生物分离与纯化技术模拟试卷一

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生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案

生物分离与纯化技术模拟试卷十一答案装订线1．盐析：23．451A0.02～10μ2A B C D 3A ．羟型阴B 4A1％～10％5A 、阴性洗脱B 6A 、水B 、甲醇C 7．在一定的pH 和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作(A) A 、KS 盐析法B 、β盐析法C 、重复盐析法D 、分部盐析法 8．在超滤过程中，主要的推动力是（C ） A 、浓度差B 、电势差C 、压力D 、重力9．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A ） A 、粗且长的B 、粗且短的C 、细且长的D 、细且短的10．如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方法最佳？（C ） A.匀浆法B.超声波法C.渗透压休克法D.冻融法 11．盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（B ） A ．分辨率高B ．变性作用小C ．杂质易除D ．沉淀易分离 12．磺酸型阳离子交换树脂可用于分离（E ） A 、强心苷B 、有机酸C 、醌类D 、苯丙素E 、生物碱13．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（C ） A ．离子交换色谱B ．亲和色谱C ．凝胶过滤色谱D ．反相色谱14．洗脱体积是（C）。

A、凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶内部的体积C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积15．下列细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法(A)A.化学法B.高压匀浆C.超声波破碎D.高速珠磨三、判断题（每小题1分，共10分）2．阴树脂易受有机物污染，可用有机溶剂浸泡或淋洗。

（×）3．吸附力较弱的组分，有较低的Rf值。

（×）4．凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。

（√）5．等密度梯度离心中，梯度液的密度要包含所有被分离物质的密度。

（√）6．疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液（√）7．采用溶剂提取法提取中草药有效成分时，选择溶剂的原则是“相似相溶原则”。

化学分离与纯化技术考核试卷

A. SDS-PAGE
B.等电聚焦
C.亲和电泳
D.毛细管电泳
16.以下哪些方法可以用于去除溶液中的杂质？（）
A.吸附
B.萃取
C.离子交换
D.沉淀
17.以下哪些因素会影响离子交换树脂的交换能力？（）
A.树脂的交联度
B.树脂的离子交换容量
C.溶液的离子强度
D.溶液的pH值
18.以下哪些是结晶过程中可能遇到的问题？（）
7.冷冻干燥是一种在常温下进行的干燥方法。（）
8.吸附色谱是按照分子大小进行分离的一种色谱法。（）
9.气相色谱中，固定相通常为液体，而流动相为气体。（）
10.亲和电泳是一种基于蛋白质与配体之间特异性相互作用的电泳技术。（）
五、主观题（本题共4小题，每题10分，共40分）
1.请简述离子交换色谱的原理，并说明其在生物大分子纯化中的应用。
9.以下哪些因素会影响蒸馏的效率？（）
A.蒸馏塔的设计
B.蒸馏温度的控制
C.冷凝器的效率
D.混合物的沸点差异
10.以下哪些方法可以用于从天然产物中提取有效成分？（）
A.水提
B.醇提
C.超临界流体萃取
D.索氏提取
11.以下哪些是凝胶过滤色谱的特点？（）
A.按分子大小分离
B.不需要固定相
C.可以用于蛋白质的纯化
一、单项选择题
1. C
2. C
3. D
4. D
5. B
6. D
7. D
8. C
9. B
10. D
11. D
12. D
13. D
14. A
15. A
16. D
17. B
18. C
19. D

生物分离纯化习题 (1)

第一章绪论一、名词解释生物物质生化分离技术二、填空题1.生物物质的来源、、、、。

2.生物分离纯化工作按照生产规模可分为、、三个层次。

3.蛋白质保存方法、、。

三、选择题1.选择生物物质分离纯化技术和工艺的依据（）A、物理性质B、化学性质C、生物学性质D、生理性质2、生物活性越高的成分，一般它在物质中的含量越（）。

A、高B、低C、一般D、无法提取3分离纯化过程需要加入（）保持生物大分子的活性。

A、糖类B、缓冲溶液C、中性盐D、半胱氨酸四、简答题1.生物分离纯化的特点？2.生物分离纯化原材料的选择要注意哪些问题？3.影响生物产品保存的主要因素？第二章预处理技术一、名词解释凝聚作用絮凝作用凝聚值二、填空题1．组织与细胞的破碎方法有、、、。

2.降低发酵液黏度的方法、。

3.加入助滤剂的方法、。

4.除去杂蛋白的常用方法、、。

5.凝聚值越小，则凝聚剂的凝聚能力越。

6.检查细胞破碎效果的方法有、、。

三、选择题1.大多数蛋白质的等电点在（）范围。

A、酸性B、碱性C、中性D、不固定2.加入助滤剂可使滤液（）A、滤速增大B、滤速减小C、增加成本 D 、保持渗透性3.除去钙离子的试剂（）A、草酸B、草酸钙C、草酸钠D、铁离子4．分离DNA、RNA混合物（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法5．分离大小不同、密度不同的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法6．分离大小相近、密度不同的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法7．分离大小不同、密度相近的物质（）A、速度区带离心法B、差分离心法C、等密度区带离心法D、平衡等密度区带离心法四、简答题1.改变发酵液过滤特性的方法有哪些？2.影响絮凝效果的因素有哪些？3.超声波破碎法的特点？4.进行细胞破碎所使用的表面活性剂有哪些？5.影响离心效果的因素有那些？6.常用的离心设备有哪些？第三章固相析出分离法一、名词解释（每题2分）1．结晶2．盐析法二、填空（每空1分）1．常用的盐析用盐有、、2．盐析方法有两种类型，分别为、，其中用于提取的前期，用于提取的后期3．盐析用中性盐的浓度多用来表示，也就是把饱和时的浓度看作1或100%。

分离纯化技能试卷

微生物发酵工实际操作技能考试试卷
酵母细胞的超声波破碎
说明：
1、该实际操作试卷满分50分，包括稀释梯度、血球计数板计数、超声波破碎三部分技能考试，要求必须在规定的时间内完成。

考试每超1分钟扣1分，最多扣5分，超时超过5分钟，终止考试；提前交卷，不加分。

2、独立完成，不得相互询问或讨论。

3、实验记录必须清晰。

如果实验记录需要修改，必须经监考老师同意后才能修改，私自修改以零分处理。

4、考试成绩为操作过程评分、测定结果评分及考试时间评分之和。

考试内容与要求：
1、稀释梯度（10－1、10－2两个稀释度）；
2、血球计数板计数（以10－2的稀释度计数）；
3、超声波破碎；
4、40min内完成。

发酵工实际操作技能考试评分记录表
酵母细胞的超声波破碎
扣分补充说明：每大项中的小项考核点除特殊说明外不重复扣分，在每大项中不可倒扣分。

考评员签名：、日期：
主考签名：日期：。

生物分离参考试题及答案

一、名词解释1•助滤齐I」：发酵工业生产中加入的能提高过滤速率的固体物质2.第二介稳区：力口入晶种结晶会生长，同时有新晶核产生3.滤饼4纳滤5凝聚二、填空题2.Coh n方程1.有机溶剂破碎法s—蛋白质溶解度，mol/L;I —离子强度c:离子浓度；乙离子化合价：盐析经验式2.KS盐析3细胞回收、细胞破碎、固液分离、初级分离、高级分离的常用方法三、简答题1.生物产品对产量和纯度的要求。

注重纯度的选择注重产量的选择即注重纯度又注重产量的选择2•发酵液的预处理方式。

加热法；调pH值；凝集和絮凝；加水稀释法；加入助滤剂法；加吸附剂或加盐法；热处理法；离子交换和活性炭吸附法等。

3.助滤剂的使用方式。

（1）在过滤器的滤布上预先涂上一层助滤剂，作为过滤介质使用，过滤结束后与滤布一起除去。

该法适用于对非常细小的或可压缩的低固形物含量（<5% ）的发酵液处理。

（2） a.将助滤剂按一定的比例均匀混入发酵液中，然后一起进入过滤器或离心机，使滤层形成疏松的滤饼，降低其可压缩性，使过滤顺畅。

b.将含助滤剂的发将夜通过压缩机，形成过滤介质层，然后在进行过滤。

该法适用于菌体细小，粘度较大的发酵液。

4•根据分离机理的不同固液分离可以分为哪两种。

过滤和离心5.结晶的前提和推动力？形成新相（固体）需要一定的表面自由能。

因此，溶液浓度达到饱和溶解度时，晶体尚不能析出，只有当溶质浓度超过饱和溶解度后，才可能有晶体析出。

溶液达到过饱和状态是结晶的前提；过饱和度是结晶的推动力。

四、综合题1•生物药物（抗生素）生物分离的选择依据。

生物分离方法的选择依据1•传统生物药物（抗生素）：根据具体条件，通过小实验决定，选择时应考虑两个因素。

（1）抗生素的理化性质：极性、酸碱性、溶解度等，了解其理化性质，通常利用纸层析和纸电泳的方法。

（2）抗生素的稳定性：要了解它在什么样的pH和温度范围易受破坏。

纸层析：抗生素在某一种溶剂中的Rf值大，表明它在该种溶剂中溶解度大；相反，如Rf值小，则溶解度小。

生物分离与纯化技术模拟试卷十二答案

生物分离与纯化技术模拟试卷十二答案装订线一、名词解释（每小题3分，共15分）1．反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到浓缩的效果，这种操作成为反渗透。

2．树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。

3．两性树脂：同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂4．流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流动相。

5．离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交换平衡。

二、单选题（每小题1分，共15分）1．其他条件均相同时，优先选用那种固液分离手段（B ） A. 离心分离 B 过滤 C. 沉降 D.超滤2．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH 为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A ） A ：正极移动；B ：负极移动；C ：不移动；D ：不确定。

3．影响电泳分离的主要因素（B ）A 光照B 待分离生物大分子的性质C 湿度D 电泳时间4．当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（ C ） A 、增大 B 、减小 C 、先增大，后减小 D 、先减小，后增大 5．关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，下列（A ）项是正确的叙述。

A 、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。

B 、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。

C 、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。

D 、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。

6．反渗透膜的孔径小于( C )A 0.02～10µmB 0.001～0.02µmC <2nmD < 1nm 7．凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（ B ）A 、凝胶排斥B 、凝胶吸附C 、柱床过长D 、流速过低 8．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A ） A 、粗且长的 B 、粗且短的 C 、细且长的 D 、细且短的9．在萃取液用量相同的条件下，下列哪种萃取方式的理论收率最高（ C ） A.单级萃取 B.三级错流萃取 C.三级逆流萃取 D.二级逆流萃取 10．用大孔树脂分离苷类常用的洗脱剂是（B ） A 、水 B 、含水醇 C 、正丁醇 D 、乙醚 E 、氯仿 11．不能用于糖类提取后的分离纯化的方法是（B ） A 、活性炭柱色谱法 B 、酸碱溶剂法C 、凝胶色谱法D 、分级沉淀法E 、大孔树脂色谱法12．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（ A ） A 、分离量大分辨率低的方法 B 、分离量小分辨率低的方法C 、分离量小分辨率高的方法D 、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 13．气相色谱柱主要有（C ）。

生物分离工程练习试题1

《生物分离工程》练习题绪论1.生物分离过程包括目标产物的提取、浓缩、纯化。

2.生物分离过程的显著特点是什么？1、条件温和2、安全性、卫生性要求高3、方法需要具有高选择性4、对原料高度浓缩3.评价一个分离过程的效率主要有三个标准,目标产物的浓缩程度、分离纯化程度、回收率。

4.图中F表示流速,c表示浓度；下标T和X分别表示目标产物和杂质。

C、P和W分别表示原料、产品和废料。

写出产品浓缩率m、分离因子α、回收率REC的计算公式。

书本第九页第一章细胞分离与破碎1.在细胞分离中,细胞的密度ρS越大,细胞培养液的密度ρL越小,则细胞沉降速率越大。

2.过滤中推动力要克服的阻力有过滤介质阻力和滤饼阻力,其中滤饼占主导作用。

3.B可以提高总回收率。

A.增加操作步骤B.减少操作步骤C.缩短操作时间D.降低每一步的收率4.重力沉降过程中,固体颗粒不受C的作用。

A.重力B.摩擦力C.静电力D.浮力5.过滤的透过推动力是D。

A.渗透压B.电位差C.自由扩散D.压力差6.在错流过滤中,流动的剪切作用可以B。

A.减轻浓度极化,但增加凝胶层的厚度B.减轻浓度极化,但降低凝胶层的厚度C.加重浓度极化,但增加凝胶层的厚度D.加重浓度极化,但降低凝胶层的厚度7.重力沉降过程中,固体颗粒受到重力,浮力,流体摩擦阻力的作用,当固体匀速下降时,三个力的关系平衡8.撞击破碎适用于D的回收。

A.蛋白质B.核酸C.细胞壁D.细胞器9.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。

10.管式和碟片式离心机各自的优缺点。

管式,优点:离心力较大缺点：沉降面积小,处理能力降低碟片式,优点：沉降面积大缺点：转速小,离心力较小11.单从细胞直径的角度,细胞直径越小,所需的压力或剪切力越大,细胞越难破碎12.细胞的机械破碎主要方法有高压匀浆、珠磨、喷雾撞击破碎、超声波破碎13.细胞的化学破碎技术包括酸碱处理、酶溶、化学试剂处理。

第二章初级分离1.防止蛋白质沉淀的屏障有蛋白质周围水化层和双电层。

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生物分离与纯化技术模拟试卷一
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一、名词解释（每小题3分，共15分） 1．质量作用定律： 2．干燥速率： 3．反渗析： 4．色谱技术： 5．超滤：
二、单选题（每小题1分，共15分） 1．HPLC 是哪种色谱的简称（）。

A ．离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱 2．盐析法沉淀蛋白质的原理是（） A.降低蛋白质溶液的介电常数 B.中和电荷，破坏水膜 C.与蛋白质结合成不溶性蛋白 D.调节蛋白质溶液pH 到等电点
3．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（） A ．离子交换色谱 B.亲和色谱 C.凝胶过滤色谱 D.反相色谱 4．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（） A ．离子交换色谱 B.亲和色谱 C.凝胶过滤色谱 D.反相色谱
5．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH 为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（） A ：正极移动；B ：负极移动；C ：不移动；D ：不确定。

6．下列哪一项是强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团（）
A 磺酸基团（-SO3 H ）
B 羧基-COOH
C 酚羟基C6H5OH
D 氧乙酸基-OCH2COOH 7．在液膜分离的操作过程中，（）主要起到稳定液膜的作用。

A 、载体 B 、表面活性剂 C 、增强剂 D 、膜溶剂
8．在液膜分离的操作过程中，（）主要起到稳定液膜的作用。

A 、载体 B 、表面活性剂 C 、增强剂 D 、膜溶剂 9．纯化酶时，酶纯度的主要指标是：（）
A .蛋白质浓度 B. 酶量 C .酶的总活力 D. 酶的比活力 10．结晶过程中，溶质过饱和度大小（）
A 、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度
B 、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度
C 、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度
D 、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度 11．发酵液的预处理方法不包括（） A. 加热 B 絮凝 C.离心 D. 调pH
12．液一液萃取时常发生乳化作用，如何避免（） A.剧烈搅拌 B 低温 C.静止 D.加热 13．那一种活性碳的吸附容量最小（） A.粉末活性碳 B 锦纶活性碳 C.颗粒活性碳 14．常用的紫外线波长有两种（）
A. 256nm 和365nm B254nm 和365nm C. 254nm 和367nm D. 256nm 和367nm 15．进行梯度洗脱，若用50g 吸附剂，一般每份洗脱液量常为（） A. 20mL B100mL C. 50mL D. 90mL 16．下列离子盐析作用强的是（）。

A. 磷酸钾
B. 硫酸钠
C. 硫酸镁
D. 磷酸铵
三、判断题（每小题1分，共10分）
1．助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。

（） 2．临界压力是液化气体所需的压力。

（）
3．生物物质中最常用的干燥方法是减压干燥。

（）
4．活性氧化铝可分三种类型：碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。

（）
5．蛋白质为两性电解质，改变pH 可改变其荷电性质，pH ﹥pI 蛋白质带正电。

（）
6．超临界流体温度不变条件下，溶解度随密度（或压力）的增加而增加，而在压力不变时，温度增加情况下，溶解度有可能增加或下降。

（） 7．用64%氯化锌溶液处理透析袋，使大分子也能通过膜孔。

（）
8．分离纯化极性大的分子（带电离子等）采用反相色谱（或正相柱）。

（）
9．渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种，适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和革兰氏阳性菌。

（） 10．发生乳化现象对萃取是有利的。

（×）
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四、填空题（每小题1分，共15分）
1．阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为（），（）和（）；其典型的活性基团分别有（），（），（）。

2．为使过滤进行的顺利通常要加入（）。

3．工业离心设备从形式上可分为（），（），（），等型式。

4．简单地说，离子交换过程实际上只有（），（）和（）三步。

5．典型的工业过滤设备有（）和（）。

6．在发酵液的预处理中，沉淀法可去除发酵液的杂质，其方法是：向钙离子中加入（）酸或（）盐，向镁离子中加入（）盐。

五、简答题（每小题7分，共35分） 1．溶剂萃取过程的机理是什么？
2．以羧酸吸附蛋白质为例，简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理。

3．简述盐析的原理及产生的现象。

4．简述过饱和溶液形成的方法。

5．简述生物分离过程的特点? 六、案例分析题（共10分）试述柱层析的基本操作过程。