α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求北化康泰
α-羟丁酸脱氢酶检测试剂注册审查指导原则2023版
α-羟丁酸脱氢酶检测试剂注册审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对α-羟丁酸脱氢酶检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。
本指导原则是对α-羟丁酸脱氢酶检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
本指导原则是供注册申请人和技术审评人员使用的指导性文件，但不包括审评审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。
如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。
本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。
一、适用范围α-羟丁酸脱氢酶检测试剂是指用于定量检测人体样本（血清、血浆等）中α-羟丁酸脱氢酶活性的试剂。
本指导原则适用于以酶促反应动力学为检验原理，采用全自动、半自动生化分析仪或分光光度计，进行α-羟丁酸脱氢酶定量检测的临床化学体外诊断试剂。
不包括用于单独销售的校准品和质控品。
其他方法学的α-羟丁酸脱氢酶检测试剂注册可参考本指导原则，但应根据产品的具体特性确定其中内容是否适用，如不适用，应另行选择适用自身方法学特性的研究步骤及方法。
二、注册审查要点（一）监管信息应按《体外诊断试剂注册申报资料要求及说明》的要求提交申请表、术语缩写词列表、产品列表、关联文件、申报前与监管机构的联系情况和沟通记录、符合性声明以及其它相关信息。
1.产品名称产品名称一般由三部分组成。
第一部分：被测物名称；第二部分：用途，如检测试剂；第三部分：方法或者原理，如底物法、酶法等。
2.分类依据根据《体外诊断试剂分类子目录》，α-羟丁酸脱氢酶检测试剂产品类别为：II-4 用于酶类检测的试剂，管理类别为第二类，分类编码为6840。
α-羟丁酸脱氢酶测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求lepu
α-羟丁酸脱氢酶测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中α-羟丁酸脱氢酶的活性。
1.1 规格试剂1:3×60 mL，试剂2:1×45 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×20 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×12 mL；试剂1:2×60 mL，试剂2:2×15 mL；试剂1:1×40 mL，试剂2:1×10 mL；试剂1:3×28 mL，试剂2:3×7 mL；试剂1:2×4L，试剂2:1×2L；试剂1:1×4L，试剂2:1×1L。
1.2主要组成成分试剂1主要组分：试剂2主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于1.1。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.002。
2.4 分析灵敏度测试200U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0025。
2.5 准确度参照EP9-A2的方法，与比对试剂盒同时测试40例线性范围内的不同浓度的血清样本，其相关系数r不小于0.990。
每个浓度点在[8，80）U/L区间内绝对偏差不超过±8U/L；[80，800]U/L区间内相对偏差不超过±10%。
2.6 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于5％。
2.7 线性2.7.1在[8，800]U/L（37℃）区间内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2 [8，80）U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±8U/L；[80，800]U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求百奥泰康
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中α-羟丁酸脱氢酶的活性。
1.1 产品规格试剂1:60mL×5，试剂2:12mL×5；试剂1:60mL×5，试剂2:60mL×1；试剂1:60mL×2，试剂2:12mL×2；试剂1:60mL×2，试剂2:24mL×1；试剂1:80mL×4，试剂2:16mL×4；试剂1:80mL×4，试剂2:64mL×1；试剂1:80mL×2，试剂2:16mL×2；试剂1:80mL×2，试剂2:32mL×1；试剂1:50mL×3，试剂2:10mL×3；试剂1:50mL×3，试剂2:30mL×1；试剂1:40mL×3，试剂2:24mL×1；试剂1:50mL×4，试剂2:20mL×2；试剂1:50mL×4，试剂2:40mL×1；试剂1:60mL×1，试剂2:12mL×1；试剂1:50mL×1，试剂2:10mL×1；试剂1:40mL×1，试剂2:8mL×1；试剂1:500mL×1，试剂2:100mL×1；试剂1:5000mL×1，试剂2:1000mL×1；1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成。
1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲溶液≥20.0mmol/Lα-酮丁酸≥3.0mmol/L试剂2：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）≥1.0mmol/L2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
b) R2应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2 净含量液体组分不少于标示值。
a -羟丁酸脱氢酶测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求zsbk
a -羟丁酸脱氢酶测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中α-羟丁酸脱氢酶的活性。
1.1包装规格干粉型试剂1（R1）：10mL×10，试剂2（R2）：100mL×1；试剂1（R1）：5mL×10，试剂2（R2）：50mL×1。
1.2主要组成成分试剂1（R1）干粉：NADH 0.18mmol/L试剂2（R2）液体：磷酸缓冲液（pH7.50，25℃）50mmol/Lα-酮丁酸钠 3.3mmol/L2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：2.1.1试剂1（R1）应为白色干粉，复溶后应为无色透明溶液，无混浊、无未溶解物。
2.1.2试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在波长340 nm（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≥1.100；试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.002。
2.4准确度用中生试剂和已上市同类试剂分别测定40个在线性范围内不同浓度的样本，在[5,1000]U/L检测范围内，比对两组数据的相关系数（r）及测值的偏差，要求r≥0.975; 在[5,50]U/L区间内，绝对偏差应不超过±5U/L；在(50,1000]U/L区间内，相对偏差应不超过±10％。
2.5分析灵敏度对应于活性为100U/L的α-HBDH所引起的吸光度变化率（△A/min）的绝对值应在0.008～0.025的范围内。
2.6批内瓶间差）应≤5%。
批内瓶间差的变异系数（CV瓶间2.7批间差测试同一样本，批间差（R）应≤6%。
2.8线性范围在[5，1000]U/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；在[5，50]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±5U/L；在（50，1000]U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10％。
α—羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α—酮丁酸底物法)产品技术要求derui
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒
（α-酮丁酸底物法）
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm，光径1.0 cm 条件下，吸光度≥ 1.1。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm，光径1.0 cm 条件下，吸光度变化率≤0.002。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时，吸光度变化率≥0.003。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5.0%。
1
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤10.0%。
2.6准确度
采用比对试验，相关系数r2≥0.95，相对偏差应在±10%范围内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
2。
a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)操作规程(SOP)
a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)操作规程（SOP）一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中α－羟丁酸脱氢酶（α－HBDH）的活性。
二、临床意义（一）概述α－羟丁酸脱氢酶（α－HBDH），酶编号为EC 1.1.2.30。
主要来源于心肌、肾和红细胞。
其活性表示LDH中能利用α－羟丁酸为反应基质的酶活性，主要为LDH1和LDH2的活性。
（二）临床意义血清а－羟丁酸测定主要用于酮症酸中毒的鉴别诊断及跟踪监护。
同时还可用于心肌梗死、肝脏实质细胞病变、活动性风湿性心肌炎、急性病毒性心肌炎、溶血性贫血等疾病的辅助诊断。
三、检验原理α-酮丁酸＋NADH＋H+−αα-羟丁酸＋NAD+−−-HBDH−→NADH的氧化速率与样品中α－HBDH活性成正比，在340nm波长处，通过连续监测吸光度的下降速率(－△A／min)，即可计算出样品中α－HBDH的活性。
四、样品血液样品原则上采集晨起空腹血（禁食12小时）；患者处于平静、休息状态，减少患者由于运动、饮食带来的影响；静脉采血时患者应取坐位或卧位；止血带使用后1分钟内采血，回血后立即松开；正确使用抗凝剂；防止溶血；防止过失性采样。
样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆，防止样品对环境的污染、水分蒸发。
α－HBDH测定样品为不溶血的血清、血浆（肝素或EDTA 抗凝）。
样品应在低温条件下运输保存，样品中α－HBDH在2～8℃保存可稳定7天。
五、试剂（一）试剂组成不同批号试剂中各组份不能互换。
（二）试剂准备R1和R2试剂为即用型液体试剂，开瓶装载即可使用，用后应及时冷藏保存。
（三）试剂的保存及稳定性1. 不能冰冻试剂。
2. 未开瓶的R1和R2试剂应在2～8℃密闭避光贮存，稳定期为瓶签标示的有效期。
开瓶后的试剂应在2～8℃保存，稳定期为30天。
（四）试剂性能可接受的指标空白吸光度：试剂空白在主波长340nm、副波长405nm 处，10mm光径下，吸光度值≥1.000。
α-HBDH,α-羟丁酸脱氢酶测定试剂盒(α-HBDH)检测标准操作规程
1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)测定试剂盒（DGKC法）测定方法2、适用范围：适用于人血清或血浆α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)的测定。
3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃～8℃有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定28天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理在α-HBDH催化作用下，α-酮丁酸被还原为α-羟丁酸，同时NADH被氧化为NAD+。
NAD+的生成引起340 nm处吸光度下降，下降速率与样品中α-HBDH的活性成正比。
α-HBDHα-酮丁酸 + NADH + H+ α-羟丁酸 + NAD+4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆，采集后及时测定，应避免溶血和污染。
样本于2℃～8℃保存可稳定3天。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围72～182 U/L（注：各实验室应有自己的参考范围。
）4.5 方法评价线性范围：10～1000U/L。
当样本测定值超过上限时，应将样本用生理盐水稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。
α-羟丁酸脱氢酶测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求shouyi
α-羟丁酸脱氢酶测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中α-羟丁酸脱氢酶的活性。
1.1产品规格试剂1：3×80ml，试剂2：3×20ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×15ml；试剂1：6×40ml，试剂2：3×20ml；试剂1：2×80ml，试剂2：2×20ml；试剂1：1×80ml，试剂2：1×20ml；试剂1：1×60ml，试剂2：1×15ml 1.2产品组成成分试剂1：Tris缓冲液50mmol/L，酮丁酸3.3mmol/L。
试剂2：NADH 0.18mmol/L。
2.1 外观试剂1、2均为无色透明溶液。
2.2 装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度A≥1.0（光径1.0cm，波长340nm）。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率ΔA/5min≤0.01。
2.4分析灵敏度测定294U/L被测物，吸光度变化率在0.0732/min～0.1032/min范围内。
2.5 准确度采用比对试验，相关系数r≥0.975，相对偏差≤10%。
2.6 精密度2.6.1 重复性变异系数CV≤5%。
2.6.2 批间差批间相对极差≤6%。
2.7 线性区间a）（0，1000]U/L（37℃）。
在规定的线性区间内，测定值与样本浓度值的相关系数（r）应不低于0.990。
b）（0，100]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±10U/L；（100，1000]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原装试剂2～8℃避光保存，有效期12个月，有效期满后两个月内测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
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α-羟丁酸脱氢酶（α-HBDH）测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）
适用范围：本试剂盒用于定量检测人体血清样本中α-羟丁酸脱氢酶的活性。
1.1产品类别
试剂1： 80ml×1；试剂2：20ml×1。
试剂1：80ml×2；试剂2：20ml×2。
试剂1： 80ml×3；试剂2：20ml×3。
试剂1：80ml×4；试剂2：20ml×4。
试剂1： 60ml×1；试剂2：15ml×1。
试剂1：60ml×2；试剂2：15ml×2。
试剂1： 60ml×3；试剂2：15ml×3。
试剂1：60ml×4；试剂2：15ml×4。
试剂1：40ml×1；试剂2：10ml×1。
试剂1：40ml×2；试剂2：10ml×2。
试剂1：40ml×3；试剂2：10ml×3。
试剂1：40ml×4；试剂2：10ml×4。
2.1 外观：均为澄清溶液，外包装完整。
2.2 净含量：不少于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度：A≥1.1（在37℃、340nm波长、1cm光径条件下）。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.002（在37℃、340nm波长、1cm光径条件下）。
2.4 分析灵敏度：浓度为400U/L时,吸光度变化率△A/min在-0.2～-0.01范围内。
2.5 线性区间
2.5.1线性相关系数：[25，750]U/L范围内，线性相关系数r≥ 0.990。
2.5.2线性偏差：[25，100] U/L时，绝对偏差不超过±10U/L；（100,750] U/L 时，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1 重复性：变异系数(CV)≤5.0%。
2.6.2 批间差：相对极差≤10%。
2.7 准确度：采用比对试验，相关系数r2≥0.95，相对偏差不超过±10%。
2.8 稳定性：试剂盒在2℃～8℃贮存，有效期为12个月。
保存至有效期末进行测定，试验结果满足2.5、2.7的要求。