Celigo细胞成像分析仪的特点和应用
生命科学与医学新技术系列讲座暨仪器展示会-生物器材网

2014年12月12日报告摘要报告主题:Celigo全视野细胞扫描分析技术报告公司:达科为生物技术有限公司简介:Celigo全视野细胞扫描分析技术是全新科技的细胞全孔高速扫描成像技术,可进行全孔整板细胞成像和细胞数据处理。
其技术能达到1um成像精度,相当于显微镜10X放大倍数,单个细胞的信号识别足够清晰完整。
在高分辨率细胞图像的基础上,实现了对1536、384、96、24孔板,甚至6孔板的全孔成像,这是因为其独特的光学技术,应用一个大型的F-theta 透镜和电磁检流计镜片来对全孔进行大面积快速扫描。
透镜的位移完全由电磁推动,安静快速而完全没有机械位移,精度可小于1um,保证了后续的多图像拼接的一致性。
原位无需消化细胞,无需取样,在任何时间点随时成像,随时分析,随时获得统计学数据处理结果。
全孔6孔板全孔图像由256张细胞图像拼接;96孔板全孔图像由16张细胞图像拼接。
每个孔均是高清晰度的全孔细胞分析,保证了统计学意义的一致性。
整板整板的全孔图像预览和曲线分析带来一目了然的细胞分析结果,而这一切均在<10min 的速度下完成,简单实现多时间点的整板细胞生长分析快速追踪。
快速这是系统的扫描光路电磁透镜技术带来的。
多通道共四个通道,采用四个独立的LED光源,包括一个高质量的明场通道,和三个荧光通道。
因此,Celigo被称为原位板式细胞培养体系的流式分析系统。
报告题目: ImageXpress 高内涵成像技术及其应用报告公司:美谷分子仪器(上海)有限公司主讲人:李延产品经理简介:高内涵成像分析技术是集自动化,智能化与海量数据为一体的新型检测平台,。
在保持细胞结构和功能完整性的前提下,高内涵成像分析系统可以实时快速检测样品多维立体的生物效应信息,在单个细胞/亚细胞水平上,同时获取反应样品生物学变化的多个指标的多元化、功能性的海量数据。
这些数据既包括高质量高分辨率图像,也包括准确定量的数值,并且可以追溯到每一细胞的原始情况,非常适合高效的数据管理和挖掘。
细胞成像的高分辨率技术及应用

细胞成像的高分辨率技术及应用细胞是生命的基本单位,也是理解其生命活动的基础。
在细胞的研究领域中,成像技术是一个非常重要的工具。
随着技术的不断发展,细胞成像技术也在不断地更新换代。
其中,高分辨率成像技术正在逐渐成为细胞成像领域的热点和趋势之一。
高分辨率成像技术是指能够对微观结构进行精细的成像,通常分为超分辨率成像和三维成像两大类。
在超分辨率成像方面,目前广泛应用的有STED (Stimulated Emission Depletion)、SIM(Structured Illumination Microscopy)和PALM/STORM(Photo-activated Localization Microscopy/Stochastic Optical Reconstruction Microscopy)等。
而在三维成像方面,常见的技术包括光片层扫描显微镜和双光子激光扫描显微镜等。
这些高分辨率技术的出现,在很大程度上克服了传统显微镜成像分辨率受限的问题,使得研究者们能够更深入和准确地观察细胞结构和细胞内分子的行为。
举例而言,STED技术可以获得高达1纳米的空间分辨率,实现了超级可视化的细胞成像,这让我们可以更好地观察细胞核、线粒体、溶酶体等亚细胞结构的动态变化过程。
同时,与传统荧光显微镜相比,超分辨技术提高了成像的深度和速度,可以在更大范围内实现3D成像。
在细胞成像技术的发展过程中,高分辨率成像技术的应用也越来越广泛。
其中,在生物医学领域中,高分辨率成像技术在疾病诊断、治疗和新药研发方面有着广泛的应用。
例如,在肿瘤的研究中,可以利用三维成像技术和高分辨率显微技术,对肿瘤的微观结构进行深入的观察,帮助研究人员更好地了解肿瘤的生长规律和转移途径。
此外,在药物筛选和研发方面,高分辨率成像技术也可用于快速评价候选化合物的药效和副作用,为新药的研发提供有力支持和指导。
此外,高分辨率成像技术还被广泛应用于生物学基础研究领域。
细胞成像技术在细胞分子生物学中的应用

细胞成像技术在细胞分子生物学中的应用细胞成像技术是现代分子生物学中不可或缺的一部分,利用先进的成像技术,可以更精确地观察细胞内发生的生物学过程,帮助我们更深入地了解细胞的结构和功能,并研究其与疾病发生的关系。
下面我们将从三个方面介绍细胞成像技术在细胞分子生物学中的应用。
一、荧光成像技术在蛋白质的动态变化研究中的应用荧光成像技术是通过标记蛋白质或其他生物大分子的荧光探针,实现对其动态变化的实时观测。
在细胞内针对不同分子标记不同的荧光探针,可以帮助科学家观察细胞内特定的蛋白质在不同时刻及空间位置上的变化。
例如,在细胞内观察细胞骨架的重组和分解过程中,科学家用荧光染料标记微管蛋白以及相关蛋白,随着荧光信号的变化,可以清晰地观察到微管的生长、重组和分解等动态过程。
同样,荧光成像技术也可以用于研究细胞凋亡、RNA转录等生物过程的实时观测,为细胞分子生物学的研究提供了强大的工具。
二、超分辨显微镜在细胞结构研究中的应用随着现代成像技术的飞速发展,超分辨显微镜的出现提高了我们对细胞结构的观测精度。
传统的光学显微镜仅能观察大于200nm 的物体,但细胞内很多生物大分子尺寸小于此范围,因此需要借助超分辨显微镜实现高分辨率的成像。
超分辨显微镜主要由结构光显微镜、双光子显微镜和单分子荧光显微镜等几种类型。
其中,结构光显微镜是目前比较实用的一种,其原理是通过对被观测物体进行频次激励,并利用贝叶斯反演的数学方法,将物体的细节图像还原出来。
超分辨显微镜能够大大提高细胞内亚微结构的分辨率,使科学家们能够更加准确地研究细胞结构与功能的关系。
三、原子力显微镜在固体细胞成像中的应用原子力显微镜是由IBM公司发明的一种新型显微镜,能够在固体材料表面通过探针扫描,在纳米级别下实现极高分辨率成像。
随着高分辨率成像技术的不断进步,原子力显微镜也逐渐应用到生命科学研究领域,用于对细胞表面结构的观测。
利用原子力显微镜观测细胞表面结构时,需要在细胞表面涂覆一层金或银,作为成像探针。
Celigo细胞成像分析仪的特点和应用详解

Celigo细胞成像分析仪的特点和应用Celigo细胞成像分析仪的特点和应用上海典奥生物科技有限公司(tekon biotech (Shanghai) Itd)Celigo细胞成像分析仪可分析生长在微孔板和T-flask中的贴壁和非贴壁(悬浮)细胞,具有超越传统方法的更好的优势。
Celigo具有特别一致的,高质量,全孔的明亮视野(brightfield)成像功能,结合强大的分割软件可在5分钟内获得整个微孔板的所有孔中的所有细胞的高质量数据。
Celigo具有非破坏性和非侵入性明亮视野分析功能,并有多色荧光功能作补充,使系统适合任何实验室中的基于细胞的广泛的实验。
图1 Celigo细胞成像分析仪Celigo细胞成像分析仪具有下列特征和优势:1)可接受T-flask(T-25和T-75)和多数微孔板(1536孔板到6孔板);2)可在整个孔的范围内进行准确的明亮视野细胞成像和识别;3)具有三通道荧光(除了明亮视野功能):红色荧光、绿色荧光和蓝色荧光;4)极快速的扫描(扫描整块微孔板大约耗时5-15min);5)有直观并易于使用的,功能强大的,软件分割和分类界面;6)可选择的API软件,可进行机械臂装载整合。
Celigo细胞成像分析仪的杰出的性能主要取决于它的独特的光学通路,此光学通路应用了一个大型的F-theta透镜和检流计镜片来进行大面积快速扫描。
与传统的基于显微镜的仪器不同,此系统可扫描整个孔,而无需移动微孔板,并保持一致的亮度对孔边缘的细胞进行准确的细胞识别。
Celigo可检测的细胞分析参数:1)总细胞数目(Total Cell Number);2)分类细胞数目(Gated Cell Number);3)分类细胞百分比(Percentage of Gated Cells);4)细胞密度(Cell Density);5)细胞面积(Cell Area);6)细胞平均强度(Cell Mean Intensity);7)细胞整体强度(Cell Integrated Intensity);8)细胞长宽比(Cell Aspect Ratio);9)细胞形状因子(Cell Form Factor);10)细胞光滑度(Cell Smoothness);11)克隆直径(Colony Diameter);12)克隆周长(Colony Perimeter)。
血细胞分析仪介绍

血细胞分析仪介绍血细胞分析仪是一种常见的医疗设备,用于自动化地进行全血细胞分析。
它通过检测血液中的不同细胞类型和各项血细胞指标,帮助医生了解患者的血细胞情况,辅助诊断和治疗决策。
本文将详细介绍血细胞分析仪的原理、工作流程、应用领域和发展趋势。
血细胞分析仪的工作原理是依据光学技术。
当一束光照射到血液样本上时,不同类型的细胞会对光的散射、吸收和传输产生不同的反应,这些反应通过光电传感器捕捉到并转换为电信号。
接下来,血细胞分析仪通过算法和模型,根据电信号的特征对血液中的细胞类型和指标进行计数和分析。
血细胞分析仪的工作流程主要包括样本准备、分析过程和结果输出。
样本准备一般涉及到血液采集和抽取,通常采用静脉抽血的方式获取血液样本。
之后,样本进入血细胞分析仪中进行分析。
在分析过程中,血细胞分析仪会自动进行细胞的计数、分类和测量。
最后,仪器会输出一个包含完整的血细胞计数和指标的结果报告,供医生参考。
血细胞分析仪广泛应用于临床医疗、科研和药物研发等领域。
在临床医疗方面,血细胞分析仪可以快速、准确地检测血细胞的数量和指标,帮助医生进行各种疾病的预防、诊断和治疗。
例如,对于血液系统疾病,如白血病、贫血和感染等,血细胞分析仪可以提供有关各种血细胞类型和指标的异常情况。
同时,血细胞分析仪还可以监测患者的血细胞情况,评估疾病的进展和治疗效果。
在科研领域,血细胞分析仪可以用于各种血液样本的研究和分析。
一些研究机构和实验室可以使用血细胞分析仪进行样本的批量分析和长期监测。
此外,血细胞分析仪还可以与其他设备和技术结合使用,如流式细胞仪、基因测序和蛋白质分析等,以便更全面地研究血液中不同类型细胞的特性和功能。
血细胞分析仪的发展趋势包括以下几个方面。
首先,随着技术的进步,血细胞分析仪的分析速度和精确度将得到提高。
新的仪器可以同时检测更多的细胞类型和指标,并且可以更加准确地定量和测量。
其次,仪器的自动化程度将进一步提升。
未来的血细胞分析仪将更加智能化,能够自动完成样本准备、数据分析和结果输出等过程,减少人工操作和提高工作效率。
细胞仪的工作原理及在医学检验中的应用

31~40岁年轻人员易高脂肪饮食,喜好烟酒等,导致在年轻时已经处在高血脂状态,为40岁后冠心病、脑血管病、糖尿病、脂肪肝等疾病的大大增加埋下主要诱发因素。
建议有条件的企业每年组织职工进行健康体检,早期预防代谢性疾病,使职工身体健康、精力充沛,为国家、为企业做贡献,为社会、为企业、为家庭节约医疗资金,创造美满幸福生活。
由于本次检测均为化工行业男性城镇职工,其结果缺乏一定全面性,建议继续扩大样本人群进行检测,使检测结果更具有代表性。
参考文献[1]丁磊,朱立华,马纪平,等.卫生专业技术资格考试指南[M].2版.北京:知识出版社,2002:199,204.[2]李振宗,朱汉熙.内科学[M].3版.北京:人民卫生出版社,1994:240.[3]陈灏珠,叶任高.内科学[M].6版.北京:人民卫生出版社,2004:263.[4]王燕.血液流变学指标与高脂血症的关系[J].检验医学与临床,2007,4(12):1179.[5]范洪,郑小丽,石海香,等.消渴病血脂异常发生率的研究[J].医学研究通讯,2003,32(2):62.[6]刘国萍.脂肪肝与血脂关系的探讨[J].工企医刊,2010,23(4):25-26.[7]郑婉玲,郑婉君.1718例体检结果分析[J].中国热带医学,2006,6(6):1085-1086.[8]李健斋,王抒,董军,等.不同年代北京部分职业人群血脂的增龄变化[J].中华老年医学杂志,2004,23(10):724-728.(收稿日期:2011-07-13)细胞仪的工作原理及在医学检验中的应用薛芳芳(湖北省荆门市第一人民医院检验科 448000) 【关键词】 细胞仪; 工作原理; 医学检验DOI:10.3969/j.issn.1672-9455.2012.01.078文献标志码:B文章编号:1672-9455(2012)01-0120-02 细胞仪是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分进行快速定量分析与分选的医学仪器。
2024年细胞成像分析仪市场调查报告

2024年细胞成像分析仪市场调查报告1. 简介细胞成像分析仪是一种用于观察和分析细胞结构和功能的仪器。
它可以通过高分辨率成像技术实时地捕捉和记录细胞的显微图像,并对其进行定量和定性分析。
细胞成像分析仪在生物医学研究、药物开发、生物检测等领域具有广泛的应用。
2. 市场规模根据市场研究机构的数据,细胞成像分析仪市场在过去几年呈现稳定增长的趋势。
预计到2025年,全球细胞成像分析仪市场规模将达到XX亿美元。
这一增长得益于生物医学研究的不断发展和生物药物市场的扩大。
3. 市场驱动因素3.1 生物医学研究的发展随着生物医学研究的不断进步,对细胞的观察和分析需求越来越高。
细胞成像分析仪作为一种高分辨率成像工具,能够帮助科研人员清晰地观察细胞的形态和结构,并进行相关定量分析,满足了研究需求。
这促进了细胞成像分析仪市场的增长。
3.2 生物药物市场的扩大随着人们健康意识的提高和医疗技术的进步,生物药物市场不断扩大。
细胞成像分析仪在药物开发中起到了重要的作用。
它可以帮助科研人员评估药物对细胞的影响,了解药物在细胞水平的作用机制,从而指导药物的研发和应用。
这也是细胞成像分析仪市场增长的重要驱动因素之一。
3.3 技术进步的推动随着成像技术的不断发展,细胞成像分析仪的性能不断提升。
高分辨率、高灵敏度、多通道成像等技术的应用,使细胞成像分析仪具备了更强的观察和分析能力。
技术进步的推动也促进了细胞成像分析仪市场的增长。
4. 市场竞争格局目前,全球细胞成像分析仪市场存在着较多的竞争对手。
主要厂商包括ABC公司、XYZ公司、123公司等。
这些公司拥有广泛的产品线和强大的研发能力。
此外,新兴公司也不断涌现,正在改变市场格局。
5. 市场前景和挑战细胞成像分析仪市场前景广阔,随着生物医学研究和生物药物市场的持续发展,需求将进一步增长。
同时,技术的进步也将提供更多的机遇。
然而,市场竞争激烈,产品同质化现象严重,价格压力和市场准入难度也是当前市场面临的挑战。
血细胞分析仪的原理和应用

血细胞分析仪的原理和应用1. 概述血细胞分析仪是一种常用的医疗设备,用于快速、准确地分析人体血液中的细胞数量和形态特征。
本文将介绍血细胞分析仪的工作原理以及其在临床应用中的重要性。
2. 工作原理血细胞分析仪通过将血液样本经过特定处理后,使用光学、电子学等技术进行细胞计数和形态分析。
具体的工作原理如下:•细胞计数:血细胞分析仪会先将血液样本进行稀释处理,以保证细胞的分散性。
然后,样本通过流式细胞术的原理,细胞逐个通过一个狭窄的通道,在通道中通过时会和激光产生散射光。
通过检测这些光的强度和特征,可以得到细胞计数的结果。
•形态分析:在细胞计数的基础上,血细胞分析仪还能通过显微镜和图像处理技术对细胞的形态特征进行分析。
血细胞分析仪会采集细胞的图像,并根据形态参数(如大小、形状等)对细胞进行分类和分析。
3. 应用血细胞分析仪在临床应用中发挥着重要的作用,主要体现在以下几个方面:•疾病诊断和监测:血细胞分析仪可以帮助医生快速获得患者血液中各种细胞的数量和形态特征。
这对于诊断和监测各种疾病,如贫血、感染、恶性肿瘤等,具有重要意义。
例如,白细胞计数异常可提示是否存在感染,红细胞计数和血红蛋白浓度异常可帮助诊断贫血等。
•临床研究:血细胞分析仪广泛应用于医学研究领域,研究人员可以通过分析不同人群或实验组细胞的数量和形态特征,了解不同疾病的发生机制、病程进展等。
•药物研发和药效评估:血细胞分析仪在药物研发和药效评估中也起到重要的作用。
研究人员可以通过观察药物对细胞数量和形态的影响,评估药物的疗效和毒副作用,从而指导临床应用。
•血液库管理:血细胞分析仪还可以应用于血液库管理,用于测定捐献者的血细胞计数和分类,保证血液库中血液质量的安全和可靠。
4. 使用注意事项使用血细胞分析仪需要注意以下几个方面:•操作规范:操作人员需要遵循相关的操作规范和使用说明,确保操作的准确和可靠性。
•样本处理:样本的处理对血细胞分析仪的结果影响重大,操作人员需要掌握好样本的采集、预处理和稀释等步骤。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
Celigo细胞成像分析仪的特点和应用Celigo细胞成像分析仪的特点和应用上海典奥生物科技有限公司(tekon biotech (Shanghai) Itd)Celigo细胞成像分析仪可分析生长在微孔板和T-flask中的贴壁和非贴壁(悬浮)细胞,具有超越传统方法的更好的优势。
Celigo具有特别一致的,高质量,全孔的明亮视野(brightfield)成像功能,结合强大的分割软件可在5分钟内获得整个微孔板的所有孔中的所有细胞的高质量数据。
Celigo具有非破坏性和非侵入性明亮视野分析功能,并有多色荧光功能作补充,使系统适合任何实验室中的基于细胞的广泛的实验。
图1 Celigo细胞成像分析仪Celigo细胞成像分析仪具有下列特征和优势:1)可接受T-flask(T-25和T-75)和多数微孔板(1536孔板到6孔板);2)可在整个孔的范围内进行准确的明亮视野细胞成像和识别;3)具有三通道荧光(除了明亮视野功能):红色荧光、绿色荧光和蓝色荧光;4)极快速的扫描(扫描整块微孔板大约耗时5-15min);5)有直观并易于使用的,功能强大的,软件分割和分类界面;6)可选择的API软件,可进行机械臂装载整合。
Celigo细胞成像分析仪的杰出的性能主要取决于它的独特的光学通路,此光学通路应用了一个大型的F-theta透镜和检流计镜片来进行大面积快速扫描。
与传统的基于显微镜的仪器不同,此系统可扫描整个孔,而无需移动微孔板,并保持一致的亮度对孔边缘的细胞进行准确的细胞识别。
Celigo可检测的细胞分析参数:1)总细胞数目(Total Cell Number);2)分类细胞数目(Gated Cell Number);3)分类细胞百分比(Percentage of Gated Cells);4)细胞密度(Cell Density);5)细胞面积(Cell Area);6)细胞平均强度(Cell Mean Intensity);7)细胞整体强度(Cell Integrated Intensity);8)细胞长宽比(Cell Aspect Ratio);9)细胞形状因子(Cell Form Factor);10)细胞光滑度(Cell Smoothness);11)克隆直径(Colony Diameter);12)克隆周长(Colony Perimeter)。
Celigo细胞成像分析仪的应用(一)明亮视野无标记实验1)细胞计数和细胞生长跟踪(Cell Counting & Growth Tracking)用于进行细胞系特征描述,克隆确认,和基于形态学的筛选。
2)克隆计数:球体分析(Colony Counting: Sphere Analysis)用于进行EB特征描述和肿瘤球体分析。
3)饱和度(Confluency)用于细胞系特征描述和侵染性实验。
(二)荧光标记实验1)细胞计数和细胞生长跟踪(Cell Counting & Growth Tracking)用于进行细胞系特征描述,克隆确认,和基于形态学的筛选。
2)细胞分泌实验(Cell Secretion Assay)用于细胞分泌分析。
3)细胞活力(Cell Viability)用于方法学发展,细胞健康性实验和高通量筛选。
4)DNA合成(DNA Synthesis)用于细胞周期分析,细胞健康性实验,高通量筛选和细胞增殖实验。
5)表达分析(Expression Analysis)用于细胞信号,高通量筛选,标记分析和转染优化。
6)磷脂酰丝氨酸外部化(Phosphatidylserine Externalization)用于方法学发展,细胞健康性实验和高通量筛选。
应用详述:(一)细胞计数(Cell Counting)Celigo的细胞计数应用,描述了全孔非标记明亮视野成像的特征,极大地提高了细胞培养物中计数的准确性,并且消除了过去需要分离酶和血细胞计数器才能确定细胞培养密度的状况。
Celigo 细胞计数应用的灵活性和易于使用性也可以监控随时间的细胞生长,并方便对培养的日常管理。
这个过程的标准化增加了基于细胞的实验的定量的一致性。
用Celigo进行细胞计数应用有如下优势:1)可进行快速的明亮视野成像和非标记的细胞原位分析;2)全孔成像的分辨率为1µm/像素;3)可对多孔微孔板(从1536-孔到6-孔微孔板)和T-flask(T-25和T-75)进行成像;4)易于使用的界面可对明亮视野中的各种细胞类型进行成像和识别;5)拥有直接图像分割(segmentation)和细胞识别软件;6)可用图像和数据报告生长曲线、细胞数目、倍增时间和倍增速度。
图2 用Celigo对贴壁细胞进行细胞计数。
上图是用直接细胞计数应用(the Direct Cell Counting application)拍摄的MDA-MB-436,MCF7和MDA-MB-231细胞系的图像,下图是用直接细胞计数应用对其进行分割后的图像。
图3 用Celigo对悬浮细胞进行细胞计数。
上图是用直接细胞计数应用(the Direct Cell Counting application)拍摄的CHO,Jurkat和THB-5细胞系的图像,下图是用直接细胞计数应用对其进行分割后的图像。
(二)饱和度计算(Confluency Measurement)Celigo能对细胞系,包括新建立的、稀有的和不易生长的细胞系,的饱和度和生长特征进行自动的、非标记的、非破坏性的和非侵入性的测定。
无需对细胞进行任何操作就可监控样品,使培养物能被原位定量,并可对同一培养物进行随时间的多次准确读取。
Celigo提供对快速明亮视野成像、图像分割和分析工具的独特的整合,使研究者能监控细胞培养,生成随时间的生长曲线,确定倍增速度和倍增时间。
Celigo的饱和度应用能提供如下优势:1)能对多孔微孔板(从1536-孔到6-孔微孔板)和T-flask(T-25和T-75)进行扫描和分析;2)能对多孔微孔板进行快速扫描和分析(384-孔微孔板的分析耗时<8min);3)能分析T-25和T-75 flask中的细胞生长(T-75 flask的分析耗时大约15min);4)易于使用的界面可获取和分析图像;5)可报告每个孔的饱和度、生长曲线、倍增时间和倍增速度。
图4 用Celigo进行的非标记明亮视野生长分析。
上图是在96-孔微孔板中培养数天的贴壁细胞(HeLa)的放大的明亮视野图像,下图是对其进行分析的图像。
图5 用Celigo计算细胞生长特性。
上左图表示用饱和度应用(Confluence application)报告的单个孔的非标记生长曲线,上右图表示多孔的缩略图。
下左图表示倍增速度,下右图表示倍增时间。
(三)非标记的生长跟踪(Label Free Growth Tracking)/细胞系的特征描述(Cell Line Characterization)可用Celigo确定原始细胞的生长特性,并在几分钟之内准确分析细胞系。
Celigo可为研究者监控细胞生长提供独特的整合的明亮视野成像、图像分割和细胞分析工具。
特别地,全孔成像和无标记明亮视野细胞计数使Celigo的用户能得到随时间变化的生长曲线,监控单个孔水平的细胞数目、饱和度、倍增速度和倍增时间。
用Celigo进行直接细胞计数有如下优势:1)对多孔微孔板进行快速扫描和分析(384-孔微孔板的分析时间<5min);2)易于使用的界面能拍摄和确认明亮视野中的各种不同的细胞;3)能原位确定细胞的生长特性,直接在它们生长的地方确定;4)可报告每个孔的生长曲线、细胞数目、饱和度、倍增时间和倍增速度。
5)可分析T-flask(T-25和T-75)中的细胞生长状况,分析T-75的耗时大约是15min。
图6 用Celigo进行无标记的细胞生长分析。
使用细胞计数应用(the Cell Counting application)得到分割的HeLa细胞的放大的明亮视野图像,上图是分析得到的细胞数目,下图是细胞饱和度。
图7 用Celigo计量细胞的生长特征。
直接细胞计数应用(the Direct Cell Counting application)报告了单个孔中的非标记生长曲线(上左图)和多孔微孔板中的生长曲线(上右图)。
它也报告了微孔板的每个孔中的倍增时间(下左图)和倍增速度(下右图)。
(四)细胞增殖实验(Proliferation Assay)评估培养细胞生长的增殖活性是监控细胞的健康和生长速度的基础工具。
很多研究者利用基于代谢的定量方法,如MTT或MTS方法来评估和确认化合物对细胞增殖的影响。
然而,这些终点法要求研究者将代谢活性的计量作为细胞数目的间接显示,并且实验是破坏性的,每个时间点都需要使用新的样品。
Celigo可利用它的细胞计数应用,进行自动化的、非标记的、非破坏性的和非侵入性的增殖实验。
Celigo的细胞计数方法有如下优势:1)可原位对细胞进行直接成像和计数;2)非标记的细胞计数无需试剂;3)可对每个孔的每个细胞进行准确的、全孔的明亮视野成像和分割计数;4)可对相同样品进行多重读取,降低成本和劳动力;5)可利用每孔中细胞的确切数目,进行准确的标准化;6)可进行细胞形态检验和分析。
图8 Celigo和MTT实验方法的对比。
Celligo在多个时间点分析细胞,并用实时明亮视野成像方法对细胞进行直接原位计数,来准确计量细胞的增殖情况。
MTT法在一个时间点分析细胞,并间接评估细胞的增殖情况。
图9 用Celigo生成的浓度响应曲线。
左图和中图表示用Celigo进行的Colo-205细胞对化合物X和5-FU的不同响应的图像分析(细胞计数)。
右图表示用MTT法分析Colo-205细胞在某个时间点的响应。
(五)评估细胞健康状况(Cell Health Analysis)Celigo可用于快速评估细胞的健康状况,该项易于操作的应用可对不同类型的细胞进行简单而快速的细胞活力分析和细胞凋亡分析。
细胞活力的应用分别用calcein AM,propidium iodide和H oechst对活细胞、死细胞和所有细胞进行确认和计数。
相似地,磷脂酰丝氨酸外部化(Phosphatidylserine Externalization)应用通过分别用annexin V,propidium iodide和Hoechst定量报告凋亡细胞、死细胞和所有细胞的个数,来计算细胞凋亡。
用Celigo分析细胞健康状况有如下优势:1)易于使用的界面来确认细胞健康状况;2)快速扫描和分析(用3个荧光通道扫描和分析96-孔微孔板耗时<12min);3)可兼容多种微孔板类型(从1536-孔到6-孔微孔板);4)先进的类似流式细胞技术的分类(flow cytometry-like gating)。