国内外医学界对它的深入研究。
随着化学检测手段及临床应用的深入研究，在银杏叶的制剂工艺、成分分析、药理作用、毒理实验和临床试验等方面国内外都有许多报道。
但对于银杏叶提取物抗菌作用的研究，迄今鲜有报道。
本文详细介绍了采用不同提取方法提取的银杏叶活性物质对常见菌的抑制作用，阐明了其抗菌特性，以期为银杏叶提取物在医药、食品等抗菌防腐方面的开发利用提供参考。
1试验方法1.1银杏叶活性物质的提取1.1.1银杏叶的处理洗涤去杂：除去银杏叶中的杂物和泥沙，洗涤时间不宜过长，以免有效成分流失，一般控制在3～5 min；洗净后沥干除去部分水分，使银杏叶含水60％～70％，含水量过多会降低浸提溶剂的浓度，影响浸提效果。
银杏叶有效成分提取与抑菌效果研究_李焰
— — —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— — — 收稿日期： ２００６－ ０３－ １３； 修回日期： ２００６－ ０４－ １５ 基金项目： 福建省教育厅科技项目（ ＪＡ０５３２３） ２００ 作者简介： 李焰（ １９６８－ ） ， 女， 讲师， 在读硕士
１ 材料与方法
１．１ 主要材料与设备 １．１．１ 银杏叶 由福建长汀树王银杏生态园有限公司 提供。 １．１．２ 供试菌种 金黄色葡萄球菌（ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕ－ ｒｅｕｓ） 、大肠杆菌（ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ） 、多杀性巴氏杆菌（ Ｐ． ｍｕｌｔｏｃｉｄａ） 均由福建龙岩学院动物医学研究所提供。 １．１．３ 培养基 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌培养采用 牛肉膏蛋白胨培养基； 多杀性巴氏杆菌培养采用鲜血 琼脂培养基； 念珠菌培养采用沙堡琼脂培养基。 １．１．４ 主要设备 ＨＨ－ ４ 恒温水浴锅、ＪＹ９２－ ２ 型超声 波细胞粉碎机、ＴＤＬ－ ４０Ｂ 离心机、单向异步电动机（ 粉 碎 机） 、ＳＨＢ－ ３ 循 环 水 式 多 用 真 空 泵 、ＺＫ－ ８２Ａ 真 空 干 燥箱和 ７５２０ 型分光光度计。 １．２ 试验方法 １．２．１ 有效成分提取 取银杏鲜叶 １ ０００ ｇ， 于 ６５ ℃烘 箱中烘 ９ ｈ， 取出 冷却至室温， 用粉碎机粉碎， 过 ６０ 目 筛， 称取 １０ ｇ， 加 ７５％乙醇 １５０ ｍＬ 浸泡， 用超声波细胞 粉碎机于 ４００～５００ 次／ｍｉｎ 振荡 ６ ｓ， 间歇 ７ ｓ， 共 ５０ 次。 然后于 ６５ ℃恒温水浴浸提 ２ ｈ， 抽滤并保留滤液， 滤渣 再用等量 ７５％乙醇于 ６５ ℃恒温水浴浸提 ２ ｈ， 抽滤后 合并 ２ 次滤液， 经离心机分离弃沉淀物制得样品原液。 进一步在真空度为 ０．０９ＭＰａ（６０ ℃）下真空浓缩， 制得样 品浓缩液， 经真空干燥得银杏叶提取物浸膏［４］。 １．２．２ 提取工艺研究 在查阅相关资料的基础［５］上 经 对比试验证实， 采用 ７５％乙醇作溶剂并用超声波细胞 粉碎机作预处理较水溶剂和其他浓度的乙醇溶液可更 好的提取银杏叶的有效成分。因此， 采用 ３ 因素 ３ 水平 的正交试验设计研究提取工艺参数， 其中固液比、浸提
银杏叶发酵与未发酵提取物的抑菌活性研究
银杏叶发酵与未发酵提取物的抑菌活性研究作者：詹欣辛敏王然王吉成刘轩唐涛唐劲天岳秉飞来源：《中国医药导报》2013年第35期[摘要] 目的对比银杏叶发酵与未发酵萃取物提取物的抑菌活性。
方法利用冠突散囊菌在银杏叶培养基中发酵培养，将得到的发酵液以及未发酵的银杏叶水提物依次进行石油醚、乙酸乙酯的萃取，选取各部位提取物进行对指示菌种（枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌）进行药敏纸片法抑菌试验。
选取未发酵部分乙酸乙酯提取物进行最小抑菌浓度的测定。
结果银杏叶未发酵乙酸乙酯提取物对供试菌的抑制作用较显著，而且抑菌活性与样品浓度不成正相关。
未发酵乙酸乙酯提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为：2.5、2.5、5.0、10.0 g/mL。
结论银杏叶发酵与未发酵的乙酸乙酯提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌均有一定的抑制作用，而未发酵作用较明显。
石油醚提取物在发酵前后抑菌活性变化不大。
说明银杏叶中主要的抑菌成分存在于乙酸乙酯极性段，发酵过程中，由于微生物转化，造成银杏叶中抑菌活性成分减少。
[关键词] 银杏叶；冠突散囊菌；发酵；抑菌；乙酸乙酯提取物[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）12（b）-0130-04冠突散囊菌，又称“金花”菌，是茯砖茶的优势菌种。
茯砖茶通过冠突散囊菌的代谢等作用，茶叶发生深度的良性生理生化变化，滋味更醇厚，茶香更纯正。
同时在“金花”菌的作用下，茯砖茶具有消食健胃以及降脂的功效[1-2]。
银杏又名白果，属我国特产植物资源，其产量占世界总量的70%以上。
银杏和银杏叶的提取物（Ginkgo biloba extract，GBE）因含有黄酮类、内酯类、酚类等多种活性成分而具有重要的药用价值。
GBE的抑菌活性与其含有的黄酮类的活性成分有关[3]。
武雪芬等[4]通过实验发现植物浓缩液乙酸乙酯层含有大量的黄酮类成分，因此本实验通过与石油醚提取物的对比，考察发酵与未发酵乙酸乙酯提取物的抑菌活性。
银杏叶提取物对柑橘青霉病菌的抑菌效果_喻林华
理作为对照组 （ＣＫ）。 每 个 组 ２０ 个 柑 橘。 将 处 理 后 的 柑 橘
置于２５ ℃室温储藏，每１０ｄ调查１次发病情况（病级），计算 病 情 指 数 和 抑 菌 效 果 。 试 验 重 复 ３ 次 。 病 果 分 级 标 准 ：０ 级 ，
无病害；１级，病害面积占整个 柑 橘 １／４ 以 下；２ 级，病 害 面 积 占整个柑橘１／４～１／２之间；３级，病 害 面 积 占 整 个 柑 橘 的 １／
艾 科 浦 超 纯 水 系 统 ：ＤＺＧ－３０３Ａ，颐 洋 企 业 发 展 有 限 公 司 ； 电子天平：ＰＬ６０２－Ｓ，梅 特 勒 － 托 利 多 仪 器 （上 海 ）有 限 公司；
高压 灭 菌 锅：ＨＶＥ－５０，日 本 平 山 （ＨＩＲＡＹＡＭＡ）制 造 公司；
超 净 工 作 台 ：ＳＷ－ＣＪ－２ＦＤ，苏 州 净 化 设 备 有 限 公 司 ； 索 氏 提 取 器 ：ＳＴ－６０，北 京 赛 福 莱 博 科 技 有 限 公 司 。
提取物得率＝ 银Biblioteka 杏杏叶叶提粉取末物的的质质量量（ｇ（ｇ））×１００％
（１）
１．３．２ 不 同 浓 度 银 杏 提 取 物 的 配 制 称 取１０ｇ 银 杏 叶 提 取
物溶解在１００ｍＬ 的丙酮溶液 中 形 成 ０．１ｇ／ｍＬ 的 银 杏 叶 提
取物丙酮溶液。 分 别 吸 取 该 溶 液 １５，１２，９，６，３ ｍＬ 进 行 稀
本 试 验 在 前 人 研 究 的 基 础 上［５，６］，以 乙 醇 替 代 石 油 醚 ，以 不同浓度银杏叶乙醇提取物处理感染了柑橘青霉病菌的柑 橘，进行药效试验，测 试 银 杏 叶 乙 醇 提 取 物 对 储 藏 期 柑 橘 青 霉病菌的抑菌效 果，旨 在 克 服 化 学 药 剂 对 人 体 的 毒 害 作 用， 提高柑橘果品防腐保鲜效果。
不同方法提取银杏叶活性物质抑菌效果的比较研究
不同方法提取银杏叶活性物质抑菌效果的比较研究
曲晓华;辛玉峰;张克英
【期刊名称】《山东农业科学》
【年(卷),期】2010(000)004
【摘要】本试验采取常压煎煮、高压煎煮、乙醇冷浸渍、微波提取四种方法提取银杏叶活性物质,并选择金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌三种菌检测银杏叶提取物的抑菌效果.结果表明,银杏叶提取物具有一定的抑菌效果,且其抑菌效果随提取方式、菌种和浓度的不同而有差异,温度对其抑菌效果没有影响,银杏叶活性物质显示出良好的热稳定性.
【总页数】3页(P62-64)
【作者】曲晓华;辛玉峰;张克英
【作者单位】曲阜师范大学生命科学学院,山东,曲阜,273165;曲阜师范大学生命科学学院,山东,曲阜,273165;安丘第一中学,山东,安丘,262100
【正文语种】中文
【中图分类】R282.710.5
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银杏黄酮抑菌作用的研究
银杏黄酮抑菌作用的研究胡筱白光李聪聪毛建（河北联合大学轻工学院，唐山河北063000）【摘要】本文采用液相色谱法对银杏仁提取物主成分进行了定性测定，并对其抑菌作用进行了研究。
结果表明：银杏仁乙醇提取物的主要成分为黄酮类化合物。
在抑菌圈试验中，黄酮类化合物对细菌和真菌都有一定的抑制作用，且对细菌的抑制作用略好于真菌。
在食物抑菌试验中，20mg/mL 提取液对培养72h牛肉中的大肠杆菌、白葡萄球菌和毛霉都有很好地抑制作用；对豆腐中的毛霉抑菌作用明显，对大肠杆菌和白葡萄球菌没有抑制作用，反而呈现促进作用，食品的特性决定了黄酮类物质对菌类的抑制效果。
【关键词】银杏；黄酮类物质；抑菌性；天然食品防腐剂中图分类号：TS 201.2文献标识码：A文章编号：2095-6495 (2014)11-0061-03 Inhibitory Properties of Flavoniods from Ginkgo bilobaHu Xiao Bai Guang Li CongCong Mao Jian（Qing Gong Colleg e，Hebei United University，Tangshan City，Heb ei Provin ce 063000）Ab st r act：M ain compon ents of Ginkgo biloba extractive were made qualitative analysis by H PLC and antibacterial effect s. Results showed that flavon oids were main compon ents in extractive. In bacteriostatic rin g experiment，flavon oids had inhibited effect to bacteria （Escherichia coli. and Staphylococcus albus）and fu n gu s （Mucor and Tricheodrma spp.）. And there were better inhibition effect to bacteria than to fu n gu s. In antibacterial of food experiment，20mg/mL G in kgo biloba extractive had inhibited effect to Escherichia coli.，Staphylococcus albus and Mucor which cultured for 72h in beef. 20mg/mL Ginkgo biloba extractive had obviou s inhibitor y effect to M ucor，but had certain promote r action to Es cherichia coli. and Staphylococcus albus which cultured for 72h in beancurd. C haracteristics of food determined effect s of flavon oids antibacterial.Key wo r d s：Ginkgo biloba，Flavoniods，Antibacterial effect，N atural food antiseptic银杏在我国大部分地区均有种植。
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银杏叶粗提物对猕猴桃灰葡萄孢霉的抑制郭宇欢，张丽媛，何玲，张美芳，徐乐艺，齐馨（西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌 712100）摘要：为了寻找到一种天然无害的猕猴桃保鲜剂，同时降低猕猴桃采后贮藏过程中灰霉病的发生，本试验用类黄酮含量分别为0.3 mg/mL、0.5 mg/mL和0.7 mg/mL的银杏叶提取液（extract of Ginkgo biloba leaves，EGb）对接种了灰霉菌菌悬液的‘秦美’猕猴桃进行处理，以无菌水为对照组，通过测定硬度、发病率、病斑直径、呼吸速率、可溶性固形物和可滴定酸等生理指标及多酚氧化酶、过氧化物酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和苯丙氨酸解氨酶等酶活性来探究银杏叶提取液对猕猴桃采后灰霉病的抑制效果。
结果表明：0.5 mg/mL和0.7 mg/mL的银杏叶提取液可以降低接种了灰霉菌的猕猴桃的发病率，同时较好的维持果实的硬度，延缓可溶性固形物的上升速率和可滴定酸的下降速率，使抗性酶活性维持在较高水平且可以更快的诱导几丁质酶和苯丙氨酸解氨酶活性的上升。
其中效果最好的处理是0.5 mg/mL处理组。
关键词：银杏叶粗提物；猕猴桃；灰葡萄孢霉；抑菌文章篇号：1673-9078(2017)6-111-117 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2017.6.017 Resistance in Kiwifruit against Botrytis cinerea by Ginkgo biloba LeafExtractGUO Yu-huan, ZHANG Li-yuan, HE Ling, ZHANG Mei-fang, XU Le-yi, QI Xin(College of Horticulture, Northwest A & F University, Y angling 712100, China) Abstract: The aim of this study was to find a natural preservative for kiwifruit, and to reduce infection of kiwifruit by gray mold during storage. Qin Mei kiwifruit was inoculated with Botrytis cinerea, and treated with Ginkgo biloba leaf extract (EGb), which was classified according to different concentrations of total flavon(0.3 mg/mL, 0.5 mg/mL, and 0.7 mg/mL). Physiological indices (firmness, incidence, lesion size, respiratory rate, soluble solid content, and titratable acid) and activities of polyphenol oxidase, peroxidase, phenylalanine ammonia lyase, chitinase, and β-1,3-glucanase were measured to investigate the inhibitory effect of EGb on gray mold infection in kiwifruits during storage. The results showed that the incidenceof diseases was reduced, and the firmness, titratable acid level, and the enzyme activities remained high; the increase in soluble solid content was delayed after the treatment with EGb of concentrations, 0.5 mg/mL and 0.7 mg/mL. EGb of concentration 0.5 mg/mL exhibited the best effect.Key words:Ginkgo biloba leaf extract; kiwifruit; Botrytis cinerea; anti-bacteria猕猴桃是猕猴桃科（Actinidiaceae）猕猴桃属（Actinidia）的多年生落叶植物。
全世界约有猕猴桃品种66种，而我国高达62种[1]，中国猕猴桃总产量一直居世界首位[2]。
而猕猴桃果实贮藏后期的腐烂主要是由病原真菌侵染引起[3]，其中由灰霉葡萄孢（Botrytis cinerea）侵染诱发猕猴桃采后灰霉病是主要的贮藏病害[4,5]。
目前使用最多的仍是化学制剂与冷藏相结合的方法来降低贮藏病害[6,7]，但是化学制剂往往收稿日期：2016-07-28基金项目：槲皮素保鲜猕猴桃关键技术研究（2015NY-14）作者简介：郭宇欢（1991-），男，硕士，研究方向：园艺产品采后生理及贮藏保鲜通讯作者：何玲（1965-），女，副教授，研究方向：园艺产品采后生理及贮藏保鲜 会残留在果实表面危害人体健康，破坏环境，因此使用一种安全无毒无污染的生物保鲜方法很有必要。
近年来已经出现了许多新型猕猴桃保鲜方法，如穆晶晶[8]等发现适当的失水处理可以降低软枣猕猴褐变指数的上升，居益民[9]等用1-MCP处理也可以提高猕猴桃的保鲜效果，二氧化氯[10]和臭氧[11,12]等气体处理也可以达到提高猕猴桃保鲜效果的目的。
天然植物提取液作为一种新型天然保鲜剂，已广泛应用于鲜果的贮藏保鲜，如油桃[13]、木瓜[14]和苹果[15]等，何靖柳[16]等研究指出植物精油可以作为红阳猕猴桃的保鲜剂，而银杏叶提取液中含有类黄酮物质，可以有效的抑制青霉菌的生长[17]，此外，银杏叶中黄酮类化合物对多种细菌也有抑制作用，例如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、禾谷镰刀菌和烟草赤星病菌等菌种都可以表现出较强111的抑制作用[18]。
银杏叶提取物黄酮类化合物可以作为一种优势明显的防腐抑菌制剂，被广泛的应用在果实的保鲜防腐上。
本研究以‘秦美’猕猴桃为试材，研究银杏叶提取液对接种灰霉菌的猕猴桃的抑制作用，为降低猕猴桃采后贮藏中灰霉病的发病提供新的思路。
1 材料与方法1.1 原料‘秦美’猕猴桃：2015年10月8号采收于陕西省周至县，选取成熟度一致、大小均匀、无机械损伤和病虫害的果实，预冷后放入冷库贮藏。
银杏叶：2015年8月采于西北农林科技大学银杏路；灰霉菌为该课题组保藏菌种；聚乙烯（PE）保鲜袋（长×宽×厚：160 mm×120 mm×0.03 mm）；试剂：芦丁、氯化钠、无水乙醇、2,6-二氯酚靛酚、抗坏血酸、氢氧化钠、草酸、愈创木酚和邻苯二酚均为国产分析纯。
琼脂、牛肉膏和蛋白胨为国产生物试剂。
仪器：压力蒸汽灭菌锅（LDZX-50KBS型）、恒温培养箱（HWS智能型）、超净工作台（苏净集团安泰公司）、GY-4型数显式果实硬度计、ETONG-7001型CO2分析仪、手持糖度计(A TAGO PAL-1)、RE-52AA 型旋转蒸发仪、SHZ-HI型循环水真空泵、3K15型高速冷冻离心机及UV-1800型紫外可见分光光度计。
1.2 试验方法1.2.1 银杏叶提取液的制备参照冯金霞银杏叶提取液的优化方法[19], 准确称量银杏叶干粉（过40目筛），用90%乙醇按料液比1:20 (m/V)浸泡，400 W超声提取50 min（60 ℃），真空抽滤后取滤液，以芦丁为标准品，用分光光度法测定滤液中总类黄酮含量的浓度，以此表示银杏叶提取液的浓度。
1.2.2 灰葡萄孢霉孢子悬浮液的制备将培养好的灰葡萄孢霉用体积分数为0.05% Tween 80无菌水冲洗平板，采用血球计数板法制成浓度为1×108个/mL的孢子悬浮液。
1.2.3 试验处理挑选大小适中，无机械损伤的‘秦美’猕猴桃果实，用质量分数为2%的次氯酸钠喷施于猕猴桃表面，无菌水冲洗3~5次，晾干。
配制银杏叶提取液总类黄酮浓度分别为0.3、0.5、0.7 mg/mL的溶液（无菌水处理作为对照组CK）。
用直径为3 mm的无菌不锈钢钉子在猕猴桃赤道处均匀刺伤（深4 mm、宽3 mm），接入25 μL不同浓度的银杏叶提取液。
24 h后，再接入20 μL灰葡萄孢霉孢子悬浮液，存放于23 ℃±1 ℃室温下。
接种病原菌后，每天对发病率、病斑直径、硬度、呼吸速率、可溶性固形物、可滴定酸进行测定，并取果肉病斑周围2 cm内健康果肉组织对相关抗性酶进行测定。
每处理用果30个，重复3次。
1.2.4 指标测定硬度：采用GY-4型数显式果实硬度计测定。
发病率：以病斑直径≥0.5 mm确定为发病，发病率(%)=发病果实数/总接种果实数×100病斑直径：采用十字交叉法测定，取平均值。
可溶性固形物含量(soluble solid content，SSC)：采用糖度计进行测定。
可滴定酸含量(titratable acid，TA)：采用酸碱滴定法测定[20]。
呼吸强度：采用ETONG-7001 型CO2分析仪测定。
多酚氧化酶(polyphenol oxidase，PPO)活性：采用邻苯二酚比色法[21,22]。
过氧化物酶(peroxidase，POD)活性：参照《植物生理学实验指导》的方法[23]。
苯丙氨酸解氨酶(phenylalnine ammonialyase，PAL)活性：参照袁仲玉等[24]方法几丁质酶(chitinase，CHI)活性：参照《果蔬采后生理生化实验指导》[20]β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase，GLU)活性：参照《果蔬采后生理生化实验指导》[20]1.2.5 统计方法试验数据采用Excel整理，SPSS进行方差分析，并用Duncan作差异显著性检验（p<0.05，表示差异显著）。
2 结果与讨论2.1 不同处理对接种灰霉菌的猕猴桃果实发病率和病斑直径的影响图1a看出，CK处理发病率显著高于银杏叶提取液处理（p<0.05），第6 d发病率高达83%，而0.3、0.5、0.7 mg/mL银杏叶提取液处理组发病率分别为70%、52%和39%，说明银杏叶提取液处理可以显著降低猕猴桃果实的发病率，而且随着浓度的升高，抑制效果不断提高。