关键酶HK
临床医学检验技术生化重点
生物化学检验常见考点总结一、临床化学基本概念临床化学是化学、生物化学和临床医学的结合，有其独特的研究领域、性质和作用，它是一门理论和实践性均较强的，并以化学和医学为主要基础的边缘性应用学科，也是检验医学中一个独立的主干学科。
二、临床化学检验及其在疾病诊断中的应用1.技术方面：达到了微量、自动化、高精密度。
2.内容方面：能检测人体血液、尿液及体液中的各种成分，包括糖、蛋白质、脂肪、酶、电解质、微量元素、内分泌激素等，也包含肝、肾、心、胰等器官功能的检查内容。
为疾病的诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防等各个方面提供理论和试验依据，也促进了临床医学的发展。
第一章糖代谢检查一、糖的无氧酵解途径（糖酵解途径）★概念：在无氧情况下，葡萄糖分解生成乳酸的过程。
1、关键酶：己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶2、三步不可逆反应：①葡萄糖磷酸化成为葡萄糖-6-磷酸，由己糖激酶催化。
为不可逆的磷酸化反应，消耗1分子ATP。
②果糖-6-磷酸磷酸化，转变为1,6-果糖二磷酸，由磷酸果糖激酶催化，消耗1分子ATP。
是第二个不可逆的磷酸化反应。
③磷酸烯醇式丙酮酸经丙酮酸激酶催化将高能磷酸键转移给ADP，生成丙酮酸和ATP，为不可逆反应。
3、两次底物水平磷酸化（产生ATP）：①1,3-二磷酸甘油酸→3-磷酸甘油酸②磷酸烯醇式丙酮酸→丙酮酸4、1分子的葡萄糖通过无氧酵解可净生成2个分子ATP，糖原可净生成3分子ATP，这一过程全部在胞浆中完成。
5、生理意义：（1）是机体在缺氧/无氧状态获得能量的有效措施。
（2）机体在应激状态下产生能量，满足机体生理需要的重要途径。
（3）糖酵解的某些中间产物是脂类、氨基酸等的合成前体，并与其他代谢途径相联系。
依赖糖酵解获得能量的组织细胞有：红细胞、视网膜、角膜、晶状体、睾丸等。
二、糖的有氧氧化★概念：葡萄糖在有氧条件下彻底氧化成水和二氧化碳的过程，是糖氧化的主要方式。
1、四个阶段：①葡萄糖或糖原经糖酵解途径转变为丙酮酸；②丙酮酸从胞浆进入线粒体，氧化脱羧生成乙酰辅酶A；③乙酰辅酶A进入三羧酸循环，共进行四次脱氢氧化产生2分子CO2，脱下的4对氢；④经氧化脱下的氢进入呼吸链，进行氧化磷酸化，生成H2O和ATP。
糖的无氧酵解与有氧氧化综述
糖的无氧酵解与有氧氧化综述班级：生物工程（2）班学号：0902012035 姓名：何良兵摘要：糖是一类化学本质为多羟醛或多羟酮及其衍生物的有机化合物。
在人体内糖的主要形式是葡萄糖(glucose，Glc)及糖原(glycogen，Gn)。
葡萄糖是糖在血液中的运输形式，在机体糖代谢中占据主要地位；糖原是葡萄糖的多聚体,包括肝糖原、肌糖原和肾糖原等，是糖在体内的储存形式。
葡萄糖与糖原都能在体内氧化提供能量。
食物中的糖是机体中糖的主要来源，被人体摄入经消化成单糖吸收后，经血液运输到各组织细胞进行合成代谢和分解代谢。
机体内糖的代谢途径主要有葡萄糖的无氧酵解、有氧氧化、磷酸戊糖途径、糖原合成与糖原分解、糖异生以及其他己糖代谢等。
本文主要介绍糖代谢的主要途径：糖酵解、有氧氧化的反应过程及生理意义。
关键词：糖酵解有氧氧化反应过程调节生理意义正文：糖酵解途径(glycolytic pathway)是指细胞在胞浆中分解葡萄糖生成丙酮酸(pyruvate)的过程，此过程中伴有少量ATP的生成。
在缺氧条件下丙酮酸被还原为乳酸(lactate)称为糖酵解。
有氧条件下丙酮酸可进一步氧化分解生成乙酰CoA进入三羧酸循环，生成CO2和H2O。
(一)葡萄糖的转运(transport of glucose)葡萄糖通过转运载体转入细胞示意图GLUT代表葡萄糖转运载体葡萄糖不能直接扩散进入细胞内，其通过两种方式转运入细胞：一种是在前一节提到的与Na+共转运方式，它是一个耗能逆浓度梯度转运，主要发生在小肠粘膜细胞、肾小管上皮细胞等部位；另一种方式是通过细胞膜上特定转运载体将葡萄糖转运入细胞内(图4－1)，它是一个不耗能顺浓度梯度的转运过程。
目前已知转运载体有5种，其具有组织特异性如转运载体-1(GLUT-1)主要存在于红细胞，而转运载体-4(GLUT-4)主要存在于脂肪组织和肌肉组织。
(二)糖酵解过程糖酵解分为两个阶段共10个反应，每个分子葡萄糖经第一阶段共5个反应，消耗2个分子ATP为耗能过程，第二阶段5个反应生成4个分子ATP为释能过程。
关键酶
糖酵解
己糖激酶（hk），磷酸果糖激酶-1（PTK-1），丙酮酸激酶（pk）
丙酮酸还原为乳酸
乳酸脱氢酶（LDH）
丙酮酸生成乙酰CoA
焦磷酸硫胺素（TPP），硫辛酸，FAD,NAD+，CoA（交流饭难吃）（辅酶）
丙酮酸脱氢酶复合体
柠檬酸循环
柠檬酸合酶，异柠檬酸脱氢酶，α-酮戊二酸脱氢酶复合体（后两个是主要调节点）
氧化脱氨
L-谷氨酸脱氨酶
鸟氨酸循环（尿素合成）
氨基甲酰酸
嘌呤补救合成
腺嘌呤磷酸核糖转移酶
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶
核苷激酶
嘧啶补救合成
嘧啶磷酸核糖转移酶
磷酸戊糖途径
葡糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）（辅酶NADP+）
糖原合成
糖原合酶
糖原分解
糖原磷酸化酶
糖异生
丙酮酸羧化酶，磷酸烯醇式丙酮酸，果糖二磷酸酶-1，葡萄糖-6-磷酸酶
脂
甘油三酯合成
脂酰辅酶A转移酶
软脂酸合成
乙酰辅酶A羧化酶
软脂酸延长
脂肪酸合酶复合体
脂肪动员
甘油三酯脂肪酶
甘油转变为3-磷酸甘油
甘油激酶
β-氧化——脂肪酸活化
脂酰辅酶A合成酶
β-氧化——脂酰辅酶A进去线粒体
肉碱脂酰转移酶I
酮体合成
羟甲基戊二酸单酰辅酶A合酶（HMGCoA合酶）
酮体分解
琥珀酰辅酶A转硫酶，乙酰乙酸硫激酶
胆固醇合成
HMG-CoA还原酶
氨基酸
γ-谷氨酰胺循环
γ-谷氨酰胺转移酶
转氨基作用
L-谷氨酸转氨酶（辅酶：磷酸吡哆醛）
己糖激酶-Ⅱ在直肠癌组织中表达临床意义
己糖激酶-Ⅱ在直肠癌组织中表达临床意义龚海;石欣;刘双海【摘要】Objective:To study the expression of Hexokinase-II in carcinoma of the rectum,and analyze the relation-ships between HK-II expression and the clinical features. Methods: The expression of HK-II in 100 carcinoma of the rec-tum tissue was checked by using reverse transcriptase polymerase chain reaction,Western blot and inununohistochemistry technique.Then the relationships between HK-II expression and the clinical features of carcinoma of the rectum patients were further investigated,such as tumor sizes,clinical stages,differentiation levels,lymphatic metastasis. Results:RT-PCR re-sult showed that positive expression HK-II in carcinoma of the rectum tissue were higher than that in normal tissue on RNA level.Western blot result showed that positive expression HK-II in carcinoma of the rectum tissue were higher than that in normal tissue on proteinlevel.Inununohistochemistry results showed that the cancer tissue had more positive expres-sion than normal rectal mucosatissue(P=0.000).Inununohistochemistry results showed that tumor sizes, differentiation lev-els and merger of tumor stages was related with positive expression HK-II (prespectively 0.001,0.000,0.019), lymphatic metastasis was not related with positive expression HK-II (P=0.815). Conclusions:The cancer tissue had more positive HK-II expression than normal rectal mucosa tissue. Tumor sizes,clinical stages and differentiation levels were related with positive expression of HK-II, lymphatic metastasiswas not related with positive expression of HK-II.%目的：检测己糖激酶-Ⅱ基因在直肠癌组织中表达，探讨其与患者预后的关系。
生物化学——-糖代谢
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（二）反应过程
⑴ 乙酰辅酶A进入TCA 不可逆 柠檬酸合成酶:关键酶，调节点
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⑵柠檬酸经顺乌头酸生成异柠檬酸(顺乌头酸 酶）
(3)异柠檬酸氧化生成a-酮戊二酸和CO2 异柠檬酸脱氢酶(NAD+) ：关键酶（主要） 不可逆
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（4） a-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰CoA
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（四）F－1，6－BP 甘油醛-3-磷酸+磷酸二羟丙酮
醛缩酶
(五）磷酸二羟丙酮
甘油醛-3-磷酸
磷酸丙糖异构酶
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(六) 甘油醛-3-磷酸
1,3-二磷酸甘油酸
1. 酶 ： 甘油醛-3-磷酸脱氢酶（NAD+ ，NADH+H+） 2. 十步反应中唯一的氧化还原反应
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3.生成2( NADH+H + ),两种去向:
糖异生途径
无氧
淀粉 乳酸、氨基酸、甘油
H2O＋CO2 ATP
乳酸
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第二节 糖酵解
一 概述 (一)概念：糖酵解（glycolysis）是通过一
系列酶促反应将葡萄糖降解为丙酮酸的过 程。 Glycolysis is the metabolic pathway that converts glucose into pyruvate。 （二）部位：胞浆 （三）产物：丙酮酸
（一）概念: 生物体内糖类、脂肪和氨基酸等的氧化产物乙
酰辅酶A与草酰乙酸缩合生成柠檬酸，柠檬酸再通 过一系列氧化步骤产生CO2、NADH+H+及FADH2，并 重新生成草酰乙酸进行再循环，从而降解乙酰基 并产生能量的代谢过程。
也叫柠檬酸循环，Krebs循环 H.A.Krebs 1937年提出 1953--- Nobel Prize in Medicine
己糖激酶(hexokinae ,HK)试剂盒使用说明
己糖激酶(hexokinae,HK)试剂盒使用说明货号：SD105规格：50管/48样产品简介：HK广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶，催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH，NAD PH在340nm有特征吸收峰。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：提取液：60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体5mL×1瓶，4℃保存；试剂四：粉剂×2支，-20℃保存，用时每支加2mL双蒸水充分溶解备用；用不完试剂仍-20℃保存；试剂五：粉剂×2支，-20℃保存；用时每支加1mL双蒸水充分溶解备用；用不完试剂仍-20℃保存；试剂六：粉剂×2支，-20℃保存；用时每支加125ul试剂一和125ul双蒸水充分溶解备用，用不完试剂4℃保存。
操作步骤：一、粗酶液提取：1、细菌、细胞或组织样品的制备收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400µL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20%。
超声3秒，间隔10秒。
重复30次）。
8000g4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定操作试剂名称测定管试剂一（ul）400试剂二（ul）400试剂三（ul）80试剂四（ul）80试剂五（ul）40试剂六（ul）8样本30将上述试剂按顺序加入1mL石英比色皿中，加样本的同时开始计时，在340nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1，比色后迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴中，准确反应5分钟。
白内障晶状体中醛糖还原酶、多元醇脱氢酶、己糖激酶、过氧化氢酶
您好，白内障是眼内晶状体透明度降低的疾病，导致视力下降。
白内障的形成与多种因素有关，其中包括氧化应激、代谢紊乱和遗传因素等。
在白内障的发生和发展过程中，醛糖还原酶、多元醇脱氢酶、己糖激酶和过氧化氢酶等酶的活性改变可能起到关键作用。
1. 醛糖还原酶(AR) :
醛糖还原酶是参与多元醇途径的关键酶。
在正常情况下，这个途径主要负责生物体内葡萄糖的转化。
但在高血糖状态下，醛糖还原酶的活性增加，导致大量的葡萄糖转化为山梨醇，而不是葡萄糖。
山梨醇在细胞内积累会导致细胞渗透性改变，进而引起细胞损伤。
在白内障的发展中，这种细胞损伤可能导致晶状体的氧化应激和蛋白质变性。
2. 多元醇脱氢酶(ALDH) :
多元醇脱氢酶是多元醇途径的另一个关键酶。
与醛糖还原酶类似，多元醇脱氢酶的活性增加也会导致大量葡萄糖转化为山梨醇。
这种细胞内山梨醇的积累也可能导致细胞损伤和白内障的发展。
3. 己糖激酶(HK) :
己糖激酶是糖酵解途径的关键酶，负责将葡萄糖转化为葡萄糖-6-磷酸。
在白内障的发展中，己糖激酶的活性可能受到多种因素的影响，从而影响到晶状体的代谢和能量供应。
4. 过氧化氢酶(CAT) :
过氧化氢酶是细胞内清除过氧化氢的主要酶。
在白内障的发展中，过氧化氢的积累可能导致晶状体的氧化应激和蛋白质损伤。
过氧化氢酶的活性增加可能有助于减少这种氧化应激，从而延缓白内障的发展。
总之，醛糖还原酶、多元醇脱氢酶、己糖激酶和过氧化氢酶在白内障的发生和发展中都可能起到关键作用。
对这些酶的研究有助于我们更好地理解白内障的发病机制，并为白内障的治疗提供新的靶点。
生物化学名词解释含习题----王镜言第三版(西农整理)
《生物化学--西农学生必看》——名词解释大全含习题！！！二、填空1、蛋白质分之的氨基酸之间以相连，核酸分子的单核苷酸之间以相连。
2、某蛋白质分子的PI是6.5，置于PH8.9的溶液中，该蛋白质带电荷，电泳时向移动。
3、核酸的基本组成成分有、、。
4、影响酶作用的因素有、、、、、。
5、全酶由和构成。
6、缺乏维生素和可引起巨幼红细胞性贫血。
7、缺乏维生素B2可引起，缺乏维生素D可引起。
8、写出下列符号的中文意思：CTPFAD FH49、线粒体内重要的呼吸链有和。
10、体内二氧化碳生成的方式有、、、。
11、呼吸链组成成分中起电子传递体作用的是和12、组成蛋白质的基本单位是，组成核酸的基本单位是。
13、蛋白质在等电点时以离子形式存在，在PH大于等电点的溶液中，大部分以离子形式存在，在PH小于等电点的溶液中，大部分以离子形式存在。
14、组成核酸中的戊糖有RNA中的和DNA中的。
15、酶作用的特点是、、、。
16、酶的化学本质是。
17、适量摄入维生素可维持机体的正常生理功能，但若长期过量摄入和可导致人类中毒。
18、缺乏维生素会引起相应的缺乏症。
VitB1——VitPP—— VitA——19、写出下列符号的中文意思：NAD+ 、UTP FMN 。
20、ATP的生成方式有和。
21、影响氧化磷酸化的因素有、、。
22、蛋白质的二级结构的主要形式有、。
tRNA 的二级结构为型。
23、糖原主要储存于、。
24、在条件下，正常人血糖浓度为。
25、糖酵解的全过程都在中进行，几乎每一步都有一种特异的酶参加。
其中，、、是糖酵解的三个关键酶。
26、一分子葡萄糖经酵解净生成分子ATP，从糖原开始，则每个葡萄糖可净生成分子ATP。
27、糖尿病的“三多一少”临床表现指的是多、多、多和减少。
28、惟一降低血糖浓度的激素是。
29、1mol乙酰辅酶A在体内彻底氧化能产生 molATP。
30、脂类是和的总称，其中为主要的能源物质之一，而则为生物膜的主要成分。
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糖代谢
1.糖的氧化：无氧氧化（3个酶，胞液）；有氧氧化（7个酶，胞液+线粒体）
①己糖激酶（葡萄糖激酶）：↓-G6P、长链脂酰COA；↑-胰岛素。
②磷酸果糖激酶-1：↓-ATP、柠檬酸；↑F-2,6-2P、F-1,6-2P、ADP、AMP。
③丙酮酸激酶：↓-ATP、丙氨酸、胰高血糖素；↑F-1、6-2P。
④丙酮酸脱氢酶复合体：↓ATP、乙酰COA、NADH、脂肪酸；↑AMP、COA、NAD、Ca2+
⑤柠檬酸合酶：- -
⑥异柠檬酸脱氢酶：↓ATP；↑ADP、Ca2+。
⑦α-酮戊二酸脱氢酶：↓ATP、NADH、琥珀酰CoA；↑Ca2+。
2.磷酸戊糖途径：胞液
葡糖-6-磷酸脱氢酶（NADPH/NADP+的产物负反馈调节）
3.糖原合成：肝、肌肉（胞液）
糖原合酶（a：有活性，去磷酸化的）。
↓磷酸化、AMP；↑ATP、G-6-P、胰岛素
4. 糖原分解：肝、肌肉、肾
糖原磷酸化酶（b:有活性，磷酸化的）。
↓血糖高时、胰岛素；↑磷酸化、胰高血糖素、Ca2+、肾上腺素
5.糖异生：肝、肾（胞液、线粒体。
原料：乳酸、甘油、生糖氨基酸、GTP、ATP）
①G-6-P酶：
②果糖二磷酸酶-1：
③丙酮酸羧化酶：↓；↑乙酰COA
④磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶：
总：↓果糖-2,6-二磷酸、AMP、胰岛素；↑ATP、胰高血糖素、肾上腺素、GC、乙酰COA、饥饿运动
脂质代谢
1.酮体（乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮）：肝（线粒体。
原料、乙酰COA--脂肪酸β氧化而来的）
①酮体的生成：HMG CoA（羟甲基戊二单酰CoA）合成酶
②酮体的氧化利用：心、肾、脑、骨骼肌（琥珀酰COA转硫酶）
2.胆固醇：肝、小肠（内质网+胞液。
原料：乙酰COA-三大代谢的分解产物、NADPH、ATP）
①合成：HMG CoA还原酶。
三高：高耗能（36A TP)、高耗料（18乙酰COA）、高耗氧（16NADPH+H）↓胰高血糖素、皮质醇、饥饿禁食、胆固醇；↑胰岛素、甲状腺素、高糖高饱高脂肪饮食
②转化为类固醇物质：胆汁酸、类固醇激素、VitD3
3.甘油三酯：
①合成：肝、脂肪组织、小肠（内质网。
原料：甘油、脂肪酸）脂酰COA转移酶
4.脂肪酸的合成：肝、肾、脑、肺、乳腺、脂肪组织（胞液。
原料：乙酰COA-线粒体内）柠檬酸-丙酮酸循环
乙酰COA羧化酶：↓脂酰COA、胰高血糖素、肾上腺素、生长激素、高脂饮食；↑柠檬酸、异柠檬酸、乙酰COA、胰岛素、高糖饮食、Mn2+。
辅基：生物素。
缩合、加氢、脱水、再加氢（NADPH供氢）
5.脂肪酸的分解：
①脂肪动员（脂肪细胞）：激素敏感性甘油三酯脂肪酶（HSL）↓胰岛素、前列腺素E、烟酸；↑肾上腺素、去甲、胰高血糖素、ACTH、TRH。
②甘油的利用（肝、肾、肠）：甘油激酶（脂肪细胞和骨骼肌的活性较低）
③脂肪酸β氧化（肝、心肌、骨骼肌，除脑外）：线粒体外活化、线粒体内β氧化。
肉碱脂酰转移酶I：禁食饥饿
脱氢、加水、再脱氢、硫解
④其他：1）不饱和脂肪酸的氧化：△3顺-△2反烯脂酰COA异构酶。
2）超长碳链脂肪酸：β氧化的同工酶。
3）奇数碳原子脂肪酸：有丙酰COA生成，β羧化酶作用后生成甲基丙二酰COA，消旋酶和异构酶作用后变成琥珀酰COA
氨基酸代谢
1.脱氨基作用
①转氨基作用：除赖、苏、脯、羟脯氨酸外
②L-谷氨酸氧化脱氨基：L-谷氨酸脱氢酶：唯一既能利用NAD+又能利用NADP+的酶
③联合脱氨基：肝、肾。
转氨酶和L-谷氨酸脱氢酶的联合作用。
④嘌呤核苷酸循环：肌肉组织中
2.尿素的合成（鸟氨酸循环、Krebs-H循环）：线粒体（甲酰磷酸合成酶I--N乙酰谷氨酸即AGA可激活）+胞液（精氨酸代琥珀酸合成酶）
核苷酸代谢
1.嘌呤合成：
①从头合成：肝细胞胞液（原料：天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、CO2、FH4）。
PRPP合成酶
②补救合成（重新合成）：脑、骨髓（原料：游离的嘌呤碱、嘌呤核苷）APRT和HGPRT
2.嘌呤分解：黄嘌呤氧化酶（别嘌呤醇可抑制）
3.嘧啶合成：
①从头：氨基甲酰磷酸合酶II（人类胞液，UMP负反馈）。
天冬氨酸氨基甲酰转移酶（细菌，CTP负反馈）
②补救：嘧啶磷酸核糖转移酶，尿苷激酶
4.嘧啶分解：核苷酸酶、核苷磷酸化酶。
①②③④⑤⑥⑦
↓；↑。