拟南芥室内培养技术
种拟南芥的步骤

种拟南芥的步骤
种拟南芥的步骤
1、紫外线照实验台15-20分钟。
准备:1/2MS培养基;平皿;枪;灭菌水;
0.1%Agar溶液(高温高压灭菌);灭菌枪头(黄枪头要剪);marker笔;无
水乙醇;95%乙醇;封口膜。
2、数种子于1.5ml的EP管中,做好标记。
3、微波炉化1/2MS培养基,倒板。
需要加抗生素的要加抗生素(潮霉素:每
100ml培养基加56ul;卡纳:每100ml培养基加100ul),无菌操作。
4、洗种子:
A、向盛种子的EP管中加1ml 75%的乙醇(250ul的无菌水加750ul的无水
乙醇,现配现用,且要先加无菌水),剧烈晃动8分钟。
【或者洗两次,每次4分钟】
B、将上述酒精倒出后,加入95%的乙醇冲洗5遍。
【3遍也可以】
C、用无菌水清洗2遍,倒掉水。
【1遍也可以】
5、将种子悬起。
加入100—200ul的0.1%的Agar溶液,将种子用枪吹起。
【Agar
的量要视情况而定】
6、点种子。
用200ul的枪和剪过的黄枪头吸取种子,在培养基上依次点种,尽
量分散均匀,晾干。
7、封皿,并做好标记。
8、层化。
放于4度的冰箱处理3天。
9、将层化的种子置于光照培养箱中育苗一周,培养皿要倾斜放置。
10、移栽于土中。
拟南芥菜室内培养技术的改进

[ 1 ] 陈 敏, 白书农. 拟南芥培养经验点滴 [J ]. 植物生理学通讯, 1995, 3 (16) : 4362438. [ 2 ] 樊妙姬. 拟南芥分子遗传学研究概况 [J ]. 遗传, 1992, 14 (3) : 40242.
Im provem en t on the Cultiva tion M ethods of A ra bidop s is tha lia na
in t roduced, includ ing of cu ltu re m ed ium , sow ing, irriga t ing, hum id ity, cu lt iva t ion
den sity. Exp eriences of cu lt iva t ion a re p rovided fo r resea rchers under the sim p le
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河北师范大学学报 (自然科学版) 第 23 卷
介质表面轻轻地浇, 不要冲着小苗, 以免把小苗冲倒; 更不要浇得过多, 以免把小苗淹死. 注意把握少量多次的原则. 小苗长至 3 cm 以上时, 可以每 2~ 3 d 浇 1 次, 每次浇水要浇 透. 1. 4 湿度 拟南芥喜湿润, 相对湿度应在 80% 左右. 我们可以把拟南芥放在人工气候箱 内培养. 但在没有人工气候箱的情况下, 可在拟南芥小苗上罩一个较薄的塑料袋. 这个塑 料袋既保证小苗所需要的湿度又保证了它的温度. 为了通气, 可在塑料袋上穿 5~ 6 个直 径为 0. 5 cm 的孔. 1. 5 种植密度 拟南芥种子很小, 很容易种得过密. 因此, 等小苗长大以后, 需要间苗. 最 终每株小苗应占 24~ 28 cm 2 的面积. 2 实验结果
YU Zheng2quan, SU N Y ing
拟南芥盆栽方案

拟南芥盆栽方案拟南芥(学名:Arabidopsis thaliana)是一种小型的一年生植物,因其生命周期短、易于培养和遗传实验的可行性,被广泛应用于植物科学研究中。
在本文中,我们将提供一个拟南芥盆栽方案,以帮助那些对这一植物进行自家种植的人。
1. 材料准备- 拟南芥种子:可在植物学实验室、种子公司或在线购买。
- 盆:选择适宜大小的盆,保证拟南芥根系能够充分扩展。
- 泥土:使用适宜的培养土,可在花草市场或园艺店购买。
- 平底盘或托盘:用于放置盆,以避免水滴在室内滴落。
2. 盆栽步骤2.1 准备盆土选择质地疏松、排水良好的培养土。
可以将培养土轻轻湿润,但避免过于湿润,以免引发根部腐烂。
2.2 播种将拟南芥种子均匀撒在培养土表面上,并轻轻压实,不要完全覆盖种子。
拟南芥种子较小,所以要小心操作,以确保均匀分散。
2.3 浇水使用喷壶或水壶从顶部轻轻喷洒水,保持培养土湿润。
避免使用喷头过大或水流过大的工具,以免种子被冲走。
2.4 光照与温度控制拟南芥适宜在温度适宜、充足的光照下生长。
将盆栽置于明亮的窗户旁或人工照明设备下。
室温保持在20-25摄氏度之间。
2.5 生长环境调节拟南芥对于光照的要求较高,因此要经常转动盆栽,以保证植株各个方向都能得到充足的光照。
如果环境光线不足,可以补充使用植物专用灯。
2.6 浇水与施肥保持培养土湿润,但避免过度浇水,以免引发根系病害。
约每周浇水一次,根据环境湿度和季节的变化做适当调整。
在生长过程中可以适时施加适量的植物营养液,以促进拟南芥的生长和发育。
3. 生长管理3.1 害虫防治定期检查拟南芥植株,如发现害虫如蚜虫、螨虫等,可以使用适量的杀虫剂进行处理,但要遵循产品说明。
3.2 避免拥挤随着拟南芥生长,植株之间可能会产生拥挤。
在植株茁壮成长后,适当间隔并摘除较弱的植株,以保证光照和营养的充足供给。
3.3 测量和记录生长数据观察拟南芥的生长情况,使用尺子或其它测量工具记录植株的高度、叶片数量等数据,以便后续分析比较。
[转载]拟南芥培养
![[转载]拟南芥培养](https://img.taocdn.com/s3/m/d965915f68eae009581b6bd97f1922791688bed3.png)
[转载]拟南芥培养一、拟南芥播种种子装入dorf管内,20μl种子加1ml 75% 乙醇消毒1分钟;吸去乙醇,加入1ml 50%次氯酸钠:50%无菌水:0.05%吐温(or 5%漂白粉),震荡洗涤15-20分钟;稍离心使种子沉于下部,吸去次氯酸钠或漂白粉,加入无菌蒸馏水清洗(清洗3次,每次洗完后稍离心,吸净水分);将种子用接种环均匀铺于MS培养基上,用封口膜封口,放入4℃冰箱内冷处理2-3天(春化)。
MS培养基的用量:直径为9cm的培养皿用25ml,直径为6cm 的培养皿用12.5ml。
加培养基时先将凝固的培养基用微波炉高温5分钟左右至全部解冻,然后慢慢冷却至不太烫手时倒板,如要加潮霉素等抗生素也是在此次加,加入后摇匀然后倒板。
倒板后至自然冷却即可铺种,如水分较多或板不够硬,亦可于倒板后将培养皿盖打开晾10分钟左右(此时超净台要关闭)。
种子的杀菌、清洗、铺板等过程在超净工作台上无菌操作,操作者进入超净工作台要用酒精棉球擦拭手、器具、超净台,防止感染细菌、真菌。
二、MS固体培养基制备1.培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。
现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ,20×) mg/LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ,200×) mg/LKI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ,200×) mg/LFeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ,200×) mg/LⅣA肌醇 20 000ⅣB烟酸 100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸 400上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
实验室拟南芥常用种植方法

贮存过程中影响种子寿命的主要是温度和含水量。温度越高,含水量越多,则种子寿命 越短。因此刚采集的种子必须要经过干燥才能保存。最安全的种子干燥的方法是将采集的种 子置于干燥环境下,在室温条件下放置 2-3 周便可。
种子的贮存可根据贮存的目的不同,分为短期、中期、长期贮藏。一般短、中期贮藏是 将种子贮存在 4℃,而长期贮藏是保持在-20℃温度下。当取用长期贮藏的种子前,先将贮 存种子的容器预热到室温,或者将其置于 37℃水浴 10min,以尽量使冰害降至最低。为了 及时了解贮存过程合适与否,一般对种子定期进行生活力测定,而种子发芽率是测定其生活 力的最佳选择。
拟南芥实验室的常用种植方法刘金亮西北师范大学生命科学学院730070摘要拟南芥由于其生活周期短种植和生长不受季节限制并且为自花受粉植物而作为实验最常用的模式植物因此拟南芥如何能够在实验室较好较快地生长便成为实验成败的关键由于拟南芥存在多种生态性各实验室均有各自适合栽培种植的方法如在土壤石英砂琼脂等均可种植但土壤种植种子萌发率低生长过程中受其它方面影响大故本方法重点介绍利用琼脂无菌培养基培养幼苗和移植相结合的方法来快速种植拟南芥该过程主包括种子的处理琼脂无要菌培养基上种子的培养和幼苗的移植以及成熟后种子的保存
过厚或过薄。过薄,点种子后水分蒸发快,培养基有可能干涸;过厚,种子发芽后,有可能 使叶子浸入平板中,影响幼苗后期发育并且过厚平板易开裂。
1.2 种子处理 1.2.1 种子消毒处理
在培养基中点样前,必须对对钟子进行消毒,防止感菌,具体方法为:利用 1%Naclo 浸泡 10min,离心后,倒掉 Naclo,然后用无菌蒸馏水洗涤 5-6 遍,时间间隔为 1min,注意 的是 Naclo 浓度不易过高和种子处理时间不易过长,有可能伤害种子。
拟南芥室内繁种技术的改进

表l
培养 介 质 的 成分 配 比
第 3期
赵 术珍 等 : 南芥 室 内繁种技 术 的改进 拟
5 l
图 1 苗 龄 为 2 0d的 拟 南 芥 幼 苗 移 栽 到 不 同 介 质 上 培 养 3 0d的 结 果
介质上 拟南 芥生 长最 弱 , 荚 小且 不 饱 满 ; 果 而在 3 号营养 土 、 石 和珍珠 岩 三 者 按 3 1 1的 比例 蛭 : : 混合 的培养 介质 上 拟 南芥 营养 生 长 旺盛 , 果荚 长 且 饱满 , 种子 数最 多 。
许多实 验室 的条 件 又较 简 陋 。为 此 , 采用 混 合介
122 播种 ..
种 子 首 先接 受 春 化 处 理 。即将 种
子 在潮湿 条件下置 于 0—4C冰 到 小盆 里 , 用水 从 盆底 部 的
质和直 播方式 进行 了拟南 芥 的繁 种技 术 研究 , 以
孔 将盆土 浸湿 , 静置 3 6 i 将托 盘 中多余 0— 0mn后 的水分倒 出 , 向介 质表面 喷洒水 , 种子与 干燥 再 将 的营养土混 匀后均 匀 地撒 到介 质表 面上 ( 需要 不
盖 土 ) 。
期在简 陋条件下 能有效 进行拟南芥 的繁 种 。
1 材 料 与 方 法
1 1 供试 材料 .
2 结 果 与分 析
2 1 不 同培 养介质对 拟南芥 生长的影 响 .
拟南芥室内培养技术研究

拟南芥室内培养技术研究刘守伟1,刘士勇2(1.东北农业大学园艺学院,哈尔滨150030;2.黑龙江省农业广播电视学校,哈尔滨150090)摘要:拟南芥室内培养的方法有土培法、蛭石培养法、沙培法、MS培养基法、移栽法、基质培养法和水培法,文章对这些方法的优缺点进行讨论。
关键词:拟南芥;室内培养;培养技术中图分类号:Q94-331文献标识码:A收稿日期:2005-09-12作者简介:刘守伟(1974-),女,黑龙江人,讲师,博士,主要从事蔬菜栽培生理和设施园艺方面的研究与教学工作。
E-mail:Liuliu_095@163.com拟南芥(Arabidopsisthaliana)是十字花科拟南芥属植物,具有生育期短,植株个体小及基因组小等特点,因而长期以来一直被用来作为分子生物学和传统遗传学研究的模式实验材料,尤其在植物发育生物学研究中扮演了十分重要的角色,为了与国际接轨,近年来国内已引入了拟南芥作为实验材料。
但是,拟南芥种子特别小,幼苗很弱,易夭折,给它的培养带来一定的困难。
目前,国内很少有实验室具备国外人工气候室培养拟南芥的全方位调控条件,在拟南芥培养方面存在成活率低、培养周期长等问题[1]。
因此,掌握拟南芥的培养技术非常重要。
目前,各个实验室常用的拟南芥培养方法主要有两种,一种土培法,另一种是移栽法。
其实,只要实验室条件具备,在室内成功培养拟南芥的方法很多。
本文依据多年在拟南芥培养方面的实践经验,结合目前的文献报道,对拟南芥的室内培养技术进行简述。
1拟南芥的室内培养技术1.1土培法把营养土和蛭石按4:6[1],1:2[2]或1:1[3]的比例混合均匀,预先放入通气良好的花盆内,用自来水浇透,待水完全渗入后15min,将经过春化处理的种子均匀地播在介质表面,不盖土,用塑料保鲜膜罩住花盆,并在上面扎几个小孔,薄膜既保证小苗所需要的湿度又保证了温度。
播种后3d就可以发芽,发芽后,及时把膜揭去,发芽后发现表土干了可以浇水,此时小苗比较脆弱,浇水时,最好用尖嘴洗瓶接近介质表面轻轻地浇,以免把小苗冲倒,不要浇得过多,以免把小苗淹死,把握少量多次的原则。
东北地区拟南芥室内栽培技术

I n d o o r Cu l t u r e Te c hn i qu e s f o r Ar a b i d o ps i s t ha l i a n a i n No r t he a s t Ch i na
( 1 . C o l l e g e o f L i f e S c i e n c e , J i a mu s i U n i v e r s i t y , J i a m u s i 1 5 4 0 0 7 , C h i n a ; 2 . S t a t e K e y L a b o r a t o r y o f T r e e
一
养 方法 , 供 同行参 考 。
1 材 料 与方 法
1 . 1 材料
,尤其 在植 物发 Fra bibliotek 生物 学 研 究 中扮 演 了十 分 重要
拟南芥种 子 ( A r a b i d o p s i s t h a l i a n a C o l u m b i a ) 由
中国林业科 学研 究 院林木 遗传 育种 国家重 点实 验室 提供 、 MS培 养基 、 培养 基 质 ( 营养土 : 蛭 石 :1 : 1 ) 、
me n t b i o l o g y . S e v e r a l c u l t u r e p r o b l e ms , h o w e v e r , e x i s t i n ma n y l a b o r a t o i r e s . T h e mo d i i f e d p r o t o c o l p r o v i d —