丛枝菌根侵染率研究
丛枝菌根真菌 侵染 新方法

丛枝菌根真菌侵染新方法丛枝菌根真菌是一种重要的土壤微生物,对植物生长和生态系统的健康具有重要作用。
然而,传统的丛枝菌根真菌侵染方法存在一些问题,如复杂操作、耗时长、易感染其他细菌等。
近年来,科研人员提出了一种新的丛枝菌根真菌侵染方法,该方法能够提高侵染效率、减少对植物的伤害、保护环境。
本文将介绍这种新方法的原理、操作步骤以及其在实际应用中的效果。
新方法的原理是利用丛枝菌根真菌与植物根系之间的互利共生关系,通过优化培养基组成和条件,提高丛枝菌根真菌侵染植物根系的效率。
首先,科研人员从土壤中分离出高效的丛枝菌根真菌菌株,并通过鉴定确保其纯度和活性。
然后,根据菌株的特性,优化培养基的pH值、温度、养分浓度等因素,以提供最适宜的环境条件。
同时,通过添加一些生长因子和激素,促进丛枝菌根真菌菌株的生长和分枝。
操作步骤如下:首先,准备好所需的培养基和试管。
培养基可以根据具体需求选择不同的配方,如PDA培养基、MS培养基等。
然后,将试管灭菌处理,将培养基倒入试管中,待其凝固。
接下来,将丛枝菌根真菌菌株接种到试管中,将试管倒立放置于恒温培养箱中,控制适当的温度和湿度。
一段时间后,观察菌株生长情况,确认丛枝菌根真菌菌株已经生长到一定程度。
在实际应用中,新方法具有以下优点:首先,新方法能够提高丛枝菌根真菌侵染植物根系的效率。
传统方法中,侵染效率较低,需要较长时间,而新方法能够在较短时间内实现高效侵染,提高工作效率。
其次,新方法能够减少对植物的伤害。
传统方法中,侵染过程中易导致植物受到伤害,影响植物生长。
而新方法能够通过优化培养基组成和条件,减少对植物的伤害,保证植物正常生长。
最后,新方法能够保护环境。
传统方法中,侵染过程中易感染其他细菌,对环境造成污染。
而新方法能够通过优化培养基组成和条件,减少对其他细菌的感染,保护环境。
综上所述,新的丛枝菌根真菌侵染方法通过优化培养基组成和条件,提高了侵染效率、减少了对植物的伤害、保护了环境。
武夷山洋庄茶区水仙茶树丛枝菌根真菌多样性调查

武夷山洋庄茶区水仙茶树丛枝菌根真菌多样性调查李国平;盛丹尼【期刊名称】《武夷学院学报》【年(卷),期】2022(41)9【摘要】为调查武夷山市洋庄茶区水仙茶树丛枝真菌(AMF)侵染特征及AMF多样性,采用醋酸-墨水法测定水仙茶树AMF侵染率,应用湿筛-倾斜蔗糖离心法对根际土壤中的AMF进行分离鉴定。
结果表明:水仙茶树AMF侵染率在12%~100%,平均侵染率达68.4%,土壤类型对茶树根系的AMF侵染有一定影响,老丛水仙与一般水仙的AMF侵染率无显著差异(P﹥0.05)。
武夷山市洋庄茶区茶树AMF资源较为丰富,从各样地根际土中共鉴定出3属26种AMF,其中球囊霉属16种,无梗囊霉属9种,盾巨孢囊霉属1种;聚丛球囊霉、明球囊霉、宽柄球囊霉、木薯球囊霉、粘屑球囊霉和光壁无梗囊霉的分布频度均大于50%,是常见种,其中光壁无梗囊霉的分布频度89.3%,为优势种。
不同采样地茶树根际的AMF物种丰度(SR)表现出较大的差异。
AMF群落Sφrenson相似性分析表明,水仙茶树根际土壤AMF群落构成与土壤类型有关,而与茶树生长年龄无关;老丛水仙与一般水仙茶树在AMF侵染率和AMF群落构成方面均无显著差异,说明两者茶品质上的差异与AMF无关。
【总页数】7页(P1-7)【作者】李国平;盛丹尼【作者单位】武夷学院生态与资源工程学院【正文语种】中文【中图分类】S154.39;Q914.83【相关文献】1.广西木薯主产区丛枝菌根真菌孢子多样性调查研究2.贵州茶树丛枝菌根真菌资源及其种属的形态特征3.茶树丛枝菌根真菌的研究进展4.海南橡胶树丛枝菌根真菌调查5.华南主要树木丛枝菌根真菌物种多样性调查研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
五种染色剂对生姜根系丛枝菌根(AM)真菌的染色效果

五种染色剂对生姜根系丛枝菌根(AM)真菌的染色效果汪茜龙艳艳*李冬萍张金莲陈廷速(广西农业科学院微生物研究所,广西南宁530007)摘要:研究菌根对生姜的侵染作用具有重要的应用意义。
在盆栽灭菌条件下,利用丛枝菌根(AM)对生姜进行接种实验,研究五种染色剂(酸性品红、台酚蓝、苏丹红Ⅳ、苯胺蓝、墨水)对生姜根系丛枝菌根真菌的染色效果。
结果表明:5%醋酸墨水染色液(派克纯黑书写墨水Quink)的染色效果最佳,根皮层细胞内AM真菌的菌丝、泡囊、孢子等结构清晰可见,并且能够明确地分辨AM 真菌与其它未知真菌,根的染色效果可以保存长久。
墨水染色操作简便、低毒性、成本低廉、染色效果极佳,适用于生姜根系AM真菌的染色和制片观察。
关键词:丛枝菌根;醋酸墨水;染色效果The Effects of five stains on arbuscular mycorrhizal fungistaining results in ginger rootsWANG Qian, LONG Yan-yan*, LI Dong-ping, ZHANG Jin-lian, CHENTing-su(Microbiology Research Institute,Guangxi Academy of Agricultural Sciences,Guangxi Nanning530007,China)Abstract: Arbuscular mycorrhizal(AM) formation in plant roots of ginger infection was studied in pot cultures under sterilized condition, the effects of five stains(acid fuchsin, trypan blue, Sudan Ⅳ, aniline blue and ink-vinegar) on arbuscular mycorrhizal fungi staining results in ginger roots were studied. The results showed that the best stain was in 5% ink-vinegar solutions ( Parker black writing ink, Quink), arbuscules of the AM fungi in root cortex were clearly visible and the distinctions between AM and other unidentified fungi could be noticed under a compound microscope. Ink-vinegar solutions should provided a smiple, low toxic and inexpensive technique for staining AM fungi in cleared root for ginger with excellent staining results.作者简介:汪茜(1984—),女,湖北武汉人,硕士,助理研究员,主要从事作物土传病害与土壤微生物互作相关机理研究;E-mail:********************通讯作者:龙艳艳(1984—),女,博士,助理研究员,主要从事AM真菌分子技术研究;E-mail:***********************基金项目:广西农业科学院科技发展基金和基本科研业务费项目Key Words: arbuscular mycorrhiza; ink- vinegar; staining results丛枝菌根( Arbuscular mycorrhiza,简称AM) 真菌作为生态系统中重要的一员,广泛分布于自然界各生态系统中。
丛枝菌根真菌对植物生长及对废弃矿山修复的研究

丛枝菌根真菌对植物生长及对废弃矿山修复的研究发布时间:2021-11-08T06:14:25.388Z 来源:《科学与技术》2021年6月第17期作者:李子辰[导读] 近几年来,丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhiza fungi, AMF)在草地植被和废弃矿山恢复重建中的应用受到广泛关注。
李子辰(河北建设集团安装工程有限公司河北保定 071000)摘要:近几年来,丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhiza fungi, AMF)在草地植被和废弃矿山恢复重建中的应用受到广泛关注。
AMF 与陆地上80%植物形成共生关系。
AMF从植物中获取自身所需要的能量,同时帮助植物吸收N、P等矿质营养元素,改善植物的品质,提高产量,修复矿区重金属污染物。
草地植物的生长时期的不同也会影响到AMF对其生长的作用。
本文重点从养分状况、植物修复矿区重金属污染角度综述AMF对草地植物生长的影响,并对未来的工作进行了展望。
旨在能够对未来草地的补播建植以及退化草地的恢复重建提供指导。
关键词:丛枝菌根真菌;废弃矿山、养分吸收、物候期、重金属菌根是真菌与植物根系形成的互惠共生体[1],是自然界中一种普遍的植物共生现象。
丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhiza fungi, AMF)是一种内生的菌根真菌[1],也是现存最古老的无性真核生物之一[2]。
大量研究表明,丛枝菌根真菌存在于生态系统的多种生境中,可以为植物生长提供高达80%的P,研究表明,AMF和植物的互惠共生是建立在营养物质互换的基础上:宿主植物通过光合作用向AMF提供菌丝和孢子生长所需要的碳和能量 [3];与此同时,AMF帮助宿主植物吸收矿质养分,促进植物生长发育、提高植物抗逆性和适应性[4]。
与AMF 形成共生关系后,宿主植物分配给AMF自身4%—20%的碳水化合物和相当量的脂质,AMF将其所吸收的绝大部分矿质营养输送给宿主。
丛枝菌根真菌侵染根系的过程与机理研究进展

丛枝菌根真菌侵染根系的过程与机理研究进展作者:岳辉,刘英来源:《湖北农业科学》 2015年第19期岳辉,刘英(西安科技大学测绘科学与技术学院,西安710054)摘要:丛枝菌根是土壤中的菌根真菌与植物形成的一种真菌-植物联合共生体,目前研究较为成熟的是在种群和群落水平上,主要应用在园艺、土地复垦、森林及环境修复等方面。
近年来,在细胞水平和分子水平上对菌根真菌-植物共生体的研究取得了较大进展。
综述了国内外在菌根真菌侵染根系过程和相关机理的研究进展,并指出今后仍需在分子水平上继续对丛枝菌根真菌侵染根系的机理进行深入研究。
关键词:丛枝菌根真菌;侵染根系;机理中图分类号:Q949.32;S154.34文献标识码:A文章编号:0439-8114(2015)19-4657-04DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.19.001ResearchProgressintheProcessandMechanismofArbuscularMycorrhizalFungiColonizingRootsYUEHui,LIUYing(CollegeofGeomatics,Xi’anUniversityofScienceandTechnology,Xi’an710054,China)Abstract:Arbuscularmycorrhizalfungiisakindofmycorrhizalplantswhichformedcombinedsymbiontsbymycorrhizalfungiinthesoilfungiandplant.Presentstudywaslimitedinthepopulationandcommunitylevel,mainlyinhorticulture,landreclamation,forestandenvironmentalrestoration.Researchprogresswasalsomadeatthecellularlevelandmolecularlevel.Processandrelatedmechanismofmycorrhizalfungiinfectingrootwerereviewed.Futurestudyonthemechanismofarbuscularmycorrhizalfungiinfectingrootshouldbecontinued.Keywords:arbuscularmycorrhizafungi;colonizingroot;mechanism收稿日期:2015-02-12基金项目:国家自然科学基金项目(41401496);西安科技大学培育基金项目(201306);西安科技大学博士启动基金项目(2014QDJ061)作者简介:岳辉(1983-),男,山东淄博人,讲师,博士,主要从事环境修复研究,(电话)13720559861(电子信箱)13720559861@163.com。
云南部分地区湿地植物的丛枝菌根初报

云南部分地区湿地植物的丛枝菌根初报
云南部分地区湿地植物的丛枝菌根初报
用碱解离、酸性品红染色法对昆明、澄江、建水、通海、石屏、东川和禄劝等地的15个科32种湿地植物的丛枝菌根状况进行了调查,共发现有11种植物形成丛枝菌根,占34%.从湿地植物根际土壤中分离、鉴定出分属于4个属的丛枝菌根真菌共16种,无梗囊霉属(Acaulospora)和球囊霉属(Glomus)是湿地土壤中的优势类群(94%).摩西球囊霉(G.mosseae)占孢子总数的88%,是湿地土壤中的优势种.
作者:王凯赵之伟WANG Kai ZHAO Zhi-Wei 作者单位:王凯,WANG Kai(中山大学)
赵之伟,ZHAO Zhi-Wei(云南大学生物资源保护与利用国家重点实验室培育基地,云南,昆明,650091)
刊名:云南植物研究ISTIC PKU英文刊名:ACTA BOTANICA YUNNANICA 年,卷(期):2006 28(4) 分类号:Q949 关键词:湿地植物丛枝菌根感染率感染程度。
丛枝菌根(AM)真菌对植物营养代谢的影响研究进展

丛枝菌根(AM)真菌对植物营养代谢的影响研究进展摘要丛枝菌根(AM)是菌根中分布最广泛、最普遍的一类。
丛枝菌根真菌因其具有增加植物对矿质营养的吸收、改善植物生长状况、提高作物产量、改善品质等特性受到全世界普遍关注。
对近期国内外相关研究成果进行归纳总结,阐述了丛枝菌根(AM)真菌改善植物碳素营养(C)、氮素营养(N)、磷素营养(P)和其他矿质营养(K、Cu、Zn、Mn等)的效应及可能机制,以期为AM 生物技术在农业生产上的应用提供一个更为可靠的理论依据。
关键词丛枝菌根(AM)真菌;植物;碳素营养;氮素营养;磷素营养;影响;进展中图分类号S144 文献标识码A文章编号1007-5739(2008)15-0010-04菌根是植物根系与一类土壤真菌形成的互惠共生体,绝大多数植物都具有菌根。
其中丛枝菌根(Arbuscular myco-rrhizas,AM)是球菌门真菌侵染植物根系形成的共生体,大部分真菌产生孢囊,故将形成的孢囊(Vesicular-arbuscular myco rrhizes,V AM)简称为从枝菌根(AM)。
丛枝菌根是菌根中分布最广泛、最普遍的一类,丛枝菌根真菌能够促进宿主对土壤中矿质养分的吸收,调节宿主体内的代谢活动,减少水分胁迫,增强植物的抗逆性,促进植物生长,增加作物产量,改善作物品质。
正是由于AM真菌对植物生长发育产生的诸多有益作用而受到世界的普遍关注,特别是在AM真菌改善植物碳素营养和矿质营养方面[1]。
研究证明,一定条件下接种AM真菌,能够促进植物对土壤中磷、锌、铜的吸收和利用,对氮、钾、镁、硫、锰等吸收也具有一定的作用,并促进植物生长[2]。
以下主要是对AM真菌改善植物碳素营养、氮素营养、磷素营养及其他元素营养的效应及机制作一个归纳,并就丛枝菌根的益处提出AM生物技术在农业生产上的应用潜力。
1AM真菌与植物碳素营养1.1AM真菌改善植物碳素营养的效应接种AM真菌改善植物碳素营养的结论是毋庸置疑的。
丛枝菌根真菌对植物抗旱性研究进展

640-653草 业 科 学第 38 卷第 4 期4/2021PRATACULTURAL SCIENCE Vol.38, No.4DOI: 10.11829/j.issn.1001-0629.2020-0495喻志,梁坤南,黄桂华,杨光,周再知,林明平. 丛枝菌根真菌对植物抗旱性研究进展. 草业科学, 2021, 38(4): 640-653.YU Z, LIANG K N, HUANG G H, YANG G, ZHOU Z Z, LIN M P. Research progress on the mechanisms of arbuscular mycorrhizal fungi on drought resistance in plants. Pratacultural Science, 2021, 38(4): 640-653.丛枝菌根真菌对植物抗旱性研究进展喻 志1, 2,梁坤南1,黄桂华1,杨 光1,周再知1,林明平1(1. 中国林业科学研究院热带林业研究所 / 国家林业和草原局热带林业研究重点实验室,广东 广州 510520;2. 南京林业大学林学院,江苏 南京 210037)摘要:植物作为固着生物,采取多种策略应对各种外界刺激和胁迫环境,其策略之一就是与丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)建立共生关系。
AMF可与80%以上的陆地植物形成共生关系,促进植物生长发育,提高植物抗旱性。
AMF增强植物的抗旱性机制主要包括促进土壤团粒结构形成、改善根系构型、提高植物吸收水分能力、增强植物营养摄取、提高植物光合能力及水分利用效率、降低植物氧化损伤、强化渗透调节能力、调节内源激素水平及诱导相关基因的表达。
本文从形态、生理生化及基因表达等层面综述了近年来国内外有关AMF提高植物抗旱性方面的研究进展,并提出当前研究存在的问题及今后研究的建议,为加快AMF这一高效生物技术的应用提供帮助。
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丛枝菌根研究方法一、检测孢子含量的方法A湿筛倾注法1. 称取一定重量的土壤样品(最好是取自15cm 表层植物根系附近的土壤),放在容器内用水浸泡20-30min,使土壤松散。
如果土壤粘性很大,也可加入各种土壤分散剂。
2. 选用一套洁净的具有孔径为0.5-0.034mm的土壤筛,依次重叠起来。
最底层用一物体垫着(如培养皿、木块等物),使筛面稍微倾斜。
3. 用玻璃棒搅动浸泡的水溶液,停置几秒钟后,使大的石砾和杂物沉淀下去,即将悬浮的土壤溶液慢慢地倒在最上一层孔径最大的土壤筛上。
倾倒时,最好集中倒在筛面的一个点上,不要使整个筛面都沾有土壤溶液。
4. 用清水依次轻轻冲洗停留在筛面上的筛出物,以免在上层粗筛面的剩留物中夹藏有VA 菌根真菌孢子。
5. 用洗瓶将停留在筛面上的筛出物轻轻冲洗到一个清洁的培养皿里面,再将滤液通过细筛并用水冲洗。
在冲下来的筛出物中,除有许多细的沙砾和杂质外,就含有VA菌根真菌的不同直径的孢子。
6. 将含有筛出物的培养皿放在双目实体解剖显微镜下观察。
B 蔗糖离心法1. 称取10 g菌剂,置入大烧杯中加500 ml水,搅拌,静置10 s。
2. 先后过80目分样筛、400目分样筛,将400目筛子上的残余物用药匙转入50ml 离心管中,后用清水冲洗筛子,将残余物全部转入离心管中,配平,3000转/min 离心10 min。
(注分样筛最好直径为12 cm左右,便于下面放置烧杯过筛)3. 去掉上清液,在离心管中加入预先配制好的质量分数为50%的蔗糖溶液,玻璃棒搅匀,配平,3000转/min 离心10 min(注意离心前离心管壁上不能有残余物)。
4. 将400目筛子呈一斜面放置,离心后的蔗糖溶液过筛子的下侧,用水将筛子上的残留物轻轻洗入划线培养皿中。
(注意水不能加太多以防影响检测,培养皿划线便于统计)。
5. 解剖镜镜检统计培养皿中的孢子数目,计算出菌剂中的孢子含量。
注:溶于蔗糖溶液中的孢子仍可进行接种。
A. Gerdemann J W, Nicolson T H,1963. Spores of mycorrhizal endogone species extracted from soil by wet sieving and decanting. Transactions of the British Mycological Society, 46: 235-244B .刘润进,李晓林.2000.丛枝菌根及其应用.北京:科学出版社:190-194二、检测菌根侵染率的方法(曲利苯蓝染色改良法)Phillips J M,Hayman D S,1970. Improved procedures for clearing and staining parasitic and vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi for rapid assessment of infection. Transactions of the British Mycological Society, 55: 158~161挑根—碱液软化—酸化—染色—脱色—制片、镜检1.将洗净的粗细合适的根系剪成1 cm左右的根段至于三角瓶中。
2.加入10% KOH在90℃的水浴锅中染色45~60 min(去除细胞质,便于染色。
一般幼根需要时间较短约0.5 h,老根需要时间长约1 h,以根系相对透明为标准)。
3.弃去碱液,用清水洗3~5次(晾至室温后再冲洗),加入2%盐酸室温下酸化5 min。
4.加入0.05%曲利苯蓝于90℃水浴锅中染色30min。
5.去除曲利苯蓝后,弃去溶液后用自来水冲洗,加入乳酸甘油溶液(1:1:1 )室温下脱色24h,(晾至室温后再冲洗,也可直接脱色)。
6.用镊子夹取15条排列在载玻片上,每个样30条2个片,显微镜镜检(10×10)。
说明:常规制片用水即可,或封固剂(聚乙烯醇1.66g,甘油1 ml,乳酸20ml ,蒸馏水10ml)制片片子可以保存较长时间,但容易产生气泡,经脱色后的植物根系可以在甘油中保存数月。
三、统计方法Estimation of mycorrhizal colonization according to Trouvelot et al丛枝菌根真菌侵染性的评估方法(Trourelot等,1986)•Trouvelot A, Kough JL & Gianinazzi-Pearson V (1986) Mesure du taux de mycorhization VA d’un système radiculaire. Recherche de méthodes d’estimation ayant une signification fonctionnelle. In : Physiological and Genetical Aspects of Mycorrhizae, V. Gianinazzi-Pearson and S. Gianinazzi (eds.). INRA Press, Paris, pp. 217-221.•1.将15个根段固定在1张载玻片上,30个染色后的植物须根根段制2个片子。
2.在显微镜下观察这些根段,按照图1的分类方法确定分级,这种分级包括对每个根段菌根侵染率水平和丛枝丰度的快速评估。
3.将观测值代入计算机软件“Mycocale”中即可按照以下相关公式计算出相关的菌根侵染度参数:%F,%M,%m, %a和%A (Trouvelot et al 1986)o Frequency of mycorrhiza in the root system根系中的菌根侵染率(%F)=有菌根根段数/总根段数*100o F% = ( nb of fragments myco/total nb)*100o Intensity of the mycorrhizal colonisation in the root system根系中的菌根侵染强度(%M)=( 95*侵染率90%以上根段数+70*侵染率50%至90%的根段数+30*侵染率10%至50%的根段数+ 5*侵染率10%以下1%以上根段数+ 侵染率1%以下根段数)/总根段数*100 o M% = (95n5+70n4+30n3+5n2+n1)/(nb total)where n5 = number of fragments rated 5; n4 = number of fragments 4etc.o Intensity of the mycorrhizal colonisation in the root fragments相对菌根强度即根段中的菌根侵染强度(%m)=M*总根段数)/有菌根根段数o m% = M*(nb total)/(nb myco)o Arbuscule abundance in mycorrhizal parts of root fragments a% = (100mA3+50mA2+10mA1)/100(相对丛枝率)菌根根段丛枝率(%a)=( 100*mA3+50mA2 +10mA1)/100,其中mA3,mA2,mA1分别是A3,A2,A1所对应的菌根侵染强度o where mA3, mA2, mA1 are the % of m, rated A3, A2, A1, respectively, with mA3=((95n5A3+70n4A3+30n3A3+5n2A3+n1A3)/nbmyco)*100/m and the same for A2 and A1.o Arbuscule abundance in the root system(绝对丛枝率)根系丛枝率(A%) = a*(M/100)Figure 1注:现在找不到“Mycocale”这个软件了,我一般都是显微镜检测后自己计算结果。
统计菌根侵染率的方法有很多,有网格交叉法、频率标准法等,可以搜一下相关文献。
另附《丛枝菌根及其应用》(刘润进,李晓林主编,2000,科学出版社)的190-199页。
四、球囊霉素相关土壤蛋白试剂配制:1.柠檬酸钠浸提剂的配制:分别称取14.705g、5.882g柠檬酸钠溶于500ml去离子水中,定容到1L,即50mmol L-1pH调至8.0、20mmol L-1pH调至7.0柠檬酸钠2.牛血清蛋白标准溶液:称取100mg0.001牛血清蛋白溶于蒸馏水中,定容到100ml即为1g L-1的牛血清蛋白标准溶液,稀释10倍(现配现用)3.考马斯亮蓝染色剂的配制:称取考马斯亮蓝G250 100mg加95%乙醇50ml,加85%(m/V)磷酸100ml,去离子水稀释至1000ml,保存于棕色瓶中球囊霉素相关土壤蛋白的提取:4.易提取球囊霉素相关土壤蛋白(EEG):分别称取土样1.00 g 于带刻度离心管中,对应加入8 mL 柠檬酸钠浸提剂(20 mmol.L-1、pH 值7.0),加盖,摇匀,在103 kPa、121℃下提取30 min,10 000×g 下离心6 min,收集上清液,每个处理重复4 次,提取1次,用蓝色记号笔。
5.总球囊霉素相关土壤蛋白(TG):分别秤取土样1.00g 于带刻度离心管中,对应加入8 mL 柠檬酸钠浸提剂(50 mmol.L-1、pH 值8.0),加盖,摇匀,在103 kPa、121℃下提取60 min,,再重复提取5 次,每次重复提取时,保证提取液体积固定且摇匀土样,使土样与浸提剂充分接触;每提取一次之后迅速在10 000×g 下离心6 min,将上浮物从土壤中分离出去,收集上清液,每个处理重复4次。
上清液储藏在4℃下直至第2 天分析。
球囊霉素相关蛋白的测定:分别吸取0.5 mL 的上清液,加入5 mL 考马斯亮蓝G-250 染色剂(使用之前过滤),加盖,震荡,显色10 min,于595 nm 波长下比色。
用牛血清白蛋白(Bovine albumin,BSA)作标准液,考马斯亮蓝法显色,绘制标准曲线,最后含量单位表示μg/g 菌根参考书期刊:Mycorrhiza1.J.R.Norris,D.J.Read,A.K.VARMA.1992.Techniques for mycorrhizal research2.国内有《菌根学》刘润进、陈应龙主编《丛枝菌根及其应用》刘润进、李晓林主编《丛枝菌根生理生态学》宋福强主编《AM培养新技术及其对土地复垦生态效应》毕银丽主编《园艺植物丛枝菌根研究与应用》吴强盛主编(此文档部分内容来源于网络,如有侵权请告知删除,文档可自行编辑修改内容,供参考,感谢您的配合和支持)。