细胞形态大小的观测——测微尺的使用
细胞形态结构的观察与显微测量
实验一细胞形态结构的观察与显微测量一、实验目的：1．熟悉动物细胞、植物细胞的基本形态结构2．掌握临时装片的制作方法3．掌握显微测量的原理和方法4．掌握生物绘图的方法。
二、实验原理：细胞是生物体结构功能的基本单位，其形态与功能相适应。
不同类型的细胞具有不同的大小、形态和结构，以适应其功能。
通过制作临时装片，可以观察很多细胞的结构，并借助测微尺测量细胞直径，进而获得细胞的体积。
三、实验仪器、试剂及材料：仪器：光学显微镜（台/人），载玻片、盖玻片（4套/人）、测微尺剪刀（1把）、镊子（1把）、牙签（50根）、滴管（个/组）试剂：1%碘液、瑞特染液（如果观察血细胞，则需瑞特染液）材料：洋葱、红辣椒、紫色落葵（或紫罗兰）、血细胞悬液、口腔上皮细胞四、实验步骤：1．洋葱鳞茎表皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用剪刀在洋葱鳞茎叶内表面画一个1mm2的方框用镊子撕下表皮在碘液中铺平盖上盖玻片用吸水纸吸去多余碘液（也可帮助排除气泡）显微镜下观察（同法制红辣椒表皮细胞装片）2．人口腔黏膜上皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用牙签刮取上皮细胞在1%碘液中搅动分散细胞染色1分钟盖上盖玻片观察3．血细胞观察（见细胞生物学实验教程：第9页）在载玻片右端滴一滴血细胞稀释液用另一张载玻片以30~45度角（两玻片夹角）推移血液成均匀薄膜滴一滴瑞特染液染色3分钟自来水洗掉染液，晾干观察4．显微测量（1）原理：测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成，目镜测微尺位于目镜内，为玻璃圆片，上有一条带刻度的直线，精确度较镜台测微尺的低；镜台测微尺是一块载玻片，中央圆形区域内有一带刻度的直线，精确度较目镜测微尺高。
（2）测量：A、将镜台测微尺放入载物台上，转动目镜，使二者平行。
选择一处让二者重合，然后向右侧寻找再次重合处，记下二者的数值，并按照目镜测微尺和镜台测微尺的精度关系换算目镜测微尺每小格实际代表的刻度值。
B、将镜台测微尺取下，换上洋葱表皮细胞、口腔黏膜上皮细胞、血细胞涂片，用目镜测微尺测量出其长度和宽度。
微生物大小的测定及显微镜直接计数法
微⽣物⼤⼩的测定及显微镜直接计数法微⽣物学实验报告姓名年级班级组别⼀组同组者科⽬微⽣物题⽬微⽣物⼤⼩和数量的测定仪器编号⼀、⽬的要求1．学习并掌握使⽤显微镜测微尺测定微⽣物⼤⼩的⽅法。
2．了解⾎球计数板的构造、明确其计数原理。
3．学习并掌握使⽤⾎球计数板测定微⽣物细胞或孢⼦数量的⽅法。
⼆、基本原理l．显微测微尺可⽤于测量微⽣物细胞或孢⼦的⼤⼩，包括镜台测微尺和⽬镜测微尺两个部件。
镜台测微尺全长1mm，等分为100格，每格0.01mm。
⽤于校正⽬镜测微尺没⼩哥的长度.⽬镜测微尺其中央刻有50等分或100等分的⼩格.测量前应预先⽤镜台测微尺来校正并计算出在某⼀放⼤镜下,⽬镜测微尺每⼩格所代表的实际长度,再以后作为测量微⽣物细胞的长度.⽬镜测微尺每格长度（µm）=（两重合线间镜台测微尺格数x10）/两重合线间⽬镜测微尺格数2.球菌⽤直径表⽰⼤⼩；杆菌⽤宽和长来表⽰µm图⼀：测微尺的校正3．显微直接计数法：将⼩量待测样品悬浮液置于计菌器上，于显微镜下直接计数的⼀种简便、快速、直观的⽅法。
显微计数法适⽤于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如酵母、细菌、霉菌孢⼦等。
菌体较⼤的酵母菌或霉菌孢⼦可采⽤⾎球计数板，⼀般细菌则采⽤彼得罗夫·霍泽（Petrof Hausser）细菌计数板或Hawksley计数板。
三种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使⽤油镜观察。
⽽⾎球计数板较厚，不能使⽤油镜，计数板下部的细菌不易看清。
⾎球计数板是⼀块特制的厚型载玻⽚，载玻⽚上有4条槽⽽构成3个平台。
中间较宽的平台，被⼀短横槽分隔成两半，每个半边上⾯各有⼀个计数区。
计数区的刻度有两种：⼀种是计数区（⼤⽅格）分为16个中⽅格，⽽每个中⽅格⼜分成25个⼩⽅格；另⼀种是⼀个计数区分成25个中⽅格，⽽每个中⽅格⼜分成16个⼩⽅格。
计数区由400个⼩⽅格组成。
每个⼤⽅格边长为1mm，其⾯积为lmm2，盖上盖玻⽚后，盖载玻⽚间的⾼度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3。
显微镜测微尺的使用
显微镜测微尺的使用目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上（此处正好与物镜放大的中间像重叠）来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺（即物镜尺）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上.由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
目镜测微尺的校正:把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。
先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
因为镜台测微尺的刻度每格长l0μm，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。
例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小格重叠，已知镜台测微尺每小格为l0μm，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5＝10μm用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。
由于不同显微镜及附件的放大倍数不同，因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件（特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用，当更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目得了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺（图－1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍm长度刻成50等分，或把10 mｍ长度刻成1０0等分。
测量时，将其放在接目镜中得隔板上（此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.镜台测微尺（图２0-2）就是中央部分刻有精确等分线得载玻片，一般将ｌmm等分为10０格，每格长l0μm(即０、0ｌmm）,就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大，因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小，所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺，换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料：酿酒酵母（Sacchaｒomyces ｃerｅvisｉae)、枯草杆菌（Bacｃiｌlｕｓｓubｔili ｓ)染色标本片。
2。
器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法１．目镜测微尺得校正把目镜得上透镜旋下，将目镜测微尺得刻度朝下轻轻地装入目镜得隔板上，把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上.先用低倍镜观察，对准焦距，视野中瞧清镜台测微尺得刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺得刻度平行,移动推动器,使两尺重叠，再使两尺得“0”刻度完全重合,定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合得刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺得格数与镜台测微尺得格数.因为镜台测微尺得刻度每格长ｌ0μｍ,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表得长度.例如目镜测微尺5小方格正好与镜台测微尺5小方格重叠,已知镜台测微尺每小方格为l0μm，则目镜测微尺上每小方格长度为=5×10μｍ/5＝10μm用同法分别校正在高倍镜下与油镜下目镜测微尺每小方格所代表得长度。
微生物细胞大小测定及显微镜直接计数
微生物细胞大小测定及显微镜直接计数一、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图示）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上，此处正好与物镜放大的中间物像重迭，用于测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图示）是中央部分刻有精确等分线的专用载玻片，一般将1mm等分为100格，每格长10µm即0.01mm，是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的实际长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物细胞大小。
测定微生物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微镜直接计数法和稀释平板计数法。
直接计数法适用于各种单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质，则难于直接测定。
菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板，一般细菌则采用彼德罗夫·霍泽（Petrof Hausser）细菌计数板。
两种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。
而血球计数板较厚，不能使用油镜，计数板下部的细菌难于区分。
血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载坡片上有4条槽所构成的3个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数区（图示），计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格，大方格用三线隔开，而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格，大方格之间用双线分开，而每个大方格又分成16个小方格。
测微尺的使用方法
测微尺的使用方法摘要：1.测微尺简介与特点2.测微尺的使用步骤3.注意事项与维护方法正文：测微尺是一种精密的测量工具，广泛应用于各种测量领域。
它具有测量精度高、操作简便等特点。
下面我们将详细介绍测微尺的使用方法及其注意事项。
一、测微尺简介与特点测微尺是一种具有高精度的测量工具，其最小刻度值为0.01mm。
它主要由尺身、刻度盘、测微螺纹和微调手轮等部分组成。
测微尺具有以下特点：1.测量范围广泛：测微尺可以测量长度、宽度、高度等各种尺寸。
2.精度高：测微尺的最小刻度值为0.01mm，满足各种精密测量需求。
3.操作简便：测微尺的结构设计使得测量过程更加轻松便捷。
二、测微尺的使用步骤1.准备工作：在使用测微尺之前，先将测微尺擦拭干净，确保其表面无尘埃及油污。
2.放置测微尺：将测微尺放置在需要测量的物体上，使其保持平稳。
3.读取数值：观察刻度盘上的数值，找到与测微尺上的刻度线对齐的刻度点。
4.微调：若需要更精确的测量结果，可以使用微调手轮进行微调。
5.记录数据：记录测量结果，注意单位的转换。
三、注意事项与维护方法1.使用过程中，避免测微尺受到撞击或摔落，以免影响测量精度。
2.测量过程中，不要用手指直接接触测微尺的刻度线，以免磨损。
3.测量完毕后，将测微尺擦拭干净，放入专用盒子里，以防尘埃及水分侵入。
4.定期检查测微尺的螺丝是否松动，如有松动，应及时拧紧。
5.长时间不使用测微尺时，可以在尺身上涂抹少量润滑油，以防止部件生锈。
总之，掌握测微尺的使用方法及其注意事项，能够让我们更加高效地进行精密测量工作。
测微尺的使用方法
原理：
采用刻有一定刻度的测微尺来测量，先用绝对长 度的物镜测微尺来校正不表示绝对长度的目镜测微尺， 计算后者每格所代表的实际长度，然后放上待测的标本， 用目镜测微尺测定标本上的结构占目镜测微尺的格数， 就可计算该细胞的大小。
测微尺的构造
目镜测微尺 是一块圆形玻片，通常是将5mm 划分为50格，实际每格等于100μm。用前 必须用物镜测微尺来标定。 物镜测微尺 一块特制的载玻片，其中 央有一小圆圈。圆圈内刻有分度，将长1mm 的直线等分为100小格，每小格等于10μm。
鸭跖草表皮细胞大小的测定方法：
• 1、将目微尺放于目镜内 • 2、将物微尺放在显微镜的载物台上。 • 3、小心转动目镜测微尺，移动物微尺使两尺平行，起点 线重合，然后找出另一处两尺刻度重合处。 • 4、记录起点线到重合线之间的各尺的刻度数（格数）， 按下式计算，在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长 度： 物微尺格数 • 目微尺每格所代表的实际长度= × 10μm 目微尺格数 • 5、将制作的鸭跖草临时装片置于载物台上，测定细胞的 大小（包括长径和短径）。
目镜测微尺的标定
• (1)取下接目镜，旋下目镜上的目透镜，将目镜测 微尺放人接目镜的中隔板上，使有刻度一面朝下， 再旋上目透镜，并装入镜筒内。 • (2)将物镜测微尺置于显微镜的载物台上，使有刻 度的一面朝上，同观察标本一样，使具有刻度的小 圆圈位于视野中央。 • (3)先用低倍镜观察，对准焦距，待看清物镜测微 尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与物 镜测微尺的刻度相平行，并使两尺的左边第一条线 相重合，再向右寻找两尺的另外一条重合线
(4)记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。
例如，在10×物镜下，目镜测微尺的10格等长于台式测微 尺的10格，即目镜测微尺每小格的长度为10 m。一般情况下， 当目镜为10×时，若物镜为4×，目镜测微尺每小格的长度为 24 m；若物镜为l0×，目镜测微尺每小格的长度为10 m；若 物镜为40×，目镜测微尺每小格的长度为2.5 m；若物镜为 100×，目镜测微尺每小格的长度为1m。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺与镜台测微尺的构造与使用原理,掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小就是微生物重要的形态特征之一,由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺(图-1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺(图20-2)就是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(即0、0lmm),就是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上,图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。
2.器材:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1.目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
先用低倍镜观察,对准焦距,视野中瞧清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数与镜台测微尺的格数。
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(二) 细胞形态观察和细胞大小的测 量
1．兔不同组织细胞永久制片 观察其细胞间隙、细胞形状、细胞核及核仁形状 与数目、细胞质的形态结构等。 2．蚕豆根尖的永久制片 观察蚕豆根尖纵切面概况，注意生长点与生长点 成熟区细胞的异同。 3．大肠杆菌标本示范，注意细胞形状、大小及核 物质等情况。 4．细胞大小的测量
1．通过观察，说明真核细胞和原核细 胞，植物细胞和动物细胞在形态结构的 复杂 性上和大小上有何差异。 2．写出目微尺在10倍、40倍镜下的 实际刻度值X的计算过程和结果。 3．分别计算出兔肾细胞和洋葱表皮 细胞的NP值。
几种测量常用的测微尺。
1．镜台测微尺：是一种特制的载 玻片，中央有刻度线的标尺，一般 全长为lmm，共分l0个大格、100个 小格，每一小格长度(0.01mm)，用 加拿大树胶将圆盖玻片密封在载玻 片上。
2．目镜测微尺：是放在目镜筒内的标尺。我们使 用的是固定式目微尺，为一块圆片玻璃片，直径 20-2lmm，上面有刻度，分为直线式和网格式的。 (1)直线式目微尺：用于测量被检物的长度，整个刻 度一般长约10mm，分成l0个大格，100个小格。 (2)网式目微尺：主要用于计算被检物的数目和测 量物体的面积，方格大小各有不同。 3．镜台标准推动器上的纵横游标尺： 一些较高级的显微镜都有该装置，它可以用来测 量被检物的长度和位置，由标尺和副标尺组成。 4．微调焦轮的标尺：是在调上、下厚度时，微调 焦轮读出的数值，一般有100个刻度，每一刻度为l2µm。
5．求核质比NP
核质比的计算=Vn(核体积)/Vc(细胞体)-Vn （核体） 注：椭圆体积 v=4／3πab2 圆球体积 v=4／3π 长方体 V=a．b．c (1)兔肾细胞的永久制片求NP值。 (2)洋葱内表皮细胞，用0.5％蕃红染色5 分钟观察，求NP值。
五、作业
实验二
细胞形态大小的观测——测 微尺的使用
一、实验目的：
观察不同组织的细胞形态，了解 它们与功能的关系，学会和掌 细胞种类繁多，形态、大小差别较大，从形 状上动物卵细胞、植物的基本组织细胞(薄壁 细胞)是球形或近球形细胞。细胞的形态与其 功能相适应。细胞的形态可以通过显微镜观 察得以描述，而细胞的大小是通过一定的测 量工具来获得较为准确的测量结果，
三、实验用品：
l、0.5％蕃红或l/3000中性红溶液 2、香柏油，二甲苯 3、兔的肝、肾、卵细胞永久制片 4、蚕豆根尖切片．洋葱新鲜材料
四、实验步骤：
(一) 台微尺和目微尺的校对 1．卸下目镜，拧开后面的透镜，将目微尺装入其焦面上，使刻度向 下。 2．将台微尺置于载物台上，使刻度向上。 3．调焦至能看清台微尺刻度线。 4．移动台微尺，并转动目微尺，使两个测微尺的左边第一条刻度 线完全重合，然后向右边找完全重合的刻度线。分别记录两重合线间 台微尺刻度数n和目微尺刻度数m，并查出台微尺的实际刻度值a(一般 为0.0lmm)。 5．计算目微尺的实际刻度值x (mm)X=n· a /m 6．校对后，卸下台微尺进行细胞形态、大小观测，如果物镜倍数 改变，需进行重新校对。