非常好的线粒体膜电位分析JC-1- Thermo Fisher Scientific
JC 线粒体膜电位的检测方法
JC-1线粒体膜电位检测试剂盒产品组成：产品编号BB-4105-1 BB-4105-2 BB-4105-3规格20 assays 50 assays 100 assaysJC-1 100ul 250ul 500ul10×孵育缓冲液4ml 10ml 20ml产品简介：线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。
可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。
在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，488nm激发时的最大发射波长为590nm，可以产生红色荧光，在流式图上表现为FL1和FL2双阳性；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，488nm激发时最大发射波长为527nm，可以产生绿色荧光，形成流式图中所有细胞FL1均为阳性。
凋亡细胞则大多为FL1单阳性。
这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。
常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
贝博线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)可以快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化，可以用于早期的细胞凋亡检测。
试剂盒染料与其他的阳离子染料如DiOC6(3)和罗丹明123相比，特异性更高，对线粒体膜电位变化的特异性高于质膜电位变化，对线粒体去极化检测的检测一致性更好；红绿色荧光强度比率只受线粒体膜电位的变化，不受线粒体大小，形状，密度的差异干扰；检测灵敏度强，对细胞应激反应的微小异质性都能辨别；使用方法：悬浮细胞1、孵育缓冲液和JC-1染色工作液的配制：根据样品数按下列比例配制孵育缓冲液和JC-1染色工作液。
取100ul 10×孵育缓冲液加900ul无菌纯水稀释，混匀并预热至37℃，即成1×孵育缓冲液；在500ul 1×孵育缓冲液中加入5ul JC-1，涡旋混匀配成JC-1染色工作液；2、收集样本细胞以及阴性、阳性对照细胞。
组织线粒体膜电位检测方法
组织线粒体膜电位检测方法检测细胞内线粒体膜电位的方法可以帮助研究者了解线粒体功能和细胞代谢状态。
以下是几种常用的检测线粒体膜电位的方法：1. Rhodamine 123 染色法： Rhodamine 123 是一种荧光染料，它能够进入活性线粒体并与线粒体膜电位呈反比关系。
这种染料会在正常的线粒体内累积并发出荧光信号，可以通过荧光显微镜或流式细胞仪来观察和测量。
线粒体膜电位高时，Rhodamine 123 的荧光信号较强；而电位低时，荧光信号则减弱。
2. JC-1染色法： JC-1 是一种双荧光探针，可根据线粒体膜电位的变化而显示不同的荧光颜色。
在正常的线粒体膜电位较高时，JC-1 形成聚集体，产生红色荧光。
而当线粒体膜电位低时，JC-1 解聚，产生绿色荧光。
通过观察红色与绿色荧光的比例变化，可以间接反映线粒体膜电位的高低。
3. TMRM染色法： Tetramethylrhodamine methyl ester (TMRM) 是一种荧光染料，其进入细胞内后与活跃的线粒体结合并发出荧光信号。
其荧光强度与线粒体膜电位的高低成正比关系。
通过荧光显微镜或流式细胞仪来观察和测量 TMRM 的荧光信号，以评估线粒体膜电位的变化。
4. 光学显微测量法： 这种方法通常利用荧光探针或荧光指示剂结合光学显微技术，直接在细胞或组织水平上测量线粒体膜电位的变化。
可以使用适当的荧光显微镜系统和图像分析软件来观察和分析线粒体膜电位的变化。
需要指出的是，这些方法每一种都有其优缺点。
选择适合的方法应根据研究需求、实验条件和所研究的细胞类型来决定。
同时，使用这些荧光探针测量线粒体膜电位时，需要注意其特异性、灵敏度和操作的准确性，以确保获得可靠和准确的结果。
线粒体膜电位检测（JC-1）
线粒体膜电位检测（JC-1）线粒体膜电位检测（JC-1)大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△ψ 的破坏，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)是一种阳离子脂质荧光染料，可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。
JC-1有单体和多聚体两种存在状态，在低浓度时以单体的形式存在，高浓度时以多聚体形式存在，两者的发射光谱不同，但均可在流式细胞仪绿色（FL-1）通道检测出绿色荧光，JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内，正常健康线粒体的膜电位（△ψ）具有极性，JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内，并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体，多聚体发射光为红色荧光；可被流式细胞仪的红色（FL-2）通道检测到，而细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。
根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。
所需仪器或者试剂流式细胞仪或荧光显微镜、高速离心机、CO2培养箱、微量移液器1.5m L Microtube、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS、灭菌去离子水使用注意事项1．微量试剂取用前请离心集液。
2． JC-1避光保存及使用。
3．细胞培养的数量不宜超过1×106，否则细胞会产生自然凋亡影响检测。
4．对PH变化过于敏感的细胞建议用胎牛血清取代Buffer孵育染色及洗涤，或延长观测时间5．流式细胞仪检测线粒体膜电位变化受到多种因素的影响，因诱导剂、细胞株类型，作用时间的不同而荧光强度比例都有不同，因此没有通用标准的补偿设门指南，因此每个试验需设阴性及阳性对照组进行荧光补偿及设门。
线粒体膜电位检测方法
线粒体膜电位检测方法线粒体膜电位是细胞内线粒体膜的电压差，是维持细胞内稳态的重要参数之一。
线粒体膜电位的变化与细胞内能量代谢、细胞凋亡等生物学过程密切相关，因此对线粒体膜电位的检测具有重要的生物学意义。
本文将介绍几种常用的线粒体膜电位检测方法，希望能够对相关研究工作者提供一定的参考。
1. 荧光探针法。
荧光探针法是一种常用的线粒体膜电位检测方法。
通过使用荧光探针染色细胞，荧光信号的变化可以反映线粒体膜电位的变化。
常用的线粒体膜电位荧光探针包括JC-1、TMRE等。
这些荧光探针在不同的线粒体膜电位下会发生荧光信号的变化，可以通过流式细胞仪或荧光显微镜来检测和分析线粒体膜电位的变化。
2. 膜电位敏感染料法。
膜电位敏感染料法是另一种常用的线粒体膜电位检测方法。
通过使用膜电位敏感染料，如Rhodamine 123等，可以对线粒体膜电位进行实时监测。
这些膜电位敏感染料可以在不同线粒体膜电位下发生荧光信号的变化，通过荧光显微镜或荧光酶标仪等设备可以对线粒体膜电位进行定量检测和分析。
3. 膜电位探针法。
膜电位探针法是一种新型的线粒体膜电位检测方法。
通过使用膜电位探针，如刚果红等，可以对线粒体膜电位进行高灵敏度的监测。
这些膜电位探针可以在不同线粒体膜电位下发生颜色的变化，通过比色法或光谱法可以对线粒体膜电位进行定量检测和分析。
4. 膜电位记录仪法。
膜电位记录仪法是一种直接记录线粒体膜电位变化的方法。
通过使用膜电位记录仪，可以实时监测线粒体膜电位的变化情况。
这种方法对线粒体膜电位的变化有较高的时间分辨率和灵敏度，可以对线粒体膜电位的动态变化进行准确的记录和分析。
总结。
以上介绍了几种常用的线粒体膜电位检测方法，包括荧光探针法、膜电位敏感染料法、膜电位探针法和膜电位记录仪法。
这些方法各有特点，可以根据具体的实验要求和设备条件选择合适的方法进行线粒体膜电位的检测。
希望本文对相关研究工作者有所帮助，促进线粒体膜电位的研究和应用。
(完整版)线粒体膜电位检测(JC-1).
线粒体膜电位检测（JC-1)大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△ψ的破坏，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide)是一种阳离子脂质荧光染料，可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。
JC-1有单体和多聚体两种存在状态，在低浓度时以单体的形式存在，高浓度时以多聚体形式存在，两者的发射光谱不同，但均可在流式细胞仪绿色（FL-1）通道检测出绿色荧光，JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内，正常健康线粒体的膜电位（△ψ）具有极性，JC-1依赖于△ψ的极性被迅速摄入线粒体内，并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体，多聚体发射光为红色荧光；可被流式细胞仪的红色（FL-2）通道检测到，而细胞发生凋亡时，线粒体跨膜电位被去极化，JC-1从线粒体内释放，红光强度减弱，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。
根椐这一特征检测线粒体膜电位的变化。
所需仪器或者试剂流式细胞仪或荧光显微镜、高速离心机、CO2培养箱、微量移液器1.5m L Microtube、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS、灭菌去离子水使用注意事项1．微量试剂取用前请离心集液。
2． JC-1避光保存及使用。
3．细胞培养的数量不宜超过1×106，否则细胞会产生自然凋亡影响检测。
4．对PH变化过于敏感的细胞建议用胎牛血清取代Buffer孵育染色及洗涤，或延长观测时间5．流式细胞仪检测线粒体膜电位变化受到多种因素的影响，因诱导剂、细胞株类型，作用时间的不同而荧光强度比例都有不同，因此没有通用标准的补偿设门指南，因此每个试验需设阴性及阳性对照组进行荧光补偿及设门。
jc1线粒体膜电位流式
jc1线粒体膜电位流式
"jc1线粒体膜电位流式"可能是指使用JC-1染料进行流式细胞仪分析线粒体膜电位的方法。
JC-1染料是一种用于检测线粒体膜电位的荧光探针。
在线粒体膜电位正常的情况下，JC-1呈现聚集态，形成红色荧光；而在线粒体膜电位丧失或降低时，JC-1分散，形成绿色荧光。
这一性质使得JC-1可以用来评估细胞的线粒体功能。
流式细胞仪是一种广泛用于单个细胞分析的仪器。
通过使用适当的激光和荧光检测器，流式细胞仪可以同时分析成千上万个细胞的多个参数，包括细胞大小、形状、表面标记物和荧光探针的荧光等。
在进行JC-1线粒体膜电位流式分析时，一般的步骤如下：
1.染色：将细胞用JC-1染色，允许染料进入细胞内并与线粒体
结合。
2.洗涤：洗涤细胞，以去除多余的染料。
3.流式细胞仪分析：使用流式细胞仪对染色后的细胞进行分析。
通过设置适当的激光和检测器，可以同时获得JC-1的红色和绿
色荧光信号。
4.数据分析：通过流式细胞仪的软件或其他分析工具，对得到的
数据进行解析和进一步的统计分析。
这种方法可以用于评估细胞的线粒体膜电位，进而了解线粒体的功能状态。
常见的应用包括研究细胞凋亡、药物筛选和疾病研究等。
JC-1 线粒体跨膜电位检测
JC-1线粒体跨膜电位检测MCE JC-1 Kit 资料规格：1T, 1 mL (100 万细胞)用途：早期细胞凋亡检测设备：荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计或流式细胞仪通道：FITC 通道看绿色，PI 通道看红色指示：红绿荧光比例变化Phosphate-buffered saline (PBS) (1× )的配制a.将PBS (10×)温浴，直至完全融化。
b.按1:10 的比例，用dH2O 稀释PBS (10×)至PBS (1×)。
■细胞染色1) 悬浮细胞：a.以6 孔板为例，每孔用1 mL 培养基重悬100 万细胞，其他培养器皿以此类推。
b.阳性对照的设置：取适量CCCP (50 mM) 恢复至室温，阳性对照孔培养基中加入1 μL，其终浓度为50 μM，细胞培养箱37℃孵育5 分钟。
c.取适量JC-1 (200 μM) 恢复至室温，每孔培养基中加入10 μL JC-1 (200μM)，其终浓度为2 μM，细胞培养箱37℃孵育15-20 分钟。
d.37℃孵育结束后，400 g 4℃离心3-4 分钟，沉淀细胞。
弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
e.用PBS (1×) 洗涤2 次：加入2 mL PBS (1×) 重悬细胞，400g 4℃离心3-4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
重复洗1 次。
f.再用500 μL 的PBS (1×) 重悬细胞，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计或流式细胞仪分析(绿色荧光：Ex/Em=510/527 nm；红色荧光：Ex/Em=585/590 nm)。
2) 贴壁细胞：注：若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞，可先对贴壁细胞进行消化、收集，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
若用荧光显微镜或共聚焦显微镜检测，方法如下：a.以 6 孔板为例，每孔加入 1m L细胞培养液。
b.阳性对照的设置：取适量CCCP (50 mM) 恢复至室温，阳性对照孔培养基中加入1 μL，其终浓度为50 μM，轻摇混匀，细胞培养箱37℃孵育5 分钟。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)简介：JC-1是一种检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential) 的理想荧光探针。
在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物，产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，产生绿色荧光。
Leagene 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)(Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1)是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测，CCCP 作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 配制JC-1染色工作液：取适量JC-1 Stain (200×)，按照每50μl JC-1 Stain (200×)加入8ml ddH 2O 的比例稀释JC-1，剧烈Vortex 充分溶解并混匀JC-1。
然后再加入2ml JC-1 Buffer(5×)，混匀后即为JC-1染色工作液。
2、 设置阳性对照：推荐CCCP(10mM)按照1:1000的比例加入到细胞培养液中，稀释至10μM ，处理细胞20min 。
3、对于悬浮细胞：a. 取1～6×105细胞，重悬于0.5ml 细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
b. 加入0.5ml JC-1染色工作液，颠倒数次混匀。
细胞培养箱中37℃孵育。
c. 在孵育期间，按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入4ml 蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 Buffer(1×)，并放置于冰浴。
d. 37℃孵育结束后， 4℃ 离心，沉淀细胞。
弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
编号 名称CT0045 50TCT0045 100TStorage试剂(A): JC-1 Stain(200×) 3×100μl 5×100μl -20℃ 避光 试剂(B): JC-1 Buffer(5×) 40ml 80ml 4℃ 试剂(C): CCCP(10mM) 10μl 20μl -20℃ 试剂(D): ddH 2O 45ml90ml RT使用说明书1份e. 用JC-1 Buffer(1×)洗涤2次：加入1ml JC-1 Buffer(1×)重悬细胞，4℃离心，沉淀细胞，弃上清。