基因克隆技术名词解释
《基因工程》重点
基因工程重点第一章一、名词解释：基因工程：基因工程是通过基因操作，将目的基因或DNA片段与合适的载体链接转入目标生物细胞，通过复制、转录、翻译外源目的基因以及蛋白质的活性表达，使基因生物获得新的遗传性状的操作。
基因操作：泛指对基因进行酶切、连接、转化等分子生物学操作，是基因工程的技术基础。
基因克隆：是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程，其目的在于获得大量的基因拷贝，它在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节，很多时候并不涉及动物、植物等的转化及性状的遗传改良。
第二章一、名词解释：核酸酶：通过切割相邻两个核苷酸残基之间的磷酸二酯键，从而使核酸分子多核苷酸链发生水解断裂的酶。
限制性内切核酸酶（restriction endonuclease）：简称限制酶，是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并切割DNA双链结构的内切核酸酶。
限制-修饰系统：黏性末端（sticky end）：指DNA分子在限制性内切核酸酶的作用下形成的具有互补碱基的单链延伸形成的末端结构，它们能够通过互补碱基间的配对而重新连接起来。
平末端（blunt end）：若限制性内切核酸酶在识别序列的对称轴上切割，形成的片段末端为平末端。
同切点酶（isoschizomer）：又称同裂酶，是一类来源于不同的微生物、能识别相同靶序列的限制性内切核酸酶。
同尾酶（isocaudamer）：来源各异，识别的靶序列也各不相同，但切割后能产生相同的粘性末端。
酶的星号活性（star activity）：限制性内切核酸酶识别和切割特异性位点是在特定条件下测定的。
当条件改变时，许多酶的识别位点会改变，导致识别与切割序列的非特异性，这种现象称为星号活性。
DNA连接酶（DNA ligase）：能催化双链DNA片段靠在一起3'羟基末端与5'端磷酸基团末端之间通过形成磷酸二酯键，使两端连接的一种核酸酶。
DNA聚合酶:DNA聚合酶的作用是在引物和模板的作用下，把脱氧核糖单苷酸连续地加到双链DNA分子引物的3'-OH末端，催化甘氨酸的聚合作用。
DNA分子克隆技术(也称基因克隆技术)
DNA分子克隆技术（也称基因克隆技术）：在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA分子克隆(或基因克隆)。
其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。
载体（vecors）在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段。
主要目的是获得某一基因或NDA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库（genomic library）,另一种是cDNA库。
载体所谓载体是指携带靶DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具。
细菌质粒是一种细菌染色体外小型双链环状结构的DNA，分子大小为1-20kb，对细菌的某些代谢活动和抗药性表型具有一定的作用。
质粒载体是在天然质粒的基础上人工改造拼接而成。
最常用的质粒是pBR322。
基因库的建造含有某种生物体全部基历的随机片段的重组DNA克隆群体，其含有感光趣的基因片段的重组子，可以通过标记探针与基因库中的重组子杂交等方法而筛选出来，所得到的克隆经过纯化和扩增，可用于进一步的研。
其主步骤包括：（1）构建基因库迅速的载体；(2)DNA片段的制备；（3）DNA片段与载体DNA 的连接；（4）包装和接种。
cDNA库的建造是指克隆的DNA片段，是由逆转录酶自mRNA制备的cDNA。
cDNA库包括某特定细胞的全部cDNA克隆的文库，不含内含子。
特异基因的筛选常用的方法有：（1）克隆筛选即探针筛选法；（2）抗体检测法，检测其分泌蛋白质来筛选目的基因；（3）放射免疫筛选法，查出分泌特异抗原的基因；（4）免疫沉淀法，进行特异基因的筛选。
核酸序列测定DNA的碱基序列决定着基因的特性，DNA序列分析（测序，sequencing）是分子生物学重要的基本技术。
基因工程的名词解释
基因工程的名词解释基因工程是一种通过人为手段对生物体进行基因操作和改良的技术方法。
它是现代生物工程学的重要组成部分，也是生物技术的核心内容之一。
基因工程的名词主要包括以下几个方面的解释。
1. 基因：基因是生物体内负责遗传信息传递的DNA片段。
它是构成生物体的遗传物质，决定了生物体的特征和功能。
在基因工程中，科学家可以通过分离、合成、克隆等手段研究和改变基因的结构和作用。
2. 重组DNA技术：重组DNA技术是基因工程的核心技术之一。
它通过将不同来源的基因片段进行切割并重新组合，从而生成具有新功能的DNA分子。
重组DNA技术可以用于基因的克隆、修饰、表达和转移。
3. 基因克隆：基因克隆是指将特定的基因片段从生物体中分离并扩增，然后将其插入到其他生物体中，使之表达并产生特定的蛋白质或产物。
基因克隆技术是基因工程研究中最基本的方法之一。
4. 转基因：转基因是指将外源基因导入到接受体生物体中，从而使接受体生物体获得外源基因的遗传特征。
转基因技术可以用于改良农作物、生物制药、生物能源等领域。
5. 基因组学：基因组学是研究生物体基因组和其功能的一门学科。
通过对生物体基因组的测序和分析，基因组学可揭示基因组的组成、结构、功能和调控机制等信息，并为基因工程提供了重要的基础。
6. 基因编辑：基因编辑是利用特定的核酸酶或CRISPR/Cas9系统，通过剪切、修复或替换基因片段，实现对生物体基因组的精确编辑和修饰。
基因编辑技术具有高效、快速和精准的特点，在基因疾病治疗和农业改良等方面具有重要应用前景。
7. 人工合成基因：人工合成基因是指通过化学合成的方法合成具有特定序列和结构的DNA分子。
人工合成基因可以用于构建人工基因网络、生物合成、药物研发等领域。
8. 反义RNA技术：反义RNA技术是一种通过合成含有目标基因序列相反互补序列的RNA分子，从而抑制目标基因的表达。
反义RNA技术可用于基因的失活和功能研究，对于研究基因功能和基因治疗具有重要意义。
基因工程名词解释
基因工程名词解释1、基因工程：对不同的遗传物质在体外进行剪切、组合和拼接，使遗传物质重新组合，然后通过载体转入微生物、植物和动物细胞内，进行无性繁殖，并使所需的基因在细胞中表达，产生人类所需的产物或新生物类型。
2、重组DNA技术：是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后再转入另一个生物体（受体）内，按照人们的意愿稳定遗传并表达新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。
3、基因xx：经无性繁殖获得基因许多相同拷贝的过程。
通常是将单个基因导入宿主细胞中复制而成。
（包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构建成新的重组的DNA，然后送入受体生物中去表达。
从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。
）4、限制性内切核酸酶：一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸水解酶。
5、修饰酶：体内有些酶可在其他酶的作用下，将酶的结构进行共价修饰，使该酶活性发生改变，这种调节称为共价修饰调节(covalentmodificationregulation)，这类酶称为修饰酶(prosessing enzyme)。
6、同裂酶：识别相同序列的限制酶称同裂酶，但它们的切割位点可能不同。
（同序同切酶、同序异切酶、“同功多位”等）7、同尾酶：切割不同的DNA片段但产生相同的粘性末端的一类限制性内切酶。
8、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一个识别序列表现出不同切割效率。
9、星星活性：极端非标准反应条件下，限制酶能够切割与识别序列相似的序列，这个改变的特殊性称星星活性。
10、甲基化酶：原核生物甲基化酶是作为限制与修饰系统中的一员，用于保护宿主DNA不被相应的限制酶所切割。
11、DNA聚合酶：以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。
DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。
dna克隆名词解释
dna克隆名词解释DNA克隆是一种生物技术，指的是通过复制和操纵DNA分子，在体外产生相同的DNA分子。
它是基因工程中最基础和重要的技术之一，广泛应用于生物学、医学和农业等领域。
DNA克隆能够帮助科学家们理解DNA的结构和功能，也为疾病的诊断和治疗提供了新的方法。
通过DNA克隆，科学家们可以获取和复制特定的DNA片段，然后将其插入到合适的目标细胞中，使目标细胞具备引入DNA片段所编码的新的特性或功能。
在这个过程中，需要包括DNA提取、切割、连接、转化等多个步骤。
首先，科学家们需要从生物体中提取DNA。
DNA可以来源于细菌、植物、动物等, 例如, 从细菌体中提取的DNA经过PCR扩增后可以得到大量的DNA。
提取的DNA会通过酶切等方法进行切割，切割产生的DNA片段通常会有不同的引物，以便后续连接。
接下来，科学家们需要将DNA片段连接到适当的载体上。
载体是DNA的携带者，通常为圆环状的DNA分子，称为质粒。
质粒可以自主复制，被细胞所识别并复制。
科学家们需要将切割后的DNA片段与质粒通过酶切片段轻松地进行连接，以获得重组DNA分子。
然后，科学家们将重组的DNA分子引入宿主细胞中，这一过程称为转化。
转化可以利用热激或电激等方式进行，以使细胞吸收DNA分子并合成新的蛋白质。
一旦DNA分子成功转化进入细胞，细胞就能够利用这些新获得的基因进行蛋白质合成。
最后，科学家们将细胞培养并分离出含有重组DNA的细胞，这些细胞称为克隆细胞。
克隆细胞在培养和扩增过程中可以形成一定数量的细胞群落。
科学家们可以从这些克隆细胞中提取出DNA，进一步研究其结构和功能。
DNA克隆在生物学研究和应用中具有广泛的意义。
它可以帮助科学家们研究基因组结构和功能，探索人类和其他物种的遗传变异。
此外，DNA克隆也在医学上扮演着重要角色，例如基因治疗、疫苗生产和药物开发等方面。
在农业领域，DNA克隆也被用于改良作物和畜禽的基因，提高产量和抗性。
总之，DNA克隆是一种重要的生物技术，通过复制和操纵DNA分子，能够获取特定的DNA片段并将其插入到目标细胞中。
基因工程技术名词解释
基因工程技术名词解释
基因工程技术是应用分子生物学和细胞生物学的原理和方法进行基因操作，修改生物基因的技术。
常见的基因工程技术名词及其解释如下：
1. 基因克隆：将目标基因从DNA中分离出来，重组到质粒等载体上，使其能够在宿主细胞中自我复制和表达。
2. 基因剪切：利用限制性内切酶进行DNA分子特定的切割，实现目标序列的切除或粘贴。
3. 基因敲除：将目标基因进行替换或删除，通过对细胞的遗传物质进行“删改”。
4. 基因表达：在某种特定的生物体系中使目标基因得以表达并产生蛋白质等特定的作用。
5. 基因转染：将确切的DNA片段转移至另一个生物体细胞内，并让它表达新的蛋白质或修改已有的蛋白质功能。
6. 基因突变：通过人工方式创造或使一段DNA序列产生突变，并观察这种遗传变异对链上蛋白质表现的影响。
7. 基因编辑：通过人为方式改变或删除一个个体或生物各自遗传基因序列的方法，在人体细胞治疗、紫外线损伤等领域具有潜在应用价值。
这些技术广泛应用于生物学、医学和农业领域，使我们可以更精准地控制和修改生物的基因，以满足不同领域的需求。
基因工程名词解释
基因工程名词解释1.载体：能载带微量物质共同参与某种化学或物理过程的常量物质，在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。
三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。
2.克隆：科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆，这门生物技术叫克隆技术，其本身的含义是无性繁殖，即由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系，该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。
3.限制性内切酶:一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。
Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。
4.基因文库：将所有的重组DNA分子都导入宿主细胞进行扩增，得到分子克隆的混合体，这样一个混合体称为基因文库。
5.cDNA基因文库：是指以 mRNA为模板，在反转录酶及其他一系列酶的催化作用下所获得的双链cDNA，经与适当载体连接并转化到寄主细胞内进行扩增，由此而构成包含着相应基因编码序列的一群克隆。
6.粘性末端:当一种限制性内切酶在一个特异性的碱基序列处切断DNA时，就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片段，即5’突出。
这些片断可以通过重叠的5‘末端形成的氢键相连，或者通过分子内反应环化。
因此称这些片段具有粘性，叫做粘性末端。
7.基因组:指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子。
8.操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。
这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。
这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。
9.启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。
在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。
有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。
10.增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。
克隆技术知识点总结
克隆技术知识点总结克隆技术是现代生物技术领域中的重要分支，通过对细胞或生物体进行复制，可以获得与原始个体遗传信息相同的克隆个体。
本文将从克隆技术的定义、分类、应用，以及伦理道德等方面对克隆技术的知识点进行总结。
一、克隆技术的定义克隆技术是指通过人工手段复制或产生与原始个体遗传信息相同的生物个体。
克隆技术可以分为两种形式：基因克隆和生物体克隆。
基因克隆是指通过重组DNA技术获得具有相同遗传信息的DNA分子，而生物体克隆则是通过复制细胞或胚胎来获得与原始个体相同基因组的生物个体。
二、克隆技术的分类根据克隆技术的不同方法和手段，可以将其分为以下几种类型：1. 重组DNA技术克隆：通过将目标基因插入到载体DNA中，进而将其转化到宿主细胞中，使得宿主细胞表达目标基因并进行大量复制。
2. 基因工程克隆：通过DNA分子的重组和转化，将外源基因导入到受体生物体中，使得受体生物体表达和遗传外源基因。
3. 细胞克隆：通过体细胞核移植或分裂的方法，复制出与原始细胞基因相同的细胞，实现细胞的无性繁殖和扩增。
4. 动物体克隆：通过体细胞核移植等方法，复制出与原始生物体基因相同的生物个体。
5. 植物体克隆：通过组织培养、离体培养等方法，将植物组织进行分裂和再生，得到与原始植株基因相同的新个体。
三、克隆技术的应用克隆技术在各个领域都有广泛的应用。
以下是其中一些主要领域的应用：1. 医学研究：克隆技术在医学研究中可以用于制备大量含有特定基因的重组蛋白，用于疾病的诊断和治疗研究。
2. 农业领域：通过克隆技术可以获得优良农作物的纯合株系，提高农作物的产量和抗病虫害能力。
3. 物种保护：对于濒危物种而言，克隆技术可以通过细胞克隆或动物体克隆的方式，复制出与原始物种基因完全相同的个体，以保护珍稀物种。
4. 药物研发：通过克隆技术可以制备大量含有特定基因的动物模型，用于药物研发和毒性测试。
5. 人类生育领域：体细胞核移植技术为不育夫妇带来了希望，使得他们可以通过克隆技术获得自己的后代。
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基因克隆技术名词解释
基因克隆技术是指通过人工手段将一个生物体的基因从其源生物体中抽取并插入到另一个宿主生物体中的过程。
以下是一些基因克隆技术的常见术语的解释：
1. DNA复制（DNA replication）：在细胞分裂或基因克隆过
程中，DNA的双链被解开，通过酶的作用，在每个单链上合
成一条新的互补链，从而产生两条完全相同的DNA分子。
2. 基因库（gene library）：基因库是一个储存基因序列的集合，通常通过将DNA分子从一个组织或生物提取出来，并将其插
入到载体（如细菌或酵母）中来构建。
3. 重组DNA技术（recombinant DNA technology）：重组
DNA技术是一种通过将不同来源的DNA片段连接到一起来生成新的DNA分子的方法。
这种方法可用于将特定基因插入宿
主生物体的基因组中。
4. 基因放大（gene amplification）：基因放大是指通过体外复
制方法制备大量特定DNA序列的过程，如聚合酶链式反应（PCR），从而获得足够量的DNA来进一步研究。
5. 基因表达（gene expression）：基因表达是指基因通过转录
和翻译的过程产生功能性蛋白质的过程。
基因克隆技术可以用于将外源基因（来自其他物种）插入宿主生物体的基因组中，从而使宿主生物体表达该基因及其编码的蛋白质。
6. 表达载体（expression vector）：表达载体是一种DNA分子，其中包含了一个外源基因的表达序列，如启动子、转录终止子和转录调控元件等。
表达载体可以在宿主生物体中将外源基因表达出来。
7. 选择标记（selection marker）：选择标记是一种用于帮助筛
选转化成功的宿主生物体的方法。
常用的选择标记包括耐抗生素基因，只有含有特定基因的宿主生物体才能在含有相应抗生素的培养基中生长。
8. 基因敲除（gene knockout）：基因敲除是指通过特定的基因
编辑技术（如CRISPR/Cas9）来使宿主生物体中的特定基因失去功能。
这种方法可以帮助研究基因的功能以及与其相关的生理和病理过程。
以上仅为基因克隆技术的部分术语解释，该领域还涉及到许多其他技术和概念。