生产用培养基制备岗位标准操作规程
培养基配制、适用性检查标准操作程序
目的：制定培养基配制、培养基适用性检查的标准操作程序。
范围：适用于微生物实验室培养基的配制和适用性检查。
责任者：微生物检验员所用器具、仪器、材料、菌种器具、仪器：高压蒸汽灭菌锅、高温灭菌柜、隔水恒温培养箱、生化培养箱、双人净化操作台、单人净化操作台、干燥箱、恒温水浴锅、电子天平、500ml三角瓶、移液管、培养皿、试管、接种环、酒精灯材料：标准干燥培养基（购于生物研究所）、待验证培养基菌种：大肠杆菌CMCC（B）44102、金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003、枯草芽孢杆菌CMCC （B）63501、白色念球菌CMCC （F）10231沙门氏菌CMCC （B）500941. 培养基的配制1.1 准备工作1.1.1 选择适宜容量的容器配制试剂，配制培养基的容器应为玻璃容器，以避免接触金属离子，如吸管、试管、三角瓶和平皿等，应按《玻璃容器清洗规程》洗涤、干燥、灭菌。
1.1.2 配制用水培养基配制用水应为纯化水，纯化水应临用新配。
1.2 配制1.2.1 记录所用脱水培养基的品名、批号、生产日期、生产厂家及配制处方。
1.2.2 用分度值为0.01的电子天平准确按处方量进行称量并装入三角瓶内。
1.2.3 用量筒按照培养基处方配比加入纯化水。
1.2.4 用硅胶橡皮塞塞上瓶口，轻轻振摇使充分混匀。
1.2.5 培养基在配置后必须进行PH值的测定，以确保符合药典要求和生产厂家的规定，一般情况下，PH值不能超过规制值±0.2。
1.2.6 用牛皮纸包扎瓶口，贴上标签，注明品名、批号、配置日期、配置人、有效期。
1.3 灭菌将上述已配制的培养基放入高压蒸汽灭菌锅按培养基灭菌条件进行灭菌（每次配制的培养基应在2小时内进行有效灭菌，否则极易染菌。
若未能在2小时内进行有效灭菌，则倒掉重新配制）。
若没有具体要求，一般灭菌温度（压力）为121℃（0.1MPa），灭菌时间为20分钟。
灭菌完成后，待高压灭菌锅温度、压强自然下降为“0”值，方可取出灭菌好的培养基（不可未降温时拿出，否则培养基内外会形成负压，易染菌）。
培养基制备的流程
培养基制备的流程
培养基制备的流程主要包括以下几个步骤：
1.计算配方：根据所需培养基的种类和实验需求，计算各成分的比例和用量。
2.称量：准确称取各种成分，如蛋白胨、牛肉膏、琼脂等。
3.溶解：将称取的成分放入适量的水中，搅拌均匀，使其充分溶解。
对于一些
不易溶解的物质，如琼脂，可能需要加热辅助溶解。
4.调pH：根据微生物的生长需求，调整培养基的pH值。
一般而言，细菌培养
基的pH值范围在6.5-7.5，真菌培养基的pH值范围在4.8-5.8。
5.过滤：将溶解好的培养基通过过滤器过滤，以去除可能存在的杂质。
6.分装：将过滤后的培养基倒入无菌的培养皿或瓶子中，注意留出适当的空隙，
以利于蒸汽的排出。
7.灭菌：将分装好的培养基进行灭菌处理，常用的方法有高压蒸汽灭菌和干热
灭菌。
灭菌过程中要注意保持培养基内部的温度和压力，确保微生物被有效杀灭。
8.检验：对制备好的培养基进行质量检验，如观察培养基的外观、透明度、pH
值等，确保符合实验要求。
9.储存：将检验合格的培养基在适当的条件下储存，如4℃冰箱或阴凉干燥处。
在使用前，如需再次检验，可进行细菌或真菌的接种试验。
需要注意的是，在培养基制备过程中要严格遵循无菌操作规程，避免微生物污染。
同时，根据实验需求选择合适的培养基类型和配方，以满足不同微生物的生长需求。
制备培养基的基本操作归纳整理
一、玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。
这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。
有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。
1、新购的玻璃器皿除去包装沾染的污垢后，先用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于１～２％的工业盐酸中数小时，使游离的碱性物质除去，再以流水冲净。
对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。
2、用过的玻璃器皿凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。
有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。
若用皂液未能洗净的器皿，可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。
洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸，其作用是将有机物氧化成可溶性物质，以便冲洗。
洗液有很强的腐蚀作用，使用时应特别小心，避免溅到衣服、身体和其他物品上。
二、培养基的类型在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的任何营养基质，都叫做培养基(Media)。
由于各类微生物对营养的要求不同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的种类很多。
我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基划分为若干类型。
1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分，可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
a.天然培养基天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料，其成分难以确切知道。
用作这种培养基的主要原料有：牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。
用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分，但一般来讲，营养是比较丰富的，微生物生长旺盛，而且来源广泛，配制方便，所以较为常用，尤其适合于配制实验室常用的培养基。
菌检培养基配制、使用和检验标准操作规程
目的：建立菌检培养基配制、使用和检验的方法，以保证检验结果客观准确。
应用范围：适用于微生物检查、生物测定检查用培养基的配制及使用。
责任人：菌检检验员、QA、质量部经理。
内容：1 概述培养基是人工配制的生物营养物质，目前，多数微生物应使用商品化的干粉培养基，这些培养基性能一般比较稳定，只需按照产品说明书的规定贮存条件，配制，在有效期内使用即可获得满意的效果，而自制培养基则应进行较严格的质量控制。
2 培养基的制备通则2.1 常用玻璃仪器的制备2.1.1 概述制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净，晾干后备用。
2.1.2 细则2.1.2.1 平皿用纸或布包好，或装在金属盒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。
2.1.2.2 试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好，用布或报纸包好，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。
2.1.2.3 吸管与滴管先用少许棉花塞于吸口端（防止污染物吸出或橡皮帽内的气体污染）然后用纸包好或装入金属吸管筒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。
其他玻璃器皿均可按上法进行处理，也可装金属筒内于160～180℃干热灭菌2h后，备用。
2.2.培养基的制备及储存2.2.1 配制2.2.1.1配制干粉培养基时，先将蒸馏水按足量加入容器中，然后称取一定量培养基干粉放入水中，静置10～15 min，搅拌，振荡，或延长时间以促进溶解，一般不要加热，必要时加热，但时间不宜过长，温度不宜过高，避免某些营养成分被破坏。
2.2.1.2 溶化一般应放在玻璃器皿或搪瓷器内。
加入蒸馏水，隔水加热以促其溶解，加热时应经常搅拌，防止焦化，待其溶解后加足水分。
2.2.2 校正酸碱度2.2.2.1 培养基必须有适当的pH。
测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一，干粉培养基一般已校正过pH，用时也必须再验证。
2.2.2.2 pH测定时，一般用指示剂滴入培养基中观察，其颜色的变化，或用pH计校正，测定标准温度应为（25±2℃），如与所需pH不符，可用酸或碱液加以校正。
培养基配制标准操作规程
范围：培养基职责：检验室对本规程的实施负责正文：1.培养基的制备1.1需气菌、厌气菌培养基（硫乙醇酸盐液体培养基）酪胨（胰酶水解） 15g 氯化钠 2.5g葡萄糖 5g 新鲜配制的0.1%刃天青溶液 1.0mlL—胱氨酸 0.5g (或新鲜配制的0.2%亚甲蓝溶液 0.5ml)硫乙醇酸钠 0.5g 琼脂 0.5～0.7g(或硫乙醇酸 0.3ml) 水 1000ml酵母浸出粉 5g——除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分加入水内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，按量加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH值使灭菌后为7.1±0.2，分装，115℃灭菌30分钟。
——在无菌检查接种前，培养基指示剂氧化层的颜色不得超过培养基深度约1/5。
否则，须经水浴煮沸加热，只限加热一次。
1.2霉菌培养基胨 5g 磷酸氢二钾（K2HPO4） 1g酵母浸出粉 2g 硫酸镁（MgSO4·7H2O） 0.5g葡萄糖 20g 蒸馏水 1000ml——除葡萄糖外，取上述成分加入水内，微温溶解后，调节pH值约为6.8,煮沸，加葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节pH值使灭菌后为6.4±0.2，分装，115℃灭菌20分钟。
1.3选择性培养基1.3.1对氨基苯甲酸培养基(用于磺胺类药物的无菌检查) 照上述需气菌、厌气菌培养基及霉菌培养基的处方制法，各加对氨基苯甲酸0.125g，溶解后摇匀，分装，115o C灭菌30分钟。
1.3.2吐温培养基（用于油剂药品的无菌检查）照上述需气菌、厌气菌培养基及霉菌培养基的处方及制法，各加10ml的吐温80，摇匀后，分装，115℃灭菌30分钟。
1.4营养肉汤培养基1.4.2处方胨 10g 肉浸液 1000ml氯化钠 5g——取胨与氯化钠，加入肉浸液内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，分装，115℃灭菌30分钟。
1.4.2肉浸液制备法——取新鲜牛肉，除去肌腱及脂肪，切细，绞碎后，每1000g加水3000ml,充分拌匀，在2～10℃浸泡20～24小时，煮沸1小时，滤过，压干肉渣，补足液量，分装，121℃灭菌30分钟,置冷暗处备用。
培养基配制及适用性检查标准操作规程【范本模板】
目的：建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程，规范实验人员的操作流程.范围：适用于微生物检验人员对培养基的规范管理.依据:《药品生产质量管理规范(2010年修订)》、《中华人民共和国药典》2015年版第四部职责：1.微生物检验员：负责实验室所需求的培养基管理工作,使日常检验可以顺利进行.2。
微生物检验主管：负责对日常配制培养基的规范操作进行监督.内容1 培养基的申购根据检验项目、工作量和工作进度的需求，提前一个月进行所需的培养基申购。
申购时需指定培养基供应商,必要时进行供应商审计。
2 培养基的验收2.1 培养基到货后，微生物室检验员应进行验收。
验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商，应与申购单一致；检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。
2.2 验收合格后，登记于《培养基领用台账》（附记录文件编号：SMP—10—QC—009—02（00））。
3 培养基的贮藏3。
1未开封的脱水培养基贮存于阴凉室,使培养基处于低温、干燥、和避光条件下。
已开封的脱水培养基应盖紧，贮存于阴凉库.3.2灭菌好的培养基应进行预培养72h检查无菌后，置4～8℃冷藏保存待用。
灭菌后培养基储存期为7天。
4 培养基的配制4。
1培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》（附记录文件编号：SMP-10—QC-009-02（00)）.4。
2培养基配制批号原则：原材料批号—配制日期:比如2011年1月1日配制的培养基，培养基干粉批号000000,配制批号为：000000—110101。
配制好的培养基贴《培养基标签》（附记录文件编号：R-SMP—10—QC-009-03).（注:同一天同一培养基配置多次的,在原批号后加“-”加“数字”表示，如000000—110101-01）4。
3培养基配制方法4。
3。
1 使用商品化脱水合成培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配制，如重量/体积、pH、灭菌条件和操作步骤等。
实验室使用各种基础成分制备培养基时，应按照配方准确配制，并记录相关信息如：培养基名称和类型及试剂级别，每个成分物质含量、制造商、批号，pH值，培养基体积/分装体积，灭菌条件（灭菌方式、温度及时间)，配制日期、人员等，以便溯源.4.3.2 水、容器具要求：培养基配制均采用纯化水，特殊说明时采用去离子水和蒸馏水。
培养基的制备和灭菌操作规程
1目的
1.1掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
1.2掌握培养基的配制方法。
1.3掌握压力蒸汽灭菌器的操作方法。
2范围
规程适用于我司产品、环境的微生物检测。
3职责
质量部实验室负责依据本规范实施操作。
4程序内容
4.1实验材料
4.1.1培养基：营养琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体
培养基
4.1.2仪器及玻璃器皿：电子天平、压力蒸汽灭菌器、试管、量筒、锥形瓶、培养皿、镊子
4.1.3其他物品：药匙、75%酒精棉、棉线、牛皮纸（或报纸）、记号笔、酒精灯
4.2操作步骤
4.2.1玻璃器皿的洗涤
玻璃器皿在使用前必须洗刷干净，将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中，用毛刷刷洗，然后用自来水及纯化水冲净。
4.2.2灭菌前培养皿的包扎
培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
4.2.3培养基的配制过程
（a）称量：一般可用精度不低于0.01g的电子天平称量，先按培养基配方计算出用量•然后进行准确称量。
（b）溶解：将称好的培养基置于锥形瓶中，用量筒加入量好的蒸馏水，用玻璃棒轻轻搅动加热。
培养基使用操作规程
培养基使用操作规程培养基使用操作规程一、实验目的培养基是进行细菌、真菌、细胞等生物体的培养和研究的重要工具，合理、正确地使用培养基是保证实验结果准确可靠的基础。
本操作规程的目的是规范培养基的使用，提高实验操作的效率和质量。
二、实验准备1. 准备所需的培养基和辅助设备，包括培养皿、试管、平板、移液器、蒸汽灭菌器等。
2. 检查培养基的颜色、透明度和保存情况，如有异常，应及时更换。
3. 检查辅助设备的清洁及消毒状态，确保无杂质和污染。
4. 执行无菌操作，包括洗手消毒、穿戴无菌手套等。
三、实验操作步骤1. 取出所需的培养基，检查其批号和有效期，如过期或批号异常，应立即更换。
2. 打开培养基瓶盖，注意不要将瓶盖放在工作台上，以防培养基被污染。
3. 使用移液器或注射器等无菌工具，将培养基均匀地移液到培养皿、试管或平板中，避免气泡的产生。
4. 关闭培养基瓶盖，以免污染其他培养基。
5. 将已加入培养基的培养皿、试管或平板进行标记，包括标注样品信息、培养基类型和培养日期等。
6. 将标记好的培养皿、试管或平板进行分类放置，如需高温、低温或其他特殊条件下培养，应放置在相应的设备中。
7. 操作完成后，清洁工作台，将未使用的培养基存放在适当的条件下，防止曝光、高温或低温等因素影响其质量。
四、实验安全措施1. 操作时要穿戴好无菌手套，以免细菌和其他微生物污染培养基。
2. 注意培养基的防护，避免被培养基溅到眼睛或其他敏感部位。
3. 注意实验室的清洁和消毒，保持操作环境的无菌状态。
4. 注意对培养基的正确处理和保存，避免因保存不当而导致培养基的污染或变质。
五、实验记录在培养基使用过程中，应做好详细、准确的实验记录，包括培养基的批号和有效期、使用日期、实验操作的细节、实验结果等。
记录应保存在指定的实验记录本中，并及时整理和归档，以备后续参考和查阅。
六、实验结果分析对培养基使用过程中出现的异常和特殊结果，应及时进行分析和解释。
如对培养结果的质量和效果有问题，应排除可能的技术和非技术原因，确保实验的准确性和可靠性。
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黑龙江正康生物技术股份有限公司GMP管理文件
一、目的：为保证培养基能够满足生产要求，特定培养基制备岗位操作规程。
二、适用范围：适用于培养基制备岗位的操作。
三、责任者：分发部门负责人，质量监督员，工艺员，操作人员。
四、正文：
1 操作前准备：
1.1 接收指令，根据指令情况填写生产状态标识牌，标明当日生产产品的品名、规格、批号、批量、岗位名称、生产日期。
1.2 检查上批次清场情况，有上一批次生产“清场合格证”，并确认无上次生产遗留物。
1.3 检查生产现场卫生状况，有厂房“已清洁”状态标识，并在效期内。
1.4 检查设备、设施及状态情况，有设备“已清洁”状态标识，并在效期内。
1.5 检查容器具卫生状况，有容器具“已清洁”状态标识，并在效期内。
1.6 检查生产用衡器是否处于水平状态，是否归零，是否有检定合格证，并在有效期内。
1.7 检查确认批生产记录及相应的配套记录已准备齐全。
2 生产操作：
2.1 领料：
2.1.1 根据生产指令开出限额领料单，领取所需用的原辅材料，并有质量管理部的检验合格报告
单。
检查报告单上的物料编码、品名、数量、规格及外观质量，合格后才能使用；如不符合要求应拒绝收料；
2.1.2 按照《物料进入生产区标准操作规程》清除原辅料外包装物表面的异物灰尘，并清洁消毒，再复核物料编码、品名，规格、检查外观、数量，避免差错，放入物料暂存间中待用。
2.2 称量：
2.2.1 称量前应核对原辅料物料编码、品名、批号、生产厂家、规格等，应与检验报告单相符。
2.2.2 原辅料的使用量应根据原料的实际含量、含水量等因素进行换算，按检验用培养基制配法或各产品的工艺规程所规定的量进行100%的投料。
2.2.3 称量时所用的取料铲必须专用，不能混用，数量应有复核人，操作人和复核人均应在称量原始记录上签名。
2.2.4 液体药品临用前单独称量，称量完毕要立即清理称量台和台秤。
2.2.5 剩余的原辅料应密封贮存，并在容器外标明物料编码、品名、批号、日期、剩余量及使用人。
2.3 配制：
2.3.1 注意事项：
2.3.1.1 根据规程，核对所用原辅料的物料编码、品名、批号、生产厂、规格等；
2.3.1.2 每一个配制器皿必须标明所配培养基的品名、规格、批号和配制量；
2.3.1.3 配制时，每一种原辅料的加入和调制必须由核对人确认并作好记录；
2.3.1.4 配制过程中的温度调节和配制的最后定量均要有复核人确认，并有操作人和复核人签字。
2.3.2 配制过程
2.3.2.1 使用市售的成品培养基的配制过程按使用说明书配制即可。
2.3.2.2 使用各种原材料配制的配制过程见附注。
3 结束工作：
3.1 操作人员对培养基制备间进行清洁。
将各种容器、滤罐、用具、管路按《洁净区容器具、工器具清洁规程》等分别处理清洗。
3.2 清洁结束后班组长检查岗位清洁情况，检查合格后，更换标识，换上厂房、设备“已清洁”标识。
3.3 填写“厂房清洁记录”。
3.4 按《清场管理规程》进行清场后，班长复查岗位清场情况，并通知质量管理部的质监员进行清场检查。
3.5 质监员清场检查后，签发“清场合格证”（正、副本），并在批生产记录上签字。
3.6 填写清场记录，并与“清场合格证”（正本）一起纳入本批生产记录中。
3.7 将填写完整的批生产记录，与清场记录、前次“清场合格证”（副本）、本次“清场合格证”（正本），整理后上交工艺员。
3.8 清场检查不合格，未取得合格证，班组长在质量监督员监控下重新进行清场直到合格，取得质量监督员签发的“清场合格证”结束工作。
附注：生产用培养基配方
1、牛肉汤
牛肉500g
氯化钠 5.0g
纯化水加至1000ml
将牛肉切除脂肪、筋膜，绞碎，放入适宜容器中，加入纯化水，搅匀，置2～8℃浸泡18～20小时。
加热搅拌，至煮沸，并维持煮沸60分钟，用滤布粗滤，分装，116℃灭菌30分钟，冷却后置2～
8℃，保存备用。
2、猪胃消化液
猪胃300g
盐酸10～11ml
纯化水加至1000ml
将猪胃冲洗干净（清洗时注意保护胃膜），切除脂肪，绞碎，放入适宜容器中，加入65℃左右纯化水混匀，用盐酸消化，调节pH值至1.7～2.0，使消化液维持在52～54℃，消化18～24小时。
前12小时搅拌6～10次，静止消化。
以胃组织溶解，液体澄清为消化完全，如消化不完全，可适当延长消化时间。
除去脂肪和浮物，吸取中间清液，煮沸10～15分钟，静置沉淀，冷却至80～90℃，调节pH 值至4.0～5.0，静置1～2小时，滤清，分装，116℃灭菌30分钟，冷却后置2～8℃，保存备用。
3、马丁肉汤
3.1 成分
牛肉汤500ml
猪胃消化液500ml
氯化钠 2.5g
3.2 制法
3.2.1 将上列成分混合后，以氢氧化钠溶液调整pH为7.6～7.8，煮沸20～40分钟，补助失去的水分。
3.2.2 冷却沉淀，抽取上清液，经滤纸或绒布过滤，滤液应为澄清淡黄色，按需要分装，经116℃灭菌30～40分钟。
3.2.3 pH应为7.2～7.6。
3.3 用途供疫苗制造及检验用。
4 普通肉汤（营养肉汤）
4.1 成分
牛肉汤1000ml
蛋白胨10g
氯化钠5g
4.2 制法
4.2.1 取蛋白胨和氯化钠，按上述比例加入牛肉汤中。
4.2.2 煮沸使溶解，以氢氧化钠溶液调整pH为7.4～7.6，继续煮沸10～20分钟。
4.2.3 不足失去的水分，以滤纸或绒布过滤。
4.2.4 将滤液分装于中性容器中，116℃灭菌30分钟，冷却后置2～8℃，保存备用。
5 胰蛋白䏡琼脂培养基
5.1成分
胰蛋白䏡20g
氯化钠 5.0g
葡萄糖（含1个结晶水） 1.0g
琼脂11～13g
纯化水加至1000ml
5.2 制法
除葡萄糖外，将上述成分混合，加热溶解后加入葡萄糖，调节pH为6.8～7.0。
分装，116℃灭菌30～40分钟，灭菌后培养基pH为6.6～6.8。
该培养基用于布氏菌病疫苗变异检验、活菌计数及布氏菌菌落结晶紫染色法等项目的检验。