黄芪甲苷含量计算公式
高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量分析
高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量分析摘要】目的：建立高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量测定体系。
方法：应用高效液相色谱法测定蒙古黄芪和甘肃红芪的黄芪甲苷含量，色谱柱：Agilent Eclipse XBD-C18柱(150×4.6 mm，5μm)；流动相：甲醇-0.2%磷酸水溶液(44∶56)；柱温：26℃；流速：0.5 mL/min；检测波长：335 nm。
结果：黄芪甲苷测定的回归方程为Y=13.614X-1.4897，r=0.9999，线性范围为10.2-102μg/mL-1。
测定蒙古黄芪和甘肃红芪中的黄芪甲苷回收率分别为95.9%与94.5%，在3 d内基本能保持稳定，含量分别为0.289mg/g和0.284mg/g。
结论：高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量方法简便、灵敏度高、重现性好，可作为首选方法之一。
【关键词】高效液相色谱法黄芪黄芪甲苷【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）34-0192-02黄芪是中医临床最常用的大宗药材之一，具有营养和抗氧化等药理活性和药用价值，主要生长在西北干旱地区。
当前由于市场需求量不断增加，其野生资源受到极大威胁[1]。
其含有多糖、甲苷等主要生物活性成分，有抗心肌缺血、缺氧、病毒性心肌炎的作用[2]。
当前黄芪甲苷的测定方法有薄层色谱法与毛细管电泳法等[3]。
本文建立了高效液相色谱法测定黄芪中的甲苷含量体系，希望为从天然植物中寻找低毒或无毒的抗氧化活性成分提供参考。
现报告如下。
1 实验仪器与方法1.1 实验仪器日本岛津公司LC-20AT高效液相色谱仪与色谱工作站，十万分之一电子天平XS205DU型，SQ21198B多功能食品加工机，UV-2450型紫外-可见分光光度计，DELTA320型pH计。
黄芪甲苷对照品购自中国药品生物制品鉴定所，石油醚、氯仿、正丁醇为色谱纯，甲醇、甲酸、无水乙醇、冰醋酸为分析纯，水为超纯水。
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展
黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展摘要：黄芪是一种常见的中草药材，具有滋补养生、增强免疫力、抗疲劳等多种功效。
黄芪甲苷作为黄芪中的一种主要有效成分，对其含量的测定一直是研究的热点。
本文将对黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展进行综述，以期为黄芪的质量控制和药用价值的评价提供参考。
一、引言黄芪，又名黄芪、土黄芪，为豆科植物黄芪的根。
黄芪在我国的使用历史非常悠久，被誉为“草中之皇”，在中医药中具有益气健脾、祛痰利水、固表止血等功效。
现代研究表明，黄芪还具有增强免疫力、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种生物活性，因此在食品、保健品、药品等领域有广泛的应用价值。
1. HPLC法HPLC（High Performance Liquid Chromatography）是目前测定黄芪甲苷含量常用的方法之一，其操作简便、分离效果好、重现性高。
常用的色谱柱有C18、C8、C4等，流动相常用乙腈-水、甲醇-水等。
检测波长一般为203nm。
HPLC法在分离和测定黄芪甲苷方面取得了一定的成果，但也存在一定的局限性，例如在样品的制备和前处理过程中易引起黄芪甲苷的流失，影响测定结果的准确性。
2. LC-MS法LC-MS（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry）是一种高灵敏度、高分辨率的分析方法，可对复杂样品进行快速、准确的分析。
LC-MS法结合了液相色谱和质谱分析的特点，可以直接测定样品中的黄芪甲苷含量，并能对其结构进行进一步的鉴定。
由于其分析灵敏度高、选择性好，因此在黄芪甲苷含量测定中得到了广泛的应用。
LC-MS法的仪器设备和操作技术要求较高，且成本较高，限制了其在一般实验室的应用。
3. UV法UV（Ultraviolet）法是通过样品对紫外光的吸收程度来测定样品中目标成分的含量。
黄芪甲苷在紫外光下有特定的吸收峰，可以通过检测其吸光度来测定其含量。
UV法操作简便、成本低，但其检测灵敏度不高，对样品的前处理要求较高，且容易受杂质的干扰。
黄芪甲苷介绍以及提取
黄芪甲苷介绍以及提取黄芪性甘，微温；归脾、肺经。
补气养血，益气固表，这是黄芪的主要作用。
同时可以复脉固脱，生津止渴，是恢复元气的良药。
对于身体虚弱、精神萎靡、四肢无力或突发性休克等均有不错的疗效。
黄芪生用可以治疗身体淤血、手脚肿胀、皮肤红肿毒疮等疾病，主要有赖于其益气固表、利水排毒的作用。
蜜炙黄芪可以缓解元气不足、腑脏功能减退、脾虚劳倦、贫血等症状，得益于其补中益气、补血养血的作用。
现代药理学研究发现黄芪有防治感冒，治疗病毒性心肌炎，预防和治疗小儿支气管哮喘，治疗和缓解慢性乙型肝炎，治疗和缓解慢性肾炎，可用于视网膜脱离术后视力恢复，防治高血压、动脉硬化、高血脂等心脑血管疾病。
黄芪的主要成分有皂苷类、多糖类、黄酮类物质及有机酸，其中皂苷类和黄芪多糖是其主要活性物质，黄芪皂苷I、II、III、Ⅳ、V、VI、VII、VIII是主要的皂苷类物质。
《中国药典》(2015版)规定，黄芪甲苷的含量是黄芪质量控制的主要指标[41。
黄芪甲苷是正品黄芪三萜皂苷中的黄芪皂苷Ⅳ，在黄芪药材中含量极低，一般在千分之一左右，而且黄芪中药材成分复杂，提取比较困难，并且现代药学的发展及新剂型新产品的不断出现，要求有效地提取黄芪中的黄芪甲苷，对于产品研发和创新有着关键性的作用。
现阶段对于黄芪甲苷的提取方法和工艺研究有了一定的进展，在传统提取基础上，出现了超临界二氧化碳萃取、微波辅助萃取、超声波辅助提取技术，所以研究高效快速提取黄芪中黄芪甲苷的方法和技术就显得尤为重要。
现代医学研究证明，黄芪甲苷可以减少血栓形成、降低血压、保护心脏、增强机体免疫力等作用，黄芪的化学成分众多，主要有皂苷类、黄酮类和多糖等，其中皂苷类化合物有黄芪皂苷及其大豆皂苷，黄酮类化合物有黄酮、异黄酮、异黄烷和紫檀烷四大类。
另外尚含单糖、氨基酸、蛋白质、核黄素、叶酸、尼克酸、维生素D、驱油酸、亚麻酸、微量元素、香草酸、阿魏酸、异阿魏酸、对羟苯基丙烯酸、咖啡酸、绿原酸、棕榈酸、B一谷甾醇、胡萝卜苷、羽扇豆醇，正十六醇等成分口。
不同生长年限黄芪中黄芪甲苷的含量测定
２ Ｘｉｎ ａ ｇＭｕ ｉｉ ａ ａ ｔ ｃ ｏ ｌ ａｙ ｎ ｎ ｃｐ ｌＨｅ ｌ Ｓ ｈ ｏ ｈ
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黄 芪 为常 用 中 药材 ， 有 补 气 升 阳 、 水 消 具 利 肿 、 气 固表 之功 效 。 年研 究发现 黄芪 总皂苷 具 益 近 有抗 血 栓形 成 等作 用 ，００年版 中 国药典 将 黄 芪 ２１
甲苷 列 为含 量 测 定 的 指标 性 成 分［。 。本 文 采 用 卜］
［ 中图分类号］Ｒ ８ ． ２２４ ［ 文献标识码］ Ａ ［ 文章编号］ １ ０－ ８ ２ ２ １） ３ ０ ３－ ２ ４ ６ ５ （０２ ０－ ０ ０ ０ ０
Ｄｅ ｒ ｎ ｔ ｎｏ ｓ ａ ａｏｉｅＩ ａｇ ｉ ｔ ｆ ｒｎ ｏ ｈＹ ａｓ ｔ ｍｉａｉ ｆ ｔ ｇ ｌｓ ｉ Ｈｕ ｎ Ｑ ｈＤｉｅｅ ｔ ｗｔ ｅｒ ｅ ｏ Ａ ｒ ｄ Ｖｎ ｗｉ Ｇｒ
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HPLC法测定黄芪中黄芪甲苷的含量
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关键 词 ：ＨＰ Ｃ；黄 芪 甲苷 ；黄芪 Ｌ ｄ ｉ １． ６ ￣ｉ ｎ１７ ７ ９ ０９０ ． ０ ｏ ： ０３ ９ ．ｓ． ２２ ７． ０ ． ０ ９ ｓ ６ ２ ３３ 文 章编 号 ： １７．７ ９ （０９ ０ １７０ ６ ２２７ ２０ ）．３０ １—２
黄 芪 甲苷 的进 样量 在 ２２ １ ． 范 围 内 ．～ ３２
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高效液相色谱法测定血安颗粒中黄芪甲苷的含量
高效液相色谱法测定血安颗粒中黄芪甲苷的含量【摘要】目的建立以高效液相色谱法测定血安片中黄芪甲苷含量的方法。
方法色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相：乙腈-水（32∶68）为流动相；蒸发光散射检测器，流速为1．0 ml/min，柱温：40℃，进样量10 μl。
结果黄芪甲苷在2．72～13．60 μg（r=0．999 5）之间呈良好的线性关系。
黄芪甲苷平均回收率:100．1%（RSD=1．26%,6例）。
结论本方法简便、准确、重现性好。
【Abstract】Objective To establish a method of HPLC determination of Asragloside in tablet of Xuean.Methods SHIM-PACK-C18 column was used with a mobile phase of acetonitrile－water（32∶68）;flow rate 1．0 ml/min; column temperature at 40℃;injecting volume 10 μg．Results Asragloside showed the good linear relationship at the range of 2．72～13．60 μg（r=0．999 5）respectively；It average recoveries was: 100．1%（RSD=1．26%,6例）respectively.Conclusion The methods is simple, accurate and reproducible.【Key words】Tablet of Xuean；Asragloside；HPLC血安片是由当归、川芎、黄益母草等组成的中药复方制剂，有益气活血、祛淤止血的功能。
用于妇人气虚血瘀之恶露不绝症。
建立以高效液相色谱法测定血安片中黄芪甲苷含量的方法，对提高中药制剂质量监控，完善质量标准体系具有实际应用意义。
外标两点法
外标两点法对数方程是在应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELS D）进行药物分析时的含量计算方法。
大家都知道在用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）的定量用外标两点法对数方程，并且药典也要求如此！比如银杏叶、知母、黄芪、人参、署预、（中药含有皂苷的），化药也有一些。
但对数方程的列法却各不相同，有很多人是3楼的列法：峰面积和进样量同时去对数。
但就药典的文字理解：“对数方程”是指在方程里有一个对数，而同时取对数列出来的方程叫双对数方程。
根据最小二乘法应该是进样量(ug)与峰面积的对数的线性方程。
我们用蒸发光散射检测器时，由于散射光的信号为非线性的，根据ELSd的工作原理，进样质量和ELSD检测响应值（峰面积）一般不呈现良好的线性。
因为信号相应值与物质质量的对数呈线性关系，如果对进样质量和峰面积分别取常用对数后，两者呈现良好的线性关系，但是它是一条不经过原点的直线，所以在含量测定时必须使用外标两点法，通常称作外标两点法对数方程，在中国药典20 00版2002增补本以及2005版、2010版中，凡采用HPLC-ELSD方法进行含量测定时，均有“采用外标两点法对数方程计算含量”一句。
进两个不同浓度的对照品, 将进样量和对应的峰面积取对数后，由两点确定方程，方法是将两组数值代入直线方程：y=Kx+b，即可求出式中的K和b。
再将求出的K和b代入公式：InA=KInC+b ，即可求出对数方程。
公式为：InA=KInC+bA：峰面积K：为公式y=Kx+b中的KC：进样量b：为公式y=Kx+b中的b计算时将样品峰面积（A）代入方程InA=KInC+b，计算出InC后，再取反对数就可以计算出C了．再电子表格计算较为方便．在Excel中进行直线回归，可得出该方程，最后求出带入计算，就OK了！解析外标两点对数方程计算黄芪药材含量方法：照高效液相色谱法，ODS柱，以乙腈-水（32：68）为流动相，流速1ml/min，经蒸发光检测器检测，用外标两点对数方程计算黄芪药材中黄芪甲苷的含量。
黄芪药材中黄芪甲苷含量测定的两种方法的比较研究
一、 引言
在中药材中，黄芪较为常用，其广泛分布于我国，且作为
君药制成的中成药较多，因各地采收加工技术、栽培管理、生
态环境存在一定差异，所以其药材质量参差不齐，这就对用
药疗效造成了直接影响。 在黄芪药材中，黄芪甲苷为有效成
分，其可对药材质量进行评价，而在测定该成分含量时，可采
ｍＬ） 。
（ 五） 考察线性关系
在高效液相色谱仪中注入 ２０μＬ 黄芪甲苷对照品溶液系
列，对色谱图进行记录，以对照品溶液浓度与对应峰面积的
自然对数作图， 然后获得回归线性方程， ｒ ＝ ０． ９９７３，１．４０２１
ＬｎＣ＋７．８６８５ ＝ ＬｎＡ。 结果表明良好线性关系时进样浓度为
２０．５６－４１１．２ μｇ ／ ｍＬ 时间。
取的方法包括高效液相色谱法和薄层扫描法。 采用《 香港中
药材标准》 （ 港标） 和《 中国药典》 两种方法测定黄芪药材中
黄芪甲苷时，其采用的仪器为高效液相－蒸发光散射检测器
（ ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ） ，两种分析方法具有较多相似之处。 因此文
章即分析了黄芪药材中两种方法测定黄芪甲苷含量的效果。
二、 试药与仪器
ＵＰＬＣ－ＥＬＳＤ 含量测定方法的优化［ Ｊ］ ． 中国实验方剂学杂
志，２０１８，２１（５） ：９２－９４．
作者简介：
陈晓勇，汕头市粤东药业有限公司。
（ 四） 测定方法
在高效液相色谱仪中注入 ２０μＬ 黄芪药材供试品溶液，
对色谱图进行记录，并对对照品峰保留时间进行对比，对黄
芪甲苷供试品溶液在色谱图中的峰进行鉴定。 对峰面积进
行测定计算，黄芪甲苷浓度的计算公式为 ａ ＬｎＣ＋ｂ ＝ ＬｎＡ，其