说明文：制作蟾蜍骨骼标本
青蛙骨骼标本制作步骤
青蛙骨骼標本製作步驟1. 先將死亡的青蛙去皮及大塊肌肉，尤其是腿部肌肉。
2. 將去皮肉的青蛙放入盛有熱水的鍋子中，繼續煮，直骨頭上殘留的肉塊變軟，並且很容易剝離去除。
3. 將已經熟爛的青蛙撈出來，小心的剔除肉屑，不必保留關節韌帶。
將剔乾淨的骨骼放入肥皂水中，去除油脂。
如果青蛙很大，例如牛蛙，建議將身體、右手右腳、左手左腳分別註明浸泡在不同的杯子內，以免浸泡後化開，左右拼錯。
4. 每天換肥皂水一次，並剔除殘肉，約浸泡1~3天，視青蛙大小及情況而定，直到乾淨沒有殘留的肉屑即可。
換水時小心不要倒掉小骨頭，尤其是趾骨，軟骨不要泡太久，可能會溶化掉。
5. 將蛙骨骼泡在3％的雙氧水，漂白用，所以不要泡太久，約12~20分鐘。
尤其是軟骨部分，稍微泡一下即可，否則會溶掉。
6. 將乾淨潔白的蛙骨，根據圖片姿勢及相對位置，仔細用膠水黏起來。
若用快乾膠，小心「一失足成千古恨」，想清楚看清楚，再黏上去。
通常脊椎骨的背面和腹面經常會弄錯，背面有供肌肉附著的神經脊突出，腹片則是平的。
脊椎通常會散開，在拼回去時，小心各個脊椎的相對位置，不要將第一個寰椎和最後一個薦椎弄混了。
胸骨的烏喙骨及鎖骨位置也經常會被弄錯，請小心比對圖片。
拼骨骼的時候，請藉此機會認識各個骨骼的名稱、位置、功能及形狀，這樣比較不會弄錯。
7. 將成坐姿的蛙骨的各個部位拉線加以標示，這時可以發揮你的創意，但以清楚易懂為佳。
不建議將牠們拼成怪模怪樣，畢竟牠們的犧牲是為了科學理由，不是娛樂。
8. 不建議將蛙骨上色，以保持原貌。
可以塗透明漆或透明指甲油，增加光澤。
9. 將完成的蛙骨標本放入盒子類，善加保存，不過骨骼通常會隨著時間變黃。
製作骨骼標本可分為三種方法：1. 乾製骨骼(一般的之脊椎動物骨骼)2. 浸製骨骼(如鯊魚和鱘魚的軟骨)3. 透明骨骼(幼小的動物和胚胎)主要分為四個步驟：去皮去肉去內臟修除骨骼上附著的結締組織襪(如腱及肌膜等)脫脂及漂白裝置及整形1. 先把青蛙殺死(不要傷害骨骼)，然後把青蛙放進熱水中煮數分鐘，使肉軟化。
青蛙骨骼标本制作
（1）处死:选择体形而完整的青蛙放入标本缸中用乙醚或三氯甲烷深度麻醉致死。
（2）剔除肌肉：用剪刀剪开腹部皮肤，注意不要剪坏剑胸软骨。
然后向两侧剪开，分别向前后四肢各方向拉下皮肤，要小心不要拉断指、趾骨。
剪开体壁，取出全部内脏。
把左右上肩胛骨的肌肉从第二、三脊椎骨横突上剥离，左右前肢与肩带之间不要分开，仍借助韧带保持相连。
剔除前肢肌肉时，用镊子夹住前肢并放入开水中煮烫，使肌肉发紧变硬，利于剔除。
但时间要短，避免骨连接处分离。
尤其是指、趾骨部位，只需在开水中蘸一下就可以，否则韧带收缩，指、趾骨变弯曲，给整形带来困难。
去除指骨肌肉时，也可先将指骨摆放在载玻片上，用细线缠紧再放入开水中，以防卷曲或脱落。
后肢在股骨与腰带连接处取下来，按前肢处理方法剔除肌肉。
头部和脊柱先在开水中稍微煮下，然后剔除其肌肉。
去掉眼球，从枕骨大孔处用镊子清除脑髓，并用清水冲洗。
在骨骼上，不易剔除的碎小肌肉，可用刷子刷洗，直到清除干净为止。
对薄小的舌骨，应该仔细清除肌肉，然后夹在二片载玻片之间，用线缠紧，自然干燥。
（3）脱脂：把骨骼浸泡在0.5%～0.8%氢氧化钠溶液中1～3天，去除一些难以除去的肌肉，脱去骨骼中的油脂。
在浸泡过程中应经常检查，以防骨骼脱散。
然后取出在清水中漂洗干净。
（4）漂白：用0.5%～1%的过氧化氢漂白30分钟，或者用1%～3%的漂白粉水溶液浸泡1～3天。
浸泡时间应灵活掌握，主要看骨骼是否已经变白，变白后马上捞出，否则，骨面会被腐蚀而变得粗糙，失去骨骼的光泽。
捞出的骨骼用清水冲洗干净并晾干。
（5）整形和装架：取一块泡沫塑料板，将骨骼放在上面。
整形时，把躯体和四肢的姿态整理好并按骨骼相应的位置用大头针固定，以免在干燥过程中变形。
离散的骨骼可以用乳胶将其粘连起来。
两块上肩胛骨就附着在第二、三椎骨横突的两侧，状况略微抬起呈倾斜状，前肢的腕骨和后肢的趾骨可用乳胶粘在泡沫板上。
骨骼标本制成后，最好装入标本盒中保存。
————刘凌云，郑光美.1998.《普通动物学实验指导》（第二版）[M].高等教育出版社，143-144。
快速制作蟾蜍坐骨神经标本的一种方法
1、破坏蟾蜍的脑和脊髓
从箱子里取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。
左手握蟾蜍，用食指按压其头部使其尽量前俯，右手用大头针自枕骨大穴垂直插入，向前刺入颅腔，左右搅动，毁坏其脑组织；将探针回撤向后刺入脊椎管，反复提插毁其脊髓。
如果蟾蜍四肢酸软，呼吸消失，说明其脑和脊髓被破坏的差不多，否则继续上述方法进行。
2、剪除蟾蜍的躯干上部和其内脏
沿着蟾蜍的上肢处将蟾蜍的头部剪去，继而沿脊柱两侧剪开腹壁，这时的内脏全部下垂，减除内脏。
此时，你可以在脊柱的两旁看见坐骨神经，注意剪除的过程中不要损伤坐骨神经！
3、剥皮
用镊子夹紧脊柱的断端，右手捏住蟾蜍的皮肤边缘，逐步向下剥离皮肤，将标本置于盛有任氏液的培养皿中。
4、制备坐骨神经的小腿标本
用粗剪刀沿中线将脊柱剪成左右两半，从耻骨联合处剪开两侧的大腿，在这期间，注意不要损伤了坐骨神经。
将分离的标本放到盛有任氏液的培养皿中。
取一侧的下肢用大头针固定在蛙板上，用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经，于近脊柱侧结扎。
再循着坐股神经沟分离暴露出坐骨神经的大腿部分，直至胫腓神经分叉处。
自上向下剪断所有坐骨神经的分支，游离出坐骨神经。
将游离的坐骨神经搭于腓肠肌上，自膝关节周围向上剪除所有的大腿肌肉，在股骨的中部剪去上段股骨，保留部分即为坐骨神经小腿标本。
5、完成坐骨神经-腓肠肌标本
将上面所做的标本在跟腱处结扎后剪断，并逐步游离腓肠肌至膝关节处，将小腿的其余部分全部剪掉，这样就制成了坐骨神经-腓肠肌标本。
一种新的青蛙(蟾蜍)骨骼标本制作方法
作者： 马秀杰 高晨光 张耀安
作者机构： 白城师专 137000
出版物刊名： 白城师范学院学报
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摘要： 生物技术中,青蛙骨骼标本的制作一直倍受人们的青睐。
但由于其制作时间较长,所以很多教师无法将其带入课堂,亲自指导学生操作。
其问题关键在于腐蚀剂氢氧化钠使用浓度。
其一般使用浓度为0.6％,浸泡标本时间为13天。
有人将氢氧化钠使用浓度提高到6％,浸泡标本时间缩短到4小时,但时间还略长。
笔者经过多次摸索实验,发现了一种新的制作方法,使浸泡。
青蛙骨骼标本制作步骤
青蛙骨骼標本製作步驟1. 先將死亡的青蛙去皮及大塊肌肉，尤其是腿部肌肉。
2. 將去皮肉的青蛙放入盛有熱水的鍋子中，繼續煮，直骨頭上殘留的肉塊變軟，並且很容易剝離去除。
3. 將已經熟爛的青蛙撈出來，小心的剔除肉屑，不必保留關節韌帶。
將剔乾淨的骨骼放入肥皂水中，去除油脂。
如果青蛙很大，例如牛蛙，建議將身體、右手右腳、左手左腳分別註明浸泡在不同的杯子內，以免浸泡後化開，左右拼錯。
4. 每天換肥皂水一次，並剔除殘肉，約浸泡1~3天，視青蛙大小及情況而定，直到乾淨沒有殘留的肉屑即可。
換水時小心不要倒掉小骨頭，尤其是趾骨，軟骨不要泡太久，可能會溶化掉。
5. 將蛙骨骼泡在3％的雙氧水，漂白用，所以不要泡太久，約12~20分鐘。
尤其是軟骨部分，稍微泡一下即可，否則會溶掉。
6. 將乾淨潔白的蛙骨，根據圖片姿勢及相對位置，仔細用膠水黏起來。
若用快乾膠，小心「一失足成千古恨」，想清楚看清楚，再黏上去。
通常脊椎骨的背面和腹面經常會弄錯，背面有供肌肉附著的神經脊突出，腹片則是平的。
脊椎通常會散開，在拼回去時，小心各個脊椎的相對位置，不要將第一個寰椎和最後一個薦椎弄混了。
胸骨的烏喙骨及鎖骨位置也經常會被弄錯，請小心比對圖片。
拼骨骼的時候，請藉此機會認識各個骨骼的名稱、位置、功能及形狀，這樣比較不會弄錯。
7. 將成坐姿的蛙骨的各個部位拉線加以標示，這時可以發揮你的創意，但以清楚易懂為佳。
不建議將牠們拼成怪模怪樣，畢竟牠們的犧牲是為了科學理由，不是娛樂。
8. 不建議將蛙骨上色，以保持原貌。
可以塗透明漆或透明指甲油，增加光澤。
9. 將完成的蛙骨標本放入盒子類，善加保存，不過骨骼通常會隨著時間變黃。
製作骨骼標本可分為三種方法：1. 乾製骨骼(一般的之脊椎動物骨骼)2. 浸製骨骼(如鯊魚和鱘魚的軟骨)3. 透明骨骼(幼小的動物和胚胎)主要分為四個步驟：去皮去肉去內臟修除骨骼上附著的結締組織襪(如腱及肌膜等)脫脂及漂白裝置及整形1. 先把青蛙殺死(不要傷害骨骼)，然後把青蛙放進熱水中煮數分鐘，使肉軟化。
青蛙骨骼标本制作步骤(精)
青蛙骨骼標本製作步驟：
1.以解剖剪、解剖刀、尖頭鑷子、解剖針剔除肌肉
2.將剔完肉的青蛙置入鍋中，以沸水煮約三分鐘（煮到使用鑷子就可以將肉撕下）
3.以尖頭鑷子將熟肉剔除（脊椎骨需拆開每一節，用解剖針清除管中心髓質），將右前肢、左前肢、
右後肢、左後肢、頭部、胸骨、脊椎、其他八部份，分別以雙層紗布包裹、繫緊（因為剔熟肉時，各部份骨骼容易脫開，以免拼骨骼時混在一起，不易分辨）
4.確定剔除乾淨（若不乾淨或當天無法完成，可將骨骼泡水，保鮮膜封住）
※切記：放在教室或家中，要每天換水以免發臭（善用尖頭鑷子剔肉）
5.將蛙骨置放肥皂水中泡，去油脂（每天要換肥皂水一次，大約須泡3-5天）
6.取出蛙骨，並用清水將肥皂水沖洗掉
7.將沖洗乾淨的蛙骨，置入3%雙氧水中漂白數小時（雙氧水可自行到藥房購買）
※切記：H2O2會腐蝕蛙骨，不宜泡過久（需放在身邊隨時觀察）
8.取出漂白過的蛙骨，置陰涼處風乾，然後將蛙骨以三秒膠及鐵絲架好（如圖示，可參考樣本）
9.將做好的蛙骨標本寫上班級、組別、姓名、學號後，交給老師評分
※更詳細的青蛙構造圖：國立竹北高中→教學網頁→生物科→實驗→青蛙骨骼。
蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本的制备
蟾蜍的坐骨神经—腓肠肌标本的制备及神经干的性质实验报告实验名称蛙的坐骨神经—腓肠肌标本的制备及神经干的性质实验目的要求学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本以及腓肠肌标本制备的方法；学习生理学实验基本的组织分离技术；观察刺激强度，刺激频率与肌肉收缩反应的关系；掌握引导神经干复合动作电位与测定其传导速度的基本原理与方法。
实验材料，仪器，试剂蟾蜍、常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、玻璃分针等）、烧杯、培养皿、纱布、棉线、粗剪刀、蛙板、污物缸、滴管、生理信号采集系统、张力传感器、铁架台、计算机、任氏液等。
实验原理两栖类动物的一些基本生命活动与生理功能与温血动物相似，而其离体组织所需要的生活条件比较简单，易于控制与掌握。
因此在生理实验中常用蟾蜍的神经肌肉标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的规律以及骨骼肌收缩的特点等。
任氏液是—种比较接近两栖动物内环境的液体，可以用来延长青蛙心脏在体外跳动时间、保持两栖类其他离体组织器官生理活性等。
腓肠肌由许多的纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。
当刺激强度过小时，不应期肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。
而能引起肌肉发生收缩的最小刺激强度，为阈刺激，但全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。
这时，即使再加大刺激强度，肌肉的收缩强度也不会随之而增大。
可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激。
肌肉组织对于一个阈上强度的刺激，发生一次迅速地收缩反应，即单收缩。
单收缩的过程分为三个时期，潜伏期、收缩期、舒张期。
刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。
在其他条件不变情况下，不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。
若刺激频率较小，两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩与舒张所持续的时间（即单收缩）时，肌肉收缩表现为一连串的单收缩；若增大刺激频率，使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间，而小于单收缩时，肌肉呈现不完全强直收缩；若继续增加刺激频率，使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间，肌肉则表现出完全强直收缩。
青蛙骨骼染色透明标本的制作及应用
文章编号：１００３－８５０７（２００８）０９－１７００－０２中图分类号：Ｒ３２２－３３文献标识码：Ａ【实验技术及其应用】青蛙骨骼染色透明标本的制作及应用刘万胜，黄明辉，刘力华，郑登秀摘要：［目的］不通过一般解剖方法直接观察青蛙体内整体骨骼的形态和位置关系。
［方法］选活蛙经去内脏（去皮或不去皮）或清洁消化道后用９５％酒精或５％～１０％福尔马林液固定，然后脱水、脱脂、再脱水和染色。
［结果］使用化学药品和方法可以将青蛙骨骼染色制成透明标本，达到一般解剖方法难以观察到的青蛙整体骨骼的位置关系和形态。
［结论］本法可广泛应用于实验教学和陈列展览。
关键词：青蛙；透明标本；制作及应用ＰＲＯＤＵＣＴＩＯＮＡＮＤＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＤＹＥＩＮＧＴＲＡＮＳＰＡＲＥＮＴＳＰＥＣＩＭＥＮＯＦＦＲＯＧ’ＳＳＫＥＬＥＴＯＮＬＩＵＷａｎ－ｓｈｅｎｇ，ＨＡＮＧＭｉｎｇ－ｈｕｉ，ＬＩＵＬｉ－ｈｕａ，ｅｔａｌ．（ＹｏｎｇｚｈｏｕＶｏｃａｔｉｏｎａｌＴｅｃｈｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｙｏｎｇｚｈｏｕ４２５００６，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｎｏｔｔｈｒｏｕｇｈｇｅｎｅｒａｌａｎａｔｏｍｉｃｍｅｔｈｏｄｓｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｆｏｒｍａｎｄｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｆｒｏｇ’ｓｓｋｅｌｅｔｏｎ．［Ｍｅｔｈｏｄｓ］Ｓｅｌｅｃｔｅｄａｌｉｖｅｆｒｏｇ，ａｂｓｃｉｓｅｄｉｔｓｉｎｎａｒｄｓ（ｆｌａｙｅｄｏｒｎｏｔｆｌａｙｅｄ）ｏｒｍａｄｅｉｔｆｉｘｅｄｗｉｔｈ９５％ａｌｃｏ－ｈｏｌｏｒ５％－１０％ｆｏｒｍａｌｉｎａｆｔｅｒｃｌｅａｎｅｄｔｈｅａｌｉｍｅｎｔａｒｙｃａｎａｌ，ｔｈｅｎｄｅｗａｔｅｒｅｄ，ｄｅｆａｔｔｅｄ，ｄｅｗａｔｅｒｅｄｉｔｏｎｃｅｍｏｒｅａｎｄｄｙｅｄｉｔ．［Ｒｅｓｕｌｔｓ］Ｕｓｉｎｇｃｈｅｍｉｃａｌｓａｎｄｍｅｔｈｏｄｓｃａｎｄｙｅｆｒｏｇ’ｓｓｋｅｌｅｔｏｎａｎｄｍａｋｅｉｔｔｒａｎｓｐａｒｅｎｔｓｐｅｃｉｍｅｎ，ｔｈｅｎｃａｎｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｒｅｌａ－ｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｆｏｒｍａｎｄｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｆｒｏｇ’ｓｓｋｅｌｅｔｏｎｉｎｓｔｅａｄｏｆｇｅｎｅｒａｌａｎａｔｏｍｉｃｍｅｔｈｏｄｓ．［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］Ｉｔｓｈｏｕｌｄｂｅｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｅａｃｈｉｎｇａｎｄｅｘｐｏｓｉｔｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｆｒｏｇ；Ｔｒａｎｓｐａｒｅｎｔｓｐｅｃｉｍｅｎ；Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ青蛙骨骼染色透明标本，可显示采用一般解剖方法难以观察清楚的结构。
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今天参加了一个课外生物活动，活动中领队要求我们一组人合作，做一个蟾蜍骨骼标本。
活的蟾蜍，抓在手中，看着它那鼓鼓的眼睛和有疙瘩的皮肤，真是有点吓人。
但是，你去解剖它，做成骨路标本，还是很有趣的呢。
如果你有兴趣的话，我来介绍一下做法。
第一步；处死。
办法有两种：
一种是用乙醚麻醉它；另一种是用探针破坏它的中枢神经--先用刀在它的胸部划t形，划一横时要注意不能弄坏胸骨，接着用探针在脊椎里多钻几下，钻的时候要轻，免得弄断脊柱。
这时，被破坏了中枢神经的蟾蜍就已经不省人事了。
第二步：
剥皮。
先从胸部向下撕，再从头向背部往下撕，这样便完好地剥下了一张皮。
如果任意去撕，就会撕坏皮下的骨骼，这样做出来的标本就不完整了。
第三步：
除内脏。
用刀剖腹，小心地取出内脏。
再用水洗洗它的身躯，这样蟾蜍身体内部解剖后的结构就一目了然了。
第四步：
去肌肉。
将洗净的蟾蜍放入开水中烫5分钟，取出后除去大块的肌肉。
接着先用铜丝把脊椎穿好，再剔肉，免得剔好后，脊椎骨对不起来。
要特别注意的是，在除去前后四个爪子的碎肉时要加倍小心，不要把爪子弄散了。
还要注意的是，头骨要完整，不要拆散。
但两块骨头下有黑色物质，要先取下骨头，挑去黑物，然后用胶把两块骨头粘好。
就这样，蟾蜍的骨骼标本做好了，看着这标本，心中涌出的成就感真不小。
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