生物分离与纯化技术模拟试卷九答案
生化分离技术 考试复习题库(含详细答案)
《生化分离》考试复习题库一、选择题1.下列不是超临界萃取工艺的方法是（）。
A 等温法B 等压法C 吸附法D 交换法2.影响絮凝效果的因素有很多，但不包括（）。
A 絮凝剂的浓度B 溶液pH值C 溶液含氧量D 搅拌速度和时间3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱，在化合物分离中，先被洗脱下来的为（）。
A 杂质B 小分子化合物C 大分子化合物D 两者同时下来4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（）。
A 增大B 减小C 先增大，后减小D 先减小，后增大5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是（）。
A 增大滤过面积B 降低料液温度C 加压或减压D 加入助滤剂6.下列方法中，哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法A 调节等电点B 降低温度C 添加表面活性物质D 添加助滤剂7.助滤剂应具有以下性质（）A 颗粒均匀、柔软、可压缩B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩C 粒度分布广、坚硬、不可压缩D 颗粒均匀、可压缩、易变形8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法，不包括（）A 沉淀法B 变性法C 吸附法D 萃取法9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是（）A 样品可被分离成一系列的样品组分区带B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质C 离心时间越长越好D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。
以下不属于助滤剂的是（）A 氯化钙B 纤维素C 炭粒D 硅藻土11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类，下列不属于机械法的是（）A 加入金属螯合剂B 高压匀浆法C 超声破碎法D 珠磨法12.萃取操作是利用原料液中各组分（）的差异实现分离的操作。
A 溶剂中的溶解度B 沸点C 挥发度D 密度13.两相溶剂萃取法的原理为：A 根据物质在两相溶剂中的分配系数不同B 根据物质的熔点不同C 根据物质的沸点不同D 根据物质的类型不同14.下列溶液不是双水相的是（）。
A PEG/葡聚糖B PEG/磷酸盐C PEG/硫酸铵D 磷酸盐/硫酸铵15.在萃取操作中，分离系数越小，组分（）分离。
生物分离与纯化技术模拟试卷九答案
生物分离与纯化技术模拟试卷九答案装订 线一、名词解释每小题3分,共15分1．离心分离技术：是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异,在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程; 2．物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应; 3．有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析; 4．平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子,亦称活性离子; 5．离子交换层析：是以离子交换剂为固定相,根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术; 二、单选题每小题1分,共15分 1．葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀C A.甲醇 B 乙醇 C.缓冲液 D.乙酸乙酯 2．不能用于固液分离的手段为CA.离心 B 过滤 C.超滤 D.双水相萃取 3．最常用的干燥方法有 DA 、常压干燥B 、 减压干燥C 、喷雾干燥D 、以上都是 4．物理萃取即溶质根据 B 的原理进行分离的 A.吸附 B.相似相溶 C 分子筛 D 亲和 5．适合小量细胞破碎的方法是 BA.高压匀浆法B.超声破碎法C.高速珠磨法D.高压挤压法 6．分配柱层析的基本操作错误D ; A 装柱分干法和湿法两种B 分配柱层析法使用两种溶剂,事先必须先使这两个相互相饱和C 用硅藻土为载体,需分批小量地倒入柱中,用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平D 分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分,或极性很相似的成分; 7．颗粒与流体的密度差越小,颗粒的沉降速度 A A.越小 B.越大 C.不变 D.无法确定8．“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质 B A ．极性溶剂 B ．非极性溶剂 C ．水 D ．溶剂 9．大孔树脂洗脱条件的说法,错误的是： A A 、最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸; B 、对弱酸性物质可用碱来解吸; C 、对弱碱性物质可用酸来解吸;D 、如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时,则常常仅用水洗就能解吸下来; 10．亲和层析的洗脱过程中,在流动相中减去配基的洗脱方法称作 D A 、 阴性洗脱 B 、剧烈洗脱 C 、正洗脱 D 、负洗脱 11．下列哪一项不是常用的滤布材料 C A. 法兰绒 B. 帆布C. 滤纸 D.斜纹布 12．阴树脂易受有机物污染,污染后,可用 B 处理A 柠檬酸B 10%NaCl+2%～5%NaOH 混合溶液C 氨基三乙酸D EDTA 13．HPLC 是哪种色谱的简称 C ;A ．离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱 14．适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是B ; A ．活性炭 B.氧化铝 C.硅胶 D.磷酸钙15．分离纯化早期,由于提取液中成分复杂,目的物浓度稀,因而易采用 A A 、分离量大分辨率低的方法 B 、分离量小分辨率低的方法C 、分离量小分辨率高的方法D 、各种方法都试验一下,根据试验结果确定 三、判断题每小题1分,共10分1．有机溶剂被细胞壁吸收后,会使细胞壁膨胀或溶解,导致破裂,把细胞内产物释放到水相中去;√ 2．向含有生化物质的水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂,能使生化物质沉淀析出;√ 3．等电点沉淀在实际操作中应避免溶液pH 上升至5以上;√4．在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠SDS,影响凝胶的形成;×5．当气体的温度超过其临界温度,压力超过临界压力之后,物质的聚集状态就介于气态和液态之间,成为超临界流体;√ 6．冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构,增加其亲水性和通透性来破坏细胞的;√7．盐析作用也能减少有机溶剂在水中的溶解度,使提取液中的水分含量减少;可以促使生化物质转入有机相从而提高萃取率;√ 8．氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析;√9．甲醇沉淀作用与乙醇相当,但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮都小,所以应用广泛;× 10．若两性物质结合了较多阳离子如Ca2+、Mg2+、Zn2+等,则等电点pH 升高;√装 订 线四、填空题每小题1分,共15分1．常用离心设备可分为离心沉降和离心过滤 两大类；2．根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同,可将吸附分为物理、化学、极性和交换吸附； 3．根据干燥曲线,物料干燥可分为恒速干燥阶段和降速干燥阶段 两个阶段；4．影响离子交换速度的因素有树脂粒度、交联度、溶液流速、温度、离子的大小、离子的化合价和离子浓度;五、简答题每小题7分,共35分 1．沉析溶剂选择主要应考虑以下因素;1、是否与水互溶,在水中是否有很大的溶解度；2、介电常数小,沉析作用强;3、对生物分子的变性作用小;4、毒性小,挥发性适中;2．吸附色谱分离化学成分的原理是什么简述硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭这四种吸附剂的主要用途和特点; 利用混合物中各成分在两相中吸附力的差异进行分离;硅胶可分离各类成分;氧化铝分离碱性或亲脂性成分;活性炭分离水溶性成分;聚酰胺是氢键吸附,适合分离黄酮成分 3．试列举改变透析袋孔径大小的方法;1用64%氯化锌溶液处理15分钟,可使膜孔径增大,使大分子也能通过膜孔; 2纤维素膜用27%乙酸吡啶溶液处理,会使孔径减小;3将透析袋内盛满水,在两端进行拉伸,会使透析袋变薄,加快透析速率；如果不向袋内注入水而充满空气在两端拉伸,膜的孔径会变小,使有些溶质不能透过膜; 4．常见的超滤装置有哪些; 1无搅拌式装置 2搅拌或振动式装置 3小棒超滤器 4浅道系统超滤装置 5中空纤维系统超滤器5．根据溶解度不同,蛋白质有几种分离纯化方法;利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一;影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH 值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等; 1等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小;单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全,常与其他方法配合使用;2盐析沉淀 中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显着的影响;一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀;盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性;有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀;通常单价离子的中性盐NaCl 比二价离子的中性盐NH42SO4对蛋白质溶解度的影响要小; 3低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中,蛋白质分子间极性基团的静电引力增加,而水化作用降低,促使蛋白质聚集沉淀;此法沉淀蛋白质的选择性较高,且不需脱盐,但温度高时可引起蛋白质变性,故应注意低温条件;一般在0～40℃之间,多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加；40～50℃以上,多数蛋白质不稳定,并开始变性;因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件; 六、案例分析题共10分 简述辅酶Q10制备的工艺路线;汽油猪心肌渣 皂化 速冷 皂化物 萃取 水洗 减压浓缩 过滤 层析 减压浓缩 结晶 辅酶Q10结晶。
生物分离技术题库(带答案)
题库名称：生物分离技术一、名词解释1．质量作用定律：化学反应的速率与参加反应的物质的有效质量成正比。
2．凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。
3．分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。
4．干燥速率：干燥时单位干燥面积，单位时间内漆画的水量。
5．CM-Sephadex C-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。
6．絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程7．过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。
8．萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的9．吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。
10．反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。
11．离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离12．离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高13．离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。
14．固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。
15．助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤16．沉降：是指当悬浮液静置时，密度较大的固体颗粒在重力的作用下逐渐下沉，这一过程成为沉降17．色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。
生物分离工程题目及答案
一、单选题1、凝聚与絮凝的主要原理为（）。
A.破坏胶体粒子的稳定性B.重力沉降C.筛分作用D.水化层作用我的答案：A2、凝集是指发酵液中的胶体粒子相互凝集成为直径为（）左右块状絮凝体的过程。
A.1mmB.3 mmC.5mmD.7mm我的答案：A3、生物悬浮液由（）组成。
A.水，培养基B.代谢产物C.生物碎片D.A，B和C我的答案：D4、下列物质不属于凝聚剂的有（）。
A.明矾B.石灰C.聚丙烯类D.硫酸亚铁我的答案：C5、其他条件均相同时，优先选用哪种固液分离手段（）A.离心分离B.过滤C.沉降D.超滤我的答案：B6、不能用于固液分离的手段为（）A.离心B.过滤C.双水相萃取D.超滤我的答案：D7、等密度区带离心的密度梯度中最大密度（）待分离的目标产物的密度。
A.大于B.小于C.等于D.以上均可我的答案：A8、差速区带离心的密度梯度中最大密度（）待分离的目标产物的密度。
A.大于B.小于C.等于D.以上均可我的答案：B9、下列哪项不属于发酵液的预处理（）A.加热B.调pHC.絮凝和凝聚D.离心我的答案：D10、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（）A. 过滤B.萃取C.离子交换D.蒸馏我的答案：C11、过滤的透过推动力是（）。
A.渗透压B.电位差C.自由扩散D.压力差我的答案：D12、颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（）A.越小B.越大C.不变D.无法确定我的答案：A二、填空题1、根据目标产物存在的位置：分为____________或____________。
根据目标产物存在的形式：分为____________或____________。
我的答案：第1空：胞内第2空：胞外第3空：活性产物第4空：包含体2、固液分离的主要方法有______和______。
发酵液预处理中，体积较小的细菌和酵母菌，采用________分离；细胞体积较大的丝状体（霉菌放线菌），采用________分离。
我的答案：第1空：离心分离第2空：过滤分离第3空：离心第4空：过滤3、为使过滤进行的顺利通常要加入__________。
生物分离参考试题及答案
一、名词解释1•助滤齐I」：发酵工业生产中加入的能提高过滤速率的固体物质2.第二介稳区：力口入晶种结晶会生长，同时有新晶核产生3.滤饼4纳滤5凝聚二、填空题2.Coh n方程1.有机溶剂破碎法s—蛋白质溶解度，mol/L;I —离子强度c:离子浓度；乙离子化合价：盐析经验式2.KS盐析3细胞回收、细胞破碎、固液分离、初级分离、高级分离的常用方法三、简答题1.生物产品对产量和纯度的要求。
注重纯度的选择注重产量的选择即注重纯度又注重产量的选择2•发酵液的预处理方式。
加热法；调pH值；凝集和絮凝；加水稀释法；加入助滤剂法；加吸附剂或加盐法；热处理法；离子交换和活性炭吸附法等。
3.助滤剂的使用方式。
（1）在过滤器的滤布上预先涂上一层助滤剂，作为过滤介质使用，过滤结束后与滤布一起除去。
该法适用于对非常细小的或可压缩的低固形物含量（<5% ）的发酵液处理。
（2） a.将助滤剂按一定的比例均匀混入发酵液中，然后一起进入过滤器或离心机，使滤层形成疏松的滤饼，降低其可压缩性，使过滤顺畅。
b.将含助滤剂的发将夜通过压缩机，形成过滤介质层，然后在进行过滤。
该法适用于菌体细小，粘度较大的发酵液。
4•根据分离机理的不同固液分离可以分为哪两种。
过滤和离心5.结晶的前提和推动力？形成新相（固体）需要一定的表面自由能。
因此，溶液浓度达到饱和溶解度时，晶体尚不能析出，只有当溶质浓度超过饱和溶解度后，才可能有晶体析出。
溶液达到过饱和状态是结晶的前提；过饱和度是结晶的推动力。
四、综合题1•生物药物（抗生素）生物分离的选择依据。
生物分离方法的选择依据1•传统生物药物（抗生素）：根据具体条件，通过小实验决定，选择时应考虑两个因素。
（1）抗生素的理化性质：极性、酸碱性、溶解度等，了解其理化性质，通常利用纸层析和纸电泳的方法。
（2）抗生素的稳定性：要了解它在什么样的pH和温度范围易受破坏。
纸层析：抗生素在某一种溶剂中的Rf值大，表明它在该种溶剂中溶解度大；相反，如Rf值小，则溶解度小。
生化分离技术 考试复习题库(含详细答案)
《生化分离》考试复习题库一、选择题1.下列不是超临界萃取工艺的方法是（）。
A 等温法B 等压法C 吸附法D 交换法2.影响絮凝效果的因素有很多，但不包括（）。
A 絮凝剂的浓度B 溶液pH值C 溶液含氧量D 搅拌速度和时间3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱，在化合物分离中，先被洗脱下来的为（）。
A 杂质B 小分子化合物C 大分子化合物D 两者同时下来4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（）。
A 增大B 减小C 先增大，后减小D 先减小，后增大5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是（）。
A 增大滤过面积B 降低料液温度C 加压或减压D 加入助滤剂6.下列方法中，哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法A 调节等电点B 降低温度C 添加表面活性物质D 添加助滤剂7.助滤剂应具有以下性质（）A 颗粒均匀、柔软、可压缩B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩C 粒度分布广、坚硬、不可压缩D 颗粒均匀、可压缩、易变形8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法，不包括（）A 沉淀法B 变性法C 吸附法D 萃取法9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是（）A 样品可被分离成一系列的样品组分区带B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质C 离心时间越长越好D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。
以下不属于助滤剂的是（）A 氯化钙B 纤维素C 炭粒D 硅藻土11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类，下列不属于机械法的是（）A 加入金属螯合剂B 高压匀浆法C 超声破碎法D 珠磨法12.萃取操作是利用原料液中各组分（）的差异实现分离的操作。
A 溶剂中的溶解度B 沸点C 挥发度D 密度13.两相溶剂萃取法的原理为：A 根据物质在两相溶剂中的分配系数不同B 根据物质的熔点不同C 根据物质的沸点不同D 根据物质的类型不同14.下列溶液不是双水相的是（）。
A PEG/葡聚糖B PEG/磷酸盐C PEG/硫酸铵D 磷酸盐/硫酸铵15.在萃取操作中，分离系数越小，组分（）分离。
生物分离工程题目及答案
一、单选题1、凝聚与絮凝的主要原理为（）。
A.破坏胶体粒子的稳定性B.重力沉降C.筛分作用D.水化层作用我的答案：A2、凝集是指发酵液中的胶体粒子相互凝集成为直径为（）左右块状絮凝体的过程。
A.1mmB.3 mmC.5mmD.7mm我的答案：A3、生物悬浮液由（）组成。
A.水，培养基B.代谢产物C.生物碎片D.A，B和C我的答案：D4、下列物质不属于凝聚剂的有（）。
A.明矾B.石灰C.聚丙烯类D.硫酸亚铁我的答案：C5、其他条件均相同时，优先选用哪种固液分离手段（）A.离心分离B.过滤C.沉降D.超滤我的答案：B6、不能用于固液分离的手段为（）A.离心B.过滤C.双水相萃取D.超滤我的答案：D7、等密度区带离心的密度梯度中最大密度（）待分离的目标产物的密度。
A.大于B.小于C.等于D.以上均可我的答案：A8、差速区带离心的密度梯度中最大密度（）待分离的目标产物的密度。
A.大于B.小于C.等于D.以上均可我的答案：B9、下列哪项不属于发酵液的预处理（）A.加热B.调pHC.絮凝和凝聚D.离心我的答案：D10、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（）A. 过滤B.萃取C.离子交换D.蒸馏我的答案：C11、过滤的透过推动力是（）。
A.渗透压B.电位差C.自由扩散D.压力差我的答案：D12、颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（）A.越小B.越大C.不变D.无法确定我的答案：A二、填空题1、根据目标产物存在的位置：分为____________或____________。
根据目标产物存在的形式：分为____________或____________。
我的答案：第1空：胞内第2空：胞外第3空：活性产物第4空：包含体2、固液分离的主要方法有______和______。
发酵液预处理中，体积较小的细菌和酵母菌，采用________分离；细胞体积较大的丝状体（霉菌放线菌），采用________分离。
我的答案：第1空：离心分离第2空：过滤分离第3空：离心第4空：过滤3、为使过滤进行的顺利通常要加入__________。
生物分离原理试题及答案
生物分离原理试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 下列哪种物质不适合作为生物分离过程中的稳定剂？A. 氯化钠B. 硫酸铵C. 尿素D. 甘油答案：C2. 凝胶色谱法中，分子大小与洗脱速度的关系是？A. 分子越大，洗脱越快B. 分子越小，洗脱越快C. 分子大小与洗脱速度无关D. 分子越大，洗脱越慢答案：D3. 电泳法中，带电粒子的迁移速度主要取决于？A. 粒子的大小B. 粒子的电荷量C. 粒子的密度D. 粒子的电荷量和电场强度答案：D4. 离心分离法中，沉降速度最快的是？A. 细胞B. 病毒C. 核酸D. 蛋白质答案：A5. 离子交换色谱法中，离子的洗脱顺序是？A. 阳离子先洗脱B. 阴离子先洗脱C. 电荷量多的先洗脱D. 电荷量少的先洗脱答案：C6. 亲和色谱法中，配体与目标蛋白的结合是？A. 非特异性的B. 特异性的C. 可逆的D. 不可逆的答案：B7. 反相色谱法中，流动相的极性与固定相的极性关系是？A. 流动相极性大于固定相极性B. 流动相极性小于固定相极性C. 流动相极性等于固定相极性D. 流动相极性与固定相极性无关答案：A8. 等电聚焦电泳法中，蛋白质的迁移方向是？A. 向正极迁移B. 向负极迁移C. 向等电点迁移D. 不迁移答案：C9. 疏水相互作用色谱法中，疏水性最强的蛋白质会？A. 最先被洗脱B. 最后被洗脱C. 不被洗脱D. 无法确定答案：B10. 膜分离技术中，根据膜孔径的大小分类，不包括以下哪一项？A. 微滤B. 超滤C. 纳滤D. 反渗透答案：D二、填空题（每题2分，共20分）1. 生物分离技术中常用的稳定剂包括______、______、______等。
答案：氯化钠、硫酸铵、甘油2. 凝胶色谱法中，分子的洗脱速度与分子的______成反比。
答案：大小3. 电泳法中，带电粒子的迁移速度与粒子的______和电场强度成正比。
答案：电荷量4. 离心分离法中，沉降速度与粒子的______成正比。
生物分离工程部分习题和答案
2 生物分离工程在生物技术中的地位？答：生物技术的主要目标产物是生物物质的高效生产，而分离纯化是生物产品工程的重要环节，而且分离工程的质量往往决定整个生物加工过程的成败，因此，生物分离纯化过程在生物技术中极为重要。
3 分离效率评价的主要标准有哪些？各有什么意义？（ppt）答：根据分离目的的不同，评价分离效率主要有3个标准：以浓缩为目的：目标产物浓缩程度（浓缩率m）以纯度为目的：目标产物最终纯度（分离因子a）以收率为目的：产品收得率（%）5 在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？(ppt)答：<1>、目标产物性质及其共存杂质的特性 <2>、充分考虑目标产物商业价值<3>、考虑生物加工过程自身规模 <4>、采用步骤次序相对合理<5>、尽可能采用最少步骤 <6>、产品稳定性与物性<7>、产品规格与型式 <8>、生产过程中废水等排放6 下游加工过程的发展趋势有哪些方面？（ppt）答：成本控制和质量控制第二章发酵液预处理一解释名词凝聚剂：让不稳定的胶体微粒（或者凝结过程中形成的微粒）聚合在一起形成集合体的过程中所投加的试剂的统称。
过滤：利用多孔介质（如滤布、微孔膜、致密膜）截流悬浮液中的固体粒子，进行液固分离的过程。
离心：在离心力作用下，利用固体和液体之间的密度差达到沉降分离目的。
细胞破碎：利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术包含体：指细胞或细菌中高表达的蛋白质(也可以汇同其他细胞成分)聚集而成的不溶性颗粒。
二简答题1 为什么要进行发酵液的预处理？常用处理方法有哪几种？答：提高过滤速度与过滤质量改变发酵液性质(黏度↓、颗粒 、颗粒稳定性↓) 去除部分杂质使产物转入到易处理的相中（通常是液相）方法：加热、调节、pH、凝聚、絮凝2 凝集与絮凝过程有何区别？如何将两者结合使用？常用的絮凝剂有哪些？答：凝集：在中性盐作用下，由于双电层排斥电位降低使胶体体系不稳定的现象。
生物分离工程题库答案
生物分离工程题库答案库程》题《生物分离工一、填充题精P 纯化和I 产物分离，P 1. 生物产品的分离包括R 不溶物的去除，；制等；离心过滤和 2. 发酵液常用的固液分离方法有等型式；碟片式套筒式， 3. 离心设备从形式上可分为管式，，超滤膜微滤膜，4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为；反渗透膜纳滤膜和两大类；和葡聚糖凝胶离子交换剂离子交换纤维素5. 多糖基离子交换剂包括；螺旋式和中空纤维式板式，管式，6. 工业上常用的超滤装置有吸附物和盐的浓度，溶液pH值，影响吸附的主要因素有7. 吸附质的性质，温度；的浓度与吸附剂的用量可（活性基）和（载体），联结骨架上的功能基团离子交换树脂由8. 网络骨架组成。
交换离子提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂（9.；合所必需的自由基）（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作交联剂甲叉双丙烯酰胺的作用是；用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链）（催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的增速剂TEMED的作用是；）聚合；pH 和温度影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，10；和晶种起晶法自然起晶法，刺激起晶法在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有11.三步；和化学交换反应 12.简单地说离子交换过程实际上只有外部扩散、内部扩散qc0在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循/doc/284186455.htmlngmuir吸附方程，其形式为?qK?c14.反相高效液相色谱的固定相是疏水性强的，而流动相是极性强的；常用的固定相有C 辛8烷基和十八烷基C ；常用的流动相有乙腈和异丙醇；1815.超临界流体的特点是与气体有相似的粘度和扩散系数，与液体有相似的密度；16.离子交换树脂的合成方法有加聚法和逐步共聚法两大类；17.常用的化学细胞破碎方法有渗透冲击法，酶消化法，增溶法，脂溶法和碱处理法；18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其等电点的不同；19.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有静态洗脱和动态洗脱；20.晶体质量主要指晶体大小，形状和纯度三个方面；21.亲和吸附原理包括配基固定化，吸附样品和样品解析三步；22.根据分离机理的不同，色谱法可分为吸附、离交、亲和、凝胶过滤色谱23.盐析实验中用于关联溶质溶解度与盐浓度的Cohn方程为lgS=β-KI；当在一定pH和温度下，s改变体系离子强度（盐浓度）进行盐析的方法称为Ks盐析法；当在一定离子强度下，改变pH和温度进行盐析称为β盐析法；24.蛋白质分离常用的色谱法有免疫亲和色谱法，疏水作用色谱法，金属螯合色谱法和共价作用色谱法；电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS）的目的是消除各种待分离蛋白的分子形状和电荷差异，而将分子量作为分离的依据；26.常用的蛋白质沉析方法有等电点沉析法，盐析法和有机溶剂沉析；27.常用的工业絮凝剂有有机高分子聚合物和无机高分子聚合物两大类；28.典型的工业过滤设备有板框压滤机、垂直叶片式硅藻土过滤机和真空转鼓过滤机；29.常用离心设备可分为离心沉降设备和离心过滤设备两大类；30.根据物化理论，萃取达到平衡时，溶质在萃取相和萃余相中的化学势相等；31.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附和交换吸附；32.影响亲和吸附的因素有配基浓度、空间位阻、配基与载体的结合位点、微环境和载体孔径；33.阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强酸性阳离子交换树脂、弱酸性和中SOH、、；；其典型的活性基团分别有强酸性COOH?)OH?PO(3234.阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性、弱碱性和中强碱性；其典型的活??RN(CH)OH、、兼有以上两种基团；性基团分别有NH?332 Sepharose是阴离子交换树脂，其活性基团是；)CH(NHH??OC??25252Sepharose是阳离子交换树脂，其活性基团是；COOHO?CH?237.影响离子交换选择性的因素有离子水合半径、离子价、离子强度、溶液pH 、有机溶剂、和交联度、膨胀度、分子筛；38.离子交换操作一般分为静态和动态两种；39.蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于静电斥力作用和水化膜层；40.盐析用盐的选择需考虑盐析作用要强、盐析用盐需有较大的溶解度、受温度影响小、盐必须是惰性的、来源丰富、经济等几个方面的因素；41.影响有机溶剂沉淀的因素有温度、溶液pH 、离子强度、样品浓度和金属离子的助沉作用；42.常用的超滤装置有板式、管式、螺旋式和中空纤维式；43.依据电泳原理，现有电泳分离系统可分为移动界面电泳、区带电泳和稳态电泳；44.依据建立pH梯度的原理不同，等电聚焦（IEF）可分为载体两性电解质电泳和同相电泳；45.双相电泳中，第一相是等电聚焦；第二相是 SDS-PAGE ；46.结晶包括三个过程过饱和溶液的形成、晶核的形成和晶体生长；47.过饱和溶液的形成方法有热饱和溶液冷却、部分溶剂蒸发、真空蒸发冷却法、化学反应结晶法和盐析法；48.晶核自动形成时，体系总的吉布斯自由能的改变ΔG由表面过剩吉布斯自由能ΔG和体积过S剩吉布斯自由能ΔG 组成；V49.物料中所含水分可分为机械结合水、物化结合水和化学结合水三种；50.根据干燥曲线，物料干燥可分为恒速干燥和降速干燥两个阶段；51.工业生产中常用的助滤剂有硅藻土和珍珠岩；52.液－液萃取从机理上分析可分为物理萃取和化学萃取两类；53.基本的离子交换过程由外部扩散、内部扩散和化学交换组成；54.吸附包括将待分离的料液通入吸附剂中，吸附质被吸附到吸附剂表面，料液流出和解吸四个过程组成；55.大孔网状吸附剂有非极性，中等极性和极性三种主要类型；56.亲和吸附剂表面连接的“手臂链”的作用是降低空间位阻的影响；57.根据修饰基团的不同，离子交换树脂可分为强酸性阳离子交换树脂，强碱性阴离子交换树脂，弱酸性阳离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂等四大类；58.根据聚合方法，离子交换树脂的合成方法可分为加聚法和缩聚法两类；59.根据聚合单体，离子交换树脂的合成方法可分为共聚法和均聚法两类；60.影响离子交换速度的因素有颗粒大小、交联度、温度、离子化合价、离子大小、搅拌速率和溶液浓度；61.分配色谱的基本构成要素有载体、固定相和流动相；62.反相色谱常用的流动相有乙腈和异丙醇等；63.反相色谱常用的固定相有 C 和 C 等；188系列的离子交换树脂的载体是琼脂糖凝胶注：葡聚糖凝胶（sephadex系列）；65.分子筛色谱（凝胶色谱）的主要应用是脱盐、生物大分子的分离；66.因重复被删67.根据膜材料的不同，常用的膜可分为合成有机聚合物膜和无机材料膜两类；68.根据膜结构的不同，常用的膜可分为对称性膜、不对称膜和复合膜三类；69.强制膜分离过程是指超滤和反渗透过程；70.电泳系统的基本组成有电泳槽、电源、灌胶模具、外循环恒温系统、凝胶干燥器、电泳转移装置、电泳洗脱仪和凝胶扫描和摄录装置；71.电泳后，样品的主要染色方法有考马斯亮蓝和银染法；－PAGE电泳中，SDS的加入是为了消除不同样品分子间形状和电荷的差异；加入二硫叔糖醇的目的是强还原剂，破坏半胱氨酸间的二硫键；73.电泳过程中，加入溴酚兰的目的是指示蛋白的迁移位置；74.固体可分为晶体和无定形固体两种状态；75.因重复被删76.结晶的前提是溶液达到过饱和状态；结晶的推动力是过饱和度；77.根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括溶质通过扩散作用穿过靠近晶体表面的一个滞流层，从溶液中转移到晶体的表面、到达晶体表面的溶质长入晶面，使晶体增大，同时放出结晶热和结晶热传递回到溶液中三个过程；78.影响晶体生长的主要因素有杂质、搅拌和温度；压力超临界流体萃取过程中溶质与溶剂分离的常用方法有和79. ；改变温度80.常用于描述吸附过程的数学模型有langmuir吸附模型和freundlich吸附模型，其形式qc n0；和分别为?q Kcq?K?c二. 讨论题1.请结合图示简述凝胶排阻色谱（分子筛）的分离原理；答：凝胶排阻色谱的分离介质（填料）具有均匀的网格结构，其分离原理是具有不同分子量的溶质分子，在流经柱床是，由于大分子难以进入凝胶内部，而从凝胶颗粒之间流出，保留时间短；而小分子溶质可以进入凝胶内部，由于凝胶多孔结构的阻滞作用，流经体积变大，保留时间延长。
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生物分离与纯化技术模拟试卷九答案
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一、名词解释（每小题3分，共15分）
1．离心分离技术：是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。
2．物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。
3．有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。
4．平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。
5．离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。
二、单选题（每小题1分，共15分） 1．葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀（C ） A.甲醇 B 乙醇 C.缓冲液 D.乙酸乙酯 2．不能用于固液分离的手段为（C ） A.离心 B 过滤 C.超滤 D.双水相萃取 3．最常用的干燥方法有（ D ）
A 、常压干燥
B 、 减压干燥
C 、喷雾干燥
D 、以上都是 4．物理萃取即溶质根据（ B ）的原理进行分离的 A.吸附 B.相似相溶 C 分子筛 D 亲和 5．适合小量细胞破碎的方法是（ B ）
A.高压匀浆法
B.超声破碎法
C.高速珠磨法
D.高压挤压法 6．关于分配柱层析的基本操作错误(D )。
A 装柱分干法和湿法两种
B 分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和
C 用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平
D 分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相似的成分。
7．颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（ A ） A.越小 B.越大 C.不变 D.无法确定
8．“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（ B ） A ．极性溶剂 B ．非极性溶剂 C ．水 D ．溶剂 9．关于大孔树脂洗脱条件的说法，错误的是： （ A ） A 、最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸。
B 、对弱酸性物质可用碱来解吸。
C 、对弱碱性物质可用酸来解吸。
D 、如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时，则常常仅用水洗就能解吸下来。
10．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中减去配基的洗脱方法称作 （ D ） A 、 阴性洗脱 B 、剧烈洗脱 C 、正洗脱 D 、负洗脱 11．下列哪一项不是常用的滤布材料 （ C ） A. 法兰绒 B. 帆布C. 滤纸 D.斜纹布
12．阴树脂易受有机物污染，污染后，可用（ B ）处理
A 柠檬酸
B 10%NaCl+2%～5%NaOH 混合溶液
C 氨基三乙酸
D EDTA 13．HPLC 是哪种色谱的简称（ C ）。
A ．离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱 14．适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是（
B ）。
A ．活性炭 B.氧化铝 C.硅胶 D.磷酸钙
15．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用 （ A ） A 、分离量大分辨率低的方法 B 、分离量小分辨率低的方法
C 、分离量小分辨率高的方法
D 、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 三、判断题（每小题1分，共10分）
1．有机溶剂被细胞壁吸收后，会使细胞壁膨胀或溶解，导致破裂，把细胞内产物释放到水相中去。
（√ ） 2．向含有生化物质的水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂，能使生化物质沉淀析出。
（√ ） 3．等电点沉淀在实际操作中应避免溶液pH 上升至5以上。
（√ ）
4．在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠（SDS ），影响凝胶的形成。
（× ）
5．当气体的温度超过其临界温度，压力超过临界压力之后，物质的聚集状态就介于气态和液态之间，成为超临界流体。
（√ ） 6．冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构，增加其亲水性和通透性来破坏细胞的。
（√ ）
7．盐析作用也能减少有机溶剂在水中的溶解度，使提取液中的水分含量减少。
可以促使生化物质转入有机相从而提高萃取率。
（√ ） 8．氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。
（√ ）
9．甲醇沉淀作用与乙醇相当，但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮都小，所以应用广泛。
（×） 10．若两性物质结合了较多阳离子（如Ca2+、Mg2+、Zn2+等），则等电点pH 升高。
（√ ）
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四、填空题（每小题1分，共15分）
1．常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤） 两大类；
2．根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为（物理）、（化学）、（极性）和（交换）吸附； 3．根据干燥曲线，物料干燥可分为（恒速干燥阶段）和（降速干燥阶段） 两个阶段； 4．影响离子交换速度的因素有（树脂粒度）、（交联度）、（溶液流速）、（温度）、（离子的大小）、（离子的化合价）和（离子浓度）。
五、简答题（每小题7分，共35分） 1．沉析溶剂选择主要应考虑以下因素。
（1）、是否与水互溶，在水中是否有很大的溶解度；（2）、介电常数小，沉析作用强。
（3）、对生物分子的变性作用小。
（4）、毒性小，挥发性适中。
2．吸附色谱分离化学成分的原理是什么？简述硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭这四种吸附剂的主要用途和特点。
利用混合物中各成分在两相中吸附力的差异进行分离。
硅胶可分离各类成分。
氧化铝分离碱性或亲脂性成分。
活性炭分离水溶性成分。
聚酰胺是氢键吸附，适合分离黄酮成分 3．试列举改变透析袋孔径大小的方法。
（1）用64%氯化锌溶液处理15分钟，可使膜孔径增大，使大分子也能通过膜孔。
（2）纤维素膜用27%乙酸吡啶溶液处理，会使孔径减小。
（3）将透析袋内盛满水，在两端进行拉伸，会使透析袋变薄，加快透析速率；如果不向袋内注入水而充满空气在两端拉伸，膜的孔径会变小，使有些溶质不能透过膜。
4．常见的超滤装置有哪些。
（1）无搅拌式装置 （2）搅拌或振动式装置 （3）小棒超滤器 （4）浅道系统超滤装置 （5）中空纤维系统超滤器
5．根据溶解度不同，蛋白质有几种分离纯化方法。
利用蛋白质溶解度的差异是分离蛋白质的常用方法之一。
影响蛋白质溶解度的主要因素有溶液的pH 值、离子强度、溶剂的介电常数和温度等。
1)等电点沉淀蛋白质在等电点时溶解度最小。
单纯使用此法不易使蛋白质沉淀完全，常与其他方法配合使用。
2)盐析沉淀 中性盐对蛋白质胶体的稳定性有显著的影响。
一定浓度的中性盐可破坏蛋白质胶体的稳定因素而使蛋白质盐析沉淀。
盐析沉淀的蛋白质一般保持着天然构象而不变性。
有时不同的盐浓度可有效地使蛋白质分级沉淀。
通常单价离子的中性盐(NaCl)比二价离子的中性盐[(NH4)2SO4]对蛋白质溶解度的影响要小。
3)低温有机溶剂沉淀法在一定量的有机溶剂中，蛋白质分子间极性基团的静电引力增加，而水化作用降低，促使蛋白质聚集沉淀。
此法沉淀蛋白质的选择性较高，且不需脱盐，但温度高时可引起蛋白质变性，故应注意低温条件。
一般在0～40℃之间，多数球状蛋白的溶解度随温度的升高而增加；40～50℃以上，多数蛋白质不稳定，并开始变性。
因此对蛋白质的沉淀一般要求低温条件。
六、案例分析题（共10分） 简述辅酶Q10制备的工艺路线。
汽油
猪心肌渣 皂化 速冷 皂化物 萃取 水洗 减压浓缩 过滤 层析 减压浓缩 结晶 辅酶Q10结晶。