台盼蓝染色液配制和染色方法

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台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理
台盼蓝(Trypan Blue) 就是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞就是否存活。

活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960、82,可溶于水(10mg/ml)。

实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。

因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞与死细胞。

台盼蓝就是组织与细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。

台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

实验步骤:
1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。

使用时用PBS稀释至0、
4 %。

2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0、4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。

(终浓度0、04%)
4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞与死细胞。

5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。

6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
注意:
1、保存条件:室温保存。

2、有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套与口罩操作。

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和步骤标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]台盼蓝染色实验原理台盼蓝(TrypanBlue)是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。

活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量:960.82,可溶于水(10mg/ml)。

实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。

因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和。

台盼蓝是组织和中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

注意也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后,通过显微镜下或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞进行比较精确的定量。

台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

实验步骤:1、配制4%台盼蓝:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。

使用时用PBS稀释至0.4%。

2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。

(终浓度0.04%)4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。

5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而拒染呈无色透明状。

6、统计细胞活力:活细胞率(%)=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%注意:1.保存条件:室温保存。

2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理台盼蓝(Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。

活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960.82,可溶于水(10mg/ml)。

实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。

因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。

台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。

台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

实验步骤:1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。

使用时用PBS稀释至0.4 %。

2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。

(终浓度0.04%)4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。

5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。

6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%注意:1.保存条件:室温保存。

2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。

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台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理台盼蓝(Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。

活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960.82,可溶于水(10mg/ml)。

实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。

因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。

台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。

台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

实验步骤:1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。

使用时用PBS稀释至0.4 %。

2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。

(终浓度0.04%)4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。

5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。

6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%注意:1.保存条件:室温保存。

2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和步骤

For personal use only in study and research; not forcommercial use台盼蓝染色实验原理台盼蓝(Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。

活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960.82,可溶于水(10mg/ml)。

实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。

因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。

台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。

台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

实验步骤:1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。

使用时用PBS稀释至0.4 %。

2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。

(终浓度0.04%)4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。

5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。

6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%注意:1.保存条件:室温保存。

2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。

仅供个人用于学习、研究;不得用于商业用途。

For personal use only in study and research; not for commercial use.Nur für den persönlichen für Studien, Forschung, zu kommerziellen Zwecken verwendet werden.Pour l 'étude et la recherche uniquement à des fins personnelles; pas à des fins commerciales.толькодля людей, которые используются для обучения, исследований и не должны использоваться в коммерческих целях.以下无正文仅供个人用于学习、研究;不得用于商业用途。

台盼蓝染色

台盼蓝染色

台盼蓝染色操作步骤
2011/5/5来源:上海泛柯生物科技有限公司
台盼蓝是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。

还常用于细胞是否存活。

活细胞不会被染成蓝色,死细胞会被染成蓝色。

操作步骤:
1、制作4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加至100ml,用滤纸过滤,4度保存。

使用时,用PBS 稀释至0.4%
2、胰酶消化单壁细胞,制备单细胞悬液,并适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合均匀。

(终浓度为0.04%)
4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞盒和死细胞
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,活细胞拒染呈无色透明状
6、统计细胞活力:活细胞率(%)=活细胞数/(活细胞数+死细胞数)×100%
PBS:磷酸缓冲液。

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理
台盼蓝〔Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。

活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。

分子式:C34H24N6O14S4Na4,,可溶于水
〔10mg/ml)。

实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。

因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。

台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比拟精确的定量。

台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。

实验步骤:
1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃ %。

2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。

〔终浓度0.04%〕
4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。

5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。

6、统计细胞活力:活细胞率〔%〕= 活细胞总数/〔活细胞总数+死细胞总数〕×100%
注意:
1.保存条件:室温保存。

2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和步骤蓝染是一种传统的染色技术,起源于中国,在日本也有悠久的历史。

蓝染色实验是为了研究蓝染工艺的原理和步骤,以便更好地理解和应用蓝染技术。

下面是台盼蓝染色实验的原理和步骤。

一、实验原理:蓝染是利用大蓝(天然靛蓝)的还原性能,将其氧化为淡蓝或蓝紫色,再使其还原为不溶于水的颜料沉淀物质,直接着色于织物纤维上,形成美观、持久、不退色的蓝色。

二、实验步骤:步骤一:准备材料1.织物:选择一块白色的纯棉织物,洗净晾干。

2.大蓝:购买或制作大蓝溶液。

步骤二:还原大蓝1.在小瓶中加入约10毫升的浓度为2%的氧化还原剂,如明矾溶液。

2.将少量大蓝溶液加入小瓶中,摇动均匀,待溶液变为淡黄色。

步骤三:染色1.将纯棉织物完全浸泡在还原后的大蓝溶液中,确保织物彻底湿透。

2.取出织物,轻轻拧干,不要使其过于湿润。

3.将湿润的织物悬挂在通风良好的地方,等待氧化。

步骤四:氧化1.将湿润的织物悬挂在通风良好的地方,等待氧化。

2.等待数小时,直至织物逐渐变蓝。

步骤五:固色1.取出已经氧化的织物,以冷水冲洗,以去除未结合的颜料。

2.将固色剂溶液(如明矾溶液)浸泡在蓝染织物中,以固定颜色。

3.用清水冲洗织物,直至水清澈。

步骤六:晾干将蓝染织物晾干,确保颜料完全固定在织物上。

通过以上步骤,就可以进行台盼蓝染色实验,获得漂亮的蓝色织物。

补充说明:1.在进行实验中,需要注意安全,避免溶液溅入眼睛或皮肤。

2.在进行染色过程时,要尽量保持环境洁净,以避免杂质进入织物。

3.实验中使用的材料可以根据需要进行调整和替换,以探索更多的蓝染效果。

4.实验所述的步骤是一种基本的蓝染方法,实际应用中可能包括更多的步骤和技巧。

总结:台盼蓝染色实验可以帮助我们理解蓝染工艺的原理和步骤,从而更好地应用蓝染技术。

通过实验,我们可以亲自体验到蓝染的魅力,并了解到大蓝的还原性能和氧化过程,以及固色剂在蓝染工艺中的作用。

蓝染作为一种古老的染色技术,在现代仍然具有广泛的应用和价值,通过实验的学习和实践,我们可以更好地传承和创新蓝染技术。

细胞活性台盼蓝染色具体步骤及方法

细胞活性台盼蓝染色具体步骤及方法
一、实验原理
各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。

为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。

正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。

染料排斥实验是一种粗糙的估计细胞活力的方法,无法区别10%~20% 的活力差异。

除此之外,排斥染料的细胞有可能不贴壁或不能较长时问生存或繁殖。

二、实验方法
1) 胰蛋白酶处理细胞(见上文“胰蛋白酶处理分离细胞”),无菌状态下取0.5 ml 细胞用PBS 稀释至每毫升2X105~4X105。

2) 向另一管中无菌加人0.5 ml 上述细胞稀释液,并加人0.5 ml 台盼蓝溶液(0.4%)
3) 细胞在染料中停留时间为不短于3 分钟、不超过10 分钟, 用毛细吸管取含染料的细胞悬液,靠毛吸作用使其进入计数器内。

4) 至少计数总数500 个细胞,蓝色细胞单独计数。

记录不排斥染料的蓝色细胞的出现频度。

5) 根据不排斥染料的细胞数计数细胞的活力百分比。

例如:单层细胞胰蛋白酶处理后重悬于5 ml 培养液中, 取0.5 ml 细胞与4.5 ml PBS 混匀,吸取0.5 ml 悬浮于PBS 中的细胞加于另一小管中,再加人0.5 ml 台盼蓝溶液混匀。

上述悬液加于计数器上,共计数540 个细胞,62 个细胞不排斥染料呈蓝色,活性百分比为88.5%。

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和步骤一、实验原理:台盼蓝(TAE)是一种经典的缓冲液,在DNA电泳中具有良好的缓冲性能。

而台盼蓝染料则是能够与DNA结合形成复合物,在紫外线下发出蓝色荧光。

实验通过台盼蓝染色将DNA可视化,从而测量DNA的存在和浓度。

二、实验步骤:1.准备实验材料和设备:-台盼蓝染色缓冲液(TAE缓冲液)-加载缓冲剂-DNA样品(待测样品)-DNA分子量标准品-DNA电泳仪-薄胶片-吸取器-紫外线照射器2.准备电泳槽:在电泳槽中注入足够的TAE缓冲液,以覆盖电泳槽的整个底部,然后添加加载缓冲剂到电泳槽中。

3.准备DNA样品:将待测样品和DNA分子量标准品分别加入到不同的试管中。

通常,待测样品需要经过DNA提取和纯化等预处理步骤。

4.加载样品:取一定数量的待测样品和分子量标准品,分别加入到电泳槽中的凹槽中,在同一凹槽中加入适量的台盼蓝染色缓冲液。

5.进行电泳:将电泳槽盖上,并将其连接到电泳电源上。

设置电压和时间参数,开始电泳过程。

6.取出胶片:电泳结束后,将胶片从电泳槽中取出,将其放在薄胶片上。

然后在紫外线照射器下观察胶片上的DNA带。

7.获得结果:根据DNA带的迁移距离和颜色强度,可以判断DNA的存在和浓度。

通常,DNA带的迁移距离与分子量呈反比,而颜色强度则与DNA的浓度成正比。

需要注意的是,实验过程中需要严格控制实验的环境和操作,以避免DNA污染和损伤。

总结:台盼蓝染色实验是一种常用的染色实验,可以用于检测DNA的存在和浓度。

通过将DNA样品与台盼蓝染色缓冲液混合后进行电泳,然后观察电泳胶片上的DNA带,可以得出DNA的存在和浓度。

实验准备工作较为简单,但实验过程需要严格控制环境和操作,以确保实验结果的准确性。

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