动物细胞培养与单克隆抗体制备 公开课
公开课动物细胞融合与单克隆抗体ppt课件

目的获:得产生
相应抗体的B 细胞
(二选):选 能产生所需专
一抗体的杂 交瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
ppt课件.
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
(B、瘤)
(一选)选 择性培养基:
只有杂交 瘤细胞才
能存活
14
2.2单克隆抗体的应用 特异性强
单克隆抗体最主要的优点:灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合,形成杂交细胞
(细胞膜具有一定的流动性)
ppt课件.
8
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的 病毒能作诱导剂?
灭活丧失感染性 保留融合活性
ppt课件.
9
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
意义:
Hale Waihona Puke 突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交 成为可能
应用: 制备单克隆抗体(最主要的应用)
但是体外
怎样大量
? 获得单一 抗体
培养的细胞 不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体,
又pp能t课件大. 量增殖的细胞 12
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 动物细胞培养技术 杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体, 又能大量增殖的细胞
ppt课件.
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细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ,因此不仅能分泌 特异__性__抗__体_____ ,还有 大量增殖 本领。
(3)该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
高三生物---动物细胞工程专题公开课一等奖课件省赛课获奖课件

应用前景
1、加紧家畜遗传改良进程 2、保护频危物种 3、器官移植供体 4、运用生物反映器生产生物蛋
白
存在问题
成功率低 存在健康问题
许多克隆动物体现出遗传和生理缺点,如体 型过大,异常肥胖,发育困难,脏器缺点, 免疫失调等。
克隆动物食品的安全问题
练习
中国自主完毕的首批成年体细胞克隆牛在山东曹 县陆续降生。克隆牛有3个母亲,A牛提供细胞核即 供体细胞,B牛提供去除细胞核的卵细胞即受体细胞 ,两种细胞在电脉冲的刺激下融合之后,通过细胞分 裂形成早期胚胎,再将这个胚胎植入C牛子宫内。 请回答下列问题: (1)哺育出的克隆牛几乎就是 A(供核牛) 牛复制品, 这是由于控制牛性状遗传的物质重要存在于 ____细_胞_核_____中。 (2)克隆牛的哺育成功阐明了 体_细_胞__的_细_胞__核_几_乎_含__有_发_育__为_新_个_体__的_全_部__遗_传_信_息。
动物细胞培养就是从动物机体内取出有关的 组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适 宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
思考:动物细胞培养的过程 是如何的呢?
阅读思考:
1 为什么细胞培养要分散成单个细胞培养? 2 如何分散? 2 用胰蛋白酶分散细胞,阐明细胞间的物质重要 3 成分是什么?用胃蛋白酶行吗?
1.在进行动物细胞培养时,用胰蛋白酶分散细胞,阐明细胞 间的物质重要是蛋白质。 2.动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶 (2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。
动物细胞生长特性:
细胞贴壁:
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称 为细胞贴壁。
规定:
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴 附。
充足的营养 气体
动物细胞培养与单克隆抗体制备 公开课

杂交细胞具有 两个或多个细胞的遗传物 质 突破_________________,使 有性杂交局限 远缘杂交 __________成为可能。获得杂
单克隆抗体制备 交细胞,用于_______
二、单克隆抗体制备的过程
问题导引:1.抗体从何而来? 2.传统抗体制备的方法是什么?弊端有哪些? 3.能否通过单独体外培养浆细胞的方式大量 获得相应抗体?
2013年3月20日
骨髓瘤细胞
杂交细胞
5.淘汰后的细胞所 产抗体是单一的吗? 若不是,下一步如 何操作?
6.如何获得大量 的单克隆抗体?
单克隆抗体
B淋巴细胞
细胞融合
骨髓瘤细胞
杂交细胞
5.淘汰后的细胞所 5.不是,下一步应 产抗体是单一的吗? 进行杂交细胞的克 若不是,下一步如 隆化培养与“专一 抗体检测” 何操作?
1.注射特定抗 1.如何获得特 (浆细胞) 定的浆细胞? 原 (选择培养基)筛选
2.浆细胞与浆细胞、骨髓瘤 2.融合过程中会出现几种类 细胞与骨髓瘤细胞、浆细胞 型的细胞?若只考虑两两融 与骨髓瘤细胞 合呢? 筛选(专一抗体检测阳性)克隆
3.该过程得到的细胞 哪种是我们所需要 的?其特点是? 4.如何淘汰掉我 们不需要的细胞?
【本节知识梳理】
要求:
1.以“单克隆抗体制备”为主线,自 己进行本节知识梳理。 2.完成当堂检测
2013年3月20日
单克隆抗体的制备(小结)
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内增殖
克隆化 诱导 选择 产生所需 融合 多种杂 培养 杂交瘤 培养
交细胞
细胞
抗体 检测
抗体的杂 交瘤细胞
单克隆抗体
应用
体外培养 体内培养
人教版高中生物选修3《动物细胞融合和单克隆抗体制备》公开课课件

单克隆抗体
?
1. 抗体是由何种细胞产生的? 2 . 抗体是如何产生的?
• 1.B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生特异性抗体。 • 2.动物在免疫反应过程中,体内产生特异性抗体种类 可达百万种以上,每种抗体对特定的抗原具有特异性免 疫作用。
生物法: 灭活的病毒 例如:仙台病毒
过程:
【问题分析一】动物细胞融合
细胞膜的流动性 病毒颗粒 1.原理: 细胞核 2.诱导动物细胞融合的方
细胞核
法? 物理法、化学法、 生物法(灭活病毒) 3.融合后细胞的类型? 4.杂交细胞?特点? 具有两个细胞的遗传信息, 可表现两个亲本的遗传性状。 5.为什么用灭活病毒能诱导动物 细胞融合? 灭活病毒的特点? 丧失感染活性,保留融合活性
植物体细胞杂交与动物细胞融合的区别:
比较项目 原理 细胞融合前 的处理方法 诱导方法 植物体细胞杂交
细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 物理法(离心、振 动、电激) 化学法(聚乙二醇)
动物细胞融合
细胞膜的流动性 使细胞分散后诱 导细胞融合 物理法、化学法 (同左) 生物法:灭活的病毒
植物细胞B
三、动物细胞融合
细胞融合是正常的生命活动
受精作用
荧光标记的小鼠细胞和人细胞融合实验示意图
1.动物细胞融合 过程 诱导因素 2.单克隆抗体 ★用哪两种细胞制备杂交瘤细胞?为什么? ★制备杂交瘤细胞过程中形成几种融合的细 胞?哪种融合细胞才是杂交瘤细胞? ★杂交瘤细胞的特点? ★单克隆抗体制备的过程中两次筛选的目的?
B淋巴细胞
细胞融合
骨髓瘤细胞
杂交细胞
2.2-2 动物细胞工程——动物细胞融合技术与单克隆抗体-高二生物课件(人教版2019选择性必修3)

课后习题·拓展应用
假如你掌握了动物细胞融合技术,你想用这种技术来解决哪些问题? 解决这些问题的大致思路是怎样的?这样做会有什么风险?请查阅相关 资料,完善自己的思路,并形成文字报告,与同学交流。
提示:可以利用动物细胞融合技术培育多倍体胚胎,研究其发育机制,甚至可能 培育出新的物种。但是,目前相关技术还不成熟,存在融合率低、胚胎死亡率高 等问题,并且还可能带来一些伦理方面的问题。
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 ↓
细胞膜被病毒颗粒穿通 ↓
细胞膜连接 ↓
细胞核融合,形成杂交细胞
相关信息
灭活病毒诱导细胞融合的原理
病毒表面的糖蛋白和一些酶与细胞膜上 的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚, 细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新 排布,细胞膜打开,细胞发生融合。
➢ 请同学们看图对比动物和植物细胞融合的异同:
二、单克隆抗体及其应用
1.单克隆抗体的优点
单克隆抗体能准确地识别 抗原的细微差异,与特定 抗原发生特异性结合,并 且可以大量制备
二、单克隆抗体及其应用
2.单克隆抗体的应用
(1)作为诊断试剂——最广泛的应用
抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体
比原来诊断方法提前了10d左右, 准确率在90﹪以上。
具有准确、高效、简易、快速特点
第一次筛选 置于选择性培养基上培养
多种杂交 瘤细胞
1
2
3
杂交瘤细胞
二、单克隆抗体及其应用
2.单克隆抗体制备过程
克隆化培养
多种杂交瘤细胞
第二次筛选 抗体检测 (抗原-抗体杂交技术)
能分泌所需抗体 的杂交瘤细胞
阳性细胞
二、单克隆抗体及其应用
2.单克隆抗体制备过程
能分泌所需抗体 的杂交瘤细胞
动物细胞融合与单克隆抗体的制备精品优秀课件标准版

③细胞融合
具如有何筛进选行作筛用选的?培
④⑤诱用杂杂灭导方台交交活细法病瘤瘤的胞是毒细仙细融什胞胞合么的的筛常?选选择培养
养基(HAT培养基)
杂交细胞
B?B种、B瘤 、
⑥分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立
瘤瘤 、
⑦单克隆抗体的大量制备
如何获得大量的
单克隆抗体?
第二十页,共四十四页。
抗原
效应B细胞
筛选
生物法:灭活的病毒同?例如:仙台病毒
第六页,共四十四页。
仙台病毒
紫外线
丧失感染性 (不感染细胞)
保留融合活性 (诱导细胞融合)
第七页,共四十四页。
细胞A
细胞B
物理法
化学法
灭活的病毒
杂交细胞
第八页,共四十四页。
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合,形成杂交细胞 (细胞膜具有一定的流动性)
第九页,共四十四页。
(三)动物细胞融合的应用
1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可
能。
鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等
2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品
种培育等的重要手段。
3、重要用途:制备单克隆抗体。
第十页,共四十四页。
二、单克隆抗体
合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞
⑤杂交瘤细胞
A. ②④
B.①③⑤
C. ①②③④
D.②③
第三十二页,共四十四页。
练习:
5、研究单克隆抗体治疗癌症的思路是( )
A.利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B.以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞 C.抗癌物质在克隆细胞中大量合成
单克隆抗体-公开课课件

B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋 巴细胞
【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的
( D)
• B淋巴细胞
B.T淋巴细胞
C.骨髓瘤细胞
D.杂交瘤细胞
【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下
列实验步骤中错误的是( B )
A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋 巴细胞
B.用纤维素酶×处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
行常用__聚__乙__二__醇_____或___灭__活__的__病__毒__的诱导。
(3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 3 种
类型的C细胞,因此需用____选__择__性__培养基筛选出D细 胞用于培养,D细胞的名称是 杂交瘤细胞 ,其特点
是___既__能__无__限__增__殖__又__能__产__生__特__异__性__抗__体__________。
二、单克隆抗体
1.抗体是由何种细胞产生的? 效应B细胞(浆细胞)
2.一个B淋巴细胞(浆细胞)能分 泌多种抗体吗?
每一个B淋巴细胞只分泌一 种特异性抗体 3.一种抗原侵入机体之后,引起 机体免疫反应产生的抗体只有一 种吗?
动物在免疫反应过程中,体 内产生的特异性抗体种类可多达 百万种以上
Ø出现在抗原分子表面、决定 抗原特异性Байду номын сангаас特殊化学基团.
(3)该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
3、治疗疾病和运载药物
主要用于治疗癌症治疗,单克隆抗体作为载体,运载抗 癌药物,形成“生物导弹”,准确杀伤癌变细胞。
“生物导弹” =单克隆抗体+药物
单抗导向,药物为弹头
【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融 合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单
《动物细胞融合与单克隆抗体》教案(第三课时)

1、概念:是指(在一定的条件下)两个或多个细胞融合形成一个细胞的过程。
[强调要点]“2个或多个动物细胞”→“1”、“杂交单核细胞”
2、动物细胞融合的方法:物理法(如电场法)、化学法(如聚
乙二醇法)、生物法(如仙台病毒法)
(3)利用酶的什么特性?
(4)诱导融合的方法有哪些?
(5)植物细胞融合完成的标志是什么?
(6)植物体细胞杂交技术的目的是什么?
(7)动植物细胞在结构上有何区别?
师:既然动物细胞与植物细胞不同,那么动物细胞是否可以融合或杂交?如果可以,两者的方法、过程相同吗?......[引入学生思考,激发兴趣]
下面就让我们一起来看看有关动物细胞融合的基础知识。
能力
目标
让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程,指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法,使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。
情感
目标
通过向学生介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果,使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入,知识不断更新并向前发展,认识到学无止境,形成终生学习的意识。
注意:应用物理法进行细胞融合的效率高,且对细胞伤害小,易操作、控制和观察。
3、过程:
师:当我们把2个动物细胞放到一起时,还需要做什么呢?
生:诱导
师:在诱导方法上,动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法是否相同?
生:相类似,可以用物理法、化学法,但动物细胞融合时可用灭活的病毒作为诱导剂。
细胞A 细胞B
(学生边写边讲,不足的地方进行补充,教师精讲点拨)
4、应用:诊断试剂;治疗疾病和运载药物。
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《专题2.2 动物细胞工程》
-----动物细胞融合与单克隆抗体制备(预习案)
【预习目标】
1. 回顾植物体细胞杂交技术,体液免疫过程。
2. 知道动物细胞融合的方法。
3. 能简述单克隆抗体的制备流程,并举例说出其具体应用。
【预习要求】认真阅读课本,回答下列问题,将疑难点在“我的疑问”做好统计【预习内容】
1.植物体细胞融合的方法有哪些?植物体细胞融合成功的标志是什么?植物体细胞杂交技术成功的标志是什么?
2.体液免疫过程中能特异性识别抗原的细胞有哪些?
完成下面的概念图
抗原与抗体结合,抗原失去活性,最终被吞噬细胞清除。
3.动物细胞融合的概念?
4动物细胞融合的方法是什么?
5.结合图片P2-24能对单克隆抗体的制备流程进行简单设计。
6.举例说出单克隆抗体的应用。
【我的疑问】
《专题2.2 动物细胞工程》
-----动物细胞融合与单克隆抗体制备(课内探究)Array【学习过程】
一.动物细胞融合
【思考探究】结合FLASH动画,阅读教材P52相关知识,回答核心知识点:
a.原理:
b.方法:
c.意义:
d.应用:
二.单克隆抗体制备的过程
【小组活动】
1.根据预习情况,梳理思路,利用手中材料尝试对“单抗”制备流程进行
设计;
2.组内交流设计思路;
3.小组代表黑板展示设计流程,并作简要说明。
【合作探究】
1. 如何获得特定的浆细胞?
2. 融合过程中会出现几种类型的细胞?若只考虑两两融合呢?
3.上述过程得到的细胞哪种是我们所需要的?其特点是什么?
4.
怎样淘汰掉我们不需要的细胞?
5. 淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗?若不是,下一步该如何操作?
6. 如何获得大量“单克隆抗体”?
【归纳提升】回顾“单克隆抗体的制备流程”,自主归纳以下六点:
1、两种细胞:
2、两次筛选(目的):
3、两种培养(培养特定杂交瘤细胞的方法):
4、两种提取(提取抗体的途径):
5、两项技术:
6、三个优点:
三.单克隆抗体的应用
(要求)阅读教材P54相关内容,总结:
1.
优点:
应用
2.
优点:
【自主知识梳理】
(要求:结合幻灯片知识树,将本节知识作简单梳理)
原理过程
A .动物细胞融合方法 B.单克隆抗体制备特点
应用应用
【巩固训练】
1.单克隆抗体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是( )
A.能使杂交细胞大量增殖B.产生特异性更强的个体
C.使细胞融合容易进行D.使产生的抗体纯度更高
2.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。
在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是()
①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自
身融合细胞⑤杂交瘤细胞
A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③
3. 用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是()
A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞
B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体
4.下列属于人类研究单克隆抗体的目的的是()
①诊断疾病②为烧伤病人进行自身皮肤细胞移植③研究“生物导弹”④基因诊断
A①③ B ②④ C ①④ D ③④
【存疑解惑】
【拓展阅读】
1.应用前景:2010年全球治疗用单抗药物的销售总额达到440亿美元,如果加上100
亿美元的单抗诊断和研究试剂,单抗药物的市场总量达到550亿美元。
2011年单抗药物的市场总量已经达到628亿美元。
未来,全球单克隆抗体药依旧会保持较高的增长率。
到2015年,全球单克隆抗体药销售额有望达980亿美元左右。
我国的单克隆抗体药物从无到有,并且在我国医药市场发挥越来越重要的作用。
目前我国单抗市场规模每年以50%以上的速度递增。
单克隆抗体在我国市场仍属高端产品,主要依赖进口。
--------《百度百科》
2.政策支持: "十二五"期间,我国"重大新药创制"专项将获中央财政下拨资金100亿
元,配套资金300亿元。
专项战略重点包括创新药物研究开发、药物大品种技术改造等。
恶性肿瘤、心脑血管疾病、神经退行性疾病、糖尿病、肺结核等10类重大疾病药物的研发是创制资金支持重点。
"十二五"期间,医药工业发展目标为总产值年均增长20%,到2015年达到3.1万亿元。
2011年,单克隆抗体药物继续领跑全球药品市场,同比有较大的增长。
2000-2010年10年间,全球单克隆抗体药物市场的复合增长率高达32%。
--------《百度百科》。