丙氨酸对酒精性肝损伤保护作用的研究凌敏

合集下载

北五味子总三萜、木脂素对酒精性肝损伤的保护作用及其机制的研究

北五味子总三萜、木脂素对酒精性肝损伤的保护作用及其机制的研究

北五味子总三萜、木脂素对酒精性肝损伤的保护作用及其机制的研究北五味子(Schisandra chinensis (Turcz.) Baill)主要分布于东北亚地区,其果实和藤茎中富含大量木脂素、三萜等生物活性成分,被广泛应用于功能食品和药品领域。

本研究以北五味子藤茎为原料,对北五味子总三萜、木脂素的化学成分进行分析,并对其干预急性和慢性酒精性肝损伤的效果及作用机制进行深入研究,以期为北五味子的产业化开发奠定基础。

主要结论如下:1、将高速逆流色谱和制备型液相色谱两种技术相结合,建立了一种从北五味子中分离木脂素的方法。

北五味子藤茎粉末经70%乙醇粗提后,采用AB-8型大孔吸附树脂进行梯度乙醇洗脱,得到的样品采用溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:1:1:1,V/V)的高逆流色谱和流动相为乙腈-水(50:50,V/V)的制备型液相色谱进行进一步分离,并对这两种色谱方法的效率和特点进行了比较分析。

得到的6种木脂素单体采用紫外光谱、质谱和核磁共振谱进行结构鉴定,所有化合物的纯度均在91%以上。

结合课题组的前期研究,将树脂纯化产物认定为北五味子总三萜、木脂素。

2、采用小鼠建立了急性酒精性肝损伤模型,通过20d后血清和肝脏的生理生化指标、抗氧化活力以及肝脏HE染色病理切片考察北五味子总三萜、木脂素的保肝作用。

小鼠在摄入50%乙醇后,肝组织及细胞出现严重损伤,血清及肝脏各指标出现异常;北五味子总三萜、木脂素各剂量组的病变明显减轻,炎症反应降低,肝功能及血脂水平恢复正常,抗氧化酶的活性得到增强。

试验结果表明,北五味子总三萜、木脂素能够降低血清中ALT、AST、ALP、TC、TG和LDL-C的水平,提高HDL-C的水平;降低肝匀浆中MDA的含量,提高SOD、GSH、T-AOC的含量,对急性酒精性肝损伤有预防和治疗的作用。

3、采用大鼠建立了慢性酒精性肝损伤模型,通过测定30d、60d和90d血清中肝功能指标、血脂水平及氧化-抗氧化能力的动态变化,发现机体对于酒精的摄入呈明显的剂量效应。

技能实验报告(谷丙转氨酶)

技能实验报告(谷丙转氨酶)
再生,如何预防及治疗各类肝脏疾病己引起国内外有关学 者的广泛重视,因此了解肝损伤及其发生机制,对寻找防 治药物的研究意义重大。
国内研究课题
1、蜂王浆对肝损伤的保护作用 2、鹿茸对肝损伤的保护作用 3、琥珀酸钠对肝损伤的保护作用 4、夏枯草对肝损伤的保护作用
实验原理
转氨酶是人体代谢过程中必不可少的“催化剂”, 主要存在与肝细胞内。肝功检查中最基本,最重 要的指标就是转氨酶,通常包括血清谷丙转氨酶 (ALT)和谷草转氨酶(AST)两项。谷丙转氨 酶主要存在于肝细胞原浆的可溶部分,肝细胞发生 炎症病变,引起细胞肿胀,坏死或肝细胞膜通透性 增高等,均可使谷丙转氨酶释放于血液循环中,而 使血清谷丙转氨酶增高。谷草转氨酶主要存在于 肝细胞线粒体内,
实验数据
高剂量组 测定组 0.616 0.349 0.403 0.758 0.821 0.424 0.613 0.342
中剂量组
低剂量组
正常组
模版组
联苯双酯组
对照组 测定组 对照组 测定组 对照组 测定组 对照组 测定组 对照组 测定组 对照组 0.27 0.261 0.316 0.325 0.344 0.325 0.272 0.283 0.432 0.409 0.411 0.442 0.326 0.374 0.407 0.631 0.346 0.35 0.354 0.36 0.28 0.293 0.303 0.374 0.37 0.587 0.398 0.665 0.414 0.755 0.397 0.55 0.263 0.291 0.297 0.349 0.34 0.357 0.25 0.292 0.438 0.604 0.424 0.458 0.397 0.336 0.383 0.623 0.31 0.33 0.372 0.346 0.34 0.384 0.356 0.321 1.602 1.374 1.252 0.865 1.168 0.754 1.135 1.271 1.256 1.151 1.197 0.992 0.47 0.494 0.478 0.389 0.373 0.391 0.757 0.425 0.336 0.339 0.279 0.261 0.329 0.357 0.348 0.35

《五味子不同组分抗氧化及酒精性肝损伤保健机制和制剂学研究》

《五味子不同组分抗氧化及酒精性肝损伤保健机制和制剂学研究》

《五味子不同组分抗氧化及酒精性肝损伤保健机制和制剂学研究》一、引言五味子,作为一种传统中药材,因其独特的药用价值和保健功效,已被广泛应用于医疗和保健领域。

其多种生物活性成分如五味子甲素、乙素等,具有显著的抗氧化和保护肝脏的功能。

本篇论文将针对五味子不同组分的抗氧化及酒精性肝损伤保健机制,以及其在制剂学方面的研究进行深入的探讨。

二、五味子的化学组成与生物活性五味子含有丰富的木脂素类、三萜类化合物等多种生物活性成分。

这些成分具有显著的抗氧化、抗炎、抗疲劳、保肝等作用。

其中,木脂素类成分是五味子主要的有效成分,具有很好的保护肝脏、抗氧化的作用。

三、五味子的抗氧化机制五味子的抗氧化机制主要通过其含有的多种抗氧化成分,如多酚、黄酮等,通过清除体内的自由基,抑制脂质过氧化,从而保护细胞免受氧化应激的损害。

此外,五味子还能提高体内超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化酶的活性,进一步增强机体的抗氧化能力。

四、五味子对酒精性肝损伤的保健机制酒精性肝损伤的主要原因是酒精代谢过程中产生的代谢产物对肝脏的损害。

五味子通过其多种生物活性成分,可以减轻酒精对肝脏的损害,促进肝脏细胞的修复和再生。

同时,五味子还能提高肝脏的解毒能力,加速酒精代谢产物的排出,从而起到保护肝脏的作用。

五、五味子制剂学研究针对五味子的不同组分,研究者们开发了多种制剂形式,如片剂、胶囊、颗粒等。

这些制剂不仅方便了患者的使用,也提高了五味子的生物利用度和稳定性。

在制剂过程中,通过控制工艺参数和添加适当的辅料,可以有效地保护五味子的活性成分,提高其药效。

六、结论五味子因其丰富的生物活性成分和显著的保健功能,在抗氧化和保护肝脏方面具有重要的作用。

其抗氧化机制主要通过清除自由基、抑制脂质过氧化等方式实现。

对于酒精性肝损伤,五味子可以通过多种途径减轻肝脏的损害,促进肝脏细胞的修复和再生。

在制剂学方面,针对五味子的不同组分开发的制剂形式,不仅方便了患者的使用,也提高了五味子的生物利用度和稳定性。

丙氨酸转氨酶实验报告

丙氨酸转氨酶实验报告

一、实验目的1. 了解丙氨酸转氨酶(ALT)在生物体内的重要作用。

2. 掌握ALT活力的测定原理和方法。

3. 分析ALT活力与肝脏疾病之间的关系。

二、实验原理丙氨酸转氨酶(ALT)是一种在生物体内广泛存在的氨基转移酶,其主要功能是催化丙氨酸和α-酮戊二酸之间的氨基转移反应。

ALT在氨基酸的合成和分解、尿素和嘌呤的合成等中间代谢过程中具有重要作用。

当肝脏、心肌等组织发生损伤或坏死时,ALT会从细胞内释放到血液中,导致血液中ALT活性升高。

本实验采用连续监测法测定ALT活力,以丙酮酸为底物,通过测定反应体系中NADH的生成量来反映ALT的活力。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 血清样本- 丙酮酸- NADH氧化酶- 2,6-二氯酚靛酚- 0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4)- 1mol/L氢氧化钠溶液- 0.1mol/L盐酸溶液- 移液器- 实时荧光分光光度计2. 实验仪器:- 低温高速离心机- 精密电子天平- 恒温水浴锅- 紫外可见分光光度计四、实验方法1. 样本处理:将血清样本离心,取上清液备用。

2. 标准曲线绘制:以丙酮酸浓度为横坐标,NADH的生成量为纵坐标,绘制标准曲线。

3. ALT活力测定:将血清样本、丙酮酸、NADH氧化酶、磷酸盐缓冲液等按照实验步骤混合,在实时荧光分光光度计上测定NADH的生成量。

4. 数据处理:根据标准曲线,计算ALT活力。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:绘制标准曲线,得到线性方程为y = 0.0126x - 0.0018,相关系数R² = 0.9989。

2. ALT活力测定:将血清样本按照实验步骤进行测定,得到ALT活力为x = 0.015 mol/L。

3. 数据分析:根据ALT活力与肝脏疾病之间的关系,当ALT活力超过正常值时,提示肝脏可能存在炎症、损伤等疾病。

六、实验结论通过本实验,我们成功测定了血清中ALT的活力,并分析了ALT活力与肝脏疾病之间的关系。

丙氨酸乙醛酸氨基转移酶的介绍和研究进展

丙氨酸乙醛酸氨基转移酶的介绍和研究进展

Open Journal of Nature Science 自然科学, 2018, 6(5), 409-415Published Online September 2018 in Hans. /journal/ojnshttps:///10.12677/ojns.2018.65053Introduction and Research Progress ofAlanine-Glyoxylate AminotransferaseJingming XiaCollege of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan HubeiReceived: Aug. 31st, 2018; accepted: Sep. 13th, 2018; published: Sep. 20th, 2018AbstractThe alanine-glyoxylate aminotransferase (AGT) is a protease expressed in the liver and plays an important role in transforming glyoxylate to glycine in case it isoxidated to harmful oxalate.Meanwhile, the gluconeogenesis of AGT is also important to supply energy to animals. Some re-searches show that AGT can target to mitochondria or peroxisome in mammals, and the location of AGT in organelle is related to their diet type. Generally, in carnivorous mammals, AGT is mainly targeted to mitochondria, while in herbivores, AGT is mostly targeted to peroxisome, and AGT is targeted to mitochondria and peroxisome in omnivores. Mistargeting of AGT to mitochondria in humans can lead to primary hyperoxaluria type 1 (PH1) disease for glyoxylate in peroxisome that cannot be efficiently detoxified and is finally converted to harmful calcium oxalate, so that the right organelle’s location of AGT is critical to animals. This review will state the structure, func-tion, glyoxylate metabolism, organelle’s location, research progress and research prospect of the AGT.KeywordsAGT, Organelle’s Location, Diet, Glyoxylate丙氨酸乙醛酸氨基转移酶的介绍和研究进展夏敬明武汉大学生命科学学院,湖北武汉收稿日期:2018年8月31日;录用日期:2018年9月13日;发布日期:2018年9月20日夏敬明摘 要丙氨酸乙醛酸氨基转移酶-AGT (alanine-glyoxylate aminotransferase)是在肝脏中表达的一种蛋白酶,作用是将乙醛酸转化为甘氨酸,防止乙醛酸被氧化为对生物体有害的草酸;而同时又能参加糖异生代谢,为动物提供能量。

丙氨酸氨基转移酶(ALT)的实验室检测

丙氨酸氨基转移酶(ALT)的实验室检测

5. 标准品法可避免检测受环境因素等 引起的系统误差,标准品的准确配置和加 样直接决定实验结果的准确。 出现大量负值(会导致漏检),阳性过多 基本上都是由于标准品配置和加样不准确。

(二) 复检——丙氨酸转移酶系数法 1. 设备 1.1 340 RT酶标仪。 2. 试剂 2.1 中生丙氨酸转移酶检测试剂(干粉) 2.2 ALT标准品:110U、88U、22U。 3. 程序设置 3.1读板程序:震荡20秒,60秒、120秒、180秒、 240秒、300秒340nm读板五次。 3.2 以标本△OD值乘以系数计算标本ALT值。
5.2.2 说明:K设为设定的接近K真的系数。 U设为已知的ALT标准品酶含量在K=K设时 测定的酶含量;∆OD为340nm波长测定反 应系统每单位时间OD值变化率; U设=K设×∆OD ∆OD= U设/K设 公式2 5.2.3同一酶含量的标本在同一反应系统中 ∆OD不变,将公式2代入公式1,得: K真= U真×K设/ U设

ALT是献血法规定的血液检验项目之一。 参考值范围为5~40U/L。 ALT催化下列反应: α-酮戊二酸 + L-丙氨酸 L-谷氨酸+丙 酮酸
ALT的生理变异较小,性别、年龄、进食、 适度运动对酶活性无明显影响。病毒性肝 炎时随不同病期和严重程度而异,常明显 升高,可达10~100倍正常上限。肝硬化、 急性心肌梗死、心肌炎、肌肉损伤、肌肉 萎缩等均可升高。
也只有在此基础上建立起来的测定方法才是可靠的准确酶反应是随着温度升高而升高的但测定酶是都需要酶和底物在一定温度下作用一段时间过高的温度可能使酶失活
丙氨酸氨基转移酶(Hale Waihona Puke LT)的 实验室检测基础知识

丙氨酸-生化课件详解


10
02
丙氨酸在食品中的 应用
3、风味调味料
a.增强化学调味料的调味效果,对于核酸系调味料添加约为其 3~5倍的量,可增强调味效果。 b.改善人工甜味剂的味感。对人工甜味剂添加1—5%(一般为 1%左右)的量,能使甜味柔和,改善后味。 c.改善有机酸的酸味。按1%—5%的量添加于有机酸,可改善冰 醋酸、琥珀酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸等的酸味。改进醋的风 味时用量约0.2%。 d.提高腌制效果。按食盐量的5%—10%添加,可缩短腌制时间。
丙氨酸 在医药上的
应用
16
03
丙氨酸在医药上的 应用
1、氨基酸输液
丙氨酸在治疗如肝病引起的蛋白质合成紊乱、糖尿病、急慢性 肾功能衰竭以及对维持危急病人的营养、抢救患者的生命方面起 到了积极作用。
如野口忠,高桥伸一郎等发明了专治糖尿病患者用的氨基酸输 液和食品。
17
03
丙氨酸在医药上的 应用
L-苯丙氨酸(或L-甲基苯丙氨酸酯)与L-天冬氨酸以化学或酶 催化反应制得阿斯巴甜。
8
02
丙氨酸在食品中的 应用
2、防腐剂
L-丙氨酸与二元羧酸 ( 如乙酸钠)、氧化性酸的混合物是保存 面条的上佳防腐剂, 并且能保鲜。
L-丙氨酸与辣椒油、山梨酸钾等混合物能有效地抑制酵母菌、 大肠杆菌、黑曲霉等有害菌, 可适用于水产品、面条、腌制品、 海产品、豆制品、畜产品以及饲料、化妆品、药品的保鲜。
11
02
丙氨酸在食品中的 应用
3、风味调味料
f.提高含醇饮料的质量。按0.1—0.5%或者0.2—1.5%的比例添 加于含醇饮料可使酒味醇和,尚可防止发泡酒老化,减少酵母臭。 g.防止油类老化。按0.01—1.0%的比例添加于油类或蛋黄酱, 具有防止氧化的效果。 h.改善浸渍品的风味。按0.2—0.3%的比例添加于糟制食品、酱 油浸渍食品、米糠腌制食品,能改善其风味。 i.合成酒精的调味料。用量0.01——0.03%

实验性酒精性肝损伤小鼠血清和肝组织中ACTA及FS的表达水平及其意义

实验性酒精性肝损伤小鼠血清和肝组织中ACTA及FS的表达水平及其意义杨清;李大光;陈勃;张灵敏;刘洋;柳忠辉【摘要】目的:探讨激活素A(ACTA)和卵泡抑素(FS)在酒精性肝损伤中的作用,阐明酒精性肝病的发生机制.方法:建立酒精性肝损伤小鼠模型,以建模后24、72、120及168 h为时间点,采用ELISA法检测40例模型组小鼠及40例对照组小鼠血清ACTA和FS水平以及肝功能变化情况.对模型组小鼠和对照组小鼠肝组织进行HE 染色及免疫组织化学染色,观察小鼠肝组织病理变化和ACTA及FS的表达情况.结果:各时间点对照组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和ACTA水平无明显变化,而模型组小鼠血清ALT、AST和ACTA水平均有不同程度的变化,其中ALT、AST水平以24 h为最高,ACTA水平以72 h为最高.模型组小鼠血清ALT、AST及ACTA水平在4个时间点上与相应对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).在4个时间点,模型组和对照组小鼠FS水平比较差异无统计学意义(P>0.05).对照组小鼠肝组织中几乎不表达ACTA,而FS表达阳性.模型组小鼠的肝组织汇管区周围高表达ACTA.模型组小鼠肝组织FS表达水平与对照组小鼠肝组织FS表达无明显差异.结论:ACTA和FS在酒精性肝损伤过程中发生了不同的变化,ACTA和FS 系统失衡可能是酒精性肝病和肝纤维化形成的重要原因.【期刊名称】《吉林大学学报(医学版)》【年(卷),期】2012(038)002【总页数】6页(P221-224,后插1-后插2)【关键词】激活素A;酒精性肝损伤;酒精性肝病【作者】杨清;李大光;陈勃;张灵敏;刘洋;柳忠辉【作者单位】吉林大学第一医院二部输血科,吉林长春130031;吉林大学第一医院二部输血科,吉林长春130031;吉林大学第一医院二部输血科,吉林长春130031;吉林大学第一医院二部输血科,吉林长春130031;吉林大学第一医院二部输血科,吉林长春130031;吉林大学白求恩医学院免疫学教研室,吉林长春130021【正文语种】中文【中图分类】R392-33激活素A(activin,ACTA)属于TGF-β超家族成员,在初期胚胎形成、神经分化诱导、造血细胞增殖和分化、内分泌中枢垂体性激素分泌等多方面发挥重要作用。

五味子及其活性成分治疗酒精性肝损伤研究进展

五味子及其活性成分治疗酒精性肝损伤研究进展都梦帆1,向 汝1,胥 冰1,郭东艳2,李 涛3,史晓燕3,段丽芳3,范 妤3,4(1.陕西中医药大学医学技术学院,陕西咸阳712046;2.陕西省中医药大学药学院,陕西咸阳712046;3.陕西中医药大学基础医学院,陕西咸阳712046;4.陕西省中医体质与疾病防治研究重点实验室,陕西咸阳712046)[关键词] 五味子;酒精性肝损伤;木脂素;多糖;药理作用doi :10.3969/j.issn.1008-8849.2022.03.029[中图分类号] R575 [文献标识码] A [文章编号] 1008-8849(2022)03-0429-05 中药五味子(Schisandra )为木兰科五味子(北五味子)(Schisandra chinensis (Turcz.)Baill )或华中五味子(南五味子)(S.sphenanthera Rehd.et Wils.)的干燥成熟果实,具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效[1]。

从地域分布来看,南五味子主要分布于华中、西南等地,北五味子主要集中于东北、内蒙古等地。

五味子因其皮肉甘酸,核中苦辛,皆有咸味,五味具备,故名之。

五味子入肺、心、肾经,可敛肺滋肾、涩精止泻、宁心安神,是常用的滋补固涩类中药,临床上主要用于久嗽虚喘、津少口渴、体虚多汗、精滑不固、小便频数、久泻不止等症[2]。

现代研究表明其具有多种药理活性,如保肝、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、调节中枢神经系统活性[3]等。

五味子常与地黄、麦冬、人参等配伍,组成参芪五味子胶囊、刺五加口服液、生脉注射液等中成药,可治疗气血不足、神经衰弱等。

此外,五味子可与其他中药配伍治疗[通信作者] 胥冰,E -mail :xubing -95@ [基金项目] 国家自然科学基金青年项目(81703925);陕西省教育厅2021年度重点科研计划项目(21JS014);陕西省科技厅项目(2016SF -367);陕西中医药大学创新团队项目(2019-YL14)急、慢性肝损伤,修复受损肝细胞,降低血清转氨酶活性,加快乙醇代谢[4-5]。

丙氨酸对酒精性肝损伤保护作用的研究凌敏

丙氨酸对酒精性肝损伤保护作用的研究凌敏发表时间:2019-05-07T10:44:15.550Z 来源:《药物与人》2019年1月作者:凌敏李秀兰[导读] 探讨了丙氨酸在保护乙醇致酒精性肝损伤小鼠中的作用。

吉林医药学院凌敏李秀兰摘要目的探讨了丙氨酸在保护乙醇致酒精性肝损伤小鼠中的作用。

方法运用酒精肝损伤模型法,设3个剂量组92mg/(kg·BW)、183mg/(kg·BW)、550mg/(kg·BW) ,空白对照组和模型对照组每日灌胃无菌水。

连续灌胃32d后测各项指标。

给予受试物结束时,将模型对照组和各剂量组一次性灌胃给予50%乙醇12mL/(kg·BW),空白对照组给予无菌水。

各组动物隔夜禁食16h后处死动物及时进行肝脏生化指标检测和组织病理学检查。

结果与模型组比较,受试物550mg/(kg·BW)组肝组织中丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.01),183mg/(kg·BW)组与550mg/(kg·BW)组肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)含量显著升高(P<0.05、P<0.01),550mg/(kg·BW)组肝组织中甘油三酯(TG)含量显著降低(P<0.01)。

550mg/(kg·BW)组肝组织中脂肪变性平均分显著降低(P<0.05)。

结论在本实验条件下,L-丙氨酸对小鼠乙醇致酒精性肝损伤具有辅助保护作用。

关键词丙氨酸;酒精性肝损伤;甘油三酯;丙二醛[中图分类号]R575 [文献标识码]A [文章编号]1439-3768-(2019)-1-wt随着经济水平的快速发展和人民生活水平的显著提高,中国的酒精肝、脂肪肝、乙肝发病人数众多,据2006版中国肝病市场研究报告显示:中国每年大约有200万急性肝炎病例,且每年还有上升趋势。

而肝病的难以治愈性加上中国人“是药三分毒”的观念,尤其肝脏又是转化“毒物”的主要器官之一,人们越来越重视对肝脏的保护。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

丙氨酸对酒精性肝损伤保护作用的研究凌敏发表时间:2019-05-07T10:44:15.550Z 来源:《药物与人》2019年1月作者:凌敏李秀兰[导读] 探讨了丙氨酸在保护乙醇致酒精性肝损伤小鼠中的作用。

吉林医药学院凌敏李秀兰摘要目的探讨了丙氨酸在保护乙醇致酒精性肝损伤小鼠中的作用。

方法运用酒精肝损伤模型法,设3个剂量组92mg/(kg·BW)、183mg/(kg·BW)、550mg/(kg·BW) ,空白对照组和模型对照组每日灌胃无菌水。

连续灌胃32d后测各项指标。

给予受试物结束时,将模型对照组和各剂量组一次性灌胃给予50%乙醇12mL/(kg·BW),空白对照组给予无菌水。

各组动物隔夜禁食16h后处死动物及时进行肝脏生化指标检测和组织病理学检查。

结果与模型组比较,受试物550mg/(kg·BW)组肝组织中丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.01),183mg/(kg·BW)组与550mg/(kg·BW)组肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)含量显著升高(P<0.05、P<0.01),550mg/(kg·BW)组肝组织中甘油三酯(TG)含量显著降低(P<0.01)。

550mg/(kg·BW)组肝组织中脂肪变性平均分显著降低(P<0.05)。

结论在本实验条件下,L-丙氨酸对小鼠乙醇致酒精性肝损伤具有辅助保护作用。

关键词丙氨酸;酒精性肝损伤;甘油三酯;丙二醛[中图分类号]R575 [文献标识码]A [文章编号]1439-3768-(2019)-1-wt随着经济水平的快速发展和人民生活水平的显著提高,中国的酒精肝、脂肪肝、乙肝发病人数众多,据2006版中国肝病市场研究报告显示:中国每年大约有200万急性肝炎病例,且每年还有上升趋势。

而肝病的难以治愈性加上中国人“是药三分毒”的观念,尤其肝脏又是转化“毒物”的主要器官之一,人们越来越重视对肝脏的保护。

L-丙氨酸是组成人体蛋白质的20多种氨基酸中的一员,为分子内含有羧基和氨基的中性非必需氨基酸,也是人体血液中含量最高的氨基酸。

它是ɑ-丙氨酸的一种旋光异构体,所以又称为L-ɑ-氨基丙酸,溶于水,无臭无毒,具有鲜味及甜味,其甜味是蔗糖的1.2倍。

有研究指出丙氨酸可以有效地减轻酒精对肝脏的损害。

通过对腹腔注射170mmol/kg体重19% 的乙醇的小鼠进行试验表明,服用L-丙氨酸的小鼠的生存率为67% ,比不投的高出34% [1]。

但L-丙氨酸对肝脏保护作用的实验研究文献较少,本文探讨了丙氨酸在 SD 小鼠酒精性肝损伤中对肝脏的保护作用。

为研究以L-丙氨酸为原料的保肝产品提供依据。

1 材料与方法1.1 样品 L-丙氨酸,白色结晶性粉末。

试验时用蒸馏水配制,放入冰箱冷藏保存。

1.2 动物健康SPF级昆明种雄性小鼠共50只,体重16g〜22g,饲料来源于北京科澳协力饲料有限公司。

1.3 仪器与试剂仪器解剖器械、灌胃针、紫外可见分光光度计、冰冻切片机、Motic生物显微镜试剂丙二醛( MDA)和谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒、双缩脲测定试剂盒、甘油三酯(TG)测定试剂盒。

1.4 方法取50只昆明种雄性小鼠随机平均分成5组。

每组10只,设3个剂量组92 mg/(kg·BW)、183 mg/(kg·BW)、550mg/(kg·BW)。

每日一次经口给予,连续灌胃32d后测各项指标。

小鼠灌胃体积为10mL/kg·BW。

同时设空白对照组(0g/kg·BW)和模型对照组(0g/kg·BW),每日灌胃体积与各受试物组相同。

各剂量组均给予维持饲料。

每周称重给予受试物结束时,将模型对照组和各剂量组一次性灌胃给予50%乙醇12mL/(kg·BW),空白对照组给予无菌水。

各组动物隔夜禁食16h。

处死动物立即称取肝重计算脏体比,并按试剂盒要求进行肝脏生化指标( MDA、GSH、TG) 检测和组织病理学检查,然后用 SPSS 11.0 对数据进行统计处理。

1.5 评定标准在酒精性肝损伤模型成立的前提下,肝脏MDA、还原型GSH和TG三项检测指标结果阳性,或肝脏MDA、还原型GSH和TG三项检测指标中任两项指标阳性和病理组织学检查结果阳性,可判定受试样品具有对酒精肝损伤有辅助保护作用。

2 结果2.1 L-丙氨酸对小鼠体重的影响表1 L-丙氨酸对小鼠体重的影响( x±s)组别动物数给予受试物前给予受试物后(只)体重(g)体重(g)空白对照组1021.2士 1.048.1±3.5模型对照组1021.5±1.149.2±2.2 92mg/(kg·BW) 组1021.6±0.947.2土 3.1183mg/(kg·BW) 组1021.7±0.547.1±2.7550mg/(kg·BW) 组1021.7±0.747.9±3.9由表1可见,小鼠的初始体重在各剂量组与模型对照组(0g/kg·BW)间比较、空白对照组与模型对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。

即小鼠的初始体重在各组间较为均衡。

经口给予小鼠不同剂量的L-丙氨酸32d后,小鼠的体重在各剂量组与模型对照组(0g/kg·BW)间比较、空白对照组与模型对照组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。

即L-丙氨酸对小鼠体重无不良影响。

2.2 L-丙氨酸对小鼠肝脏 MDA、GSH、TG 含量的影响表 2 L-丙氨酸对小鼠肝匀浆中 MDA、GSH、TG 含量的影响( x±s)组别动物数(只)MDA/nmol·mg-1GSH/mg·g-1TG/mmol·g-1空白对照组100.92±0.429.71±2.040.021±0.003模型对照组10 2.21±0.55##7.73±1.33##0.035±0.008# 92mg/(kg·BW) 组10 1.90±0.777.78±2.110.030±0.005 183mg/(kg·BW)组10 1.85±0.488.53±2.23*0.027±0.005 550mg/(kg·BW) 组10 1.21±0.45**9.18±1.76**0.022±0.006*注:#表示与空白对照组比较 P<0.05;##表示与空白对照组比较 P<0.01;* 表示与模型对照组比较 P<0.05; **表示与模型对照组比较 P<0.01。

由表2可见,经口给予小鼠不同剂量的L-丙氨酸32d后,建立酒精肝损伤模型。

模型对照组与空白对照组比较,肝组织中MDA显著升高(P<0.01),GSH显著降低(P<0.01),TG显著升高(P<0.05),表明造模成功。

与模型对照组(0g/kg·BW)比较,550mg/(kg·BW)组肝组织中丙二醛含量显著降低(P<0.01),183mg/(kg·BW)组与550mg/(kg·BW)组肝组织中GSH 含量显著升高(P<0.05、P<0.01),550mg/(kg·BW)组肝组织中TG含量显著降低(P<0.01)。

2.3 L-丙氨酸对肝组织切片病理学影响表3 L-丙氨酸对肝组织切片病理学影响(I±SD)组别动物数脂肪变性(只)平均分空白对照组109±4模型对照组1041±6## 92mg/(kg·BW)组1039±10 183mg/(kg·BW) 组1034±11 550mg/(kg·BW)组1028±11*注:##表示与空白对照组比较 P<0.01; *表示与模型对照组比较 P<0.05。

由表3可见,经口给予小鼠不同剂量的L-丙氨酸32d后,建立酒精肝损伤模型。

模型对照组与空白对照组比较,肝组织脂肪变性平均分显著升高(P<0.01),表明模型建立成功。

与模型对照组(0g/kg·BW)比较,550mg/(kg·BW)组肝组织中脂肪变性平均分显著降低(P<0.05)。

3 讨论丙氨酸是存在于许多食品中的一种氨基酸 ,已经用作饮食的添加剂。

近几年来,L-丙氨酸在国内外已普遍应用于食品的营养强化和调味。

L-丙氨酸本身不含钠离子,在用量上具有更高的安全性;目前我国批准的作为食品添加剂使用的 L-丙氨酸仅适用于经酶法生产制得的 L-丙氨酸,但酶法生产过程成本高,有研究者研究了发酵法生产L-丙氨酸,并对其安全性进行了研究。

陈耿等[2-3]研究发酵法 L-丙氨酸对小鼠的亚慢性毒性和最大无作用剂量、L-丙氨酸对小鼠的急性毒性和遗传毒性研究。

结果表明发酵法 L-丙氨酸对雌、雄小鼠亚慢性毒性试验未观察到有害作用剂量( NOAEL) 分别为 5.56、4.58 g/kg BW( 分别相当于推荐剂量的 332 和 274 倍),发酵法L-丙氨酸急性毒性属无毒级,未见其明显致突变作用或遗传毒性。

众所周知 ,酒精是通过肝脏进行代谢的,长期多量摄入酒精时 ,会引起脂肪肝、纤维化、肝硬化等症;即使饮入的酒量还未引起上述症状,也会引起血糖下降,行动受到抑制。

L-丙氨酸在被人体吸收后可产生大量的泛酸,泛酸是 NAD+的辅酶,泛酸的增加促进了酒精在人体内的代谢,同时丙氨酸可以抑制乙醇所致的丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高,对肝损害有显著的保护作用[4]。

丙氨酸作为增味剂的较早应用是将其添加到合成酒中,增加合成酒的浓香味和甜味。

L-丙氨酸可增加酒的甜味,使酒的味道更加醇厚,也能防止啤酒和发泡的氨基酸褐变,减少酵母气味,同时由于它具有减轻酒精对肝脏损伤的解毒作用,所以L-丙氨酸被广泛用于低度酒的生产[5],也可以将 L-丙氨酸与谷氨酰胺以 1 0. 05~ 0. 5(摩尔比 )[6]混合物制成片剂、胶囊、乳剂、口服液等,这样能起到保肝护肝、降低酒精中毒的作用。

本文运用酒精肝损伤模型法,设3个剂量组92mg/(kg·BW)、183mg/(kg·BW)、550mg/(kg·BW) ,研究了L-丙氨酸对酒精性肝损伤保护作用,结果显示与模型组比较,受试物550mg/(kg·BW)组肝组织中丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.01),183mg/(kg·BW) 组与550mg/(kg·BW)组肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)含量显著升高(P<0.05、P<0.01),550mg/(kg·BW)组肝组织中甘油三酯(TG)含量显著降低(P<0.01)。

相关文档
最新文档