花椰菜叶片离体再生技术的研究
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花椰菜毕业论文
目录摘要 (1)引言 (1)1材料与方法 (3)1.1材料 (3)1.2实验方法 (3)1.2.1 花椰菜无菌的准备 (3)1.2.2 不同苗龄的外植体的获得 (3)1.2.3 AgNO对不定芽分化的影响 (3)1.2.4不定芽的生根培养及再生植株的移栽 (4)1.3再生频率与每块外植体再生芽数的计算 (4)2结果分析 (4)2.1激素浓度对不定芽分化的影响 (4)2.2不同基因型和苗龄对不定芽分化的影响 (5)2.3AgNO a对外植体分化能力的影响 (5)3小结与讨论 (5)谢辞 (6)参考文献 (7)花椰菜下胚轴高频再生体系的建立摘要：本文就NAA浓度、基因型和外植体苗龄的不同对花椰菜下胚轴再生的影响进行了初步的研究与探讨。
实验结果表明：单独使用6-BA 时，不定芽产生较少，而配合一定浓度的NAA寸，不定芽分化率增加。
但当NAA浓度大于0.2mg/L 时，外植体分化出大量的不定根并很少有不定芽产生。
只有在 2.0mg/L6-BA 和0.05 mg/LNAA 配合使用，才能达到最佳的诱导效果。
关键词：花椰菜下胚轴高频再生体系引言花椰菜又称花菜或菜花，属于十字花科芸薹属的栽培植物，原产于地中海北岸，传入我国已有二百多年的历史。
目前我国花椰菜种植面积已达35.3 万km2，居世界第一位。
花椰菜所含营养成分极其丰富，每10g 花菜含蛋白质 2.0g ，碳水化合物3-4g ，还有矿物质及维生素等多种营养物质，其中Vc 含量居十字花科蔬菜之首。
更加可贵的是，其含有多种吲哚类衍生物，可提高肝脏的芳香羟化酶的活性，能增强分解致癌物质的能力。
自从首次在花椰菜愈伤组织上得到再生植株以来，花椰菜组织培养得到迅速发展，现在可以通过直接分化再生、愈伤组织再生、胚状体再生、细胞悬浮培养和原生质体再生等方式得到再生植株，而通过子叶、下胚轴和子叶节直接再生可以保持原有品质或亲本的优良性状，这为转基因的顺利进行做了充分的准备。
中国热带农业科学院开发出多种热带植物离体保存技术
■ 来源 ： 《光明 日报 》
宁夏 隆德 ]o o o oq~绿鲜果蔬 气调保鲜库项 目正 式签约
近 日 ， 宁 夏 隆德县 绿鲜果 蔬气 调保鲜库 项 目正 式签
约 。 该 项 目 占地 8 3． 2
亩 ( 0 5． 5 5
公 顷 ) ， 建 筑 面积 14 0 0
m
。 ，
预 计 总投 资5 0 0 万 元 ， 一 次性储藏 果蔬 能 力为 10 0 0 吨 ，
异 进 行 了检 测 ， 并在 国 内首次 利 用 流 式 细胞 技 术进 行香 蕉 种 质 染
色 体 倍 性 的检 测 。
该技术 的成功开 发 ， 除 了进 行保存保护热带 主要 作物 、 珍稀
野生 濒 危植物外 ， 还 可 为 科研 单位 提供 批 量 、 整齐 的试 验材 料 ，
用 于 品 比试 验 、 育 种 、 种 质 鉴 定 ； 以 及 迅 速 快 捷 地 为 市 场 提 供 优
式 极 易 受 到 自然 灾 害 的 威 胁 ，
同 时耗 费大 量 的人 力、 物 力 ，
不 能对濒危物种进 行有效地挽
救 ， 也不 利于种质的交流 、 开
发和 可 持续利 用。 利 用离体保
存技术保 存热带作物种质资源
已 经 逐 步成为热带作物种质资
离体 保 存 的种质
源保存 、 保护和可 持续利 用 的
中国热带农业 科学院开发 出 多种 热 带 植物 离体 保 存 技 术
国 家大宗
中国热带农业 科学 院热 带作物 品种 资源研 究所 科研 人 员 ， 经
霆 过 1 O余 年 的 潜 心 研 究 ， 开 发 出 多 种 热 带 植 物 离 体 保 存 技 术 ， 并
利 用该 技术建 立 了热带植物种质 资源 保 存库 ， 以保存热带 主 要 作 物 、 拯救珍稀野 生 濒 危植物 。 日前该 技术依 托 的 “ 海 南热 带作物 种质资源 安全 保 存体 系的构建 ” 研 究 成 果 通 过 了农 业 部组 织 的专 家鉴 定。
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第三章第三节 园艺植物的离体快繁
（四）、马铃薯无病毒株的繁殖
（１） 直接块茎繁殖 （２） 扦插繁殖 （３） 组织培养切段繁殖 A：继代培养 B：低温保存
2010312
（二）茎芽增殖的途径：
1.茎芽增殖的途径
（1）侧芽增殖途径：指利用茎尖及侧芽培养直接获得芽 苗或丛生芽的方法。通过添加细胞分裂素促进侧芽萌发而 形成丛生芽。 （2）不定芽途径：除了利用顶芽和侧芽等固定芽之外， 由根、茎、叶等外植体直接或经脱分化形成愈伤组织后再 分化不定芽的过程进行增殖。
（3）体细胞胚途径：由外植体直接或间接（先形成愈伤 组织）形成胚状体的途径进行快速繁殖。如百合鳞片可 直接形成胚状体；胡萝卜、芹菜先形成愈伤组织，然后 形成胚状体。
（三）玻璃化 1. 玻璃化苗发生的原因： （1）琼脂和蔗糖浓度与玻璃化呈负相关； （2）培养温度过高；（3）生长调节剂浓度过高，如细胞 分裂素过高；（4）培养瓶乙烯浓度过高；（5）光照过 强或与高温同时作用；（6）培养基含氮量高，尤其是 銨态氮。 2. 防治玻璃化的措施： （1）提高培养基硬度；（2）提高培养基蔗糖含量或加入 渗透剂；（3）选用透气瓶盖改善通气状况；（4）降低 生长调节剂和含氮化合物的浓度；（5）适当降低温度； （6）一些添加物或抗生素可降低玻璃化，如马铃薯汁、 活性炭、PP333，CCC等。
马铃薯的脱毒与快繁
马铃薯
微型薯
马铃薯病毒的种类
危害有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、 M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。 马铃薯病毒可使块茎产量减少5万公顷， 每年需合格种薯45亿公斤，脱毒原种4亿 公斤，脱毒小薯或微型薯45亿粒。
马铃薯继代培养基：
MS+2. 0 mg/L6BA+0. 2 mg/L NAA+3%蔗糖；
植物离体快繁技术..
• 不定芽型容易成苗，对培养基要求不高， 后代遗传性稳定；但取材受限制。 • 胚状体发生型对培养基要求高，但遗传性 稳定
• 切割 • 调节激素种类和配比 • 外源激素的积累，过量会造成畸形芽、透 明芽，影响不定芽的质量，因此应适时降 低激素的浓度。
（3）完整小植株的形成
诱导根分化的技术关键： • 调节激素种类和浓度：提高生长素相对浓 度、降低细胞分裂素的浓度、无激素 • 调节基本培养基的营养组成：1/2或1/4MS • 适当降低渗透压：根分化低于芽分化的渗 透压 • 添加活性碳：造成黑暗的环境
芦笋
石刁柏
百合科植物石刁柏Asparagus officinalis L. 的块根 化学成分 含皂甙，其皂甙元为美洲菝葜皂甙 元
润肺镇咳，祛痰杀虫
芦笋是指石刁柏的嫩茎，因其嫩茎形似芦苇的 嫩茎和竹笋，故称芦笋 芦笋雌雄异株，是一种多年生宿根性草本植物， 以食其嫩茎为主
芦笋
2、操作过程
• 取材：在组培室中剪取1.5-2.0cm长的带顶 芽的茎段，余下部分可作继代扩繁培养。 • 生长素处理：所剪取茎段的基部在一定浓 度的生长素蘸过后，轻轻插入滤纸桥中， 放入棚内有一定营养液的的长方形容器内， 然后启动调控措施。 • 保养：在操作过程当中，要对茎段不时的 喷水雾以防止失水过多而萎蔫，通过观察 茎段的生根情况，并根据所出现的情况及 时调整光强，温度、湿度，筛选出最佳的 生根条件。
4、生根培养
• 幼苗叶片长到3cm左右时，将幼苗放入装有 生根培养基的三角瓶中培养。 • 大约半个月后，幼苗即可生根。
5、炼苗
• 当幼苗的根长到一 定长度，幼苗形体已显 健壮时。 • 将幼苗取出，在清水中洗除附着在根上的 培养基(注意:一定要严格洗净，否则会烂 根 )。 • 将洗净的幼苗排好，用清水喷湿，在1525℃、湿度60%- 80%的条件下炼苗24h
《天津农学院学报》第13卷(2006年)作者索引
不动点定理 的一个推广．
高洁．
３ ：
３：
４ ：
４ ０．
１． ３
１． Ｏ
高梅秀，张金海． 葛红，顾国华，韩娟，季桦，薛爱芳＋
顾国华． 顾青海． 关文强． 桂枝．
多年不结果的冬枣树优质高产栽培技术． 阿维菌素 ・ 苦参碱复配荆对菜青虫的室内毒力测定及田
一
．
以内蒙古自治区镶黄旗为例． Ｅ Ｄ地能设计软件的工程应用分析． Ｅ
维普资讯
第 １ 卷 第 ４期 ３ ２０ ０６年 １ ２月
天 津 农 学 院 学 报 Ｊ ｕｎ ｌ ｆ ｏ ｒａ ０ ． ｉ ｒ ｕｔｒｌ ｎｖ ｒ ｔ ｎ删 ｎＡｇｉ ｌ ａ Ｕ ｉｅｓｙ ｃ ｕ ｉ
Ｖ ｌ ３ № ・ ０・ ， １ ４
Ｄｅ ｅ ｅ， ０ ６ ｃ ｍｂ ｒ２ ０
近十年来国内旅游可持续发展研究述评．
见 ：孙振 久．
４ ：
２ ：
见 ：班立桐．
１ ：
维普资讯
・Ｉ Ｉ Ｉ・
刘林．
见：黄俊轩．
４ ：
刘同海， 吴新宏， 董永平，孟玉环，李新 基于Ｔ Ｍ遥感影像的退牧还草工程植被恢复监测研究—— １ ：
慧，刘林 ，刘云红．
Ｊ
季桦 ．
见：葛红．
４ ：
１ ０． ４． ７
贾风伶，孙国兴．
Ｓ Ｔ分 析 法 在 蔬 菜 种 业 公 司 发 展 战 略研 究 中 的 应 ３ ＷＯ ：
用——以天 津科润农 业科技股份 有限 公司为例．
Ｌ
李春燕．
见：王风琴．
２ ：
李贺，冉多良，张明．
见 ：徐军．
见 ：孟玉环．
高洁．
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第 １ 卷 第 ４期 ３ ２０ ０６年 １ ２月
天 津 农 学 院 学 报 Ｊ ｕｎ ｌ ｆ ｏ ｒａ ０ ． ｉ ｒ ｕｔｒｌ ｎｖ ｒ ｔ ｎ删 ｎＡｇｉ ｌ ａ Ｕ ｉｅｓｙ ｃ ｕ ｉ
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Ｄｅ ｅ ｅ， ０ ６ ｃ ｍｂ ｒ２ ０
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受体植物离体培养再生系统的建立
性；
抗生素对受体植物没有剧烈的毒性。
五、农杆菌敏感性
• 农杆菌介导的基因转化由于具有转化效率高、多为单拷 贝插入等优点，是常用的植物基因转化方法
• 对于利用农杆菌Ti或Ri质粒为载体所介导的植物基因转
化而言，需要植物受体材料对农杆菌敏感,即受体应是 农杆菌的天然宿主，这样才能更容易接受外源基因。 • 选择农杆菌转化系统前必须测试受体系统对农杆菌侵 染的敏感性，敏感的才能作为受体系统。
根瘤农杆菌 及其诱导产生的冠瘿瘤
植物基因转化受体系统的类型及特性
• 经过愈伤组织的受体系统
• 不经过愈伤组织的受体系统
• 原生质体再生系统
• 细胞系及其体细胞胚受体系统
• 生殖细胞受体系统
经过愈伤组织的受体系统
• 经过愈伤组织的受体系统是指经过愈伤组织的受体系 统是指外植体经脱分化培养诱导愈伤组织，转化，并通过 分化培养获得再生植株的受体系统。 包括： • 外植体先诱导形成愈伤组织，再利用愈伤组织转化外源基 因，进而再生植株 • 利用农杆菌直接侵染外植体，经过培养形成愈伤组织，再 分化成植株
植物基因转化受体系统的条件
• 高效稳定的再生能力
• 较高的遗传稳定性
• 具有稳定的外植体来源
• 抗生素敏感性 • 农杆菌敏感外植体： 必须易于再生；
有很高的再生频率；
并且具有良好的实验稳定性和重复性。
不同植物的种类、细胞类型、细胞状态、特定的植物
培养技术的成熟程度等在建立受体系统时均需考虑。
高频再生系统的建立
抗生素的敏感性试验 对农杆菌介导的 基因转化系统而 言
农杆菌敏感性试验
一、 高频再生系统的建立
高频再生系统必须满足4个条件： • 外植体的组织细胞具有诱导愈伤组织和再生完整 植株的能力，并且最好是外植体能直接分化出芽 • 芽的分化率要高； • 易于离体培养，具有高度可重复性； • 体细胞无性系变异小。
第2章 离体培养基本技术2
以叶片材料作为外植体，不但取材容易，操作方便，而且能大 幅度地扩大外植体的来源。特别是对单子叶植物而言，可以不损失 亲本植株。故在某些植物上应用颇多。一些再生能力较强的植物种 类如番茄、芥蓝、花椰菜、青花菜、玫瑰、海棠、大岩桐、倒挂金 钟、矮牵牛、兰花、豆瓣绿等植物，都可采用叶片为起始材料，但 由于叶片的分化程度较高，一般需要通过诱导愈伤组织并经再分化 才能产生植株，变异率较高。另外，对那些再分化能力弱的植物种
类而言，叶片离体再生的难度相当大。
13
④ 花蕾、花球和花药
花球和花蕾培养：花球和花蕾中含有较多的分生组织细胞，有
较强的分生能力，也是较好的外植体材料。另外，花球和花蕾属于
生殖器官，胚胎发生能力较强，故一般可通过诱导胚状体的途径实
现植株再生，但也有通过愈伤组织和不定芽成苗的报道，例如采用 花椰菜的3mm直径的花球组织、西瓜的2mm直径的幼蕾作为外植
另外，芽在植株上的部位也需注意，某些草本植物，如香石竹和菊花的顶芽 或上部的芽容易培养成功，而中下部的芽则较难培养，这可能与芽内的激素和营 养水平有关。
19
② 木本植物的发育年龄：下部的芽或枝条＞上部的芽或枝条。
发育年龄对培养材料的形态发生能力有较大的影响。木本植物
由幼龄小苗生长为成年或老年大树，是沿着植株的主轴由下而上生 长，随着植株越长越高，顶端部分的发育年龄也越来越大。换句话 说，下部的芽及由其长成的枝条的再生能力较强，越往上则越接近 成年态甚至老年态，其再生能力呈现递减趋势。现有的大多数离体
茎尖顶芽往往发育为花序，如月季、番茄、葡萄等植物，不注意观
位上的腋芽萌发，实现植株的再生。特别是对假轴分枝的植物来讲，
察会把花蕾当作茎尖取材，偏离研究的目标。茎段在茎尖作为外植
类而言，叶片离体再生的难度相当大。
13
④ 花蕾、花球和花药
花球和花蕾培养：花球和花蕾中含有较多的分生组织细胞，有
较强的分生能力，也是较好的外植体材料。另外，花球和花蕾属于
生殖器官，胚胎发生能力较强，故一般可通过诱导胚状体的途径实
现植株再生，但也有通过愈伤组织和不定芽成苗的报道，例如采用 花椰菜的3mm直径的花球组织、西瓜的2mm直径的幼蕾作为外植
另外，芽在植株上的部位也需注意，某些草本植物，如香石竹和菊花的顶芽 或上部的芽容易培养成功，而中下部的芽则较难培养，这可能与芽内的激素和营 养水平有关。
19
② 木本植物的发育年龄：下部的芽或枝条＞上部的芽或枝条。
发育年龄对培养材料的形态发生能力有较大的影响。木本植物
由幼龄小苗生长为成年或老年大树，是沿着植株的主轴由下而上生 长，随着植株越长越高，顶端部分的发育年龄也越来越大。换句话 说，下部的芽及由其长成的枝条的再生能力较强，越往上则越接近 成年态甚至老年态，其再生能力呈现递减趋势。现有的大多数离体
茎尖顶芽往往发育为花序，如月季、番茄、葡萄等植物，不注意观
位上的腋芽萌发，实现植株的再生。特别是对假轴分枝的植物来讲，
察会把花蕾当作茎尖取材，偏离研究的目标。茎段在茎尖作为外植
第三章第三节园艺植物的离体快繁
2. 控制污染的措施：
（1）灭菌时充分排净锅内冷空气；（2）接种器具充分灼烧； （3）污染外植体及时挑出，灭菌后倒掉。外植体材料少 可二次处理；（4）接种时用75%乙醇擦拭双手和培养容 器，操作区不放置过多的培养容器；
(5) 接种室定期熏蒸或消毒液处理；并采用紫外灯进行空气 杀菌；（6）超净工作台定期清洗过滤网。
（4）培养基组成及激素配比: 选择适宜的基本培养基，草本 植物选用MS等，木本植物选用WPM等培养基。激素和生长 调节剂浓度比例需注意在不同培养阶段进行合理使用。
三、离体快繁中常见的问题：
（一）污染
1. 污染发生的原因：
（1）培养基和接种用具灭菌不彻底；（2）外植体灭菌不彻 底；（3）操作时人为带入；（4）接种室环境不洁净； （5）超净工作区域不洁净。
（4）原球茎途径：兰科花卉的种子萌发形成原球茎，由 茎尖、叶片等外植体可诱导形成类原球茎，并可快速增 殖。
大花蕙兰原球茎增殖与植株再生
2. 影响茎芽增殖的因素：
（1）植物种类：草本植物速度快，木本植物增殖慢。
（2）外植体的生理状态：生长旺盛组织增殖快。
（3）表面灭菌时的受伤害程度: 表面灭菌剂对外植体伤害轻， 启动快，伤害重，启动慢。
取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培 养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发 育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此 法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种 在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。
马铃薯继代培养基：
MS+2. 0 mg/L6BA+0. 2 mg/L NAA+3%蔗糖； 20-25℃，3000-4000LX，14-16hr光照； 每3周继代一次，单芽茎段约1厘米； 原则试管苗用2年—3年。
（1）灭菌时充分排净锅内冷空气；（2）接种器具充分灼烧； （3）污染外植体及时挑出，灭菌后倒掉。外植体材料少 可二次处理；（4）接种时用75%乙醇擦拭双手和培养容 器，操作区不放置过多的培养容器；
(5) 接种室定期熏蒸或消毒液处理；并采用紫外灯进行空气 杀菌；（6）超净工作台定期清洗过滤网。
（4）培养基组成及激素配比: 选择适宜的基本培养基，草本 植物选用MS等，木本植物选用WPM等培养基。激素和生长 调节剂浓度比例需注意在不同培养阶段进行合理使用。
三、离体快繁中常见的问题：
（一）污染
1. 污染发生的原因：
（1）培养基和接种用具灭菌不彻底；（2）外植体灭菌不彻 底；（3）操作时人为带入；（4）接种室环境不洁净； （5）超净工作区域不洁净。
（4）原球茎途径：兰科花卉的种子萌发形成原球茎，由 茎尖、叶片等外植体可诱导形成类原球茎，并可快速增 殖。
大花蕙兰原球茎增殖与植株再生
2. 影响茎芽增殖的因素：
（1）植物种类：草本植物速度快，木本植物增殖慢。
（2）外植体的生理状态：生长旺盛组织增殖快。
（3）表面灭菌时的受伤害程度: 表面灭菌剂对外植体伤害轻， 启动快，伤害重，启动慢。
取试管苗单节切段扦插在（或平放）固体培 养基上，每瓶可插20个左右茎段，经20d左右发 育成5~10cm高小植株，继续进行切段繁殖，此 法速度快，每月可繁殖5~8倍，试管苗多节接种 在液体培养基上，进行浅层静止液体培养。
马铃薯继代培养基：
MS+2. 0 mg/L6BA+0. 2 mg/L NAA+3%蔗糖； 20-25℃，3000-4000LX，14-16hr光照； 每3周继代一次，单芽茎段约1厘米； 原则试管苗用2年—3年。
七种观赏植物叶片离体分析和耐盐性研究
总之，植物的耐盐性研究是非常复杂的。本 研究的离体测定方法测定的结果仅仅是个参考， 还需要对盐胁迫下植株的生长、生理反应等进行 综合分析，才能准确判断植物的耐盐性。
参考文献 ［１］ 翟凤林，曹鸣庆．植物的耐盐性及其改良［Ｍ］．北京：中国
农业出版社，１９８６，３３５－３３７． ［２］ 支欢欢，杨敏生，张华新等． ３ 种园林植物耐盐性对比
> 吊兰和绿萝 > 水竹草。
关键词：离体测定；膜透性；伤害率；耐盐性；观赏植物
中图分类号：Ｓ－３
文献标识码：Ｂ
土壤盐碱化是一个世界性的难题，全世界盐 渍土面积约 １０ 亿公顷；我国盐渍土面积约 ３４６０ 万公顷，天津地区拥有盐碱地总面积为 ４９．３ 万 平方米，占全市土地总面积的 ４２．３％。通过多年 的实践证明，种植耐盐碱作物既能改良土壤，又 能有一定的效益，是一种相对耗资少、见效快的 盐碱地农业发展方向［１］。大叶黄杨、紫叶小檗、吊 兰、绿萝、水竹草、二色补血草和紫花地丁这七种 观赏植物广泛在天津市应用，大叶黄杨、紫叶小 檗、二色补血草和紫花地丁被广泛的应用于重盐 碱地和轻盐碱地的改良［２］。
紫花地丁、二色补血草的叶片为试验材料，通过不同浓度的盐胁迫处理，离体测定了它们的细胞膜透
性和细胞膜伤害率。结果表明：随着盐浓度的增加，植物的叶片细胞膜透性和细胞伤害率逐渐增加，其
中大叶黄杨的细胞膜透性和细胞伤害率略高于紫叶小檗，紫花地丁的高于二色补血草，水竹草高于绿
萝和吊兰。研究显示，七种观赏植物的耐盐性依次为：二色补血草 > 紫叶小檗 > 大叶黄杨 > 紫花地丁
二色补血草，紫叶小檗的高于二色补血草；在盐 溶液浓度为 １％时，紫花地丁的细胞膜伤害率最 低，但在盐溶液浓度为 ２％、４％和 ６％时，紫花地 丁的细胞膜伤害率逐渐升高，最后成为 ４ 种植物 中最高的，说明盐溶液对紫花地丁的伤害最大。 对比 ４ 种植物的叶片细胞膜伤害率变化，大叶黄 杨从 ０ 增加到 ５３％，紫叶小檗从 ０ 增加到 ４９％， 二色补血草从 ０ 增加到 ４０％，紫花地丁从 ０ 增加 到 ５５％。因此，细胞膜伤害率顺序依次为：紫花地 丁 ＞ 大叶黄杨 ＞ 紫叶小檗 ＞ 二色补血草。 2.2 盐胁迫对吊兰、绿萝和水竹草细胞膜透性 和细胞伤害率的影响
参考文献 ［１］ 翟凤林，曹鸣庆．植物的耐盐性及其改良［Ｍ］．北京：中国
农业出版社，１９８６，３３５－３３７． ［２］ 支欢欢，杨敏生，张华新等． ３ 种园林植物耐盐性对比
> 吊兰和绿萝 > 水竹草。
关键词：离体测定；膜透性；伤害率；耐盐性；观赏植物
中图分类号：Ｓ－３
文献标识码：Ｂ
土壤盐碱化是一个世界性的难题，全世界盐 渍土面积约 １０ 亿公顷；我国盐渍土面积约 ３４６０ 万公顷，天津地区拥有盐碱地总面积为 ４９．３ 万 平方米，占全市土地总面积的 ４２．３％。通过多年 的实践证明，种植耐盐碱作物既能改良土壤，又 能有一定的效益，是一种相对耗资少、见效快的 盐碱地农业发展方向［１］。大叶黄杨、紫叶小檗、吊 兰、绿萝、水竹草、二色补血草和紫花地丁这七种 观赏植物广泛在天津市应用，大叶黄杨、紫叶小 檗、二色补血草和紫花地丁被广泛的应用于重盐 碱地和轻盐碱地的改良［２］。
紫花地丁、二色补血草的叶片为试验材料，通过不同浓度的盐胁迫处理，离体测定了它们的细胞膜透
性和细胞膜伤害率。结果表明：随着盐浓度的增加，植物的叶片细胞膜透性和细胞伤害率逐渐增加，其
中大叶黄杨的细胞膜透性和细胞伤害率略高于紫叶小檗，紫花地丁的高于二色补血草，水竹草高于绿
萝和吊兰。研究显示，七种观赏植物的耐盐性依次为：二色补血草 > 紫叶小檗 > 大叶黄杨 > 紫花地丁
二色补血草，紫叶小檗的高于二色补血草；在盐 溶液浓度为 １％时，紫花地丁的细胞膜伤害率最 低，但在盐溶液浓度为 ２％、４％和 ６％时，紫花地 丁的细胞膜伤害率逐渐升高，最后成为 ４ 种植物 中最高的，说明盐溶液对紫花地丁的伤害最大。 对比 ４ 种植物的叶片细胞膜伤害率变化，大叶黄 杨从 ０ 增加到 ５３％，紫叶小檗从 ０ 增加到 ４９％， 二色补血草从 ０ 增加到 ４０％，紫花地丁从 ０ 增加 到 ５５％。因此，细胞膜伤害率顺序依次为：紫花地 丁 ＞ 大叶黄杨 ＞ 紫叶小檗 ＞ 二色补血草。 2.2 盐胁迫对吊兰、绿萝和水竹草细胞膜透性 和细胞伤害率的影响
植物再生技术-概述说明以及解释
植物再生技术-概述说明以及解释1.引言1.1 概述植物再生技术是一种利用植物细胞或组织培养技术，通过一系列的细胞分化、增殖和再生过程，实现全新植株的培育。
这项技术在植物学、农学、园艺学等领域有着广泛的应用和重要意义。
通过植物再生技术，可以实现对植物基因的编辑、繁殖优良品种、推广新品种以及保护濒危物种等目标。
在本文中，我们将探讨植物再生技术的历史发展、应用领域和方法步骤等内容，旨在深入了解这一领域的最新进展和未来发展方向。
1.2文章结构1.2 文章结构：本文将首先介绍植物再生技术的定义和历史发展，让读者了解这一技术的起源和演变过程。
接着分析植物再生技术在不同领域的应用和意义，探讨其对农业、医药等行业的重要性。
然后详细描述植物再生技术的方法和关键步骤，解释其实现植物再生的原理和技术手段。
最后，对植物再生技术的前景和挑战进行评估，并提出未来发展方向和建议，总结全文内容。
通过这样的文章结构，读者将能够全面了解植物再生技术的现状和发展趋势。
1.3 目的本文旨在深入探讨植物再生技术在现代农业和生物学领域的重要性和应用价值。
通过对植物再生技术的定义、历史发展、方法和关键步骤的介绍，以及其在农业生产、环境保护、生物工程等领域的应用和意义的阐述，旨在帮助读者更全面地了解和认识这一领域的前沿科技。
同时，通过对植物再生技术的前景和挑战的分析，探讨其未来的发展方向和可能的发展趋势，为相关研究和应用提供参考和建议。
通过本文的阐述和分析，希望能够引起更多人对植物再生技术的关注和重视，促进其在农业和生物领域的广泛应用和推广，为推动农业生产和生物科学的发展做出贡献。
2.正文2.1 植物再生技术的定义和历史发展植物再生技术是一种利用植物体内的特殊细胞或组织进行再生和重组的技术。
通过诱导植物体内的生殖细胞或幼胚等特殊细胞再生，可以实现植物的无性繁殖和遗传改良，从而提高作物的产量和品质。
植物再生技术起源于20世纪70年代，最早应用于植物育种领域。
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花椰菜（ｒｓｉ ｏｌ ａｅ ａ． ｏ ｙｉ 属十字花科芸薹属植物 ，世界各地均有种植 。但花椰菜生长 Ｂ ａｓ ａ ｒｃａｖ ｒ ｂｔ ｔ） ｃ ｅ ｒ ｓ 期间病虫害严重、不耐贮藏、品质差等问题一直困扰着广大菜农与菜商。因此 ， 对花椰菜品种进行改 良
势在必行 ， 而常规育种方法 己不能满足现代农业对花椰菜品种改良的要求 现代生物技术的发展为人们
选育和转化具有优 良园艺性状基 因的突破性品种提供 了可能【 】 ｌ 。然而 ，国内外关于花椰菜遗传转化的 ０ 技术还很不成熟，遗传转化率极低，难以适应花椰菜分子育种的要求［ 华学军 ５ ４ １ 】 将融合 Ｇ Ｓ基 因 Ｕ 的 Ｂ 杀虫剂基因转入花椰菜 ， ｔ 但只得到表达 Ｇ Ｓ活性的愈伤组织， Ｕ 而未得到完整 的转基因植株。陈晓
．
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文章编 号：１０ － ３ ４（ ０ ６ ４ ０ ２— ３ ０ ８ ５ ９ ２０ ）０ － ０ １０
花椰菜 叶片离体再生 技术 的研 究母
黄俊轩 ’ ，李双跃 １ ，李建科 ’ ，刘艳军 １ ，杨静慧 １ 刘林 ２ ，刘云红 ２
（． １ 天津农学院 园艺系，天津 ３０８ ．２ 天津市园林局，天津 ３０ ８ ） ０ ３４ ． ０３０
．
２ Ｔａｊ ｒｅ ｕｅｕ ｉ ｊ ０ ３ ０ ｈｎ ） ． ｉｎｉ Ｇａ ｎＢ ｒａ ，Ｔａ ｉ ３ ０ ，Ｃ ｉａ ｎ ｄ ｎｎ ８
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邦等将 Ｉｔ ｎＧ Ｓ嵌合基因转入花椰菜， ｎ ｏ— Ｕ ｒ 获得 的再生转基 因植株的频率仅为 １ ％。其原因在于尚未真正
解决适宜农杆菌介导的花椰菜高频率植株再生技术。 现在， 花椰菜基因转化多以花椰菜种子所发的无菌 苗的子叶为外植体进行遗传转化 ，但采种难是长期存在的一大难题。利用无性繁殖的方法繁育采种株 ， 又 因多数品种不发生腋芽而难 以实现。因此，利用花椰菜叶片为外植体，经消毒后培养一段时间，重新 造成伤 口，用农杆菌浸染后对转化苗进行诱导，这样操作既简便，又可避免因种子难得所带来的不便。 本研究选用 “ 白灵”菜花品种为材料。以花椰菜 叶片为外植体，消毒后在添加不同激素浓度 的培养
摘 要：以花椰菜叶片为外植体， 经消毒处理后在不同激素浓度的培养基上进行诱导再生。 结果表 明： 在附加 ３ ｇ －Ａ和 ０ ｍ ／ Ａ ｍ／ Ｂ Ｌ６ ． ｇ ２ ＬＮ Ａ的 ＭＳ培养基上培养， 芽分化率最高， １０ 平均每 达 ０％，
块 外植体产生 ５７ 个 芽。 ．１
关键词：花椰菜；叶片；组织培养；离体再生
基上进行诱导再生，确定高效的再生条件 ，旨在为花椰菜高效遗传转化体系的建立奠定基础 。
收稿 日期：２０ － －５ ０６０ ０ ９ 基 金项 目：天津市 自然科学基金项 目 “ 转基 因抗黄化 苹果 选育”（２６４ １） “ ０３ １２ １， 抗旱抗寒高产油树工程育种 ”（５ ＦＭＪ １４０ ， ０Ｙ Ｊ Ｃ ４０ ） 津市科技发展规划项 目 “ 津市生物技术预见 ”（５ Ｉ ｚ ｌ０ ） 天 ０ｚ 】 ６０ 。天津市农业科 技成 果转化 与推广项 目 “ 丑 耐盐牧 草选 育 ”（５４ １） ０００ ８，天津市高等学校科技发展基 金项 目 “ 名贵花卉— — 巨型红掌的引种和组培快繁研 究”（ｏ ５９８ ２ＱｏＯ ） 作 者简 介：黄俊轩 （９ ３ ） １７一，男，广东河源人 。讲师 ，学 士。主要从事园林植物的研究 。联系 电话 ：（２ ）２７ １１。 ０２ ３８５７
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第１ ３卷 第 ４期 ２０ ０ ６年 １ ２月
天 津 农 学 院 学 报 Ｊｕｎｌ ｆ ｉｎｉ Ａ ｒ ｕ ｒ ｎｖｒｉ ｏ ｒａ ａｊ ｇｉ ｌ ａ Ｕ ｉｅｓｙ ｏＴ ｎ ｃｔ ｌ ｕ ｔ
Ｖｏ．３ Ｎｏ４ １１ ， ．
Ｄｅ ｅ ｅ ， ０ ６ ｃ ｍｂ ｒ ２ ０
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花椰菜（ｒｓｉ ｏｌ ａｅ ａ． ｏ ｙｉ 属十字花科芸薹属植物 ，世界各地均有种植 。但花椰菜生长 Ｂ ａｓ ａ ｒｃａｖ ｒ ｂｔ ｔ） ｃ ｅ ｒ ｓ 期间病虫害严重、不耐贮藏、品质差等问题一直困扰着广大菜农与菜商。因此 ， 对花椰菜品种进行改 良
势在必行 ， 而常规育种方法 己不能满足现代农业对花椰菜品种改良的要求 现代生物技术的发展为人们
选育和转化具有优 良园艺性状基 因的突破性品种提供 了可能【 】 ｌ 。然而 ，国内外关于花椰菜遗传转化的 ０ 技术还很不成熟，遗传转化率极低，难以适应花椰菜分子育种的要求［ 华学军 ５ ４ １ 】 将融合 Ｇ Ｓ基 因 Ｕ 的 Ｂ 杀虫剂基因转入花椰菜 ， ｔ 但只得到表达 Ｇ Ｓ活性的愈伤组织， Ｕ 而未得到完整 的转基因植株。陈晓
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文章编 号：１０ － ３ ４（ ０ ６ ４ ０ ２— ３ ０ ８ ５ ９ ２０ ）０ － ０ １０
花椰菜 叶片离体再生 技术 的研 究母
黄俊轩 ’ ，李双跃 １ ，李建科 ’ ，刘艳军 １ ，杨静慧 １ 刘林 ２ ，刘云红 ２
（． １ 天津农学院 园艺系，天津 ３０８ ．２ 天津市园林局，天津 ３０ ８ ） ０ ３４ ． ０３０
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解决适宜农杆菌介导的花椰菜高频率植株再生技术。 现在， 花椰菜基因转化多以花椰菜种子所发的无菌 苗的子叶为外植体进行遗传转化 ，但采种难是长期存在的一大难题。利用无性繁殖的方法繁育采种株 ， 又 因多数品种不发生腋芽而难 以实现。因此，利用花椰菜叶片为外植体，经消毒后培养一段时间，重新 造成伤 口，用农杆菌浸染后对转化苗进行诱导，这样操作既简便，又可避免因种子难得所带来的不便。 本研究选用 “ 白灵”菜花品种为材料。以花椰菜 叶片为外植体，消毒后在添加不同激素浓度 的培养
摘 要：以花椰菜叶片为外植体， 经消毒处理后在不同激素浓度的培养基上进行诱导再生。 结果表 明： 在附加 ３ ｇ －Ａ和 ０ ｍ ／ Ａ ｍ／ Ｂ Ｌ６ ． ｇ ２ ＬＮ Ａ的 ＭＳ培养基上培养， 芽分化率最高， １０ 平均每 达 ０％，
块 外植体产生 ５７ 个 芽。 ．１
关键词：花椰菜；叶片；组织培养；离体再生
基上进行诱导再生，确定高效的再生条件 ，旨在为花椰菜高效遗传转化体系的建立奠定基础 。
收稿 日期：２０ － －５ ０６０ ０ ９ 基 金项 目：天津市 自然科学基金项 目 “ 转基 因抗黄化 苹果 选育”（２６４ １） “ ０３ １２ １， 抗旱抗寒高产油树工程育种 ”（５ ＦＭＪ １４０ ， ０Ｙ Ｊ Ｃ ４０ ） 津市科技发展规划项 目 “ 津市生物技术预见 ”（５ Ｉ ｚ ｌ０ ） 天 ０ｚ 】 ６０ 。天津市农业科 技成 果转化 与推广项 目 “ 丑 耐盐牧 草选 育 ”（５４ １） ０００ ８，天津市高等学校科技发展基 金项 目 “ 名贵花卉— — 巨型红掌的引种和组培快繁研 究”（ｏ ５９８ ２ＱｏＯ ） 作 者简 介：黄俊轩 （９ ３ ） １７一，男，广东河源人 。讲师 ，学 士。主要从事园林植物的研究 。联系 电话 ：（２ ）２７ １１。 ０２ ３８５７
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第１ ３卷 第 ４期 ２０ ０ ６年 １ ２月
天 津 农 学 院 学 报 Ｊｕｎｌ ｆ ｉｎｉ Ａ ｒ ｕ ｒ ｎｖｒｉ ｏ ｒａ ａｊ ｇｉ ｌ ａ Ｕ ｉｅｓｙ ｏＴ ｎ ｃｔ ｌ ｕ ｔ
Ｖｏ．３ Ｎｏ４ １１ ， ．
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