人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)
低密度脂蛋白正常值 世界卫生组织标准
低密度脂蛋白正常值世界卫生组织标准低密度脂蛋白（Low-Density Lipoprotein，LDL）是体内的一种脂质载体，负责将胆固醇从肝脏转运到全身细胞。
在适当的情况下，适量的LDL对身体是有益的，但当其水平过高时，会增加动脉粥样硬化和心血管疾病的风险。
因此，了解LDL的正常值是非常重要的。
世界卫生组织（World Health Organization，WHO）已经对LDL 的正常值进行了划分。
根据WHO的标准，成人的LDL-C水平可分为以下几个范围：1.低风险：LDL-C水平低于100 mg/dL（2.59 mmol/L）在这个范围内，人们的心血管疾病风险较低。
2.中风险：LDL-C水平介于100 mg/dL（2.59 mmol/L）至129 mg/dL（3.34 mmol/L）之间在这个范围内，人们的心血管疾病风险较中等。
3.高风险：LDL-C水平介于130 mg/dL（3.36 mmol/L）至189 mg/dL（4.89 mmol/L）之间在这个范围内，人们的心血管疾病风险较高。
4.非常高风险：LDL-C水平高于190 mg/dL（4.90 mmol/L）在这个范围内，人们的心血管疾病风险非常高。
需要注意的是，这些标准是一般适用于所有成年人，对于有心血管疾病家族史或其他健康风险因素的人群可能有所不同。
因此，在进行LDL-C水平评估时，医生还会根据个人情况进行综合判断。
降低高LDL-C水平的方法主要包括以下几个方面：1.饮食调整：限制高胆固醇、高饱和脂肪酸和高盐食物的摄入，适量增加富含纤维素、不饱和脂肪酸和抗氧化剂的食物，如蔬菜、水果、全谷类食品、鱼类等。
2.运动锻炼：适度的有氧运动，如快走、慢跑、游泳等，能够提高身体代谢率，帮助降低LDL-C水平。
3.改善生活习惯：戒烟、限制饮酒、保持合理的体重以及控制血压等，都有助于降低LDL-C水平。
4.药物治疗：对于LDL-C水平较高且饮食和生活习惯调整无效的患者，医生可能会考虑使用药物，如他汀类药物，来降低胆固醇水平。
普罗布考对脑梗死急性期伴代谢综合征患者血清氧化型低密度脂蛋白水平的影响
普罗布考对脑梗死急性期伴代谢综合征患者血清氧化型低密度脂蛋白水平的影响马瑞付英1杜继臣李继来王培福（北京航天中心医院神经内科，北京100049）〔摘要〕目的探讨普罗布考对脑梗死急性期伴代谢综合征患者血清氧化型低密度脂蛋白（oxLDL ）水平的影响及临床疗效。
方法收集急性脑梗死伴代谢综合征患者60例，随机分为对照组和治疗组各30例。
两组均给予常规治疗，治疗组加用普罗布考，分别于治疗前和治疗后1月及6月测定血脂和oxLDL 水平，并以神经功能评分评定两组临床疗效。
结果对照组与治疗组总显效率分别为76.67%和93.33%，两者相比差异显著（P ＜0.05）；治疗后1个月及6个月治疗组TC 、TG 、LDL-C 及oxLDL 水平与治疗前相比明显降低（P ＜0.05），而HDL-C 明显增高（P ＜0.05）。
结论普罗布考通过降低脑梗死伴代谢综合征患者急性期血清oxLDL 水平来减少神经元的损伤，提高临床疗效。
〔关键词〕普罗布考；脑梗死；代谢综合征；氧化低密度脂蛋白自身抗体〔中图分类号〕R743〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202（2012）11-2264-02；doi ：10.3969/j.issn.1005-9202.2012.11.0221北京大学航天临床医学院神经内科第一作者：马瑞（1977-），男，主治医师，硕士，主要从事神经内科疾病的诊治工作。
Najarian 等〔1〕报道代谢综合征（MS ）患者脑卒中发病率约为无MS 患者的2倍，对其发病机制的研究及基于此基础上的治疗性干预显得尤为重要。
脑梗死的主要病因之一为动脉粥样硬化，而在动脉粥样硬化形成与发展的过程中氧化修饰低密度脂蛋白（oxLDL ）起重要作用。
有研究显示脑梗死急性期患者血清oxLDL 水平明显增高，且与病灶大小及病情程度正相关〔2〕，而以oxLDL 为抗原产生的oxLDL-Ab 可确切反映LDL 在体内的氧化修饰情况。
氧化低密度脂蛋白与肾小球硬化的研究进展
氧化低密度脂蛋白与肾小球硬化的研究进展张婕【摘要】氧化应激是介导肾小球硬化的重要机制之一.近年来氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)在肾小球硬化及间质纤维化中发挥的作用越来越受到关注,再度成为研究热点.文章综述了近年来关于Ox-LDL的形成及其在肾病进展中临床意义,以进一步理解Ox-LDL诱导肾小球硬化的发生、发展机制,以及针对Ox-LDL诱导肾纤维化的一些新的治疗措施.%Oxidative stress is one of the important pathogenic factors for glomerulosclerosis. Recently, the role of oxidized low-density lipoprotein (Ox-LDL) in the development of glomerulosclerosis and interstitial fibrosis has attracted more and more concerns. This article reviewed the formation of Ox-LDL, its clinical significance in the progress of nephropathy and current understanding of the pathogenic mechanisms of lipid-mediated glomerulosclerosis, and the fibrogenic signaling cascades triggered by Ox-LDL. In addition, therapeutic strategies to prevent the development of OxLDL-mediated glomerulosclersis is also discussed.【期刊名称】《临床儿科杂志》【年(卷),期】2011(029)008【总页数】3页(P793-795)【关键词】氧化应激;肾小球硬化;氧化低密度脂蛋白【作者】张婕【作者单位】南京军区南京总医院,南京大学医学院临床学院,江苏南京,210002【正文语种】中文【中图分类】R725高脂血症为原发性肾病综合征的一个显著特征，脂质代谢紊乱可导致肾脏损伤并加速肾脏疾病的慢性进展。
氧化低密度脂蛋白与冠心病关系的探讨
氧化低密度脂蛋白与冠心病关系的探讨（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）作者：帕丽旦·马木提，付玉华，廖洪利，田刚【摘要】目的探讨氧化低密度脂蛋白（OX LDL）在冠心病动脉粥样硬化（AS）发生发展中的作用及其相关性。
方法测定所有研究对象血压、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血糖（S）等指标，采用不连续密度梯度离心及体外LDL氧化修饰法检测稳定型心绞痛（SAP）组30例，不稳定型心绞痛（UAP）组32例，急性心肌梗死（AMI）组28例，正常对照组38例等的OX LDL水平。
结果 AMI组分别与正常对照组、SAP组、UAP组比较，OX LDL水平有显著性差别（P＜0.01），SAP组和UAP组分别与正常对照组比较，OX LDL水平无显著性差异（P＞0.05），冠心病患者OX LDL与TC、TG、LDL成正相关，与HDL成负相关。
结论 CHD患者OX LDL水平可作为早期诊断心肌梗死的一个敏感指标，冠心病脂代谢异常是发生AS的重要危险因素之一。
【关键词】冠心病；动脉粥样硬化；氧化低密度脂蛋白冠心病（CHD）的发生发展与许多因素有关。
除已明确的高血压、糖尿病、高血脂、吸烟和高龄等因素外［1］，目前众多学者认为氧化低密度脂蛋白（OX LDL）的水平是冠心病发病的一个独立危险因素，其与冠心病的发生、发展和预后有一定的关系，已引起广泛关注。
本研究目的是探讨OX LDL在CHD发生发展中的作用及其相关性。
1.一般资料选择2006年12月至2007年8月我院收治冠心病（CHD）患者90例，其中男50例，女40例，年龄35 ～71岁，平均54.6±8.1岁，均符合WHO 2002年关于CHD诊断标准。
按疾病类型分为3组：稳定型心绞痛（SAP）组30例，男、女各15例，年龄54.3±8.7岁；不稳定型心绞痛（UAP）组32例，男19例，女13例，年龄52.3±8.9岁；急性心肌梗死（AMI）组28例，男16例，女12例，年龄55.3±8.6岁。
氧化低密度脂蛋白的检测方法
氧化低密度脂蛋白的检测方法氧化低密度脂蛋白（oxLDL）是低密度脂蛋白（LDL）在体内经过氧化后的产物，与动脉粥样硬化和心血管疾病的发展有密切关系。
因此，检测oxLDL的水平对于心血管疾病的预防和治疗具有重要意义。
以下是几种常用的oxLDL检测方法：1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：这是检测oxLDL最常用的方法之一。
通过使用特异性抗体识别和结合oxLDL，然后通过酶标记的二抗和底物的颜色变化来定量oxLDL的浓度。
ELISA方法具有较高的特异性和灵敏度，适合于临床和研究实验室的需要。
2. 免疫荧光法：通过使用特异性抗体，这些抗体对oxLDL有很高的亲和力，并且被荧光染料标记。
当抗体与oxLDL结合时，可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到荧光信号，从而实现对oxLDL的定性和定量分析。
3. 流式细胞术：这种方法可以用来检测血液样本中含有oxLDL的细胞。
通过使用针对oxLDL的荧光标记抗体，可以在流式细胞仪上对单个细胞进行分析，从而评估oxLDL的水平和其在细胞中的分布。
4. 电化学发光法：这是一种灵敏度高、特异性强的检测方法，利用电化学发光标记的抗体与oxLDL的结合来测量oxLDL的浓度。
该方法适合于高通量筛选和大规模临床样本的分析。
5. 高效液相色谱法（HPLC）：HPLC可以用于分离和定量oxLDL中的特定氧化产物，如氧化脂质和胆固醇氧化物。
这种方法需要复杂的样品准备和专业的操作，但提供了关于oxLDL氧化程度的详细信息。
6. 直接检测氧化标志物：还可以通过检测与LDL氧化相关的标志物，如丙二醛修饰的LDL（MDA-LDL）、4-羟基壬烯醛（4-HNE）修饰的LDL等，间接评估oxLDL的水平。
每种方法都有其优点和局限性，选择适合的方法通常取决于实验目的、样本类型、设备可用性以及成本等因素。
在临床和研究应用中，多种方法的结合使用可以提供更全面的信息，有助于更好地理解oxLDL在心血管疾病中的作用。
阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白刺激下脂肪细胞分泌功能的影响
阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白刺激下脂肪细胞分泌功能的影响谢湘竹;赵水平;于碧莲;钟巧青【摘要】目的观察阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)刺激下3T3-L1脂肪细胞分泌功能的影响,并探讨其作用机制.方法 3T3-L1脂肪细胞促分化成熟后,oxLDL刺激脂肪细胞,给予不同浓度的阿托伐他汀干预,收集细胞,测定脂肪细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度、TNF-α和PPAR-γ mRNA表达水平及核因子-κB(NF-κB)活性.结果 oxLDL刺激使3T3-L1脂肪细胞分泌TNF-α、TNF-α mRNA表达水平明显增高.阿托伐他汀呈浓度依赖性抑制oxLDL刺激下TNF-α分泌、TNF-α mRNA表达和NF-κB活化,并增强PPAR-γ mRNA表达.1.0及10.0μM阿托伐他汀干预组TNF-α水平、TNF-α mRNA表达低于oxLDL刺激组(P＜0 05),10.0 μM阿托伐他汀干预组PPAR-γ mRNA表达高于oxLDL组,NF-κB活性低于oxLDL刺激组(P＜0 05);TNF-α水平、TNF-α mRNA表达、NF-κB活性和PPAR-γ mRNA表达10.0和0.1 μM阿托伐他汀干预组比较差异均有统计学意义(P＜0 05).结论阿托伐他汀能抑制oxLDL刺激下3T3-L1脂肪细胞TNF-α分泌、TNF-α mRNA表达和NF-κB活性,增强PPAR-γ mRNA表达,PPAR-γ与NF-κB可能介导了他汀类药物对脂肪细胞炎性过程的调节.【期刊名称】《解放军医药杂志》【年(卷),期】2012(024)005【总页数】4页(P4-7)【关键词】脂细胞;脂蛋白类;LDL;阿托伐他汀;肿瘤坏死因子α;核因子-κB;过氧化物酶体增殖物激活受体【作者】谢湘竹;赵水平;于碧莲;钟巧青【作者单位】100853,北京,解放军总医院南楼心血管一科;410011,长沙,中南大学湘雅二医院心内科;410011,长沙,中南大学湘雅二医院心内科;410011,长沙,中南大学湘雅二医院心内科【正文语种】中文【中图分类】R972.6;R977.6目前认为，炎性反应参与了动脉粥样硬化的发生发展过程［1］。
氧化低密度脂蛋白定量测定试剂盒说明书
氧化低密度脂蛋白定量测定试剂盒（酶联免疫法）说明书【产品名称】通用名称：氧化低密度脂蛋白定量测定试剂盒（酶联免疫法）商品名称：氧化低密度脂蛋白定量测定试剂盒（酶联免疫法）英文名称：Requirement for Oxidized Low Density Lipoprotein Detection Kit （ELISA）【包装规格】96人份/盒；48人份/盒。
【预期用途】本品为体外定量检测血液中氧化低密度脂蛋白（Oxidized Low Density Lipoprotein，OxLDL）含量的试剂。
【检验原理】本试验采用双抗体夹心直接酶联免疫法。
用抗人OxLDL抗体预包被微孔板，使样品中的OxLDL与固相化在微孔板上的抗人OxLDL抗体结合后，将未反应的组分洗脱，再加入酶标记抗体进行酶底物显色，在450nm波长下测定光吸收值，并根据在同一微孔板内反应的校准品制作的剂量-反应曲线，求得样品中OxLDL的含量。
【主要组成成份】见表1。
表1 本试剂盒主要组成成份编号组成规格数量1 固相抗体微孔板96孔/ 48孔1块2 OxLDL校准品0，1，2，4，8，16U/ml 各1瓶3 质控物高、低各1瓶4 酶标记抗体100μl1支5 浓缩洗涤液（21×）30ml 1瓶6 浓缩稀释液（5×）10ml 1瓶7 样品反应液12ml 1瓶8 底物液A 6ml 1瓶9 底物液B 6ml 1瓶10 终止液6ml 1瓶【储存条件及有效期】1、储存条件：2~8℃避光保存。
2、有效期：12个月。
3、试剂复溶及开瓶/开袋后储存条件及有效期见表2。
表2 试剂盒组份复溶、配制及开瓶/开袋后储存条件及有效期组份效期及储存条件固相抗体微孔板（开袋后未使用板条）1个月，2~8℃，于封口的铝箔袋中OxLDL校准品（复溶后）1周，2~8℃质控物（复溶后）1周，2~8℃酶标记抗体（稀释后）1天，2~8℃，避光洗涤液（1×）1个月，2~8℃稀释液（1×）1个月，2~8℃底物液（配制后）新鲜配制后使用酶标记抗体（未稀释）12个月，2~8℃，避光洗涤液、稀释液（未稀释）12个月，2~8℃底物液A、B 12个月，2~8℃样品反应液、终止液12个月，2~8℃【适用仪器】1、带有单波长检测能力的酶标仪，有450nm滤光片，增益应小于20。
高血压并发阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清氧化低密度脂蛋白水平的变化
第一作者： 王秀川（ 1967-） ，男，副主任医师，主要从事呼吸内科疾病的 诊治。
1. 2 诊断标准 高血压的诊断符合 1999 年《中国高血压防治 指南》〔3〕中诊断标准。OSAHS 的诊断符合 2002 年中华医学会 耳鼻咽喉科分会〔4〕制定标准，即每夜 7 h 睡眠过程中呼吸暂停 及低通气反复发作在 30 次以上，或 AHI≥5 次 / h。OSAHS 又 根据 AHI 不同分为： 轻度 OSAHS： 5 次 / h≤AHI ＜ 20 次 / h； 中度 OSAHS： 20 次 / h≤AHI ＜ 40 次 / h； 重度 OSAHS： AHI≥40 次 / h。 1. 3 指标检测 AHI 采用澳大利亚 Sullivan Autoset Plus Ⅱ睡眠 监测系统进行监测。监测内容包括： 二导脑电图、下颌肌电图、 二导眼动图、心电图、口鼻气流、胸腹运动、血氧饱和度、鼾声、体 位及腿动。晨醒 5 min 内采集空腹肘静脉血 5 ml，EDTA 抗凝。 采用 BECKMAN 全自动生化仪检测总胆固醇（ TC） 、高密度脂蛋 白胆固醇（ HDL-C） 、甘油三酯（ TG） 、LDL-C 水平。采用 ELISA 法检测 ox-LDL，试剂盒为上海荣盛生物制剂公司提供。 1. 4 统计学方法 应用 SPSS15. 0 统计学分析软件进行分析， ox-LDL 呈偏态分布，经对数转换成正态分布后进行分析，计量 资料用x ± s表示，两组间比较采用 t 检验，多组间比较采用单因 素方差分析。计数资料采用 χ2 检验或 Fisher 确切概率法。采 用逐步 Logistic 回归分析影响高血压患者 OSAHS 严重程度的 因素。
氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化进展
氧化型低密度脂蛋白与动脉粥样硬化进展动脉粥样硬化是从危险因素开始的终身疾病，逐渐导致亚临床疾病的发展，后建立明显的心血管疾病（CVD）。
而动脉粥样硬化导致的血管闭塞症是最广泛和最严重的健康问题之一。
氧化低密度脂蛋白（oxLDL）通过促进动脉壁中的炎症反应和脂质沉积，在动脉粥样硬化形成中起重要作用。
本综述阐述了oxLDL 作为CVD生物标志物的价值。
标签：oxldl；动脉粥样硬化；生物标记物；脂质过氧化预防和治疗心血管疾病是世界上最重要的公共卫生问题之一。
由于心血管（CV）事件發生在没有确定危险因素的人群中，所以需要借助于筛选和管理CVD的其他临床工具。
其中，生物标志物是CV风险评估的重要补充。
循环生物标志物是极为重要的，因为它们通常易于测量并且通常是可再现的。
OxLDL 是一种与CVD有关的循环生物标志物，已被列为许多急性或慢性炎性疾病的独立危险因素[1]。
在这里，我们讨论OxLDL在动脉粥样硬化形成中的作用，及该生物标志物在CVD管理和风险评估中的价值。
低密度脂蛋白（LDL）是胆固醇对自身组织的主要载体。
LDL的主要组分是甘油三酯和胆固醇脂，因其含有丰富的多不饱和脂肪酸，在一些诱导因素下，如缺血、药物、吸烟、糖尿病、高血压等激发后，产生大量氧自由基，在血管内皮下很容易被氧化修饰成oxLDL。
oxLDL已作为动脉粥样硬化的独立危险因素，是一种较LDL更为重要的致动脉粥样硬化脂蛋白，在动脉粥样硬化的形成及发展中都发挥了重要作用。
血管表面内皮细胞结构得完整性对于维持血管的正常功能具有重要的作用及意义。
oxLDL引起血管内皮细胞损伤和功能障碍是启动动脉粥样硬化发生发展的重要环节。
oxLDL可通过其细胞毒性作用（目前研究认为钙离子浓度升高可能介导oxLDL对内皮细胞的损伤作用）直接损伤血管表面的内皮细胞，导致内皮细胞间间隙增大及通透性增强，有利于脂质成分通过内皮层进入内皮下层导致脂质沉积，引起动脉粥样硬化的发生。
氧化低密度脂蛋白测定方法的探讨
氧化低密度脂蛋白测定方法的探讨（作者：__________ 单位： ___________ 邮编： ___________ ）作者：汪咏新，热阳古力•努尔麦麦提，廖洪利，姑丽娜尔•依明，田刚【摘要】目的探讨建立共扼双烯法（CD ）测定氧化低密度脂蛋白（OX J LDL）对临床诊断的指导意义。
方法采用改进分离低密度脂蛋白的方法，应用CD法与国内通用的ELISA法平行对比，经检测急性心肌梗死（AMI）、不稳定性心绞痛（UAP ）、稳定心绞痛（SAP）患者各30例，并与健康人30例比较。
结果ELISA法检测OX[LDL 的结果与CD法之间无相关性，各疾患组血清中LDL氧化形成CD 的延迟期显著短于对照组（P均V 0.01 ）。
结论阻断LDL的氧化可能成为预防或治疗此类疾患的手段之一。
【关键词】氧化低密度脂蛋白；共扼双烯法；ELISA法国外近年研究表明，促动脉硬化的低密度脂蛋白（LDL ）可在体内由多种因素形成氧化低密度脂蛋白（O X LDL），从而明显增强其促动脉硬化及促凝的作用。
体内Ox]LDL升高与缺血性心、脑血管病及多种老年病关系密切，已成为国内外医学关注的焦点问题。
本研究建立了体外LDL氧化产物共扼双烯（CD）检测法[1],并对急性心肌梗死（AMI）、不稳定性心绞痛（UAP）、稳定心绞痛（SAP）患者各30 例、及健康人30例的氧化易感性进行分析，以探讨应用此方法检测OX]LDL的可靠性。
资料与方法1. 观察对象急性心肌梗死（AMI）患者30例，不稳定性心绞痛（UAP）患者30 例,稳定心绞痛（SAP）患者30例，均符合WHO1999年诊断标准。
取体检及化验指标均正常的30例健康人作为对照组，各组对象均男女各半，年龄在50〜65岁，均同时空腹静脉取血，冷冻备用。
2. 主要试剂CuS04分析纯；pH 7.4的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）;溴化钾（天津化学试剂三厂出品）；ELISA测定Ox[LDL试剂盒；氨基黑10B （AR北京化学试剂厂）；油红0” MERCK ）。
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人氧化低密度脂蛋白（OxLDL ）酶联免疫检测
试剂盒使用说明书
使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测人氧化低密度脂蛋白（OxLDL），只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
用途：用于人血清、血浆及相关液体样本中氧化低密度脂蛋白（OxLDL ）的测定。
工作原理
本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人氧化低密度脂蛋白（OxLDL ）的水平。
向预先包被了人氧化低密度脂蛋白（OxLDL ）单克隆抗体的酶标孔中加入氧化低密度脂蛋白（OxLDL ），温育；洗涤后，加入HRP标记过的氧化低密度脂蛋白（OxLDL ）抗体。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人氧化低密度脂蛋白
（OxLDL ）的浓度呈正相关。
试剂盒组成
需要而未提供的试剂和器材
1. 37 C恒温箱。
2. 标准规格酶标仪。
3. 精密移液器及一次性吸头
4. 蒸馏水，
5. 一次性试管
6. 吸水纸
注意事项
1. 从2-8 C取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
酶标包被板开封后
如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差
3. 建议所有标准品、样本都做双份检测。
如标本中待测物质含量过高，请先用样品稀释液稀
释一定倍数（n倍）后再按说明书操作进行测定，计算时请最后乘以总稀释倍数
（X n x5）。
4. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5. 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
7. 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。
根据需要，重复此过程数次自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中
标本要求
1 •不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP活性。
2•标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20 C保存，但应避免反复冻融
操作程序
1.标准品的稀释：（本试剂盒提供原倍标准品一支，用户请按照说明自行在小试管中倍比稀
2. 分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品孔中加入稀释好的标准品50卩；在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40 pl，然后再加待测样品10 d （样品最终稀释度为5倍）。
轻轻晃动混匀，37E温育30分钟。
3. 弃去液体，甩干，每孔加满30倍稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍
干。
如此重复5次，拍干。
4. 每孔加入酶标试剂50 pl，空白孔除外。
轻轻晃动混匀，37C温育30分钟。
5. 弃去液体，甩干，每孔加满30倍稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍
干。
如此重复5次，拍干。
6. 每孔先加入显色剂A50 d，再加入显色剂B50 d，轻轻震荡混匀，37C避光显色10分钟.
7. 取出酶标板，每孔加终止液50 d，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
8. 测定：以空白孔调零，在450nm波长下测量各孔的吸光度值（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
9. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD
值在回归方程上计算出对应的样品浓度。
也可以使用各种应用软件来计算。
应记住由
于样品稀释了的，其实际浓度应该乘以总稀释倍数。
操作程序总结：
C 洗板5次，加入酶标试剂，37 反应30分钟 加入终止液 15分钟之内读0
D 值 计算 检测范围： 5(_g/L — 200 规格： 96人/盒 保存： 2-8 C 有效期： 6 个月（2-8。