高效液相色谱仪测定黄芪中的黄芪甲苷含量

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高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定仙芪眩宁颗粒中黄芪甲苷含量

高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定仙芪眩宁颗粒中黄芪甲苷含量庞兴寿;牟晓崟【摘要】Objective To establish a method to determine astragaloside in Xianqixuanning Granules. Methods HPLC - ELSD was used to directly determine astragaloside on Phenomenex Gemini C18 ( 250 mm ×4. 6mm,5 μm) column. Using methanol -water (80 ∶ 20) as mobile phase,the flow rate was 1.0 mL/min. The temperature of drift tuhe for ELSD was 45 ℃ and the flow rate of gas was 3.0 L/min. Results Good linear relation oflogA with log W was achieved when the sample size of astragaloside ranged at 25. 52 - 127. 6 μg, r = 0. 999 3. The average recovery of astragaloside was 96. 89％ , RSD was 1. 44％ ( n =6). Conclusion The method is simple, accurate and reproducihle. It can be used as thequality control method of Xianqixuanning Granules.%目的建立仙芪眩宁颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法.方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法,色谱柱为Phenomenex Gemini C18柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇一水(80:20),流速1.0mL/min,柱温30℃,进样量10μL;蒸发光散射检测器漂移管温度为45℃,栽气(空气)流速3.0 L/min.结果黄芪甲苷进样量在25.52～127.6μg 范围内的对数值与峰面积的对数值线性关系良好,r=0.999 3,平均回收率为96.89%,RSD为1.44%(n=6).结论该方法无干扰,准确、重现性良好,可作为产品的质量控制方法.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2011(020)017【总页数】2页(P32-33)【关键词】仙芪眩宁颗粒;高效液相色谱-蒸发光散射检测器法;黄芪甲苷;含量测定【作者】庞兴寿;牟晓崟【作者单位】广西壮族自治区玉林食品药品检验所,广西,玉林,537000;广西壮族自治区玉林食品药品检验所,广西,玉林,537000【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0仙芪眩宁颗粒是由仙鹤草、黄芪、白术、泽泻、生姜5味药材制成的中药复方制剂，具有健脾燥湿、升清降浊、利水除痰的功效，用于痰湿中阻型美尼尔氏病的辅助治疗。

HPLC-ELSD测定舒筋通络颗粒中黄芪甲苷含量

HPLC-ELSD测定舒筋通络颗粒中黄芪甲苷含量陈光辉;赵志强;张久胜;陈进钱;彭新华【摘要】目的:建立舒筋通络颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD),色谱柱为DIONEX C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(38∶ 62),流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,载气流速为2.5 L·min-1,漂移管温度为105℃.结果:黄芪甲苷的线性范围为0.968 8～9.688 μg,平均回收率为98.9％,RSD=1.2％.结论:该方法重现性好、灵敏、准确,可作为舒络通络颗粒的质量控制方法.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2013(015)012【总页数】3页(P1086-1088)【关键词】HPLC-ELSD;舒筋通络颗粒;黄芪甲苷;含量测定【作者】陈光辉;赵志强;张久胜;陈进钱;彭新华【作者单位】神威药业有限公司,河北石家庄051430;神威药业有限公司,河北石家庄051430;神威药业有限公司,河北石家庄051430;神威药业有限公司,河北石家庄051430;神威药业有限公司,河北石家庄051430【正文语种】中文舒筋通络颗粒是由牛膝、骨碎补、川芎、天麻、黄芪、葛根、威灵仙等9味中药组成，具有补肝益肾、活血舒筋功效[1]，是神威药业集团研制的国家二类中药保护品种。

现代药理学研究表明，舒筋通络颗粒组方中的黄芪，主要含皂苷类、黄酮类、多糖类及氨基酸类成分等，黄芪总皂苷(AST)具有免疫调节、护肝作用[2]，其中黄芪甲苷(AST-Ⅳ)为活性指标成分。

现行的舒筋通络颗粒标准[3]要求测定骨碎补的含量，未对其他成分进行定量测定。

为了更好地控制本品质量，保证临床疗效，笔者研究建立并验证了HPLC-ELSD检测黄芪甲苷含量的方法。

1.1 仪器DIONEX Ultimate 3000高效液相色谱系统(Ultimate 3000四元泵，Ultimate 3000自动进样器，变色龙色谱工作站)，Alltech 2000 ES蒸发光散射检测器。

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展

黄芪中黄芪甲苷含量测定研究进展黄芪是我国传统中药材之一，被广泛应用于治疗贫血、疲乏乏力、食欲不振等症状。

其中，黄芪甲苷是黄芪的主要有效成分之一，具有抗菌、抗氧化、免疫调节等多种药理作用。

因此，明确黄芪中黄芪甲苷的含量对于黄芪的质量控制和临床应用具有重要意义。

本文将综述黄芪中黄芪甲苷含量测定的研究进展。

一、黄芪甲苷的生物学活性黄芪甲苷是黄芪中的一种单体化合物，其化学结构为3,6-二葡萄糖基芪苷-7-葡萄糖基芪苷，分子量为782。

研究表明，黄芪甲苷具有多种生物学活性，如抗菌、抗氧化、免疫调节、保护神经细胞等作用。

其中，黄芪甲苷的抗菌作用主要表现在对多种细菌、真菌和病毒的抑制作用。

抗氧化作用表现在黄芪甲苷能够清除自由基，降低氧化损伤。

免疫调节作用表现在黄芪甲苷能够激活巨噬细胞和自然杀伤细胞，增强免疫功能。

保护神经细胞的作用表现在黄芪甲苷能够减轻中枢神经系统的氧化损伤和炎症反应，防止神经细胞的死亡。

二、黄芪甲苷的含量测定方法黄芪甲苷的含量测定是对黄芪质量的评价和控制的重要手段，常用的测定方法包括高效液相色谱法、超高效液相色谱法、荧光法、紫外分光光度法、质谱法等。

1. 高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是目前最为常用的黄芪甲苷含量测定方法之一，该方法具有快速、灵敏、准确的优点。

其中，一般采用C18反相柱为分析柱，流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（25:75，体积比），检测波长为254nm。

该方法能够实现对黄芪甲苷的同时定量，其检测限低至0.82ug/mL。

3. 荧光法荧光法是一种基于黄芪甲苷的分子结构与物理性质的检测方法，该方法具有高灵敏度、高选择性、快速等特点。

该方法采用黄芪甲苷在荧光素（FL）存在下，通过化学反应生成荧光产物，再利用荧光光谱仪检测荧光强度进行测定。

该方法的灵敏度高，能够检测到0.128ug/mL的黄芪甲苷。

4. 紫外分光光度法紫外分光光度法是一种简单、快速、准确的检测方法，该方法基于黄芪甲苷在紫外光下吸收特定波长的原理进行测定。

HPLC法测定黄芪中黄芪甲苷的含量

ＧｕｎＺｏｎｖｒｉｆＣＧａｇｈｕ５００）ａｇｈｕＵｉｅｓｙｏＭ，ｕｎｅｏｍｔｄｆｒｅｒｎｔｎｏｔｇｌｓｅｄｘｔｇｉｗｉＰＣ．ｔｏｓＴｅＨｐｒｌＤＳ８ｂｔｃ：ｊｃｉｏｖｌｐｅｈｔｍｉａｏｆｓａｏｏｉｉＲａｉＡｓａａｓｔＨＬＭｅｄｈｙｅｓｒＯｖｄａｏｏｄｅｉａｒｄＩｎＶｒｌｈｈｉＯ２Ｃ１
关键词：ＨＰＣ；黄芪甲苷；黄芪Ｌｄｉ１．６￣ｉｎ１７７９０９０．０ｏ：０３９．ｓ．２２７．０．０９ｓ６２３３文章编号：１７．７９（０９０１７０６２２７２０）．３０１—２
黄芪甲苷的进样量在２２１．范围内．～３２
ｃｌｍｎｗｓｓｄＴｅｍｏｉｈｓａｘｕｅｏｅｏｉｉ．ｔｒ２８．ｅｅｃｏｖｌｎｔａ０ｍｎｅｏｕｎｔｅａｒｓｏｕａｅ．ｂｌｐａｅｗｓｍｔｒｆｃｔｎｔｌｗａ（：）ｔｔｎｗａｅｇｗｓ３ｕｈｅａｉａｒｅａ３６Ｔｄｅｉｈｅｈ２ｎａｄｔｌｍｍｐｒｔｅｗａｈＣｅｕｒｏｅｐｒｔｒ．ｅｕｓＴｅｐｅｉｏｄｓｂｌｙｗｒｎ．ｅｌｅｒｒｎｅｏａｉｒｔｎｃｒｅｗａ－～１．ｔ（０９９）ｆｒＲｄｘｏｍｔｍｅａｕｅｓｌｈｒｃｓｎａｔｉｔｅｅｆｅＲｔｉｎａｉｉＴｉａａｇｆｃｂａｏｕｖｓ２ｈｎｌｉ２３￣ｒ．９ｏａ２ｇ＝９－ｉ

黄芪甲苷检测

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黄芪甲苷检测
黄芪甲苷即黄芪皂苷IV（astragaloside IV），是黄芪中的一种皂苷类代表性成分。

具有强心、增强免疫功能等多种药理作用。

黄芪甲苷也被用作评价黄芪药材质量优劣的标准。

迪信泰检测平台采用高效液相色谱（HPLC）和液质联用（LC-MS）技术，可高效、
精准的检测黄芪甲苷的含量变化。

此外，迪信泰检测平台还提供其他多种中药成分检测服务，方法成熟，可高效处理大批量样本。

HPLC和LC-MS测定黄芪甲苷样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

2. 相关质谱参数（中英文）。

3. 质谱图片。

4. 原始数据。

5. 黄芪甲苷含量信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定童康片中黄芪甲苷的含量

汪德清，丁保国，马艳青，黄芪总黄酮对扑热息痛所致小鼠肝损等．伤防护作用的研究［］中国中药杂志，０１２（）４３Ｊ．２０，７：．６８苏励，陈湘君，胡建东，不同剂量黄芪及黄芪加丹参对大鼠蛋等．白尿作用的比较［］中国新药与临床杂志，０，（）２５Ｊ．２０１３：０．０９魏敏，江雪华．正交设计法优选黄芪提取工艺研究［］基层中药Ｊ．
摘要：目的建立童康片中黄芪甲苷的含量测定方法。方法采用ＨＬ —ＩＤ法测定童康片中黄芪甲苷的含量；ＰＣＥＳ色谱柱
为Ｋｏｓｌ２０ｍｍ× ．ｍ，Ｉ，ｒｍａｉＣＲ５ｌ（４６ｍ５ｍ）流动相：水一ｘ乙腈（４６，３：６）流速：．ｌ・ｉ～，ＩＤ参数：０８ｍｍｎＥＳ漂移管温度：
００ＡＡｐ＜ＯＯ．５．．ｌ
３讨论
黄芪采用水提取法，效成分（芪甲苷）其有黄提取率能达到［４］９％以上，０较醇提法能大大降低成本，且黄芪中尚含有多糖等水溶性有效成分，采用水提取法更能保证提取质量。［］５吲哚美辛是最强的ＰＧ合成酶抑制剂之一，可抑制内源性６ＰＧ的合成，导致其机体抗氧化能力下降，自由基增多，胃黏膜的［］抵御能力降低，诱发急性胃溃疡。幽门结扎手术是一种简单而有
杂志，００，３６：４２０２（）１．
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效液相色谱一蒸发光散射检测法测定童康片中黄芪甲苷的含量

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定消渴丸中黄芪甲苷的含量

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定消渴丸中黄芪甲苷的含量李培【摘要】目的：建立消渴丸中黄芪甲苷的含量测定方法。

方法用高效液相色谱法，以蒸发光散射检测器测定黄芪甲苷的含量。

色谱柱为 Thermo - C18（4.6 mm×250 mm，5μm），流动相为乙腈-水（32：68），流速为：1.0 mL·min -1；ELSD 参数气体流速为1.60 mL·min -1，漂移管温度为80℃；进样量为20μL。

结果黄芪甲苷进样量在1.016~4.064μg 范围内呈现良好的线性关系，r =0.9998（n =5）；平均回收率为97.03%，RSD =1.8%（n =9）。

结论所建立的含量测定方法操作简便、快速、准确、重现性好，可作为消渴丸的质量控制。

%Objective To establish a method for the determination of astragaloside in Xiaoke Pills. Methods The HPLC - ELSD was conducted on a Thermo - C18 column(4. 6 mm × 250 mm,5 μm)with acet onitrile -water(32:68)as mobile phase,the flow rate was 1. 0 mL·min - 1 . The gas flow rate of ELSD parameter was 1. 60 mL·min - 1 . The drift tube temperature was 80 ℃,the injection volume was 20 μL. Results The linear range of astragaloside was 1. 016 ~ 4. 064μg,r = 0. 999 8(n = 5),the recovery rate was 97. 03% ,RSD = 1. 8%(n = 9). Conclusion The established HPLC - ELSD was simple,rapid,accurate,reproducible,and can be used for the quality control of Xiaoke Pills.【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】3页(P267-268,271)【关键词】高效液相色谱-蒸发光散射检测法;消渴丸;黄芪甲苷【作者】李培【作者单位】聊城市药品检验所，山东聊城 252000【正文语种】中文【中图分类】R927.2消渴丸是由葛根、黄芪、地黄、天花粉等八味药组成，滋肾养阴，益气生津。

含黄芪制剂中黄芪甲苷的含量测定

含黄芪制剂中黄芪甲苷的含量测定作者：沈小玲来源：《科技创新导报》 2015年第2期沈小玲（广东省轻工业高级技工学校广东广州 510000）摘要：该文旨在建立某黄芪制剂中黄芪甲苷的高效液相色谱法测定含量。

所采用方法：采用蒸发光散射检测器（ELSD）以黄芪甲苷为对照品对黄芪中黄芪甲苷进行HPLC-分析，色谱柱为C18柱，甲醇－水（75∶25）为流动相，流速1.0 mL/min，柱温40 ℃；漂移管温度83.8 ℃，载气（空气）流速2.0 L/min。

结果：所建立的含量测定方法结果准确，便捷，专属性强，无干扰，可用于控制该制剂的质量。

关键词：黄芪甲苷 HPLC-ELSD 含量测定含黄芪制剂中图分类号：R284文献标识码：A 文章编号：1674-098X（2015）01（b）-0036-02中药黄芪含有黄芪甲苷、黄芪多糖等多种成份，其中黄芪甲苷为主要活性成分，具有降压、保护心肌、减轻心肌缺血和增强免疫力等作用［1-2］。

该研究建立某黄芪制剂（六类新药，研发中。

主要含黄芪、砂仁等）中黄芪甲苷的含量测定方法，为该制剂的质量控制提供方案。

1 仪器、试药与样品1.1 仪器Agilent1100高效液相色谱议；Alltech2000蒸发光散射检测器； AB250D十万分之一电子天平。

1.2 试药黄芪甲苷标准品（中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯和分析纯；其余所用试剂均为分析纯；黄芪等药材购自广州致信药业有限公司。

1.3 样品的制备按制剂处方称取黄芪30 g和其他药材。

将除黄芪外的其他药材置圆底烧瓶中，加12倍量水，接挥发油提取器，提取1 h，所得挥发油弃去，水提液过滤，保留待用；药渣加入黄芪，加8倍量水，加热回流提取1 h，所得水提液过滤，保留待用；再加6倍量水，加热回流提取0.5 h，水提液过滤，与前两次水提液合并，浓缩至每毫升药液中含药材1 g，搅拌加入95%的乙醇至含醇量为60%，放置过夜，抽滤取滤液，即样品液。

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关键词：中药饮片黄芪黄芪甲苷 E800型蒸发光散射检测器高效液相色谱黄芪甲苷是一种从黄芪上提取出来的高纯度药物，有“超级黄芪多糖”之称。

黄芪甲苷能增强
机体免疫力、提高机体的抗病能力。

黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。

黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。

其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄芪甲苷。

黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用，还有些是黄芪多糖无法比拟的作用，其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多，抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。

由于含量少，效果好，更是有“超级黄芪多糖”之称。

图1 黄芪甲苷结构式
2检测部分
2.1仪器
本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。

具体配置为H6000系列的两台输液泵、一台E800蒸发光散射检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器；sainaer色谱工作站。

2.2 分析条件
色谱柱：岛津WondaSil C18 Superb 5um
流动相：乙腈：水=32:68（V/V）
流速：1ml/min
柱温：35℃
气体流量：2.8L/min
蒸发温度：75℃
进样量：10μL
等度洗脱
2.3 标准品溶液的配制和样品处理
标准品品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。

样品溶液的制备取干燥的黄芪切片，粉碎后，取中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即制得黄芪样品溶液。

3结果
3.1 标样的色谱图
图2 0.5mg/ml标准品色谱图
3.2 线性关系
将配制浓度为0.5mg/ml的标准溶液，分别精密吸取对照品溶液2.5μL、5μL、10μL、15μL、20μL，供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，测定，以峰面积对数为横坐标，已进样量对数为纵坐标绘制工作曲线，所得曲线良好，R达到0.999以上。

标准品的浓度及峰
面积的结果见表1。

图3 黄芪甲苷的标准曲线表1 黄芪甲苷进样量及峰面积
3.3 精密度试验
50mg/ml的苦杏仁苷标准品连续测定6次，考察方法的精密度，保留时间和峰面积的RSD%结果
如表2所示：
序号保留峰面积
1 11.591 142152
2 11.542 145212
3 11.458 144879
4 11.523 148721
5 11.542 148524
6 11.554 144258
平均11.535 145624
RSD% 0.381 1.750
表2 黄芪甲苷重复性数据（n=6）
3.4 样品测试
使用2.3配制好的黄芪甲苷样品溶液得出图4图谱：
图4 黄芪样品图谱
表3 黄芪中黄芪甲苷测定结果
4结论
经方法有效性测试，本方法的工作曲线好R=0.999以上。

数据重现性好，保留时间RSD%=0.38%（n=6），小于国家要求0.5%以内，峰面积RSD%=1.75%（n=6），小于国家要求2.0%以内。

并且峰形完好，拖尾因子为1.02。

说明此方法适用于检测黄芪中黄芪甲苷的含量。

5客户现场照片。