基因工程中学生常见的十个问题

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基因工程技术使用中常见问题解答

基因工程技术使用中常见问题解答

基因工程技术使用中常见问题解答基因工程技术是一项重要的生物技术,它通过改变生物体的基因,可以创造出具有新功能或特性的生物体。

然而,在实际应用过程中,人们常常会遇到一些问题和疑惑。

本文将解答一些基因工程技术使用中常见的问题,帮助读者更好地了解和应用该技术。

问题一:什么是基因工程技术?基因工程技术是通过改变生物体的遗传信息,创造出具有新功能或特性的生物体的一种技术。

具体而言,它可以将一种生物体中的基因导入到另一种生物体中,或是通过人工合成新的基因来改变生物体的遗传特性。

问题二:基因工程技术有哪些应用?基因工程技术在许多领域都有广泛的应用。

首先,它在农业领域被用于改良作物,增加抗病性、耐旱性等特性,从而提高农作物产量和质量。

其次,在医学领域,基因工程技术被用于研发新药物和治疗方法,例如基因治疗和基因诊断。

此外,基因工程技术还被应用于制造工业产品,如生物染料、生物燃料等。

总之,基因工程技术具有广阔的应用前景。

问题三:基因工程技术安全吗?基因工程技术在应用过程中需要遵循一定的安全操作规范和法规。

在实验室中的操作应严格按照相关的操作流程和标准进行,以确保实验过程安全可靠。

另外,在将基因工程产品应用到实际环境中时,也需要进行适当的风险评估,以评估其对环境和人类健康的潜在影响。

因此,在合理使用和管理下,基因工程技术可以被控制在安全范围内。

问题四:基因工程技术对人类健康有何影响?基因工程技术对人类健康有着广泛的积极影响。

首先,它可以帮助研发新的药物和治疗方法,从而提高人类对各种疾病的抵抗力。

例如,基因工程技术可以用于生产重组人胰岛素,治疗糖尿病。

其次,基因工程技术还可以用于基因诊断,即通过检测和分析患者的基因信息,帮助早期发现某些遗传疾病,从而进行精确的治疗和预防。

问题五:基因工程技术是否会对自然界产生影响?基因工程技术的应用可能对自然界产生一定的影响。

当基因工程生物体进入自然界时,可能对原生态系统造成潜在的影响。

如何克服基因工程技术在实验中的常见困难

如何克服基因工程技术在实验中的常见困难

如何克服基因工程技术在实验中的常见困难基因工程技术作为一种重要的生物技术手段,已经在医疗、农业和生物学研究等领域取得了显著的成就。

然而,在基因工程实验中常常面临各种困难与挑战。

本文将就常见困难进行深入探讨,并提供一些建议来克服这些困难。

一、难以获取所需DNA样本在进行基因工程实验时,获取所需的DNA或RNA样本是一个重要的第一步。

然而,由于某些物种的DNA提取困难或样本稀缺,科研人员常常面临这一挑战。

为了克服这个困难,可以尝试以下方法:1.1 合理设计实验方案:在实验设计时,要合理规划样本的来源,选择适当的物种和组织,并确保能够获取足够的DNA或RNA样本。

1.2 扩大样本采集范围:如果某种物种的样本难以获得,可以考虑从相关物种或亲缘物种中获取相似的基因序列以进行操作。

1.3 应用现代分子生物学技术:可以通过利用现代分子生物学技术的方法,例如PCR扩增、基因克隆等,扩增所需的DNA片段,以获得足够的样本。

二、选择适当的表达载体在基因工程实验中,合适的表达载体对于成功表达目标基因至关重要。

然而,在实验中常常会遇到表达效率低下、蛋白质积累不稳定等问题。

为了克服这些困难,可以采取以下措施:2.1 选择适当的宿主表达系统:根据实验需求和目标基因的特点,选择适当的宿主表达系统,如大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞等。

2.2 优化启动子和调控序列:启动子和调控序列对于基因的表达水平和稳定性起着重要作用。

通过合理设计启动子和调控序列,可以提高目标基因的表达水平和稳定性。

2.3 优化表达条件:调整培养基成分、温度、培养时间等条件,优化表达条件,以提高表达效率和蛋白质的稳定性。

三、克服基因编辑技术的难题基因编辑技术作为基因工程的一项重要技术手段,已经引起了广泛的关注。

然而,在实际应用中,常常会面临一些困扰和难题。

下面提供一些建议来克服这些问题:3.1 提高工具的特异性:为了避免非特异性的基因编辑,可以选择更加特异性的基因编辑工具,如CRISPR/Cas9技术中的高特异性锚型RNA。

基因工程技术实验中的问题解答及案例分享

基因工程技术实验中的问题解答及案例分享

基因工程技术实验中的问题解答及案例分享基因工程技术是一门涉及生物学、化学、医学等多个领域的学科。

它通过对生物体基因进行修改和重组,以改变其遗传性状。

这项技术在农业、医学、环境保护等方面都有广泛的应用,但同时也引发了一系列的问题与争议。

本文将就基因工程技术实验中常见的问题进行解答,并分享一些实际案例。

首先,让我们来关注一些基础问题。

有人会问,基因工程技术是否安全?这是一个非常重要的问题。

从科学的角度来看,基因工程在实验室条件下进行,在研究人员的严格控制下,应该是安全的。

然而,无论如何,存在风险是不可避免的。

因此,科学家们对基因工程技术进行了严格的监管和评估,以确保其安全性。

同时,国家和国际社会也建立了相应的法律法规和伦理准则,来指导和约束基因工程技术的研究与应用。

另一个常见的问题是,基因工程技术是否有可能导致新的疾病或产生不良影响?基因工程技术的目的是改变生物体的遗传性状,以获得特定的功能或性质。

然而,由于基因是生物体的重要组成部分,对其进行修改可能会导致一些未知的风险。

因此,在进行基因工程技术实验时,科学家们会进行全面的风险评估,并采取安全措施来最大限度地减少潜在的不良影响。

基因工程技术在农业领域的应用引起了广泛的关注。

例如,转基因作物被广泛用于提高产量、抗虫害和抗病害等特性。

然而,有人担心转基因作物可能会对生态环境产生不良影响,或对人类健康产生负面影响。

根据大量的研究和实践经验,目前尚未发现转基因作物对人体健康造成直接影响的证据,同时转基因作物也经过了严格的风险评估和监管。

在农业方面,适当的管理和监测措施可以帮助有效控制潜在的环境风险。

在医学领域,基因工程技术为人类健康带来了巨大的潜力。

例如,基因治疗被用于治疗遗传性疾病,将正常的基因导入患者体内,以修复缺陷基因。

然而,基因治疗仍然处于研究和实验阶段,并未广泛用于临床治疗。

在进行基因治疗实验时,科学家们会严格遵循伦理准则和法律法规,并进行充分的风险评估。

基因工程常见问题梳理

基因工程常见问题梳理

基因工程常见问题梳理1、什么是星星活性,产生的原因及解决方案?星星活性是指在极端非标准条件下,限制性内切酶能切割与识别序列相似的序列,而造成误切的现象。

产生的原因:1)甘油浓度过高,大于5%;2)酶过量,>100U/ul;3)Mg2+被其他的二价金属离子取代;4)pH过高,>8.0;5)添加了有机溶剂DMSO、乙醇等;6)离子强度低,<25mmol/l。

2、限制性内切酶的发现、分类和各类的特点:限制性内切酶的发现是20世纪60年代,噬菌体侵染大肠杆菌之后,DNA在感染宿主中会被降解,从而提出了限制酶切和限制酶的概念。

1970年,H.Smith偶然发现了HindIII,揭开了限制酶的面纱。

主要分为三类:I类、III类:限制作用需要A TPII类:最常使用的一类限制酶,识别序列主要有4-6个核苷酸,回文结构,与甲基化的反应分开,限制作用不需要A TP。

3、不同条件的两种限制性内切酶,双酶切时应该采取什么措施?1)同步双酶切:配置同时适合这两种限制酶的最佳缓冲体系,同时加入两种酶;2)分步酶切:分开加酶时遵循先低盐后高盐原则,而且可以在加入第二种酶的时候使第一种酶失活,避免产生星星活性。

3)使用配有特殊缓冲液的酶进行酶切:在大多数情况下采用标准缓冲液的酶也能在这些特殊缓冲液中进行酶切,这保证了对缓冲液有特殊要求的酶也能良好工作。

由于内切酶在非最佳缓冲液中进行酶切时,反应速度会减慢,因此需要增加酶量,延长反应时间。

4、差异杂交的基本原理和思路差异杂交要拥有两种不同的细胞群体:在一个细胞群体中的目的基因正常表达,在另一个细胞群体中的目的基因不表达。

在这种情况下便可制备两种不同的mRNA提取物。

其一是含有目的基因的mRNA的总mRNA,另外一种是不含有目的基因mRNA的总mRNA。

因此,可以通过这两种mRNA的cDNA拷贝为探针,对由表达目的基因的细胞总mRNA构建的克隆库进行筛选。

思路:将来自一种细胞的mRNA反转录形成cDNA的第一链,用这种细胞的cDNA与另一种细胞过量表达的mRNA进行杂交。

基因工程技术使用中的常见问题及解决方法

基因工程技术使用中的常见问题及解决方法

基因工程技术使用中的常见问题及解决方法随着科学技术的不断进步,基因工程技术被广泛应用于医学、农业、环境保护等领域,为人类社会的发展带来巨大的潜力和机遇。

然而,与此同时,基因工程技术使用中也会遇到一些常见问题。

本文将对这些问题进行解析,并提供解决方法,以期帮助读者更好地理解和应用基因工程技术。

常见问题一:目标基因无法稳定表达在基因工程技术中,常常需要将外源基因导入到目标生物体中,并使其稳定表达。

然而,由于转基因过程中的多种因素,往往导致目标基因无法稳定表达,表现为低表达或完全不表达。

针对这种情况,可以考虑以下解决方法:1. 优化启动子和终止子:启动子和终止子是控制基因表达的关键序列,合理选择和优化它们,可以提高目标基因的表达水平。

2. 选择适当的载体:合理选择载体的基本元件,如选择具有高转录活性的启动子和转录因子,有助于增加目标基因的表达水平。

3. 考虑信号序列:某些外源基因需要特定信号序列的介导才能正确定位到细胞器或细胞膜上,因此,在设计转基因实验时,应该根据目标基因的特点,加入适当的信号序列。

常见问题二:基因编辑技术中的意外剪切事件基因编辑技术是一种广泛应用的基因工程技术,通过对基因组进行针对性的修饰来实现特定基因的删除、插入或编辑。

然而,由于技术的复杂性,有时会发生意外的剪切事件,导致不完全的或不准确的编辑。

下面是一些常见的问题和解决方法:1. 优化工作流程:合理选择基因编辑酶、优化酶反应条件,如温度、酶浓度和反应时间,以最大限度地减少非特异性剪切。

2. 加强规范实验:正确使用试剂和仪器,遵守实验室操作规程,如低容量多管道操作、持续质量控制,能够减少人为因素对实验结果的影响。

3. 选择适当的细胞系:在进行基因编辑实验时,细胞系的选择也很重要。

合理选择易于编辑的细胞系,可以提高编辑效率和准确性。

常见问题三:基因转导的有效性基因转导是将外源基因转运到目标细胞中的过程。

但是,市面上许多转导方法都存在一些限制,如低效和细胞毒性等问题。

基因工程问答题整理

基因工程问答题整理

名解抗体:B细胞在抗原的刺激下分化为浆细胞,产生具有与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白,称为抗体。

Fab:用木瓜蛋白酶将IgG分子断裂的3个大小相似的片段中能与抗原结合的2个片段Fc:用木瓜蛋白酶将IgG分子断裂的3个大小相似的片段中不能与抗原结合的1个片段免疫球蛋白:具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。

超变区:重链和轻链的V区各有三个区域的氨基酸组成和排列顺序特别易变化,称为超变区可变区:重链和轻链靠近N端的约110个氨基酸的序列变化很大,称为可变区单克隆抗体:由一个克隆细胞产生、只作用于某一抗原决定基的均一抗体。

借助小鼠B细胞杂交瘤技术,所制备的高度均一(属同一类、亚类、型别)、单一特异性(仅针对特定抗定抗原表位)的抗体ADCC:抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用,表达Fc受体的细胞通过识别抗体的Fc段直接杀伤呗抗体包被的靶细胞。

调理作用:抗体,补体等调理素促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用J链:一条由浆细胞合成的富含半胱氨酸的多肽链,可连接Ig单体形成的二聚体,五聚体或多聚体分泌片:分泌型IgA的一个辅助成分,由粘膜上皮合成,连接IgA二聚体上,使其成为分泌型,保护其铰链区免受蛋白水解酶作用,介导其转运到粘膜表面Ig功能区:Ig分子的每条肽链可折叠为几个功能不同,结构相似的球形功能区,或称结构域Ig折叠:由几股多肽链折叠形成的2个反向平行的β片层结构,2个片层结构中心的2个半胱氨酸残基由一个链内2硫键垂直连接,可稳定结构域,形成一个β桶状结构,这种折叠方式称为免疫球蛋白折叠。

CDR:互补性决定区,即高变区(超变区)Ig:免疫球蛋白同种型:同一种属内所有个体共有的Ig抗原特异性标记同种异型:同一种属不同个体间Ig分子所具有的不同抗原特异性标志。

由若干散在分布的氨基酸序列差异导致。

独特型:每一个Ig分子在CDR区氨基酸序列所显示出的免疫性,是每一个Ig分子所特有的抗原特异性标志。

中学有关基因工程的几个问题

有关基因工程的几个问题1、DNA分子复制与PCR为什么需要引物?无论体内复制还是体外复制,都需要引物。

这是由DNA聚合酶的催化特点所决定的。

聚合酶只能催化脱氧核糖核苷酸加到已有核酸链的游离3'-羟基上,而不能使脱氧核糖核苷酸自身发生聚合,也就是说,它需要引物链(primer strand)的存在。

体内复制时,初始的一段无法聚合形成DNA引物,只能由另一种酶引物合成酶合成RNA引物。

RNA引物形成后,由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3'-OH端而进入DNA链的延伸阶段。

引物长度通常只有几个~10多个核苷酸。

RNA引物的消除和缺口填补是由DNA聚合酶Ⅰ完成的,最后由DNA连接酶连接。

为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢?这可能与尽量减少DNA复制起始处的突变有关。

DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错,因此,用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除,提高了DNA复制的准确性。

而体外复制时,引物是人为设计合成加入反应体系的。

自然可以简化成直接加入短DNA链,无需再消除填补。

一般引物长度在15-30bp。

2、引物的作用是什么?PCR技术是否需准确知道基因的碱基序列?还是只知道引物结合的序列就可以了?正因为有了人为设计合成的引物,PCR技术才实现了对目的基因的特异性扩增(或称选择性扩增)。

真实的实验操作中,加入反应体系的模板决不仅仅是目的基因那一段序列。

它往往是一定量还有目的基因的质粒,或是从细胞中提取出的全部基因组DNA。

如何保证只针对我们要的那一段序列进行大量扩增呢?需要两段引物特异性的与目的区段的两端结合(通俗地讲就是卡住两头,延伸中间的一段)。

我们根据目的基因两端的序列,设计与其碱基互补配对的引物,特异性的结合就实现了。

因此,引物的作用,一方面为DNA聚合酶提供已有核酸链的游离3'-羟基,另一方面更重要的是实现在众多序列中找到需要扩增的那段序列。

2_基因工程_专题疑难问题解析

第 26 卷第 3 期 2010 年
中学生物学 Middle School Biology
文件编号: 1003 - 7586(2010)03 - 0003 - 04
Vol.26 No.3 2010
“基因工程”专题疑难问题解析
王丽萍 (江苏省海门中学 江苏南通 226100)
这两年在讲授人教版选修 3 《现代生物科技专 题》的“基因工程”专题部分时,发现无论是部分老师, 还是学生对其中的有关问题,都存在着或多或少的疑 问,现收集教学一线碰到的以下问题逐一进行解析, 供同行参考。
解析:人们之所以要选择乳腺来生产药物蛋白,原 因很多。首先,乳汁可以由乳腺不断地分泌,而且产量 很高,长期收集也不会对动物造成伤害;其次,将新的 药物蛋白限制在乳腺内生产,最后分泌到乳汁中,一 般不易对转基因动物的正常生理活动造成影响。此 外,乳腺分泌的蛋白质是经过正常的高等哺乳动物的 翻译后加工的,这使得生产的药物蛋白更接近于人类 自身的蛋白质。再有,乳汁中蛋白纯化起来相对较为 容易,而且在乳汁中含有的其他蛋白质也不多。
再结合人教版必修 2 第五章第一节,给出的基因 重组的概念,即是生物体在有性生殖的过程中,控制 不同性状的基因的重新组合。这样,不禁使人产生一 个疑问:R 型和 S 型细菌都不可能进行有性生殖,那 它们的转化还属于基因重组吗?要弄清楚这个问题, 就需要先全面地认识一下“基因重组”。 1 自然界的基因重组 1.1 真核生物的基因重组
第二步,核酸酶 H 使 RNA-DNA 杂交分子中的 RNA 链降解,使之变成单链的 DNA。
第三步,以单链 DNA 为模板,在 DNA 聚合酶的 作用下合成另一条互补的 DNA 链,形成双链 DNA 分 子。
问题 3:为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的 DNA?

基因工程技术中常见问题的解答与案例分析

基因工程技术中常见问题的解答与案例分析基因工程技术是一种在生物学领域中使用基因技术来改变生物体的遗传信息的方法。

它已经在医学、农业和工业等领域取得了重要的突破和应用。

然而,随着基因工程技术的广泛应用,也出现了一些常见的问题和争议。

本文将回答一些基因工程技术中常见的问题,并通过案例分析来说明。

1. 人工合成基因是否安全?人工合成基因是通过合成DNA序列来创建新的基因,用于改变生物体的性状。

但一些人担心这可能产生不可预测的风险。

事实上,人工合成的基因需要经过严格的筛选和测试,确保其安全性和有效性。

例如,利用基因工程技术开发的新药物需要经过临床试验,以确保其安全性和有效性。

此外,相关的监管机构也会对人工合成的基因进行审查和监督。

因此,人工合成基因在科学和法律层面上都有一套严格的安全措施。

案例分析:1990年代,美国农业部批准了一种转基因玉米。

该转基因玉米中添加了一种基因,使其对一种农药具有耐受性。

在该品种上市之前,经过了大量的实验和临床试验,以确保其安全性。

多年来,这种转基因玉米已经广泛种植,并被证明对环境和人体健康没有负面影响。

2. 转基因食品对人体健康的影响如何?转基因食品是指经过基因工程技术改造过的食品。

许多人对转基因食品的安全性产生了担忧。

然而,大量的科学研究表明,转基因食品与传统食品相比,在食品安全方面没有显著差异。

案例分析:1996年,一种转基因番茄上市销售。

这种转基因番茄通过基因工程技术增加了一种天然存在的营养素,提高了其营养价值。

经过严格的评估和测试,该转基因番茄被认为与传统番茄一样安全,对人体健康没有负面影响。

3. 转基因作物对环境的影响如何?转基因作物种植对环境可能产生一些影响。

然而,大多数研究表明,转基因作物与传统作物相比,在环境方面并没有明显不同。

案例分析:一项对转基因棉花的研究发现,转基因棉花能够减少农药使用量、提高收成、对土壤中的益生菌无害,并提供了经济利益。

此外,转基因作物的耐旱性和抗病性等特性也有助于减少对化学农药和水资源的使用,从而减少了对环境的负面影响。

基因工程技术实验中常见问题的解答及解决思路

基因工程技术实验中常见问题的解答及解决思路基因工程技术在生物科学领域中发挥着重要的作用。

然而,这项技术在实验过程中常常面临一些问题。

本文将回答基因工程技术实验中常见问题并提供相应的解决思路。

1. 实验中基因测序结果不准确或存在错误。

基因测序是基因工程技术实验的重要步骤之一。

若结果不准确或存在错误,可能会导致后续实验的失败。

出现这种情况时,可以采取以下措施:1)重新校正仪器:检查测序仪器及相关试剂的质量,确保仪器的准确性和稳定性。

2)检查操作流程:仔细检查实验操作流程是否按照标准程序进行,排除操作失误。

3)重复实验:确保实验结果的准确性,可以进行重复实验,验证测序结果的一致性。

2. 载体转染效率低或不稳定。

载体转染是将目标基因导入宿主细胞中的重要步骤。

若转染效率低或不稳定,可能会影响后续实验的进行。

以下是解决思路:1)优化转染条件:调整转染条件,包括转染试剂、转染时间和细胞密度等因素,优化转染效果。

2)选择合适的载体:确保选择的载体具有高转染效率和稳定性,避免低效率和不稳定性的问题。

3)筛选转染细胞:对转染后的细胞进行筛选,选择表达目标基因较高且稳定的细胞株。

3. 基因编辑效率低或无法完全实现预期修饰。

基因编辑是基因工程技术中的重要环节。

如果编辑效率低或无法完全实现预期修饰,可能会导致结果不准确或无法达到预期目标。

以下是解决思路:1)优化编辑工具:选择适当的基因编辑工具,如CRISPR-Cas9系统,并进行技术优化,提高编辑效率。

2)优化编辑条件:调整编辑条件,例如优化转染系统、优化编辑剂量和编辑时间等,提高编辑效率。

3)优化细胞系选择:选择易于编辑的细胞系,如某些细胞系对编辑更加敏感,对特定基因修饰效率更高。

4. 目标基因表达量低或不稳定。

目标基因表达是基因工程技术实验的重要结果之一。

若表达量低或不稳定,可能会影响实验效果和结果解读。

以下是解决思路:1)优化启动子:选择适当的启动子,确保其能够驱动目标基因的高表达,并确保启动子的稳定性。

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《基因工程》专题中学生常问的十个“为什么”
人教版新课标教材选修3《基因工程》专题对基因工程进行了生动地介绍,让学生对一项生物技术有了一定的了解,在教学中我发现学生们对此内容很感兴趣,在和他们的交流过程中,他们经常会给我提出这样﹑那样的一些问题,我把它们总结成了十个“为什么”。

一.为什么原核生物的限制酶不切割自己的DNA?
原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵如噬菌体,在长期的进化过程中原核生物形成了一套完善的防御机制,以保持自身遗传的相对稳定性。

当外源DNA侵入后,限制酶就将其切割掉,使外源DNA不能发挥遗传效应,而且限制酶往往与一种甲基化酶同时成对存在,它们具有相同的底物专一性,具有识别相同碱基序列能力。

甲基化酶的甲基供体为S-腺苷甲硫氨酸,甲基受体为DNA上的腺嘌呤与胞嘧啶。

当限制酶作用位点上的某一些碱基被甲基化修饰后,限制酶就不能再降解这种DNA了。

这样在含有某种限制酶的原核生物的细胞中,其DNA分子中不具备这种限制酶的识别切割序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。

所以限制酶只降解外源入侵的异种DNA,而不分解自身DNA,在解除外源DNA遗传干扰的同时又保护了自身遗传特性的稳定。

二.为什么CDNA文库只有该物种部分基因?
因为CDNA是以mRNA为模板,经逆转录酶催化,在体外逆转录合成,如果与适当的载体如噬菌体或质粒连接后导入受体菌,则每个细菌含有一段CDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的CDNA集合称为该组织细胞的CDNA文库。

基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以CDNA文库具有组织细胞特异性,当然CDNA文库也就比基因组DNA文库小得多。

三.为什么要扩增目的基因?
因为基因工程中的每一个操作步骤的成功率都不高,要进行大量的筛选,这样就需要大量相同的目的基因,所以需要扩增目的基因。

四.为什么PCR技术中不使用解旋酶和ATP?
PCR技术是一种体外进行DNA复制的方法,通过在一定的条件下控制温度即高温变性、低温退火和适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增。

在DNA 复制过程中是通过在高温条件实现DNA解旋,所以不需要解旋酶,而且如果使用了解旋酶会使DNA一直处在单链的状态,反而会破坏复制过程的循环性;复制的过程本来是需要能量的,但是在PCR反应体系中加入的并非是普通的4种脱氧核苷酸,而是4种脱氧核苷三磷酸即dATP,dTTP,dGTP,dCTP,它们分别由4种脱氧核苷酸在消耗ATP的基础上活化形成的,所以它们能提供PCR反应需要的能量,所以在PCR过程中,不需要加入ATP。

五.为什么用Ca2+处理大肠杆菌能增大转化率?
对于大肠杆菌来说,人们一般采用先用冰冷的CaCl2处理,然后置于42?SPAN>C高温下,这样使大肠杆菌变成感受态细胞,使其吸收外源的DNA时能够增大转化率,而原因目前大多数人认为可能是这样能够大肠杆菌的细胞壁上打了一些孔,DNA分子从这些孔洞中进入细胞,而这些孔洞随后又可以被大肠杆菌修复。

六.为什么动物基因工程中的受体细胞使用的通常是受精卵?
动物基因工程的最终目的是为了得到转基因的动物个体,而动物的体细胞的全能性受到了很大的限制,所以通常使用的受体细胞通常是受精卵。

七.为什么用同位素标记DNA探针,如果能够实现分子杂交后可以显示出杂交带?
因为利用目的DNA片段制作的探针用同位素标记之后,当探针与硝酸纤维素膜上的DNA 进行杂交后,就能在X光底片上显示出黑色的条带,也就是杂交带。

八.为什么转基因动物只让药物蛋白目的基因在动物乳汁中表达?
乳腺是最理想的表达场所,因为乳腺属于外分泌器官,乳汁不进入体内循环,不会影响动物自身的新陈代谢,从而不会损害到转基因动物的健康。

同时通过转基因动物的乳汁中获取的目的基因产物,又具有产量高、易提纯,表达的蛋白经过充分的修饰后,有相当稳定的生物活性等特点。

九.为什么在基因治疗中使用腺病毒作为载体,而没有使用质粒?
在基因治疗中通常的受体细胞是人细胞属于哺乳动物细胞,腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,且致病性低,而腺病毒则除了卵细胞以外几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中,因此不会干扰其它的宿主基因,无插入致突变性。

十.为什么说蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程?
因为蛋白质工程主要体现在对蛋白质分子进行预先设计,但最终要生产出所需要的蛋白质,还是要需要通过基因工程才能实现。

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