植物生理生化实验
植物生理生化指标测定
植物生理生化指标测定植物生理生化指标测定是研究植物生长发育和适应环境的重要手段之一、通过测定植物的生理生化指标，可以了解植物的代谢活动、光合作用强度、水分状况、营养状况等，从而为植物生长调控、抗逆性研究提供依据。
下面将从光合作用测定、水分状况测定和营养状况测定三个方面对植物生理生化指标测定进行详细介绍。
光合作用是植物生长发育的重要过程之一，也是植物蓄积养分和能量的主要途径。
常用的光合作用测定指标有净光合速率、光饱和点、光补偿点和光抑制。
净光合速率是指单位时间内单位叶面积净光合产物的量，可以通过测定二氧化碳吸收量和氧气释放量来计算。
光饱和点是指植物的净光合速率达到最大值时的光强度，可以通过测定不同光强下的净光合速率来得出。
光补偿点是指净光合速率和呼吸速率相等的光强度，可以通过测定不同光强下的净光合速率和呼吸速率来确定。
光抑制是指过高或过低的光强度对植物光合作用的影响，可以通过测定光强对净光合速率的影响来评价。
水分状况是植物生理生化指标测定的重要方面之一，也是植物生长发育和适应环境的关键因素之一、常用的水分状况测定指标有相对含水量、蒸腾速率和水分利用效率。
相对含水量是指植物组织中的相对含水量与干重的比值，可以通过称量植物组织的湿重和干重来计算。
蒸腾速率是指单位时间内单位叶面积水分蒸腾的量，可以通过测定植物的蒸腾量和叶面积来计算。
水分利用效率是指植物单位干物质产量所需要的水分量，可以通过测定植物的干物质产量和水分消耗量来计算。
营养状况是植物生理生化指标测定的另一个重要方面，也是植物生长发育和代谢活动的基础。
常用的营养状况测定指标有叶绿素含量、叶绿素荧光参数和土壤养分含量。
叶绿素含量是评价植物叶绿素合成和叶绿素降解的指标之一，可以通过植物叶片中叶绿素的提取和测定来得出。
叶绿素荧光参数是评价光能利用效率和光能转化效率的重要指标之一，可以通过叶绿素荧光仪来测定。
土壤养分含量是评价土壤中不同营养元素含量的指标之一，可以通过土壤样品的提取和测定来得出。
《植物生理生化》实验指导
令狐采学《植物生理生化》实验指导（适用专业：农学类相关专业）黑龙江八一农垦大学植物科技学院生理生化教研室目录生物化学实验部分：实验一、氨基酸的纸层析 (1)实验二、蛋白质含量测定（设计性实验） (5)实验三、酶的基本性质 (7)实验四、维生素C含量的测定 (12)实验五、还原糖和总糖的测定 (14)实验六、淀粉酶活性的测定 (17)实验七、脂肪浸提——索氏脂肪浸提法 (20)实验八、一种简单实用的提取植物DNA的方法 (22)实验九、聚丙烯酰胺电泳法测定大麦、小麦种子纯度 (24)实验十、淀粉酶的诱导、提取和活性测定（综合性实验） (26)植物生理学实验部分:实验一、植物组织水势的测定（小液流法） (28)实验二、植物伤流量的测定 (30)实验三、根系活力的测定 (31)实验四、蒸腾强度的测定 (35)实验五、叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定（综合性实验） (37)实验六、光合强度的测定（改良半叶法） (39)实验七、呼吸强度的测定 (41)实验八、植物抗逆性的鉴定（电导仪法） (43)实验九、植物缺水程度的测定（脯氨酸法） (45)生物化学实验部分实验一氨基酸的纸层析一、目的：层析分析法已广泛用于氨基酸、核酸、激素、维生素、糖类的分离与分析。
其优点是能够分离与分析在组成、结构及性质上极为相似的物质；设备简单，操作容易，样品用量很少，结果也较明确。
本实验的目的在于要求学生掌握纸层析法的一般原理和操作技术。
二、原理：纸层析法是以滤纸作为支持物的分配层析法。
分配层析法是利用物质在两种不同混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离的目的。
通常用α表示分配系数。
在一定条件下，一种物质在某溶剂系统中的分配系数是一个常数。
）溶质在流动相的浓度（）溶质在静止相的浓度（l s C C =α 层析溶剂是选用有机溶剂和水组成的。
由于滤纸纤维素对水有较强的亲和力（纸上有很多-OH 基与水以氢键相连），吸附很多水分子，一般达滤纸重的22%左右（其中约有6%的水与纤维素结合成复合物），因此使这一部分水扩散作用降低形成静止相；而有机溶剂与滤纸的亲和力很弱，可以在滤纸的毛细管中自由流动，便形成流动相。
植物生理生化实验
合分析。 1000ml 量筒1个；
实验 玉米苗水溶液培养和缺素培养及症状观察 实验 玉米苗水溶液培养和缺素培养及症状观察 ４、刚移栽的苗不宜直接放在阳光下，要等植株恢复正常生长后才能移置光照下培养； １、严防试剂污染和混杂; 第一轮需要完成的实验内容： 实验原理：
用植物必需的矿质元素按一定比例配成营养液来培养植物，可使植物长得与土壤中一样好。
植物生理生化实验
第一轮需要完成的实验内容： 实验 缺素培养 实验 膜透性鉴定 实验 小液流法测定植物组织 水势
第二轮需要完成的实验内容：综合性实验
(一) 目的要求： 利用《植物生理学》课堂理论—植物的矿质营养、植物的 光合作用、植物的逆境生理等相关知识综合分析“玉米或 烟草等植株完全液培养和缺素培养苗的生理差异”。 (二) 需要完成的实验内容： 实验四 植物水溶液和缺素培养症状观察,TTC法测根系活
植物材料：
高活力玉米苗（去胚乳）
仪器设备：
烧杯；移液管5ml、1ml若干支；1000ml 量筒1个；陶瓷 培养缽7个；精密pＨ试纸（pＨ5～6）或广泛pＨ指示剂；玻 璃棒；吸球；棉花。
试剂 ：
硝酸钾；硫酸镁；磷酸二氢钾；硫酸钾；硫酸钠；磷酸二氢 钠；硝酸钠；硝酸钙；氯化钙；硫酸亚铁；硼酸；氯化锰；
6.实验开始后每两天观察一次，并用精密pH试纸检查培养液 的pH值，如高于6，应用稀盐酸调整到5～6之间。 为了使根系氧气充足，每天定时向培养液中充气，或在盖与 溶液间保留一定空隙，以利通气。培养液每隔一周需更换一 次。注意记录缺乏必需元素时所表现的症状和最先出现症状 的部位。待各缺素培养液中的幼苗表现出明显症状后，可把 缺素培养液一律更换为完全培养液，观察症状逐渐消失的情 况，并记录结果。
玉米生理生化实验报告
一、实验目的1. 探究玉米在不同生长阶段的主要生理生化特性。
2. 分析玉米光合作用、呼吸作用、水分利用效率等生理指标。
3. 通过实验了解玉米种子萌发、幼苗生长及植株发育过程中的生理生化变化。
二、实验材料与方法1. 实验材料：玉米种子（品种：郑单958）、生长培养基、蒸馏水、NaOH溶液、碘液、斐林试剂等。
2. 实验方法：（1）种子萌发实验：将玉米种子浸泡在蒸馏水中，置于恒温培养箱中，定期观察种子萌发情况，并记录萌发率。
（2）幼苗生长实验：将萌发的玉米幼苗移栽至生长培养基中，定期测量幼苗株高、叶面积等生长指标。
（3）生理生化指标测定：a. 光合作用：利用光合仪测定玉米叶片的光合速率、蒸腾速率等指标。
b. 呼吸作用：利用呼吸仪测定玉米叶片的呼吸速率。
c. 水分利用效率：通过测定玉米植株的水分含量和光合速率，计算水分利用效率。
d. 植物激素含量：利用酶联免疫吸附法（ELISA）测定玉米叶片中的生长素、细胞分裂素等植物激素含量。
e. 酶活性测定：利用比色法测定玉米叶片中过氧化物酶、超氧化物歧化酶等酶活性。
三、实验结果与分析1. 种子萌发实验：- 种子萌发率随浸泡时间延长而增加，浸泡时间为24小时时，种子萌发率最高。
- 种子萌发过程中，呼吸速率和水分含量逐渐增加，表明种子在萌发过程中需要消耗大量能量和水分。
2. 幼苗生长实验：- 玉米幼苗在生长培养基中生长良好，株高、叶面积等生长指标随培养时间延长而逐渐增加。
- 幼苗生长过程中，叶片颜色逐渐由黄绿色转变为绿色，表明光合作用逐渐增强。
3. 生理生化指标测定：- 光合作用：玉米叶片的光合速率和蒸腾速率随光照强度增加而增加，表明玉米具有较强的光合作用能力。
- 呼吸作用：玉米叶片的呼吸速率随温度升高而增加，表明玉米在较高温度下呼吸作用较强。
- 水分利用效率：玉米水分利用效率较高，表明玉米具有较强的水分利用能力。
- 植物激素含量：玉米叶片中生长素和细胞分裂素含量较高，表明玉米具有较强的生长调节能力。
植物生理生化实习报告
植物生理生化实习报告一、实习目的与任务本次植物生理生化实习的主要目的是通过实践活动，加深我们对植物生理生化基本理论的理解和记忆，提高我们运用所学知识解决实际问题的能力。
实习任务包括：1. 学习并掌握植物生理生化实验的基本方法和技能；2. 观察并分析植物生理生化的实验现象，理解实验原理；3. 掌握实验数据的基本处理方法，提高我们的科学研究能力。
二、实习内容与过程1. 植物生长激素的检测我们通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测了植物生长激素赤霉素（GA）的含量。
实验中，我们首先制备了标准GA溶液和样品溶液，然后按照ELISA试剂盒的说明书进行实验操作。
最后，通过酶标仪检测吸光度（OD）值，计算出样品中GA的含量。
实验结果表明，植物生长激素GA在植物生长和发育过程中起着重要作用。
2. 植物抗逆性生理指标的测定为了研究植物的抗逆性，我们测定了植物叶片中的脯氨酸（Pro）和丙二醛（MDA）含量，以及超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）的活性。
实验结果显示，在逆境条件下，植物体内Pro和MDA含量增加，而SOD和POD活性升高，表明植物具有一定的抗逆性。
3. 植物光合生理参数的测定我们采用光合仪测定了植物的光合速率、蒸腾速率和气孔导度等生理参数。
实验中，我们首先将植物置于不同光照强度和CO2浓度条件下，然后测定各参数的变化。
实验结果表明，植物的光合生理参数受到光照强度和CO2浓度的影响。
4. 植物体内营养物质含量的测定我们通过光谱分析法测定了植物体内蛋白质、淀粉和脂肪等营养物质的含量。
实验中，我们首先将植物样品进行研磨和提取，然后采用光谱分析仪测定样品的光谱强度，根据标准曲线计算出营养物质含量。
实验结果表明，植物体内的营养物质含量与其生长发育阶段和环境条件密切相关。
三、实习收获与体会通过本次实习，我们不仅学到了许多植物生理生化的实验方法和技能，还加深了对实验原理和实验现象的理解。
在实验过程中，我们学会了如何正确处理实验数据，提高了我们的科学研究能力。
《植物生理生化》实验教学大纲-洪永聪
《植物生理生化》实验教学大纲实验一钾离子对气孔开度的影响（3学时）一、实验目的通过本实验的观察验证气孔运动的无机离子吸收学说，通过与钠离子、蒸馏水做对照，观察钾离子对气孔开度的影响。
二、实验性质验证性实验三、实验内容钾离子对茶树叶片气孔开度的影响。
四、实验材料与仪器设备(一)材料：茶树叶片(二)仪器设备：显微镜，温箱，镊子，盖玻片，载玻片，培养皿(三)试剂：0.5% 硝酸钾溶液，0.5% 硝酸钠溶液，蒸馏水五、实验方法与步骤（1）每2人一组。
取三个培养皿编号，分别放入15ml的0.5% 硝酸钾溶液、0.5% 硝酸钠溶液和蒸馏水。
（2）撕茶叶表皮分别放入上述3个培养皿中。
（3）将3个培养皿放入25℃温箱中。
（4）取出培养皿置于人工光照条件下照光0.5h。
（5）分别取出叶表皮放在载玻片上，加盖玻片，在显微镜下观察气孔的开度。
六、作业1．完成实验报告。
编写人：茶学与生物系洪永聪实验二植物细胞渗透势的测定（3学时）一、实验目的渗透势与植物水分代谢、生长及抗性等有密切关系，因此，在植物的水分生理和抗性生理研究中经常需要测定渗透势。
要求学生通过本实验熟悉植物细胞渗透势的测定方法。
二、实验性质验证性实验三、实验内容洋葱细胞渗透势的测定。
四、实验材料与仪器设备(一)材料：洋葱(二)仪器设备：显微镜，载玻片，盖玻片，温度计，尖头镊子，刀片，小培养皿，试剂瓶，烧杯，容量瓶，量筒，吸管等（三）药品试剂：蔗糖、0.03%中性红溶液五、实验方法与步骤（1）每2人一组。
取培养皿9套编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序加入各培养皿。
（2）用镊子博取0.5平方厘米的洋葱表皮，吸去表面水分，放入0.03%中性红溶液中染色5min，吸去表面水分后浸入不同浓度的蔗糖溶液中，浸泡30min。
（3）取出切片放在载玻片上，并滴一滴同浓度的蔗糖溶液，盖上盖玻片，于显微镜下观察。
六、作业1．完成实验报告编写人：茶学与生物系洪永聪实验三叶绿体色素的提取分离及理化性质（4学时）一、实验目的学会叶绿体色素提取和分离的方法；了解叶绿体色素的荧光现象、皂化反应等理化性质。
植物生化实验》综合性实验总结写好的
植物生化实验》综合性实验总结写好的福建农林大学生命科学学院综合性实验总结《植物生理生化实验》综合性实验总结201*－201*学年第一学期课程：《植物生理生化实验》--生化实验21学时成绩：学院：林学院专业：林学年级：10级学号：102253007040姓名：陈薇综合性实验项目面向专业吸胀与萌发水稻种子若干生化指标的差异分析10级农学、植保、农资、园艺、设施、茶学、本项目学时14学时林学、水保、制药、生安等种子萌发是种子植物生长发育过程中的早期阶段，是个体发育中最为关键的时期，直接影响到后期的出苗、生长和结实等。
本综合性实验要求学生测定吸胀和萌发水稻种子的若干生化指标，利用植物生理生化理论知识综合分析两组种子之间可溶性蛋白质含量、游离氨基酸总量、过氧化物同工酶以及淀粉酶的活性等生化指标的差异。
综合性实验报告总结吸胀与萌发水稻种子若干生化指标的差异分析摘要：以吸胀与萌发的水稻种子为材料，通过茚三酮试剂显色法，Foin-酚试剂法，滴定法，活体法等方法测定了不同处理水稻种子的游离氨基酸含量、淀粉酶活性及其过氧化物同工酶特性。
结果表明：与吸胀水稻种子相比，萌发水稻种子的游离氨基酸含量更高；可溶性蛋白质含量更高；淀粉酶活性更高；过氧化物同工酶含量更高；种子中各种酶活性提高，各种氨基酸含量升高，明显有利于促进种子的萌发。
引言植物根系吸收、同化的氮素主要以氨基酸和酰胺的形式进行运输，所以测定植物组织中不同时期、不同部位游离氨基酸的含量，对于研究根系生理，氮素代谢等有一定意义；蛋白质作为细胞中含量最丰富的生物大分子，是生物体结构和功能最重要的基础物质之一。
蛋白质的含量测定，是植物生理、生化研究中最常用、最基本的分析方法之一；淀粉酶活性高低可以衡量种子萌发速率，也可以作为水稻抗旱性的生化指标；同工酶谱的差异是基因表达的差异造成的，所以在研究植物基因调控与生长发育及其与环境条件的关系以及许多生意生化和遗传问题时，常常要分析同工酶谱的差异，因此，同工酶研究在理论和实践中都有非常重要的意义。
《植物生理生化实验》课程教学大纲
《植物生理生化实验》教学大纲1．课程中文名称/英文名称：植物生理生化实验（Experiment of Plant Physiology and Biochemistry）2．课程代码：PRN2523．课程类别：☐公共课程 学科基础课程☐专业课☐实践教学环节4．课程要求： 必修课☐选修课5．课程属性： 独立设课☐课内实验6．课程总学时:32学时总学分：1学分实验学时：32学时实验学分：1学分7．适用专业：园艺学、设施农业科学与工程学、农学、草业科学、农业资源与环境学、植物保护8．先修课程：植物生理生化理论一、实验课程简介本课程是植物生理生化学的配套课程，是园艺学、设施农业科学与工程学、农学、草业科学、农业资源与环境学、植物保护学专业基础课。
是以无机化学、分析化学、有机化学、植物学等课程为基础，它与植物生理生化理论课同时开设。
该课程主要介绍植物生理生化的实验研究技术以及常用植物生理生化指标的分析方法及原理，为专业课的学习与科学研究工作提供技术支持与手段。
它不仅是验证、巩固和加深课堂所学的基础理论知识，更重要的是培养学生实验操作能力，综合分析问题和解决问题的能力，培养学生自主设计实验的基本能力，养成严肃认真、实事求是的科学态度和严谨的工作作风，使学生在科学方法上得到初步训练。
二、实验教学目标与基本要求通过本课程的学习，要求学生掌握植物生理生化的一些基本实验技术与原理，熟悉植物生理生化常规仪器的使用方法，掌握植物生理学实验注意事项，如取材方法、环境控制、数据处理，图表表示，结果讨论等基本规定和要求。
掌握包括糖、蛋白质、核酸、脂肪、酶等生命物质的分离、分析和测定技术；光合、呼吸、水分等代谢生理；生长、发育及环境生理等的动态测定和分析等内容。
能独立设计并完成一般性实验内容，操作规范，并熟练运用所学过的植物生理及其它有关课程的知识独立完成实验报告，以培养学生严谨的科学态度和科研素质。
三、本实验课程的基本理论与实验技术知识本实验课是基于《植物生理生化》理论课学习而开设的，基本理论依据为：生物大分子蛋白质、核酸、糖、脂及维生素、酶等的理化特性及其生物学活性；植物或离体组织的生长特性和规律等。
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《植物生理生化实验》复习习题一、名词解释：用标准溶液制成的曲线。
先配制一系列不同浓度的标准溶液，在溶液最大吸收波长下，逐一测定吸光度，然后用坐标纸以溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，若被测物质对光的吸收符合光的吸收定律，必然得到一条通过原点的直线，即标准曲线。
:又称lowry法，它结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应，是双缩脲方法的进一步发展，可利用其在650nm波长下的特定吸收进行比色测定。
游离氨基酸与茚三酮共热时，能定量生成紫色的二酮茚-二酮茚胺。
其吸收峰在570nm，而且在一不定期范围内吸光度与游离氨基酸浓度成正比，因此可用分光光度法测定其含量。
茚三酮溶液与氨基酸共热，生成氨。
氨、茚三酮与还原性茚三酮发生反应，生成紫色化合物。
该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比，通过测定570nm 处的光密度，可测定氨基酸的含量。
氮素及含氮的活体物质的同化、异化、排泄，总称为氮素代谢。
：水解淀粉和糖原的酶类总称指将叶片打孔放入注射器中，加水浸没，排出空气后用手指堵住前端小孔，同时把活塞向外抽拉，即可造成减压而排出组织中的空气，轻放活塞，水液即进入组织的方法。
根据物质颗粒在一个实用的离心场中的行为而发展起来的是1.分离细胞器和生物大分子物质的必备的手段之一，也是2.测定某些纯品物质的部分性质的一种方法。
差速离心法基于待测物质颗粒大小、密度、沉降速度的不同而得到分离。
各种生物大分子在一定pH条件下，可以解离成带电荷的颗粒,这种带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。
指催化同一种化学反应，但其酶本身分子结构和带电性质却有所不同的一组酶。
指带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。
溶液中带电粒子在电场中向着与它电性相反的电极移动，它的移动速度是电场和粒子的有效迁移率(m)的乘积，即：V=mE。
以丙烯酰胺为单位，由甲叉双丙烯酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶：又称酶活性，指酶催化一定化学反应的能力。
（酶活力单位/mg蛋白质）比活力的大小可以用来比较酶制剂中单位质量蛋白质的催化能力，衡量酶的纯度指种子潜在的发芽能力或种胚具有的生命力。
植物对逆境的抵抗和忍耐能力，简称为抗性。
单位时间、单位叶面积吸收CO2或放出O2的量。
单位时间鲜重或干重的植物组织或原生质释放的CO2或吸收O2的量土壤而用加有养分溶液的物料作为植物生长介质的栽培方法。
清除超氧阴离子自由基的酶。
,催化植物体内硝酸盐还原成亚硝酸盐的反应。
：又称适应酶，指植物体内本来不含有，但在特定外来物质的诱导下诱导生成的酶。
E.g.硝酸还原酶可为NO3-诱导生成。
二、填空：在测定植物可溶性蛋白质含量时，绘制标准曲线是以标准蛋白质浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标。
常用的测定植物可溶性蛋白质含量的方法有：Folin-酚试剂法(Lowry 法) 、考马斯亮蓝法和紫外吸收法用滴定法测Vc含量时，若样品本身带有颜色，则需先将样品用__草酸__ 处理。
用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸含量时，茚三酮溶液与氨基酸共热生成氨，氨__与茚三酮和还原性茚三酮反应，生成蓝紫色的二酮茚胺。
该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比，可通过测定570 nm处的光密度，求出氨基酸的含量。
在测定淀粉酶的活性时：α－淀粉酶不耐酸，β－淀粉酶不耐热。
在测定淀粉酶活性时，3，5－二硝基水杨酸试剂（DNS）的作用是1、与还原糖显色生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸 2、终止酶活性。
聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中，电泳存在三大效应，分别是浓缩效应、分子筛效应和电荷效应。
测定硝酸还原酶活性的方法有活体法和离体法。
用活体法测定硝酸还原酶的材料，取样前叶子需进行一段时间的光合作用，以积累光合产物，产生更多NADH ，加速硝酸盐的还原。
叶绿素吸收光谱有红光和蓝紫光区两个最强吸收区。
类胡萝卜素吸收光谱最强吸收区在蓝紫光，它不仅可以吸收传递光能，还具有保护叶绿素的作用。
叶绿素溶液在透射光下呈绿色，在反射光下呈暗红色。
缺N 和缺Fe 都能引起缺绿病，二者区别在于缺氮老叶病。
缺乏必需元素Mg、N 、Ka等，均可引起植物产生缺绿病。
缺钙(Ca)症首先会表现于植物的嫰叶上。
植物光合速率测定方法有红外线CO2气体分析法和改良半叶法等。
植物呼吸速率常用的测定方法有_红外线法CO2气体分析法和改良半叶法在研究植物矿质元素中,常用的植物溶液培养法有水溶液培养法、砂基培养法和气栽法。
常用水溶液培养法确定植物生长的必需元素。
水培时要选用黑色容器装营养液，这是为了防止藻类滋生。
在植物生理研究中常用的完整植物培养方法有 _______、 ______ 、______和________。
三、选择题：1、某蛋白质pI为7.5，在pH6.0 的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为（ A ）A、向负极移动B、向正极移动C、不运动D、同时向正极和负极移动在7.5的时候，这个蛋白质为电中性，不带电而6.0的时候更酸，结合上的氢就多，于是呈正电性于是就向负极去了2、进行酶活力测定时（A ）A、底物浓度必须极大于酶浓度B、酶浓度必须极大于底物浓度，C、酶能提高反应的平衡点D、与底物浓度无关3、蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。
它们具有吸收紫外光的性质，其吸收高峰在（ D ）波长处A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm4、Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度时，用（ B ）波长比色，测定光密度值。
A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm5、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳比一般电泳的分辨率高，是因为具有下列哪种效应？（ ABC ）A、浓缩效应B、电荷效应C、分子筛效应D、粘度效应6. 硝酸还原酶与亚硝酸还原酶 ( D )A.都是诱导酶B.硝酸还原酶不是诱导酶，而亚硝酸还原酶是C.都不是诱导酶D.硝酸还原酶是诱导酶，而亚硝酸还原酶不是7、酶的分离提纯过程中，不正确的操作是（C ）。
A、需在低温下进行，一般在0～5℃之间B、酶制剂制成干粉后可保存于4℃冰箱中C、需经常使用巯基乙醇以防止酶蛋白二硫键发生还原D、提纯时间尽量短8、在提取叶绿素时，研磨叶片时加入少许CaCO3，其目的是（D ）A.使研磨更充分B.加速叶绿素溶解C.使叶绿素a、b分离D.保护叶绿素10、一般而言，正常植物叶片的叶绿素与类胡萝卜素的比值为（B ）A.2:1B.3:1C.1 :2D.1:311、叶绿素卟啉环的中心原子是（ C ）A. CuB. FeC. MgD. Mn12、测定叶绿素总量时，分光光度计选用的波长是（ D ）A.663nmB.645nmC.430nmD.652nm13、在95%提取液中,叶绿素a在红光区的最大吸收峰为 ( D )。
A、 470 nmB、649 nmC、 656 nmD、665 nm14、植物的幼嫩部分，亏缺下列哪种元素时，缺素症首先表现出来。
（B ）A. KB. CaC. PD. N15、下列元素中，属于必需的大量元素有（B ）A、铁B、氮C、硼D、锌16、高等植物的老叶由于缺少某一种元素而发病，下面元素属于这一类的有（ A ）A、氮B、钙C、铁17、呼吸作用的底物为( A )。
A、有机物和O2B、CO2和H2OC、有机物和CO217、光合作用的底物为( B )。
A、有机物和O2B、 CO2和H2OC、有机物和CO219、小蓝子法测定呼吸强度生成的白色沉淀是( A )A、 BaCO3B、Ba(COO)2C、Ba(D、CaCO3Ba(OH)2 + CO2 BaCO3 + H2O20、TTC法测定种子生活力的试验中，活种子的现象为 ( A )。
A、种胚全部染成红色B、种胚全部未染色C、种胚全部染成黑色D、种胚非关键部位染色，而胚根和胚芽的尖端都不染色21、小篮子法测定呼吸强度中，若在滴定时，外界CO2进入呼吸测定装置内，会使测得的结果( A )。
A、偏大B、偏小C、不变D、不一定三、简答题1、怎样提高样品测定的准确性?答：①正确采集代表性样品②选择合适的测定方法③减少测定误差④正确记录和处理测定数据。
2、植物材料的取样有哪些方法？答：①原始样品的取样法：随机取样、对角线取样。
②平均样品的采样法：混合取样法、按比例取样法。
3、简述分光光度计的使用方法。
答：①检查721A型分光光度计的旋钮和开关，使其回复零点。
②按要求接通电源，按下“T键”，打开暗盒盖和电源开关，指示灯亮。
预热20分钟。
③调节波长旋钮至所需波长。
选定波长④取比色皿分别盛装B、S、U液，置入检测室（比色皿先用蒸馏水洗后，再用比色液润洗才能装比色液）。
B液对准光路。
⑤调节面板“零位细调”，使指示为00.0，即透射比“T”的零点，同时“一”号闪跃。
⑥合下检测室盖.调节“光量粗、细调”电位器，使指示为100.0，须反复5、6两点操作达到稳定。
⑦按下“A”键，指示为“.000”同时“一”闪跃，如果指示读数不是比值时，应调节“消光调零“电位器，使其达到要求。
⑧拉出或推入拉杆，使U、S液分别置于光路读取A值，然后移动拉杆，读B管A值，如为0，则前述A值有效。
⑨在稳定时，重复读数一次，并按下“T”键。
⑩打开检测室盖，取出比色皿，倾去比色液于水槽中，用自来水冲洗干净，倒置于表面皿（铺有滤纸）中。
（11）关上电源开关，拔出电源插头，取出比色皿架，检查检测室内是否有液体溅出，并擦净。
检测室内放入硅胶袋，合上盖，套上仪器罩。
预热仪器→选定波→固定灵敏度档→调节“0”点→调节T=100%→测定→关机4. 请介绍3种常用的可溶性蛋白质的测定方法。
答：….5、简述斐林－酚试剂法测定植物可溶性蛋白质的原理。
（188页）在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物，Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基还原，产生深蓝色（钼兰和钨兰的混合物）。
在一定的条件下，蓝色深度与蛋白的量成正比。
6、植物组织可溶性蛋白质含量的测定中，斐林－酚试剂法、考马斯亮蓝法两种方法各有何优缺点？7、Folin-酚试剂法测定植物可溶性蛋白质时受哪些因素的干扰？答： Folin-酚试显色反应是由络氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起的，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基类化合物均有干扰作用。
此外，不同蛋白质音络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有差异。
8、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时，加入Vc的作用是什么？答：防止还原型茚三酮在含氧量高的情况下再氧化9、茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时为什么要除去蛋白质？用10%乙酸除去蛋白质的原理是什么？28、比较溶液培养和砂基培养的优缺点。
优点：不收水土和季节限制，易于调控缺点：溶液培养：无法给根系提供支撑作用；溶液PH值会发生变化，抑制根吸收矿质元素；容易造成污染，影响实验。