气相色谱仪使用方法及实验操作步骤

合集下载

杭州气相色谱仪操作规程

杭州气相色谱仪操作规程

杭州气相色谱仪操作规程
《杭州气相色谱仪操作规程》
一、实验目的
通过操作杭州气相色谱仪,掌握色谱原理及技术,进行样品的分析和检测。

二、实验材料
1. 杭州气相色谱仪
2. 色谱柱
3. 样品溶液
4. 气源(氢气、氮气、氦气等)
5. 注射器
6. 色谱软件
三、操作步骤
1. 打开色谱仪电源,同时打开氢气、氮气等气源,待色谱仪预热达到工作温度后可进行下一步操作。

2. 将色谱柱固定在色谱仪中,连接好进样口和检测器,并进行气路连接。

3. 调节色谱仪的运行参数,如流速、温度等,根据样品类型和需要进行调整。

4. 将样品溶液用注射器注入到色谱柱的进样口中,注意不要进样过多,避免柱内液相过多而影响分析结果。

5. 启动色谱软件,设置样品分析的参数和检测模式,开始采集数据。

6. 分析结束后,关闭色谱仪电源和气源。

清洁和维护色谱柱
及其他设备。

四、注意事项
1. 操作时应注意色谱仪设备的安全性,避免发生意外事故。

2. 样品溶液的进样量和处理方法应谨慎,以免影响实验结果。

3. 定期保养和维护色谱仪设备,确保其正常运行。

以上就是《杭州气相色谱仪操作规程》,操作人员应严格按照规程进行操作,确保实验的准确性和安全性。

气相色谱仪操作步骤

气相色谱仪操作步骤

气相色谱仪操作步骤气相色谱仪(Gas Chromatograph,简称GC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境科学等领域。

下面将详细介绍气相色谱仪的操作步骤,以帮助读者更好地掌握和运用该仪器。

一、准备工作1. 确认气相色谱仪处于正常工作状态,例如检查仪器的电源和气源是否正常连接。

2. 打开气相色谱仪的主机,启动仪器,然后等待一段时间,使仪器温度稳定在操作温度范围内。

3. 检查气相色谱仪的气源,确保气源的压力稳定,并进行必要的调整。

二、样品处理1. 准备样品及溶剂,并按照实验要求进行配制。

2. 将样品溶解于溶剂中,并进行必要的预处理,例如过滤、稀释等。

3. 采用适当的方法,将样品溶液转移至气相色谱仪的进样器中。

三、进样1. 调整进样器的温度和压力,以确保样品能够顺利地进入气相色谱仪的色谱柱中。

2. 设置进样器的进样体积或进样位置,根据需要确定样品的进样量。

四、色谱柱设置1. 选择合适的色谱柱,并确保其完好无损。

2. 将色谱柱安装在气相色谱仪中,并根据需要对色谱柱进行温度和压力的调节。

五、操作参数设置1. 设置气相色谱仪的运行参数,例如温度程序、流动速率、进样模式等。

2. 根据需要,选择合适的检测器和检测器参数。

六、开始分析1. 确保所有的操作参数设置完成后,点击“开始”按钮,启动气相色谱仪的运行。

2. 在分析过程中,观察仪器的运行状态,确保仪器正常工作。

七、数据处理1. 获取气相色谱仪分析的数据,并进行必要的处理。

2. 根据实验要求,对数据进行解读和分析,并形成相应的结论。

八、仪器维护1. 在分析结束后,将仪器设置回初始状态,并进行必要的清洗和保养。

2. 定期检查仪器的性能和状态,确保仪器的正常运行。

气相色谱仪操作步骤是使用气相色谱仪进行样品分析的基本流程。

通过准备工作、样品处理、进样、色谱柱设置、操作参数设置、开始分析、数据处理和仪器维护等步骤的操作,可以获得准确可靠的分析结果,并有效地利用气相色谱仪进行科学研究和实验分析。

气相色谱操作规程

气相色谱操作规程

气相色谱操作规程
《气相色谱操作规程》
一、实验目的
本实验旨在通过气相色谱分析技术,掌握样品的分离与检测方法,提高实验者对色谱仪器的操作技能,进一步加深对气相色谱的理论与实践知识。

二、实验原理
气相色谱是利用气相色谱分析仪器对样品进行分离和检测的一种分析方法。

该方法通过样品在色谱柱中的分配和扩散,实现对混合物中各种组分的分离,然后利用检测器进行定量或定性分析。

三、实验步骤
1. 样品制备:将待测样品按照实验要求充分制备,并注明详细标签。

2. 色谱仪器准备:打开气相色谱仪器,进行相关初始化操作,包括检查色谱柱和检测器的清洁程度、连接气源并设置好气流速率和流场温度等。

3. 样品注入:将样品溶液通过进样口注入色谱柱中,注意保持流量均匀。

4. 色谱分离:根据最佳分离条件设定,进行色谱柱温度程序升温、保持和降温,保证样品能够被充分分离。

5. 数据采集和分析:通过色谱仪器数据采集系统采集样品分离结果,利用相关软件进行数据处理和分析。

四、注意事项
1. 实验者需严格遵守化学品安全操作规程,正确佩戴防护装备。

2. 对色谱柱和检测器进行长期维护,保持其功能的稳定。

3. 样品注入时,注意避免造成进样口的污染和堵塞。

4. 在操作过程中,注意观察并记录相关操作和设备的异常情况,及时调整。

五、实验总结
通过本次实验,实验者能够熟练地掌握气相色谱仪器的操作规程,进一步理解气相色谱的理论基础和分析应用,提高了实验者对色谱分析技术的应用能力和操作技能。

气相色谱仪使用方法说明书

气相色谱仪使用方法说明书

气相色谱仪使用方法说明书一、前言气相色谱仪(Gas Chromatography, GC)是一种广泛应用于化学分析领域的仪器,具有高分离能力、分析速度快和检测灵敏度高等特点。

本说明书将详细介绍气相色谱仪的使用方法,以帮助用户正确操作仪器,并保证分析结果的准确性和可靠性。

二、仪器及配件1.仪器:XXX型气相色谱仪2.气源:气相色谱仪需要接入高纯度稳定的氢气、氮气和空气供给装置。

3.色谱柱:色谱柱是气相色谱仪的重要部件,不同的分析需求可能需要不同类型的色谱柱。

使用前需要检查柱子是否损坏或污染,可以进行条件恢复或更换。

4.进样器:气相色谱仪通常配备了进样器,用户需要根据分析目标选择合适的进样方式和进样器类型。

5.检测器:检测器是气相色谱仪的核心组件,可以根据实际需要选择合适的类型和参数。

三、仪器操作步骤以下为一般的气相色谱仪使用方法步骤:1.前期准备1.1 确保气源供应充足并连接正确。

检查氢气、氮气和空气的供应装置,确保气源没有泄漏。

1.2 检查色谱柱的状态。

检查色谱柱是否完好无损,如果有损坏或污染,需进行更换或清洗。

1.3 检查进样器和检测器。

确保进样器和检测器连接稳固,没有松动或漏气。

2.仪器开机2.1 打开气相色谱仪电源开关,待仪器启动正常后,进行进一步的操作。

2.2 启动控制软件,并与仪器建立通讯连接。

3.样品进样3.1 按照分析需要,选择合适的样品进样方式和进样器类型。

手动进样和自动进样是常见的进样方式。

3.2 确保样品进样器和进样口的连接牢固,在进行样品进样前,检查进样器是否已经装好,并调整好相关参数。

3.3 进行样品进样。

根据实验要求,将样品准备好,经过适当的处理或预处理后,将其注入进样器中。

4.方法设定4.1 根据分析要求,设置合适的色谱柱和检测器。

4.2 在控制软件中设定色谱的温度、流速和温度程序等参数。

4.3 进行仪器的初始调试。

在开始正式分析前,运行程序进行初始调试,并根据示意图和结果进行相关参数的调整。

气相色谱仪操作规程

气相色谱仪操作规程

气相色谱仪操作规程
《气相色谱仪操作规程》
一、前言
为了确保实验数据的准确性和实验人员的安全,使用气相色谱仪进行实验需要严格遵守操作规程。

本规程旨在规范气相色谱仪的操作流程,保障实验人员的安全和实验数据的准确性。

二、实验前准备
1. 确保气相色谱仪处于正常工作状态,检查仪器各部件是否完好无损,是否有漏气现象。

2. 使用符合要求的气相色谱柱和色谱仪检测器,并进行新柱上样。

3. 调节色谱仪的温度、流速和压力参数,使之符合实验要求。

三、样品处理
1. 样品的制备应当符合实验要求,避免因样品制备不当导致实验结果的失真。

2. 取样应当准确,避免污染或混杂其他样品。

3. 样品的注入应当准确、快速,并避免产生气泡。

四、实验操作
1. 打开色谱仪的电源,并进行预热。

2. 在进行样品检测前,进行还原值的设定。

3. 样品检测完成后,关闭气相色谱仪的电源,清理色谱柱和检测器,并拆卸相关部件进行清洁。

五、实验安全
1. 在操作过程中,注意防止柱管泄漏和气相泄漏,避免发生意外。

2. 注意化学品的风险性质,避免发生化学品事故。

3. 操作过程中需佩戴相关防护装备,确保实验人员的安全。

总之,严格遵守《气相色谱仪操作规程》,才能保障实验数据的准确性和实验人员的安全。

希望所有使用气相色谱仪的实验人员能够严格遵守本规程,确保实验结果的准确性。

安捷伦气相色谱仪操作规程

安捷伦气相色谱仪操作规程

安捷伦气相色谱仪操作规程安捷伦气相色谱仪操作规程一、实验目的本实验旨在熟悉和掌握安捷伦气相色谱仪的操作方法,了解色谱仪的常见故障及其处理方法,以提高色谱分析的准确性和可靠性。

二、实验仪器1. 安捷伦气相色谱仪一台2. 气相色谱柱3. 气源和载气瓶4. 样品进样器5. 检测器三、实验步骤1. 打开色谱仪电源,等待仪器启动完成。

2. 检查气源和载气瓶,确保气源充足。

3. 将气相色谱柱固定在色谱仪柱座上,并将柱座连接至进样器。

4. 打开进样器,将待测试样品加入进样器中。

5. 设置进样器的进样时间和进样容量,确保进样量符合分析要求。

6. 在色谱仪的控制面板上设置分析方法,包括温度程序、流速和检测器参数等。

7. 开始进样,将样品注入气相色谱柱进行分离。

8. 监控检测器输出信号,记录峰形和峰面积等数据。

9. 分析结束后,关闭进样器和色谱仪电源,并及时清理进样器和色谱柱。

四、注意事项1. 在操作色谱仪前,务必佩戴防护眼镜和实验手套,确保个人安全。

2. 气源和载气瓶的气压要稳定,确保色谱分析的流速稳定。

3. 进样器要经常清理,以避免污染样品和柱床,影响分析结果。

4. 在设置分析方法时,要根据待测物的性质和要求进行合理设定。

5. 小心操作、轻放仪器,避免对仪器造成损坏。

6. 如遇到色谱仪故障,应及时关闭仪器并联系维修人员处理。

五、常见故障及处理方法1. 色谱柱压力过高:可能是气源压力过高或柱床堵塞,应检查气源压力和清理柱床。

2. 峰形异常:可能是进样量过大或柱床老化,应调整进样量或更换色谱柱。

3. 检测器信号异常:可能是检测器故障或进样器漏气,应检查检测器和进样器。

4. 柱床损坏或破裂:可能是柱温不合适或柱床老化,应修复或更换柱床。

六、实验安全注意事项1. 使用化学品时,注意避免接触皮肤和吸入,加强通风换气。

2. 处理废弃物时,应按规定分类处理。

3. 操作过程中严禁大声喧哗,以免影响他人安全。

4. 实验后要及时清理工作台和仪器设备。

气相色谱仪原理及操作步骤

气相色谱仪原理及操作步骤

气相色谱仪原理及操作步骤
一、气相色谱仪的原理
用色谱柱先将混合物分离,然后利用检测器依次检测已分离出来的组分。

色谱柱的分离原理在于惯用的具有吸附性的色谱柱填料,使得混合物中各组分在色谱柱中的两相间进行分配。

由于各组分的吸附能力不同,因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同,经过一定的柱长后,便彼此分离,按顺序离开色谱柱进入检测器,产生的离子流讯号经放大后,在记录器上描绘出各组分的色谱峰。

二、气相色谱仪的操作步骤如下:
1. 准备工作:检查仪器安全阀是否处于开启状态,确认分析柱安装正确,温度设定在操作手册规定的温度范围内,并检查各部份是否连接完好。

2. 样品溶解:将样品加入溶剂中,采用高速搅拌混匀,以确保样品完全溶解,得到浓缩的溶液。

3. 溶液导入:将溶液加入检测器中,控制流量大小,确保流量的稳定性。

4. 调零:使用空白样品进行调零,确保实验数据准确性。

5. 开始实验:按照实验要求逐次放入样品,并监测色谱图及色谱曲线。

6. 记录数据:记录实验数据,包括色谱图及色谱曲线。

7. 清理仪器:关闭安全阀,拆卸分析柱,清理仪器,确保下次实验的正确进行。

气相色谱仪的使用方法说明书

气相色谱仪的使用方法说明书

气相色谱仪的使用方法说明书1. 引言气相色谱仪(Gas Chromatograph, GC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、环境、食品、药物等领域。

本文将详细介绍气相色谱仪的使用方法,包括样品准备、仪器操作、数据分析等方面,旨在帮助用户正确高效地运用气相色谱仪进行分析实验。

2. 实验前准备在进行气相色谱分析之前,需要进行一系列的准备工作:2.1 样品准备样品的准备通常包括样品的收集、提取和预处理等步骤。

确保样品的纯度和完整性对获得准确可靠的分析结果至关重要。

2.2 仪器准备对气相色谱仪进行仔细的检查和准备,确保各部分设备的正常工作。

包括检查进样口、色谱柱、流动相、检测器等部分。

2.3 标准曲线的制备准备一系列已知浓度的标准溶液,用于后续的定量分析。

3. 仪器操作步骤3.1 开机与系统初始化打开气相色谱仪的电源,启动系统软件,进行系统初始化和仪器自检。

3.2 进样口的设置根据不同的样品性质和应用要求,选择合适的进样口类型,如液相进样口或固相进样口。

3.3 色谱柱的选择与更换根据分析的具体要求,选择合适的色谱柱。

更换色谱柱时,需注意操作的规范,避免损坏色谱柱和产生不必要的样品交叉污染。

3.4 流动相的设置选择适合分析物性质和分离要求的流动相,调整流速和温度等参数来优化分离效果。

3.5 检测器的设置根据分析物的性质和检测需求,选择合适的检测器,并根据仪器要求进行相应的设置。

3.6 样品进样将准备好的样品通过进样口进入气相色谱仪进行分析。

在进样过程中,需控制好进样量和速度,确保分析结果的准确性和重复性。

3.7 数据采集和分析根据所选的分析方法和仪器设置,进行数据的采集和记录,并使用适当的数据分析软件对结果进行处理和解读。

4. 数据结果的解读与分析根据气相色谱仪的分析结果,对样品中的目标成分进行定量和定性的解读与分析。

可使用已建立的标准曲线进行定量,或进行峰的识别和峰面积积分计算等操作。

5. 仪器维护和注意事项5.1 仪器的日常维护定期对气相色谱仪进行维护和保养,包括清洁进样口、色谱柱的更换、检测器的检查和标定等。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

液相色谱仪、气相色谱仪、原子吸收分光光度计、红外光谱仪、核磁共振、原子发射光谱等分析仪器气相色谱仪使用方法及实验操作步骤:A、打开氮气、氢气、空气发生器的电源开关(或氮气钢瓶总阀),调整输出压力稳定在0.4Mpa左右(气体发生器一般在出厂时已调整好,不用再调整)。

B、打开色谱仪气体净化器的氮气开关转到“开”的位置。

注意观察色谱仪载气B的柱前压上升并稳定大约5分钟后,打开色谱仪的电源开关。

C、设置各工作部温度。

TVOC分析的条件设置:(a)柱箱:柱箱初始温度50℃、初始时间10min、升温速率5℃/min、终止温度250℃、终止时间10min; (b)进样器和检测器:都是250℃。

脂肪酸分析时的色谱条件:(a)柱箱:柱箱初始温度140℃、初始时间5min、升温速率4℃/min、终止温度240℃、终止时间15min; (b)进样器温度是260℃,检测器温度是280℃。

D、点火:待检测器(按“显示、换档、检测器”可查看检测器温度)温度升到150℃以上后,打开净化器上的氢气、空气开关阀到“开”的位置。

观察色谱仪上的氢气和空气压力表分别稳定在0.1Mpa 和0.15Mpa左右。

按住点火开关(每次点火时间不能超过6~8秒钟)点火。

同时用明亮的金属片靠近检测器出口,当火点着时在金属片上会看到有明显的水汽。

如果在6~8秒时间氢气没有被点燃,要松开点火开关,再重新点火。

在点火操作的过程中,如果发现检测器出口白色的聚四氟帽中有水凝结,可旋下检测器收集极帽,把水清理掉。

在色谱工作站上判断氢火焰是否点燃的方法:观察基线在氢火焰点着后的电压值应高于点火之前。

E、打开电脑及工作站(通道一分析脂肪酸,通道二分析碘),打开一个方法文件:脂肪酸分析方法或碘分析方法。

显示屏左下方应有蓝字显示当前的电压值和时间。

接着可以转动色谱仪放大器面板上点火按钮上边的“粗调”旋钮,检查信号是否为通路(转动“粗调”旋钮时,基线应随着变化)。

待基线稳定后进样品并同时点击“启动”按钮或按一下色谱仪旁边的快捷按钮,进行色谱数据分析。

分析结束时,点击“停止”按钮,数据即自动保存。

F、关机程序:首先关闭氢气和空气气源,使氢火焰检测器灭火。

在氢火焰熄灭后再将柱箱的初始温度、检测器温度及进样器温度设置为室温(20-30℃),待温度降至设置温度后,关闭色谱仪电源。

最后再关闭氮气。

高效液相色谱我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表:鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。

三、色谱法分类 (3)四、色谱分离原理 (3)II.基本概念和理论 (5)一、基本概念和术语 (5)二、塔板理论 (8)三、速率理论(又称随机模型理论) (9)III.HPLC系统 (10)一、输液泵 (11)二、进样器 (13)三、色谱柱 (14)四、检测器 (17)五、数据处理和计算机控制系统 (20)六、恒温装置 (20)IV.固定相和流动相 (20)一、基质(担体) (20)二、化学键合固定相 (22)三、流动相 (23)1.流动相的性质要求 (23)2.流动相的选择 (24)3.流动相的pH值 (24)4.流动相的脱气 (25)5.流动相的滤过 (25)6.流动相的贮存 (26)7.卤代有机溶剂应特别注意的问题 (26)8.HPLC用水 (26)V.HPLC应用 (27)一、样品测定 (27)二、方法研究 (27)附件:高效液相色谱法(HPLC)复核细则 (28)一、对起草单位的要求: (28)二、对复核单位的要求: (28)二、HPLC的特点和优点HPLC有以下特点:高压——压力可达150~300 Kg/cm2。

色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。

高速——流速为0.1~10.0 ml/min。

高效——可达5000塔板每米。

在一根柱中同时分离成份可达100种。

高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。

同时消耗样品少。

HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:速度快——通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min即可完成。

分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。

灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。

柱子可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。

样品量少,容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

三、色谱法分类按两相的物理状态可分为:气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。

气相色谱法适用于分离挥发性化合物。

GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC),其中以GLC应用最广。

液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。

LC同样可分为液固色谱法(LSC)和液液色谱法(LLC)。

此外还有超临界流体色谱法(SFC),它以超临界流体(界于气体和液体之间的一种物相)为流动相(常用CO2),因其扩散系数大,能很快达到平衡,故分析时间短,特别适用于手性化合物的拆分。

按原理分为吸附色谱法(AC)、分配色谱法(DC)、离子交换色谱法(IEC)、排阻色谱法(EC,又称分子筛、凝胶过滤(GFC)、凝胶渗透色谱法(GPC)和亲和色谱法。

(此外还有电泳。

)按操作形式可分为纸色谱法(PC)、薄层色谱法(TLC)、柱色谱法。

四、色谱分离原理高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。

1.液固色谱法使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。

分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。

常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。

适用于分离分子量200~1000的组分,大多数用于非离子型化合物,离子型化合物易产生拖尾。

常用于分离同分异构体。

2.液液色谱法使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。

分离过程是一个分配平衡过程。

涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外在流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集复杂化。

由于涂布式固定相很难避免固定液流失,现在已很少采用。

现在多采用的是化学键合固定相,如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。

液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。

正相色谱法采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。

常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。

反相色谱法一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。

适用于分离非极性和极性较弱的化合物。

RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。

随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。

为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。

但需要注意的是,C18和C8使用的pH 值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的烷基脱落。

有报告新商品柱可在pH 1.5~10围操作。

正相色谱法与反相色谱法比较表正相色谱法反相色谱法固定相极性高~中中~低流动相极性低~中中~高组分洗脱次序极性小先洗出极性大先洗出从上表可看出,当极性为中等时正相色谱法与反相色谱法没有明显的界线(如氨基键合固定相)。

3.离子交换色谱法固定相是离子交换树脂,常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架,在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基(称阳离子交换树脂)或季氨基(阴离子交换树脂)。

被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的电荷吸引力而分离。

缓冲液常用作离子交换色谱的流动相。

被分离组分在离子交换柱中的保留时间除跟组分离子与树脂上的离子交换基团作用强弱有关外,它还受流动相的pH值和离子强度影响。

pH值可改变化合物的解离程度,进而影响其与固定相的作用。

流动相的盐浓度大,则离子强度高,不利于样品的解离,导致样品较快流出。

离子交换色谱法主要用于分析有机酸、氨基酸、多肽及核酸。

4.离子对色谱法又称偶离子色谱法,是液液色谱法的分支。

它是根据被测组分离子与离子对试剂离子形成中性的离子对化合物后,在非极性固定相中溶解度增大,从而使其分离效果改善。

主要用于分析离子强度大的酸碱物质。

分析碱性物质常用的离子对试剂为烷基磺酸盐,如戊烷磺酸钠、辛烷磺酸钠等。

另外高氯酸、三氟乙酸也可与多种碱性样品形成很强的离子对。

分析酸性物质常用四丁基季铵盐,如四丁基溴化铵、四丁基铵磷酸盐。

离子对色谱法常用ODS柱(即C18),流动相为甲醇-水或乙腈-水,水中加入3~10 mmol/L的离子对试剂,在一定的pH值围进行分离。

被测组分保时间与离子对性质、浓度、流动相组成及其pH值、离子强度有关。

5.排阻色谱法固定相是有一定孔径的多孔性填料,流动相是可以溶解样品的溶剂。

小分子量的化合物可以进入孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入孔中,直接随流动相流出。

它利用分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异而完成分离。

常用于分离高分子化合物,如组织提取物、多肽、蛋白质、核酸等。

II.基本概念和理论一、基本概念和术语1.色谱图和峰参数➢色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。

➢基线(base line)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。

一般应平行于时间轴。

➢噪音(noise)——基线信号的波动。

通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。

➢漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。

主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。

➢色谱峰(peak)——组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。

流出曲线上的突起部分。

正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线(高斯Gauss 曲线)。

不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。

前者少见。

➢拖尾因子(tailing factor ,T)——T =,用以衡量色谱峰的对称性。

相关文档
最新文档