植物的器官培养
植物组织培养的一般过程
植物组织培养的一般过程
以下是有关植物组织培养的一般过程：
1.植物组织培养的一般过程
（1）在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下，用纤维素酶和果胶酶处理以去除细胞壁，使之露出原生质体。
（2）然后放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官和组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。
不过这种组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞，称为愈伤组织。
（3）在合适的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，分化成植物的各种器官和组织，进而发育成一株完整的植株。
2.植物组织培养的特点
（1）培养条件可以人为控制，组织培养采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长，摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响，且条件均一，对植物生长极为有利，便于稳定地进行周年培养生产。
（2）生长周期短，繁殖率高，植物组织培养是由于人为控制培养条件，根据不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培养条件，因此生长较快，另外，植株也比较小，往往20~30天为一个周期。
所以，虽然植物组织培养需要一定设备及能源消耗，但由于植物材料能按几何级数快速繁殖生产，故总体上成本低廉，且能及时提供规格一致的优质种苗或脱病毒种苗。
（3）管理方便，利于工厂化生产和自动化控制。
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第四章 器官培养
第四章器官培养植物器官培养主要是指包括离体的根、茎、叶、花器和果实、种子的无菌培养。
以器官作为外植体进行离体培养的植物种类最多，应用的范围也最广，它是植物组织培养中最主要的一个方面。
植物器官培养不仅是研究器官生长、营养代谢、生理生化、组织分化和形态建成的最好材料和方法，而且在生产实践上具有重要的应用价值。
如利用茎、叶和花器培养建立的试管培养物，可在短期内提高繁殖速率，从而实现名、优、特、新品种的快速繁殖；利用茎尖培养可以获得脱毒试管苗，解决品种的退化问题；将植物器官作诱变处理和培养可获得突变株，进行细胞的突变育种。
另外，器官培养也是种质保存的有效手段。
第一节根的培养离体根的培养是进行根系生理和代谢研究最优良的实验体系。
因为根系生长快，代谢强，变异小，加上无菌和不受微生物的干扰，可以通过改变培养基的成分来研究其营养吸收、生长和代谢的变化；在工厂化生物反应器系统中通过工艺调控实现根的大规模培养不受环境和季节的限制，可以随时随地生产离体根的培养物，进行药物、微量活性物质及一系列次生代谢产物的工厂化生产。
另一方面通过根细胞的培养可再生植株，用于生产实践。
一、根无性繁殖系的建立1.外植体根的培养材料一般来自无菌种子发芽产生的幼根或植株根系经消毒处理后的切段。
2.根无性繁殖系的建立将种子消毒后在无菌条件下萌发，待根伸长后从根尖一端切取长1.2cm的根尖（或植株的根系经表面灭菌后）接种于培养基中。
这些根的培养物生长甚快，几天后发育出侧根。
待侧根生长约1周后，即切取侧根的根尖进行扩大培养，它们又迅速生长并长出侧根，又可切下进行培养，如此反复切接就可得到从单个根尖衍生的无性繁殖系。
二、培养方法1.植株的再生培养根离体培养再生出植株的方法是：先诱导离体根形成愈伤组织，再在再分化培养基上诱导芽的分化，进而形成小植株。
如果愈伤组织先分化形成根，则往往抑制芽的形成。
2.固氮培养将具有固氮作用的根瘤菌接种到禾谷类等作物的试管苗根系中，并在诱瘤剂的诱导下使根瘤菌侵入试管苗根部结瘤固氮，从而实现谷物直接利用生物固氮的捷径。
小学科学25《植物的器官》(教案)
小学科学25《植物的器官》（教案）植物的器官教案一、教学目标1. 了解植物的器官，包括根、茎、叶、花和果实。
2. 能够描述和区分植物各个器官的结构和功能。
3. 能够通过观察和实践，探究植物器官的特点和生长过程。
二、教学重点1. 植物的器官的结构和功能。
2. 植物器官的生长过程。
三、教学难点1. 能够区分植物器官的结构和功能。
2. 能够理解植物器官的生长过程。
四、教学准备1. 图片或幻灯片展示植物各个器官的结构和功能。
2. 种子、花盆、土壤和水等实验材料。
五、教学过程Step 1：导入（5分钟）通过展示一棵植物的图片或幻灯片，引导学生们思考植物有哪些部分组成，植物的每个部分有什么功能。
Step 2：学习植物的各个器官（15分钟）通过图片或幻灯片展示植物的根、茎、叶、花和果实，介绍植物器官的结构和功能：- 根：固定植物体、吸收水分和养分。
- 茎：连接根和叶、负责水分和养分的输送。
- 叶：进行光合作用，制造营养物质。
- 花：植物的繁殖器官，吸引传粉者。
- 果实：装有种子的结构，保护和传播种子。
Step 3：讨论植物器官的特点（15分钟）提出问题，让学生们讨论植物器官的特点：1. 哪些器官可以见到？哪些器官看不见？2. 植物的哪个器官可以进行光合作用？3. 哪个器官在植物生长过程中起到固定植物体的作用？4. 在四季更迭时，植物的哪个器官会凋谢和重新生长？Step 4：实验观察植物器官的生长过程（20分钟）将种子种植在花盆中，观察并记录植物生长的过程，着重观察和记录根、茎、叶的生长和变化。
Step 5：总结和巩固（15分钟）回顾植物的各个器官的结构和功能，让学生们自己总结并记住。
引导学生归纳出植物生长的基本过程，包括从种子发芽、根、茎、叶生长和变化的过程。
通过问题练习或小组讨论巩固学生对植物器官的理解。
六、课堂作业要求学生根据所学内容，设计一个小实验，观察和记录植物器官的生长过程。
七、教学反思通过本节课的教学，学生们对植物的器官有了初步的了解和认识。
植物组织培养技术第三章第四章植物器官的培养
营养器官的培养——茎尖的培养 营养器官的培养——茎尖的培养
1、 取材 、
取1-2㎝顶梢 ①直接取材：在生长旺盛、枝 直接取材：在生长旺盛、 条健壮、 条健壮、无病的母株上选生 长不久、杂菌污染少的顶梢 长不久、 （1－2cm）（取前可喷杀菌 cm）（取前可喷杀菌 ）（ 药，可顶芽或侧芽）。 可顶芽或侧芽）。 ②从试管苗获取。 从试管苗获取。
第一节 一、离体根的培养 意义： （一） 意义： ①生理代谢研究的优良实验体系 ②研究器官分化形态建成的良好体系 ③建立快速生长的根无性系 ④进行诱变育种 营养器官的培养
营养器官的培养——根的培养 营养器官的培养——根的培养
（二） 培养方法 1. 培养基选择 White培养基；2/3或1/2 MS 和 B5培养基 培养基； 或 培养基 培养基 注：离体根生长要求 提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好， 提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好，加入 B1、B6最重要 生长素对离体根影响不一致。 最重要， B1、B6最重要，生长素对离体根影响不一致。培养 温度25 27℃，暗光培养。 25－ 温度25－27℃，暗光培养。
离 体 根
脱分化培养基
愈 伤 组 织
再分化培养基
分 化 芽
再 生 植 株
植物器官的培养
二、茎尖的培养
•1.茎尖培养概念及类型 1.茎尖培养概念及类型 1. •2.茎尖培养方法及步骤 2.茎尖培养方法及步骤 2.
营养器官的培养——茎尖的培养 营养器官的培养——茎尖的培养
（一）茎尖培养概念及类型
茎尖培养： 茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行 无菌培养。 茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： 茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： 微茎尖培养: 微茎尖培养 带有1-2个叶原基的生长锥, 其长度不超过0.5mm 普通茎尖培养： 普通茎尖培养：较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽 这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便， 茎尖容易成活，成苗所需时间短
植物组织培养器官发生途径的特点
植物组织培养器官发生途径的特点
1. 植物组织培养器官发生途径就像搭积木一样神奇呀！你看香蕉的组织培养，不就是从一点点细胞开始，慢慢长出完整的器官。
它的特点之一就是能高效“复制”，哇塞，就像复印机一样精准呢！
2. 嘿，植物组织培养器官发生途径可有意思啦！比如说草莓的培育，能快速地产生新器官呢。
这特点不就像是变魔术一样，转眼间就有新东西出现啦，厉害吧！
3. 植物组织培养器官发生途径啊，那真的是很独特呢！就如同赛车在赛道上飞驰，速度超快。
像兰花，通过这个途径就能快速达成器官生长呢。
4. 哇哦，植物组织培养器官发生途径的稳定性也很强呢！就好比建房子，稳稳当当的。
比如玫瑰的组织培养，能稳稳地长出器官来，多棒呀！
5. 植物组织培养器官发生途径有时候真让人惊叹啊！像是有魔力一般。
比如在康乃馨的培养中，就能看到它精准地实现器官发生，这难道不神奇吗？
6. 哎呀呀，植物组织培养器官发生途径有个特点太酷啦！就好像有一双灵巧的手在塑造。
就像郁金香，通过这个途径把器官完美地塑造出来。
7. 植物组织培养器官发生途径的这个可再生性，真的绝了！这不就是超级英雄的能力嘛。
比如多肉植物，能不断通过这个途径让器官再生，简直不可思议！
8. 嘿呀，植物组织培养器官发生途径可有着超强的适应性呢！就跟打不死的小强一样顽强。
像绿萝的培养，无论啥环境都能很好地进行器官发生，牛不牛？
9. 总之呢，植物组织培养器官发生途径真的是太神奇啦，具有高效、稳定、可再生等超多特点，这些特点让植物的培养变得更容易和有趣呀！就像给植物赋予了新生命一样，太神奇啦！。
植物组织培养植物器官以及组织培养
（5）生根培养 刚形成的芽苗往往比较弱小，多数无根，此时可降
低或不加细胞分裂素浓度，提高生长素浓度，促进芽苗 生根，提高其健壮度。 （6）炼苗移栽
选择生长健壮，有3～5条根的生根苗进行炼苗，移 栽到疏松透气的基质中，注意保温、保湿、遮荫。当苗 完全成活后，再移向大田。
（四）果实和种子的灭菌
表皮有茸毛或蜡质，需在灭菌剂中加入几滴土温-80。 果实70%酒精浸泡数秒—0.1-0.2%氯化汞浸泡3-10min， （或1%次氯酸钠浸泡10-20min）—灭菌水冲洗3-5次—无 菌滤纸吸干—分割—接种。
植物组织培养植物器官以及组织培 养
初代培养物的建立
（一）无菌环境
培养基、接种器械、超净工作台、接种室环境、抗 生素物质（去除侵入组织内部的病菌。见表）
器官发生 体细胞胚胎发生
植物组织培养植物器官以及组织培 养
形态发生和植株再生
器官发生：芽或芽原基起源于培养组织中比较表 层的细胞，即外起源。根原基发生在组织较深处，即 内起源。两者之间一般没有什么联系，呈现单向极性。
胚状体发生：极大多数体细胞胚起源于单细胞， 形成的胚状体具有双极性，在其发育的早期阶段，在 方向相反的两端分化出茎端和根端，其维管组织与母 体植物或外植体的维管组织通常没有联系。胚状体维 管组织呈独立的Y形。
植物组织培养植物器官以及组织培 养
拟定培养方案
外植体预处理
外植体无菌接 种
启动培养
分化出芽、胚 状体或原球茎
继代增殖培养
生根培养
炼苗移栽
成活供生产使 用
培养基配制灭菌
植物组织培养的一般程序
植物组织培养植物器官以及组织培 养
第一节 植物器官和组织培养的基本程序
植物的器官和组织培养
二、植物根段培养
植物根段培养是指以植物的根切段为外 植体进行离体培养，再生完整植株的过程 。是研究根系生理代谢、器官分化及形态 建成的良好实验体系。培养方法与叶片培 养相似。
培养过程包括愈伤组织诱导、不定芽分 化、无菌苗的增殖与生根等。
大蒜根尖培养及植株再生
三、植物茎段培养
植物茎段培养是指对植物的带有定芽或 不定芽的外植体进行离体培养，再生完 整植株的过程。
利用灭菌剂对 外植体灭菌
无菌水冲洗 3-5次
1、茎尖、茎段、叶片的灭菌 2、根、块茎、鳞茎的灭菌 3、花蕾的灭菌 4、果实、种子的灭菌
二、初代培养物的建立
（一）无菌环境 （二）规范操作 （三）条件合适
三、形态发生和植株再生
外植体 愈伤组织
体胚途径
植株
具根茎的两极器官
器官化途径
先茎后根
单极器官
先根后茎
对培养的要求：成熟种子萌发培养所用培养基成 分简单，不需生长调节剂；未成熟种子萌发培养 则需要添加一定的营养成分和生长调节剂。若需 要其形成愈伤组织，需要相应的生长调节剂及营 养物质。
第四节 植物组织培养和脱毒苗的生产
一、植物分生组织(meristem culture)培养：
定义：是指对植物的分生组织进行离体培养 的技术，包括植物根尖、茎尖等顶端分生组 织和形成层组织的培养。其中茎尖培养广泛 应用于植物再生和脱病毒研究。
植物茎尖培养过程
➢茎尖离体培养可能出现的培养反应：
生长太慢 生长过旺，愈伤增多 生长正常
三、利用茎尖培养生产脱毒苗
脱毒苗生产的意义 茎尖脱毒机理 基本技术规程 影响脱毒效果的因素
1、脱毒苗生产的意义：
目前受病毒危害严重影响生产的有：
仙人掌植物器官培养技术实验报告
仙人掌植物器官培养技术实验报告一、实验目的：1．掌握无菌操作的仙人掌组织培养方法；2．通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法；3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；5．了解仙人掌细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对仙人掌细胞的全能性的理解。
二、实验原理：（一）仙人掌组织培养仙人掌组织培养是把仙人掌的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。
仙人掌的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。
这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。
（二）仙人掌细胞的全能性选择一个构建基块。
仙人掌细胞的全能性即是每个仙人掌的本细胞或性细胞都具有该仙人掌的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。
有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。
营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、仙人掌激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。
三、实验器材：高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。
四、实验材料：豌豆种子五、实验药品：药品、70% 酒精、0.1% 升汞、MS培养基、蒸馏水、NaOH、84消毒液、蔗糖、琼脂等。
植物器官和组织培养的基本程序
植物器官和组织培养的基本程序离体的植物器官和组织在人工培养条件下，通过不同的器官发生途径，形成体细胞胚或茎芽，进一步再生成完整植株。
因此，植物器官和组织培养的基本程序包括：无菌外植体的获得、初代培养物的建立、形态发生、植株再生以及培养产物的观察记载。
一、无菌外植体的获得从自然界和室内采集的植物器官和组织材料携带有各种微生物，这些污染源一旦进入培养容器中，造成培养基和培养材料污染，实验无法进行。
所以，污染是组织培养的一大障碍。
利用各种灭菌剂可以进行外植体的灭菌，但不同植物或同一植物不同器官和组织的带菌程度不同，所用灭菌剂的种类、浓度及灭菌方法也不尽相同。
(一)茎尖、茎段、叶片的灭菌灭菌前外植体用清水冲洗，茸毛较多的外植体用皂液洗涤后再用清水冲洗、用吸水纸吸干表面水分；将外植体浸泡在0.1%～0.2%的氯化汞溶液中2～10min，或先在70%～75%酒精中浸数秒，然后在10%次氯酸钙溶液中浸泡10～20min。
或先在70%～75%酒精中浸泡数秒，再在2%次氯酸钠溶液中浸泡15～30min进行灭菌；灭菌后倒掉灭菌液，无菌水冲洗外植体3～5次，置外植体于无菌滤纸上吸干表面水分，适当分割后接种。
(二)根、块茎、鳞茎的灭菌这类材料生长在土中，灭菌较困难，且挖取时易受损伤。
所以灭菌前应仔细清洗，对凹凸不平及鳞片缝隙处，需用软刷清洗，并切除损伤部位。
灭菌时应增加灭菌时间或增大灭菌剂浓度，如将外植体浸泡在0.1%～0.2%氯化汞溶液中5～12min，或在70%～75%酒精中浸数秒，然后用6%～10%次氯酸钠溶液浸5～20min进行灭菌。
灭菌后的操作步骤同上。
(三)花蕾的灭菌未开放花蕾中的花药为花被包裹，处于无菌状态，所以采摘后可直接灭菌。
灭菌时先在70%～75%酒精中浸蘸10～30s，然后在0.1%氯化汞溶液中浸泡3～10min或在1%次氯酸钠溶液中浸泡10～20min。
灭菌后的处理同上。
(四)果实、种子的灭菌这类材料有的表皮具有茸毛或蜡质。
植物组织培养技术
初代培养（ culture） 初代培养（primary culture）：指在组织 培养过程中，最初建立的外植体无菌培 养阶段。由于首批外植体来源复杂，携 带较多细菌，要对培养条件进行适应， 因此，初代培养一般比较困难。 继代培养（ subculture） 继代培养 （ subculture ） ： 在组织培养过 程中，当外植体被接种一段时间后，将 已经形成愈伤组织或已经分化根、茎、 叶、花等的培养物重新切割，转接到其 它培养基上以进一步扩大培养的过程称 为继代培养。
另一为药物和生物制品的工业生产，探索 天然药物生产工业化的途径是当前药物生产 的一个新方向，有可能用组织培养法来代替 全植物提取有效成分。组织培养应用在药学 方面的工作虽然历史不长，但发展很迅速， 它具有如下一些优点： 1．利用组织培养代替原植物的栽培以获得 所需的有效成分，达到产量高，成本低的目 的，还可节约土地。 2．除了应用于产生次生物质外，还可应用 于生物转化。例如烟草组织培养中蒂巴因去 甲基后可能生成吗啡。
目前中国已成功地将麦角菌、灵芝、猴 头菇等真菌进行工业化生产，高等植物组织 培养在工业化中的应用也正在研究。 总之，植物组织培养这一新技术在中草药 方面应用的前途是无限广阔的，它不仅有利 于探讨和阐明药用植物生理、遗传和成分生 物合成等一系列理论问题，而且一旦工业化 生产问题得到解决，将可以为防病治病做出 很大的贡献。
2 培养基的种类 MS培养基、B5培养基、White培养基、N6培养基等等。 3 培养基的配制 （1）混和培养基中的各成分 （2）融化琼脂 （3）调整pH为5.8 （4）分装 （5）灭菌 （6）放置备用
二组织培养操作的一般流程
1 2 3 4 5 6 器皿的洗涤 培养基的配制和灭菌 接种室及用具消毒 材料灭菌：70％酒精、氯化汞 接种 无菌培养
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（4）继代培养
用茎段切割法。•
继代培养可用MS0培养基。或用生长物质较
5)培养条件为暗光、25～27℃。
3．植株再生培养 第一步诱导形成愈伤组织。• 第二步在再分化培养基上诱导芽的分化、
是切取茎尖部分或茎尖分生组织部分，进行培养的过程。
这是组织培养中用得较多的外植体。因为茎尖分生区是三个分 区的主要部分。
㈡ 茎尖培养可分为微茎尖培养和普通茎尖培养。
一、离体根培养
2．无性系的建立和培养、应用 1)将种子进行表面消毒，在无菌条件下用湿布培养萌发，至根伸长1.0cm以上。 2)从根尖一端切取长1.2cm的尖端，接种于培养基中。3)培养物生长甚快，• 几天后发育 出侧根。待侧根生长约一周后，即切取侧根的根尖进行接种培养，如此反复，得到 离体根的无性系。 4)这种根可用来进行根系生理生化和代谢方面的实验研究。如营养选择吸收、根尖伸长 生长、生长素对伸长的影响等
1.微茎尖：指带有1-2个叶原基的生长锥，其长度不超过0.5mm。 2.普通茎尖：指取几mm到几十mm长的顶芽尖及侧芽尖。这里主要介 绍后者 ㈢ 特点：技术简单，• 操作方便，易成活和分化，成苗时间短。
㈣ 步骤如下：
1．取材：挑选洁净、无污染，生长不久的茎，从植物的茎、藤或匍匐枝 上切取2cm以上的顶梢。• 木本植物可事先对茎尖喷几次灭菌药剂。• 用 于普通茎尖培养。
生长正常等三种类型。
I 生长太慢：接种后茎尖不增大，只是茎尖逐渐
变绿，出现绿色小点，细胞逐渐老化而进入休
眠状态，• 或者逐渐变褐死亡。引起原因的是生
长素浓度太低，或是温度过低或过高。
（2）培养问题处理：
II 生长太快型：是接种后茎尖迅速增大，在茎
尖基部产生愈伤组织，• 并迅速增殖，而茎尖
不伸长，久之茎尖也形成愈伤组织，从而丧
营养吸收、生长和代谢的变化。
㈡ 应用：研究根系生理和代谢变化；也可由根细胞再生成植株，不 仅证明根细胞的全能性，也产生了无性繁殖系，用于生产实践 。
一、离体根培养
㈢ 培养方法： 1．培养基 用无机离子浓度低的White培养 基，也可用MS、B5等，但浓度为2/3或1/2。 White培养基配方为：硝酸钾80，硫酸镁720， 硫酸锰7，硫酸铜0.03，碘化钾0.75， Vpp0.5,VB6 0.1,VB1 0.1,甘氨酸3(mg/L)
【主要内容】
第一节 营养器官培养 一、离体根培养 二、茎尖培养 三、茎段培养 四、离体叶培养 第二节 生殖器官培养 一、花器官和种子培养 二、胚胎培 三、胚珠培养 第三节 植物器官组织培养常见问题及对策
第一节
一、离体根培养
营养器官培养
㈠ 离体根培养特点：因为根系生长快，• 代谢强，变异小，加上无菌， 不受微生物干扰，可根据研究需要，• 改变培养的成分来研究其
低的MS培养基。
也可边增殖边生根培养
（5）诱导生根
I） 用1/2 MS培养基， • 并只加入生长素类调节物质， 如NAA 、IBA等。注意浓度 II）也可将切下的新梢基部浸入50或100ppm的IBA溶液 处理4～8小时，然后转移到无激素的生根培养基中。 III）注意较高浓度的生长素对生根有抑制作用。
移栽前的工作
（1）培养瓶生壮苗 加入生长控制剂，如多效唑， B9， CCC，其 作用是使苗粗壮，叶绿素增加。
（2）炼苗
将瓶盖打开，打破无菌环境，湿度逐渐下降，光照逐 渐加强，使之形成新的功能强的根和叶片。一般炼苗时 间为10—30D。
失发育成苗的能力。引起原因一是生长素浓
度过高，引起细胞疯狂分裂而导致愈伤组织
的形成。• 二是光照太弱或温度太高。
（2）培养问题处理：
III 生长正常型是接种后茎尖基部稍增大并形成
少量愈伤组织，• 茎尖颜色逐渐变绿，并逐渐
伸长，叶原基发育成可见的小叶，进而形成
小苗。
（3）培养条件：
培养时每天光照可长一些，最长达16h/d，照度
5.移栽驯化
⑴ 指标：发现新梢基部生有较浓密的不定根，生长健壮而发达， 长度在1cm以内。 ⑵ 移栽：可先进行几天炼苗程，• 取出→洗培养基→栽入驯化器 皿—基质蛭石：珍珠岩：草炭土为1:1:0.5。 ⑶ 栽后管理：1)初期保持湿度。• 基质浇透水，床面浇湿，• 搭小拱 棚等，并且初期要常喷雾处理。 • 2)后期逐渐减少湿度。拱棚两端打开通风，减少喷水次数。• 以 后揭去拱棚，并控制水分。 ⑷ 温度管理上要掌握适宜的生根温度，最适宜的温度是16～20℃， 春季地温较低时，可用电热线来加温。 光照：初期弱光照，加盖遮阳网或报纸等，后期可直接利用自 然光照。
第六章
植物的器官培养
【学习目的要求】
1．一般掌握离体根培养的取材部位和培养基的选择。 2．掌握茎尖培养的种类和操作步骤。 3．掌握茎段培养中材料的选择、处理及培养基的调 整。 4．掌握离体叶片的培养步骤。 5．一般掌握胚胎培养的类型与各自的注意事项。 6.掌握如何防止培养过程中外植体的褐化和玻璃化。 7.掌握植物器官组织培养常见问题的原因及对策
2．消毒
将采到的茎尖切成0.5～1.0cm长，并将大叶除去，休眠芽预先
剥除鳞片。• 将茎尖置于流水冲洗干净，再在95%的酒精中处理30秒， 然后在稀释20倍的次氯酸钠中浸5～８分钟，最后用无菌水冲洗数次， 沥干后准备接种。 3．• 接种 为了减少污染，在接种前再剥掉一些幼叶，使茎尖为0.5cm大小 左右。• 用作快速繁殖。 注意：一要防褐化。接种时，不用锈刀，动作敏捷，• 随切随接，用 1～5%VC液浸泡处理。二要防干燥
4．培养
（1）培养基：• 采用MS培养基或略加修改，或补加其它物
质。也可用其它培养基如White,Heller等。 培养基中生长素是必须的，如2,4-D，IAA,• NAA等，但 是浓度不能太高，一般用0.1mg/L左右，若高易产生畸 形芽或形成愈伤组织。
（2）培养问题处理：
茎尖在培养过程中会出现生长太慢、• 生长太快和