pH标准缓冲溶液(pH4.00)
pH标准缓冲溶液(pH=10.00)
pH 标准缓冲溶液(pH=10.00)简介：pH 标准溶液的pH 值是已知的，并达到规定的准确度，其pH 值有良好的复现性和稳定性，具有较大的缓冲容量，较小的稀释值和较小的温度系数。
该pH 标准缓冲溶液常用于酸度计的定位和斜率校准，其准确度范围在±0.01pH 。
pH 标准缓冲溶液(pH=10.00)是特指在25℃下，pH=10.00。
组成：操作步骤(三点校准通用，仅供参考)：1、 将pH 电极在纯水中清洗干净并甩干。
2、 用温度计测量pH 标准缓冲溶液的温度，并将pH 计的温度值调整准确。
自动温度pH 计无需该步骤。
3、 定位校正：将pH 电极浸入pH 标准缓冲溶液(pH=7.00)中，稍微搅动后静止放置，待测量值稳定后，按校准键或参考仪器说明校准，一般会先显示闪烁的7.00，再显示pH 校准数值，表示pH7.00的校准完成。
4、 斜率校准Ⅰ: 取出pH 电极，用纯水清洗干净并甩干。
将pH 电极浸入pH 标准缓冲溶液(pH=4.00)中，稍微搅动后静止放置，待测量值稳定后，按校准键或参考仪器说明校准，一般会先显示闪烁的4.00，再显示pH 校准数值，表示pH4.00的校准完成。
完成校准后会自动显示电极在该线性段的斜率百分比(如显示99%)。
5、 斜率校准Ⅱ: 取出pH 电极，用纯水清洗干净并甩干。
将pH 电极浸入pH 标准缓冲溶液(pH=10.00)中，稍微搅动后静止放置，待测量值稳定后，按校准键或参考仪器说明校准，一般会先显示闪烁的10.00，再显示pH 校准数值，表示pH10.00的校准完成。
完成校准后会自动显示电极在该线性段的斜率百分比(如显示98%)。
注意事项：1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，尤其以pH 标准缓冲溶液(pH=10.00)较易失效。
2、 显示pH 校准数值时，pH 值会随温度不同而不同，例如在定位校正中，25℃时显示7.00，15℃时就显示6.90。
标准缓冲液pH值与温度对照表
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（ 0.05M） X 毫升 0.2M K2PO4 + Y 毫升 0.2N NaOH加水稀释至 29 毫升
pH(20℃ )
X (ml)
Y（ ml）
pH(20℃)
5.8
5
0.372
7.0
6.0
5
0.570
7.2
6.2
5
0.860
7.4
6.4
5
1.260
7.6
6.6
5
1.780
Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05 ，0.2 mol/L 溶液含 35.61 克/ 升。
C4H2O7· H2O分子量 = 210.14 ， 0.1 mol/L 溶液为 21.01 克 / 升。
4．柠檬酸–氢氧化钠 - 盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度 柠檬酸（ g） 氢氧化钠 (g) 盐酸（ ml） 最终体积 （ L）
30
1.68
4.01
6.85
9.14
35
1.69
4.02
6.84
9.11
常用缓冲溶液的配制方法
1． 甘氨酸–盐酸缓冲液（ 0.05mol/L ） X 毫升 0.2 mol/L 甘氨酸 +Y毫升 0.2 mol/L HCI ，再加水稀释至 200 毫升
pH
X
Y
pH
X
Y
2.0
50
44.0
3.0
50
11.4
0.3 mol/L NaH2PO4 (ml)
39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3
（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（ 1/15 mol/L ）
标准缓冲液pH值与温度对照表
常用蛋白质分子量标准参照物
高分子量标准参照 蛋白质 肌球蛋白 β－半乳糖苷酶 磷酸化酶B 牛血清清蛋白 过氧化氢酶 醛缩酶 中分子量标准参物 低分子量标准参照 Mr Mr 蛋白质 97 400 212 000 磷酸化酶B 66 200 116 000 牛血清清蛋白 55 000 97 400 谷氨酸脱氢酶 42 700 66 200 卵清蛋白 40 000 57 000 醛缩酶 31 000 40 000 碳酸酐酶 21 500 大豆胰蛋白酶抑制剂 14 400 溶菌酶 蛋白质 碳酸酐酶 大豆胰蛋白酶制剂 马心肌球蛋白 溶菌酶 肌球蛋白（F1） 肌球蛋白（F2） 肌球蛋白（F3） Mr 31 000 21 500 16 900 14 400 8 100 6 200 2 500
（四）凝胶过滤层析介质的技术数据
凝胶过滤介质 名称 分离范围 Superdex 30 Superdex 75 Superdex200 Superose 6 Superose 12 Sephacryl S-100 HR Sephacryl S-200 HR Sephacryl S-300 HR Sephacryl S-400 HR Sepharose 6 Fast Flow Sepharose 4 Fast Flow Sepharose 2B Sepharose 4B Sepharose 6B Sepharose CL-2B Sepharose CL-4B Sepharose CL-6B 45~165 60000~20×105 10000~4×106 45~165 颗粒 大小 （μm） 24~44 <10000 24~44 3000~70000 24~44 3 000 10000~600000 20~40 20~40 5000~5×106 25~75 1000~300000 1000~ 100000 25~75 5000~250000 10000~1.5×106 20000~8×106 10000~4×106 60000~20×106 70000~40×106 60000~20×106 10000~4×106 70000~40×106 45~165 45~165 60~200 25~75 25~75 平均90 平均90 60~200 特性/应用 肽类、寡糖、小蛋白等 重组蛋白、细胞色素 单抗、大蛋白 蛋白、肽类、多糖、核酸 蛋白、肽类、寡糖、多糖 肽类、小蛋白 蛋白，如清蛋白 蛋白、抗体 多糖、具延伸结构的大分 子如蛋白多糖、脂质体 巨大分子 巨大分子如重组乙型肝 炎表面抗原 pH稳定性工作 耐压（Mpa） 最 快 流速 （cm/h） 0.3 100 3~12 0.3 100 3~12 0.3 100 3~12 0.4 30 3~12 0.7 30 3~12 0.2 20~39 3~11 3~11 3~11 3~11 2~12 2~12 4~9 0.2 0.2 0.2 0.1 0.1 0.004 0.008 0.02 0.005 20~39 20~39 20~39 300 250 10 11.5 14 15
PH计校准及缓冲液配置
标准缓冲溶液(均用pH标准缓冲物质配制)1.1 苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液：c(KHC8H4O4)=0.05 mol/L(25℃时，pH=4.003)。
苯二甲酸氢钾的pH标准缓冲物质，有小塑料袋和瓶装两种，配制方法如下：a)袋装配制法：在250 mL(或500 mL)量瓶中(根据袋中标准缓冲物质量，选择量瓶大小)，按袋上的说明配制成所需的浓度。
保存于聚乙烯瓶中。
b)瓶装配制法：称取5.10 g苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4预先在115℃±5℃，烘2～3 h，于干燥器中冷却)，溶于水并稀释至500 mL，混匀。
保存于聚乙烯瓶中。
1.2 0.025 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.025 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)混合标准缓冲溶液(25℃时，pH=6.864)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠的pH标准缓冲物质，有小塑料袋装(混合磷酸盐)和瓶装(两种pH 标准缓冲物质分别包装)两种。
配制方法如下：a)袋装配制法：在量瓶(根据袋上说明确定量瓶大小)中按袋上说明配制成所需浓度后，保存于聚乙烯瓶中。
b)瓶装配制法：迅速称取3.40 g磷酸二氢钾(KH2PO4)和3.55 g磷酸氢二钠(Na2HPO4)(均预先在115±5℃烘2～3 h，于干燥器中冷却)溶于蒸馏水，转入1 000 mL量瓶中，加水至标线，混匀。
1.3 0.008 695 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.030 43 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)标准混合缓冲溶液(25℃时，pH=7.413)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠两种pH标准缓冲物质分别用瓶包装，配制方法如下：迅速称取1.18 g磷酸二氢钾和4.31 g磷酸氢二钠(均预先在115℃±5℃烘2～3 h，于干燥器中冷却)，溶于水，全量移入1 000 mL量瓶中，加水至标线，混匀。
保存于聚乙烯瓶中。
1.4 硼砂标准缓中溶液：c(Na2B4O7·10H2O)=0.010 mol/L(25℃时，pHs=9.182)。
常用pH标准缓冲溶液
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
6.98
6.95
6.92
6.90
6.88
6.86
6.85
6.84
6.84
不同温度时的pH值(pH in different temperatures)
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
6.83
6.83
6.83
6.84
6.85
6.86
6.88
6.89
-
硼酸盐标准缓冲溶液
c(Na2B4O7·10H2O)称取硼砂（Na2B4O7·10H2O）(3．80± 0．01)g（注意：不能烘！），溶于预先煮沸过 15～30min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml。置聚乙烯塑料瓶中密闭保存。存放时要防止空气中的CO2的进入（注：可用于酸度计校准）
70℃
80℃
90℃
95℃
-
9.04
9.01
8.99
8.96
8.92
8.89
8.85
8.83
-
氢氧化钙标准缓冲溶液
在25℃，用无二氧化碳的蒸馏水制备氢氧化钙的饱和溶液。氢氧化钙溶液的浓度c[1/2Ca(OH)2]应在（0.0400～0.0412）mol/L。氢氧化钙溶液的浓度可以酚红为指示剂，用盐酸标准溶液[c(HCl)=0.1mol/L]滴定测出。存放时要防止空气中的二氧化碳的进入。出现混浊应弃去重新配制
不同温度时的pH值(pH in different temperatures)
0℃
5℃
10℃
标准缓冲液pH值与温度对照表
标准缓冲液pH值与温度对照表常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na 2HPO 4分子量 = 142.98，0.2 mol/L 溶液为28.40克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含35.61克/升。
C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 ① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
②柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。
6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。
227．磷酸盐缓冲液242NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。
242KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃）50毫升0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris ）溶液与X 毫升0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。
232升。
Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
2472硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
2472硼酸H 2BO 3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ）232NaHCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。
pH计校准方法和标准缓冲液配置
pH计校准方法和标准缓冲液配置本文分享pH计校准所需工具、标准缓冲液配置方法，以及pH计校准方法、步骤及开展pH计校准工作的注意事项。
掌握这些pH计校准技能，对仪表人用好酸度计实惠多多。
pH计的应定期检定校准，使精密度和准确度符合要求。
怎么校准，或者说是怎样校正酸度计。
以下是昌晖仪表制造有限公司整理出来的资料。
有直接用配置好的标准缓冲液校准，有的需要自己配置标准缓冲液再校准，下面就看看这两种不同的前提，相同的校准方法步骤，供需要的朋友参考。
pH计校准所需工具/原料标准缓冲液(应选择与供试液pH值接近的标准缓冲液)，目前标准溶液有7种，在我国一般使用以下3种溶液:(pH值在25时)①邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)4.003pH；0.05M②混合磷酸盐(Na2HPO4)：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠混合盐溶液6.864 pH；0.025M③硼砂(Na2B4O7·10H2O)9.182 pH：0.01M这三种标准缓冲液的配置方法如下：①pH4，邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液精密称取在115±5干燥2-3小时的邻苯二甲酸氢钾[KHC8H4O4]10.12g，加水使溶解并稀释至1000ml。
②pH7，磷酸盐标准缓冲液(pH7.4)精密称取在115±5干燥2-3小时的无水磷酸氢二钠4.303g与磷酸二氢钾1.179g，加水使溶解并稀释至1000ml。
另补充：磷酸盐标准缓冲液(pH6.8)精密称取在115±5干燥2-3小时的无水磷酸氢二钠3.533g与磷酸二氢钾3.387g，加水使溶解并稀释至1000ml。
③pH9，硼砂标准缓冲液精密称取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g(注意：避免风化)，加水使溶解并稀释至1000ml，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免与空气中二氧化碳接触。
pH计校准步骤/方法1、实验室使用的pH计校准方法①常用的实验室PH计仪器校正时，要把仪器的斜率调到最大，并拨开电极上部的橡胶塞，使小孔露出，否则在进行校正时，会产生负压，泞致溶液不能正常进行离子交换，会使测量数据不准确。
十标准缓冲液pH值对照参考表
十三、标准缓冲液pH值对照参考表pH值标准溶液配制说明：剪开塑料袋，将粉末倒入250mL容量瓶中，以少量无CO2蒸馏水冲洗塑料袋内壁，并在20℃稀释到刻度摇匀备用。
溶液的 pH 值（准确度为±0.02pH）温度℃0.05M邻苯二甲酸氢钾pH值0.025M混合磷酸盐pH值0.01M硼砂pH值0 4.01 6.98 9.465 4.00 6.95 9.3910 4.00 6.92 9.3315 4.00 6.90 9.2820 4.00 6.88 9.2325 4.00 6.86 9.1830 4.01 6.85 9.1435 4.02 6.84 9.1040 4.03 6.84 9.0745 4.04 6.83 9.0450 4.06 6.83 9.0255 4.07 6.83 8.9960 4.09 6.84 8.9770 4.12 6.85 8.9380 4.16 6.86 8.8990 4.20 6.88 8.8695 4.22 6.89 8.84 仪器实际读值与标准有时会有±1个字的误差序言本说明书详细说明了广州汇谷环保技术有限公司2200型pH/ORP在线分析仪的使用方法，涵盖了2200型在线pH/ORP控制器和传感器的应用模式，如果在使用中有任何疑问，请立即与最近的授权经销商联系。
本说明书所阐述的内容将随产品的不断改进而改变，本公司在该说明书中将不另行通知，敬请谅解。
使用前请仔细阅读本说明书，若故意损坏或不正当使用分析仪所造成的故障本公司不承担责任。
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2012 09 20安全知识广州汇谷环保技术有限公司的分析仪必须严格按照在说明书中指定的安装和运行方式下使用。
只有接受过专业培训或被授权的人员才可以安装、设置和操作该款分析仪。
在上电开机前，先确认电源（AC220V)已经正确连接至分析仪接线座上的指定位置。
并做好电源保护,如果出错将可能导致仪器永久损坏。
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pH 标准缓冲溶液(pH=4.00)
简介：
pH 标准溶液的pH 值是已知的，并达到规定的准确度，其pH 值有良好的复现性和稳定性，具有较大的缓冲容量，较小的稀释值和较小的温度系数。
该pH 标准缓冲溶液常用于酸度计的定位和斜率校准，其准确度范围在±0.01pH 。
pH 标准缓冲溶液(pH=4.00)是特
指在25℃下，pH=4.00。
组成：
操作步骤(三点校准通用，仅供参考)：
1、 将pH 电极在纯水中清洗干净并甩干。
2、 用温度计测量pH 标准缓冲溶液的温度，并将pH 计的温度值调整准确。
自动温度pH 计
无需该步骤。
3、 定位校正：将pH 电极浸入pH 标准缓冲溶液(pH=6.86)中，稍微搅动后静止放置，待测量
值稳定后，按校准键或参考仪器说明校准，一般会先显示闪烁的6.86，再显示pH 校准数值，表示pH6.86的校准完成。
4、 斜率校准Ⅰ: 取出pH 电极，用纯水清洗干净并甩干。
将pH 电极浸入pH 标准缓冲溶液
(pH=4.00)中，稍微搅动后静止放置，待测量值稳定后，按校准键或参考仪器说明校准，一般会先显示闪烁的4.00，再显示pH 校准数值，表示pH4.00的校准完成。
完成校准后会自动显示电极在该线性段的斜率百分比(如显示99%)。
5、 斜率校准Ⅱ: 取出pH 电极，用纯水清洗干净并甩干。
将pH 电极浸入pH 标准缓冲溶液
(pH=9.18)中，稍微搅动后静止放置，待测量值稳定后，按校准键或参考仪器说明校准，一般会先显示闪烁的9.18，再显示pH 校准数值，表示pH9.18的校准完成。
完成校准后会自动显示电极在该线性段的斜率百分比(如显示98%)。
注意事项：
1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用，尤其以pH 标准缓冲溶液(pH=9.18)
较易失效。
2、 显示pH 校准数值时，pH 值会随温度不同而不同，例如在定位校正中，25℃时显示6.86，
15℃时就显示6.90。
编号 名称
OR0001
OR0001
OR0001
Storage pH 标准缓冲溶液(pH=4.00) 50ml
100ml
500ml
4℃
使用说明书
1份
3、根据pH等温测量原理，被测溶液的温度与校准溶液的温度越接近，其测量的准确度就越高。
4、对于大多数检测，可以采用两点校准。
如果测量范围仅在酸性范围(pH＜7.00)，可以选择
pH 6.86和pH 4.00校准；如果测量范围仅在碱性范围(pH＞7.00)，可以选择pH 6.86和pH9.18校准；如果测量范围比较宽或pH电极老化，应进行三点校准。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
附录：不同温度下，pH标准缓冲溶液对应的pH值。
pH4.00 pH6.86 pH9.18
5℃ 4.00 6.95 9.39
10℃ 4.00 6.92 9.33
15℃ 4.00 6.90 9.28
20℃ 4.00 6.88 9.23
25℃ 4.00 6.86 9.18
30℃ 4.01 6.85 9.14
35℃ 4.02 6.84 9.11
40℃ 4.03 6.84 9.07
45℃ 4.04 6.83 9.04
50℃ 4.06 6.83 9.02
55℃ 4.07 6.83 8.99
60℃ 4.09 6.84 8.97
相关：
编号名称
DC0032 Masson三色染色液
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
NH0043 SSC缓冲液(20×,pH7.0)
NR0001 DEPC处理水(0.1%)
OR0002 pH标准缓冲溶液(pH=6.86)
PT0013 考马斯亮蓝快速染色液
PW0111 Super ECL Plus超敏发光液
TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)。