酵母菌计数实验
酵母菌大小的测定及计数实验流程
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实验九酵母菌的计数
contents
目录
• 实验简介 • 实验材料 • 实验操作 • 结果分析 • 结论与总结
01 实验简介
实验目的
掌握酵母菌的计数方 法。
探究酵母菌在发酵过 程中的作用。
了解酵母菌在不同环 境下的生长情况。
实验原理
酵母菌是一种单细胞真菌，具 有细胞壁、细胞膜、细胞质和 细胞核等结构。
未来改进方向
优化实验操作
为了提高计数的准确性和可靠性，我们可以在实验过程中采用更加先进的显微技 术和设备，如自动计数仪等。
扩大样本量
为了使实验结果更具有代表性，我们可以增加样本数量和实验重复次数，以提高 数据的稳定性和可靠性。
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感谢您的观看
结果讨论
根据实验结果，我们可以讨论酵母菌在不同环境中的生长特点、影响因
素以及在实际应用中的意义。同时，我们还可以提出改进实验的方法和
措施，以提高实验的准确性和可靠性。
05 结论与总结
实验结论
酵母菌数量计算
通过实验，我们成功地计算出了样品 中酵母菌的数量。通过对比标准曲线 ，我们得出了较为准确的计数结果。
数据记录与处理
数据记录
详细记录每个视野或平板上的酵母菌数量，确保数据准确无 误。
数据处理
根据实验要求，对数据进行统计、分析和图表绘制，得出结 论。
04 结果分析
数据解读
酵母菌数量
通过实验计数，我们得到了不同样品中酵母菌的数量。这些数据可以帮助我们了解酵母 菌在样品中的分布和密度。
误差分析
在实验过程中，由于操作、仪器误差等因素，可能会导致计数结果存在一定的误差。Байду номын сангаас 们需要对误差进行分析，以评估实验的准确性和可靠性。
微生物学实验5 酵母菌细胞总数和大小的测定
2022/9/12
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三．实验原理
➢ 利用血球计数板进行微生物计数的原理？ 总菌数（个/ml）＝5×104 A·B A：5个中方格中的总菌数，B：稀释倍数（＝1） ；
➢ 利用接目测微尺测定微生物大小的原理？
接目测微尺每格长度（mm）=10n/m n：两重合线间镜台测微尺格数 m：两重合线间接目测微尺格数
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四．实验内容
1. 利用血球计数板对所给酵母培养液进行计数：上下两 个计数室各计数一次
2. 微生物大小测定 ➢ 40 ×10放大系统下对接目测微尺进行标定； ➢ 在同样放大系统下测定所给酵母细胞大小：要求测定
10个细胞长和宽
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五. 实验结果报告与思考题
1. 计数：将2个计数室结果分别填入P14的表中，并按公式 计算菌体细胞浓度：
2. 大小测定
➢ 接目测微尺标定结果：高倍镜下两重合线间镜台测微
尺 格、目镜测微尺
格；
目镜测微尺每小格实际长度为
μm。
➢ 10个细胞测定结果填入 P17的表中，计算酵母细胞大小 的范围及平均值（宽×长）
3. 思考题：讲义P14 2，3； P17 3
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实验五 酵母菌细胞总数和大小的数板进行微生物计数的方法。 2. 学习并掌握接目测微尺的标定方法及微生物大小的测
定方法，增强微生物细胞大小的感性认识。
二．实验材料
1. 菌种：啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌悬液 2. 其他：血球计数板，接目测微尺，镜台测微尺，显微
酵母菌大小测定及显微镜直接计数[指南]
![酵母菌大小测定及显微镜直接计数[指南]](https://img.taocdn.com/s3/m/455b9f37ae45b307e87101f69e3143323968f51b.png)
实验一：酵母菌大小测定一、实验器材1、菌种：酵母菌液体培养物2、仪器和其他物品目镜测微尺，镜台测微尺，普通光学显微镜，擦镜纸，载玻片，滴管等。
二、实验目的及要求1、学习并掌握使用显微测微尺测定微生物大小的方法。
2、掌握对不同形态细菌大小测定的分类学基本要求，增强对微生物细胞大小的感性认识。
三、基本原理微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
微生物大小测定需借助测微尺---目镜测微尺和镜台测微尺，两者配合使用。
镜台测微尺是一个在特制载玻片中央封固的标准刻尺，其尺度总长为1mm，精确分为10个大格，每个大格又分为10个小格，共100个小格，每个小格10μm。
镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小，而是用于校正目镜测微尺每格地相对长度。
目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，一般有等分为50小格和100小格两种。
测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物像。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞实际大小。
四、操作步骤1、装目镜测微尺(换目镜)把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝上放在目镜镜筒内的格板上，然后旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。
※双目显微镜的左目镜通常配有屈光度调节环，不能被取下，因此使用双目显微镜时目镜测微尺一般都安装在右目镜中。
2、校正目镜测微尺（1）放镜台测微尺将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。
（2）校正先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。
探究培养液中酵母菌数量的动态变化
探究培养液中酵母菌数量的动态变 化 问题探究：
1、如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎 样的措施？ 摇匀试管取1ml酵母菌培养液稀释几倍后，再用血球计数 板计数，所得数值乘以“n×2.5×104”，即为1ml酵母菌 原液中酵母菌个数。
2、本探究需要设置对照吗？如果需要，请讨论说明怎样设 计；如不需要，请说明理由。
计算公式
• 16格×25格的血球计数板计算公式： 酵母细胞数/ml=小格内酵母细胞个数 /100×400×104×稀释倍数
• 25格x16格的血球计数板计算公式： 酵母细胞数/ml=小格内酵母细胞个数 /80×400×104×稀释倍数
探究培养液中酵母菌数量的动态变 化 方案设计：
一、提出问题 培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？也可以 提出其他的探究问题，例如，在不同温度（以及通氧、通CO2 等）条件下酵母菌种群数量增长的情况如何？不同培养液（如 加糖和不加糖）中酵母菌种群数量增长的情况如何？等等。 二、猜想假设 酵母菌种群的数量随时间呈S型增长变化。 三、设计实验 ①全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组。②分别用等量 培养液，在相同适宜环境中培养等量酵母菌。③每天用血球计 数板，采用抽样检测的方法计数一个小方格内的酵母菌数量并 作记录，连续7天。④7天后，各组向全班汇报本小组7天的数 据，算出每一天数据的全班平均值，根据平均值画出酵母菌种 群数量的增长曲长。
(3)将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上 加盖专用的厚玻片。 (4)将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖 玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水 纸吸取，捎待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数 室内。 (5)计数时，如果使用16格×25格规格的计数室，要 按对角线位，取左上、右上、左下、右下4个中格 （即100个小格）的酵母菌数。如果规格为25格 ×16格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需 再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。
酵母菌的计数
* *
16个中格
探究培养液中酵母菌种群数量
♣ 酵母菌的计数 （2）计算： 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？ 所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数 酵母细胞个数/mL= 所数的小方格数
的动态变化
例1 :在用血球计数板（2mm×2mm方格）对某一稀释 50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片 下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此 估算10mL培养液中有酵母菌 2x107 个。
探究培养液中酵母菌种群数量
的动态变化
♣ 酵母菌的计数 （6）讨论：计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？
酵母菌培养： ♠培养液配制 ♠灭菌 ♠接种
配制质量分数为5％的葡萄糖溶液（葡 萄糖20g，1000 mL水），分装到5个 烧杯中（200mL/烧杯） 用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计 数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。 接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的 1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌 母液，往每个烧杯中加入。（注意：滴 加量不要太多，避免初始菌数过多。） 将烧杯置于28℃的恒温箱中培养
的动态变化
探究培养液中酵母菌种群数量
的动态变化
♣ 酵母菌的计数 （4）血球计数板的清洗：
• 使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗， 切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。 镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。 若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。
探究培养液中酵母菌种群数量
例2:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球 计数板每个大方格容积为0.1mm3 ，由400个小 方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个 小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 稀释 后 再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格 中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母 菌总数有 2×108 个。
实验九酵母菌的计数
实验九酵母菌的计数一、实验目的1. 了解酵母菌计数的方法和步骤。
2. 练习从样品中筛选出有效的酵母。
3. 熟练掌握血球计数板的使用方法和计算准确菌落数的技巧。
二、实验原理酵母比细菌大，通常直径在3-5um左右。
因此，酵母计数需要使用高倍显微镜和血球计数板。
血球计数板具有网格状的结构，格子大小为1mm x 1mm，每个格子被分成16个小方格，靠着板子底部的深度为0.1mm。
在这样的板子上，可以计算出每个小方格中的数量，进而计算出酵母菌落数。
三、实验步骤1. 酵母菌培养液制备取一小瓶酵母菌液（1ml/瓶）和50ml的培养基置于培养瓶中，摇晃好进行稀释。
2. 稀释酵母菌液使用吸管和15ml的试管来进行酵母菌液的稀释。
取出大约0.5ml的酵母菌液放入试管中，使用吸管加入5ml的无菌蒸馏水，进行混合。
将10倍的稀释液取出0.5ml，进行第二次稀释。
3. 取样取出10ul的酵母稀释液，加入到血球计数板的中心宫格中。
重复三次。
4. 计数使用高倍显微镜（400×）观察血球计数板，并手动计算每个格子中的酵母菌数量。
计算方法：（每个小方格中酵母菌总数÷ 16） x 10^45. 数据分析计算出平均酵母菌浓度，将结果用来评估样品中酵母菌的含量。
四、实验注意事项1. 所有实验用品都需要在自然环境下进行消毒，并最好使用自动消毒器。
2. 使用高倍显微镜时，需要避免透过培养液的气泡和混沌，以获得清晰的图像。
3. 在计算酵母菌浓度时，需要始终保持准确的记录，并进行计算。
出现微小误差可能会有较大的影响。
4. 进行实验时需要着实考虑消除外因因素。
五、实验数据处理与分析在实验中，首先需要从样品中筛选出有效的酵母，并进行稀释。
稀释后的酵母菌液，需要使用吸管加入到试管中，并定期混合。
取10ul的酵母稀释液，加入到血球计数板的中心宫格中（使用不同液体的试管不同），所得数据如下表：| 每个小方格中的酵母菌数量 ||----------|--------------|| 1 | 9 || 2 | 12 || 3 | 15 || 4 | 13 || 5 | 11 || 6 | 16 || 7 | 12 || 8 | 14 || 9 | 10 || 10 | 12 || 11 | 10 || 12 | 11 || 13 | 9 || 14 | 8 || 15 | 16 || 16 | 18 ||----------|--------------|平均酵母菌浓度：（每个小方格中酵母菌总数÷ 16）X10^4 = (154÷16) X 10^4 = 9.63 X 10^4/ml。
实验：应用血细胞计数板对酵母菌进行计数
数据整理
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数据校验
我们将实验数据整理成表格，方 便后续分析。
在数据整理过程中，我们进行了 数据校验，确保数据的准确性和 可靠性。
数据处理与图表绘制
数据处理
我们对实验数据进行处理，包括数据 清洗、数据转换和数据变换等。
图表绘制
根据处理后的数据，我们绘制了图表， 包括柱状图、折线图和饼图等，以便 更好地展示数据和发现数据之间的关 系。
实验应用血细胞计数 板对酵母菌进行计数
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验结论 • 参考文献
01
实验目的
掌握血细胞计数板的使用方法
了解血细胞计数板的构造和原理
血细胞计数板是一种用于细胞计数的工具，由一块载玻片和一块盖玻片组成， 上面刻有方格，用于放置细胞悬液。通过显微镜观察，可以对细胞进行计数。
03
实验步骤
准备实验材料
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04
血细胞计数板：用于计数酵母 菌的数量。
显微镜：用于观察和计数酵母 菌。
试管、吸管、培养皿等：用于 制备酵母菌悬液。
无菌水、营养琼脂培养基等： 用于培养和制备酵母菌。
制备酵母菌悬液
将营养琼脂培养基倒入培养皿 中，待其冷却凝固。
用接种环取少量酵母菌，轻 轻划线在培养基上，放置在
学习正确使用血细胞计数板的方法
在实验过程中，需要掌握如何制备细胞悬液、如何将细胞悬液滴加到计数室、 如何进行显微镜观察等操作步骤。
学习酵母菌的计数方法
了解酵母菌的形态特征
酵母菌是一种单细胞真菌，具有椭圆 或球形的细胞形态，通过出芽方式进 行无性繁殖。
学习酵母菌的计数方法
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(1)在实验中，某同学的部分实验操作过程是这样的： ①从静置试管中吸取酵母菌培养液加入计数板进行计数， 记录数据；②把酵母菌培养液放置在冰箱中；③第七天 再取样计数，记录数据，统计分析绘成曲线。请纠正同 学实验操作中的3处错误： ① __________________________________________ ； ② __________________________________________ ； ③ ____________________________________管 等 器 具 进 行 __________处理。 (3)如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应采 取的措施是________。 (4) 如果观察到上图所示 a 、 b 、 c 、 d 、 e 5 个大格共 80 个小格内共有酵母菌 48个，则上述1 mL酵母菌样品 加99 mL无菌水稀释后有酵母菌________个；要获得较 为准确的数值，减少误差，你认为该怎么做？ ____________________________。
3.在探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验 中，需利用显微计数板对微生物细胞进行直接计 数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻 片，样品就滴在计数室内。计数室由25×16＝400 个小格组成，容纳液体总体积为0.1 mm3。某同学 操作时将1 mL酵母菌样品加99 mL无菌水稀释， 用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，盖上 盖玻片并用滤纸吸去多余菌液，进行观察计数。