链霉亲和素琼脂糖凝胶6FF使用说明
Ni-琼脂糖凝胶6FF(His标签纯化树脂)说明书
Ni-琼脂糖凝胶6FF(His标签纯化树脂）说明书货号：P2010规格：5mL/10mL（凝胶体积）保存：4°C保存，有效期至少一年产品说明：Ni-NTA琼脂糖凝胶6FF是用于纯化6×His标签重组蛋白的一种纯化介质，它是由6%交联的Sepharose 耦连了一种四齿螯合剂NTA而得.它可用于在非变性或变性条件下纯化任何表达系统表达的6×His标签重组蛋白。
NTA，含有四个螯合区，较一般的三齿螯合剂能更好的结合Ni2+。
6×His可与Ni2+螯合，从而使His 标签蛋白结合在Ni-NTA纯化介质上，未结合的蛋白被洗涤下去，结合在介质上的蛋白经过一定浓度的咪唑或低pH缓冲液的温和洗脱下来，从而得到高纯度的目的蛋白。
该纯化介质与His标签蛋白具有极高的亲和力，可达5-20mg/mL。
可在非变性和变性条件下纯化任何表达系统所得的His标签蛋白。
纯化程序简单，所得的蛋白纯度可高达95%。
Ni-NTA可再生4-6次，重复使用。
本产品悬浮液为20%乙醇，已螯合Ni2+。
操作方法：A.非变性条件下抽提His标签蛋白1)准备细胞，接种，诱导表达。
收集细胞，置于-70°C或立即进行步骤2操作。
2)加入1/20细胞生长体积的NTA-0Buffer和PMSF。
PMSF使用的工作浓度为1mM现用现加。
3)将细胞悬浮起来，加入溶菌酶，混匀，冰上放置30分钟，超声或匀浆破碎细胞。
该步骤冰上操作。
4)加入10%Triton X-100,使终浓度为0.05%，充分混匀，冰上放置15分钟。
5)12000rpm/min(20,000×g以上)，4°C离心15分钟以上。
取上清，置于冰上备用或-20°C保存。
6)将NTA树脂装入合适的层析柱，层析用10倍NTA体积的NTA-0Buffer洗。
7)将样品加至NTA层析柱中，流速在15mL/h左右，收集穿透部分，用SDS/PAGE分析蛋白的结合情况。
ProteinG琼脂糖凝胶说明书
Version 11302010ProteinG-Sepharose Protein G 琼脂糖凝胶Cat. No. CW0012保存：2-8 ℃组分说明CW0012 CW0012A Cat.No.Volume 1 ml 5 mlose 本产品具有广谱IgG 结合、高Fc 段结合活性、高抗体吸附量和性，可重复多次使用。
左右），以利于维持抗体的生物活性，避免抗脱5-10个柱床体积，可洗脱脂类和疏水性较强的蛋白质，避免使亲和介质的载量下降、干扰亲和介质的应用效果。
产品简介本产品为Protein G 与Sephar 偶联后产物，可从血清，腹水，细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc 片段的基因工程重组蛋白。
Protein G 是链球菌(group C 和G)细胞表面蛋白。
它与Protein A 类似，通过与免疫球蛋白的Fc 区相互作用，可结合大多数哺乳动物的IgG。
但两者结合特异性有所不同。
Protein G 对人IgG3，小鼠IgG1，大鼠IgG2a 等具有高亲和力。
天然Protein G 具有白蛋白和细胞表面结合域。
重组Protein G 去除了白蛋白和细胞表面结合域，以减少非特异性结合。
能稳定等特点注意事项1. 凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温， 装柱， 避免产生气泡影响柱效。
2. 装柱时尽可能维持凝胶长径比为5：3-2：1，长径比过大将导致洗脱峰拖尾，洗脱体积增大；长径比过小将导致样品与填料接触时间短，吸附不充分，填料吸附蛋白量小。
3. 若上样液中抗体浓度过高，应使用平衡缓冲液稀释至1-2mg/ml，以免上样浓度过高影响柱效。
4. 可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5. 凝胶用低 pH 缓冲液洗脱时间应尽可能短，洗脱后用中性缓冲液尽快中和至 pH 中性，以延长亲和介质的使用寿命。
6. 洗脱后，应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性（pH7.4体失活。
BeaverBeadsTM Streptavidin 链霉亲和素磁珠说明书
链霉亲和素磁珠（BeaverBeads TM Streptavidin ）产品简介链霉亲和素-生物素（SA-Biotin ）系统具有极高的结合亲和力（Kd=10^-15），在生物领域具有广泛的应用。
BeaverBeads TM Streptavidin 采用海狸专利的蛋白偶联技术将SA 共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。
本产品采用超顺磁性微球，粒径均一、形貌规整，有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。
本产品可配套自动化设备进行高通量操作。
产品信息产品信息 SA 磁珠（300 nm ）生物素化IgG 结合性能 20μg/mg 磁珠 磁珠浓度 10 mg/mL 磁珠表面 亲水基团保存溶液 1×PBS ，含0.1%（w/v ）BSA ，0.1%（v/v ）proclin-300 保存条件 2-8 ℃ 保质期2年产品应用范围适用于体外诊断体系磁微粒化学发光免疫诊断操作流程（本操作以两步双抗体夹心CLIA 法为例）1. 使用前准备1.1. 检测试剂：包括捕获抗体、待测物标准品、待测样品、酶标记抗体、底物液等，使用前平衡至室温1.2. Washing buffer ：用户根据需求配制洗液，使用时平衡至室温 1.3. 化学发光96孔平底微孔板1.4. 96孔平底微孔板磁性分离器：可选用海狸磁性分离器，Cat.No.60302 1.5. 漩涡振荡器 1.6. 真空吸液泵 1.7. 化学发光仪 1.8. 移液器2. 磁微粒化学发光免疫诊断操作流程2.1.调整磁珠至合适浓度（建议0.8mg/ml ），将磁珠置于漩涡振荡器上20 s ，振荡重悬磁珠。
用移液器移取50 μL 磁珠至96孔板中，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
2.2. 每孔加入100 μL 生物素化捕获抗体，充分震荡重悬磁珠，37℃恒温箱中孵育15min 后，磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下96孔板。
琼脂糖凝胶电泳注意事项及操作流程
琼脂糖凝胶电泳注意事项及操作流程凝胶电泳操作注意事项：1. 缓冲系统：在没有离子存在时，电导率最小，DNA不迁移，或迁移极慢，在高离子强度的缓冲液中，电导很高并产热，可能导致DNA 变性，因此应注意缓冲液的使用是否正确。
长时间高压电泳时，常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。
2. 琼脂糖：不同厂家、不同批号的琼脂糖，其杂质含量不同，影响DNA的迁移及荧光背景的强度，应有选择地使用。
3. 凝胶的制备：凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致，溶解的凝胶应及时倒入板中，避免倒入前凝固结块。
倒入板中的凝胶应避免出现气泡，影响电泳结果。
4. 样品加入量：一般情况下，0.5cm宽的梳子可加0.5ug的DNA量，加样量的多少依据加样孔的大小及DNA中片段的数量和大小而定，过多的量会造成加样孔超载，从而导致拖尾和弥散，对于较大的DNA此现象更明显。
5. 电泳系统的变化会影响DNA的迁移，加入DNA标准参照物进行判定是必要的。
6. DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率，平行对照样品应使用同样的缓冲条件以消除这种影响。
7. DNA迁移率取决于琼脂糖凝胶的浓度，迁移分子的形状及大小。
采用不同浓度的凝胶有可能分辨范围广泛的DNA分子，制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度。
小片段的DNA电泳应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳以提高分辨率。
琼脂糖加样时候注意事项：1、用移液抢将样品加至点样孔。
每孔点样的体积一般少于25ul，因此吸取每一个样品时，操作要稳当且细心。
2、常加一定量的蔗糖来增加样品的浓度，以使每个样品停留在各自的点样孔中。
3、在样品中加入水溶性的阴离子追踪染料（如溴酚蓝），用以看出样品移动的距离。
4、在一个或几个孔中加入标准分子质量样品，电泳结束后，根据已知分子质量的带的相应位置可用来做出标准曲线。
5、电泳一般是在追踪染料泳动到胶的80%部位时停止。
注意电泳期间，电泳槽盖要安全盖好，以防止液体蒸发，又可以降低电击的可能性。
Q-琼脂糖凝胶HP的使用方法说明
Q-琼脂糖凝胶HP的使用方法说明产品简介Q-琼脂糖凝胶HP是将季铵基团键合在琼脂糖微球上形成的一种强阴离子交换介质。
具有高分辨率，高载量，回收率高和再生能力强等特点。
化学稳定性好，可用氢氧化钠在位清洗。
基质的亲水特性保证在洗脱过程中减少细胞衍生杂质的非特异性吸附。
可用于蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
产品参数产品名称：Q-琼脂糖凝胶HP (Q- Sepharose High Performance)货号：S9200基质：6% 交联琼脂糖凝胶配基：季铵交换基团：- N+(CH3)3离子容量：0.14-0.20 mmolCl-/mL颗粒大小：34μm蛋白载量：10mg lgG，24mg HAS/mL工作pH：1~14(短时间，在位清洗)；2~12(长时间)化学稳定性：在以下溶液中稳定- 1mol/L NaOH；8mol/L尿素；6mol/L盐酸胍；30%异丙醇；70%乙醇；30%SDS，30%乙腈；使用方法1.装柱（1）将所有的试剂和填料达到室温.配制初始缓冲液(平衡液)和缓冲液。
（2）根据柱子大小取所需凝胶的量，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3:1比例）配成匀浆。
（3）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液体（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
（4）用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意不要使用气泡。
打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
（5）打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。
用2-3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
2.平衡让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。
平衡缓冲液一般是高盐浓度的缓冲液，如：Tris、PBS等。
3.上样（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心、过滤后上柱；（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡洗液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和pH值。
硼酸琼脂糖凝胶 FF使用说明
硼酸琼脂糖凝胶FF使用说明货号：CS-A08-01简介硼酸琼脂糖凝胶FF将硼酸类化合物偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上，该填料具有很高的化学稳定性。
硼酸能和1，2顺式二醇结合，所以硼酸琼脂糖凝胶可以用于糖类、核苷、核苷酸、核酸、肽及酶类的分离纯化，特别适合糖蛋白的分离纯化。
硼酸琼脂糖凝胶FF稳定性好，基团脱落少，使用寿命长，使用方便，应用广泛。
亲和填料特性：特点基团脱落少，结合特异性强基质4%的交联琼脂糖凝胶配基硼酸盐配基密度20μmol/ml吸附载量10mg亲和填料的颗粒大小45-165μm最大流速300cm/hpH范围3-10，在位清洗时pH范围可到2-13使用温度4℃~常温保存温度+4~8℃保存液体20%乙醇适用范围硼酸琼脂糖凝胶用于各种糖类、核苷、核苷酸、核酸、肽及酶类的分离纯化，特别适合糖蛋白的分离纯化。
亲和填料应用的注意事项：1、该凝胶从冷室或冰箱中取出后最好在室温下缓慢振摇恢复到室温，然后再装柱，以免产生气泡影响柱效。
2、吸附：pH8.5-10为避免离子交换的干扰，盐浓度10mM-500mM,缓冲液或者样品中不能有Tris及三乙醇胺类的物质，一些二价阳离子可以增加目标物质的吸附力。
一些非离子表面活性剂也可以加目标物质和填料的作用力。
3、洗脱：可以用pH4-6的缓冲液洗脱，也可以用1-100mM糖类竞争线性或阶段洗脱，例如用山梨醇、甘露醇等，其中Tris最有效4、上样样品必须与平衡柱子的缓冲液的pH、电导相同。
5、硼酸琼脂糖凝胶FF亲和填料的再生处理方法：先用0.1M Tris-HClpH5.0缓冲液洗3个柱床体积，然后用0.5M NaOH含2M NaCl流洗3个床体积,最后用20%乙醇洗3个床体积即可。
6、该亲和填料保存条件为20%乙醇，+4~8℃。
CM- 琼脂糖凝胶 FF使用说明
CM-琼脂糖凝胶FF使用说明货号：S8781规格：50ml保存：4℃~25℃，有效期5年。
一、简介CM-琼脂糖凝胶FF是将羧甲基键合在高流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱阳离子交换介质。
广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
本品为白色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
亲和填料特性项目指标离子交换基团-O-CH₂COO¯离子交换类型弱阳离子，可交换离子Na﹢基质6%交联琼脂糖蛋白质吸附容量60mg溶菌酶/ml介质总离子交换量0.09-0.13mmol/ml介质形状球形粒径45~165μm流速300~600cm/h；最大流速750cm/h工作温度4~40℃耐压0.3MPa耐热pH7水中120℃30minpH值稳定性2~14(短时间，在位清洗) 4~13(长时间)pH工作范围6~10化学稳定性在以下液体中稳定:所有常用的水相缓冲液；1mol/L氢氧化钠；8mol/L尿素；6mol/L盐酸胍；70%乙醇*检测条件：层析柱10mm×300mm*柱床高15cm，25℃，流动相为0.1mol/LNaCl。
.三、适用范围本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成正离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
四、操作说明1装柱（1）让所有的材料和试剂达到室温。
配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
（2）根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。
（3）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
（4）用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。
打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
链酶亲和素
实用标准文案链霉亲和素商品化应用简介一、链霉亲和素性质streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质，）是由链霉菌streptavidin，SA链霉亲和素（条相同的肽链组成，其氨基酸组成中，甘氨酸和丙氨4分子量为65kD。
链霉亲和素分子由链霉亲和素是一种稍而且结合生物素的活性基团也是肽链中的色氨酸残基；酸的含量较大，）的蛋白质，并且不带任何糖基。
偏酸性（pH6.0链霉亲和素分子中每条肽链都能结合一个生物素，因此与亲和素一样，一个链霉亲和素）亦为个生物素分子，二者亲和常数（K分子也能结合4间断裂，和Ｃ端19-2112N端10～L10／mol。
在蛋白水解酶作用下，链霉亲和素可在15链霉亲和素的活性单位也是以结形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。
18U。
生物素所需的量来表示，１mg链霉亲和素的最高活性可达μ合1g二、亲和素和链霉亲和素的比较相同点14~18U：，SA生物素结合能力：、AV：13~15U1两个位点有110-111和懒氨酸：亲和素在氨基酸序列的70-70-2、活性中心依赖于色氨酸懒氨两个位点含有色氨酸-120-121-色氨酸懒氨酸，链霉亲和素在氨基酸序列的79-80和酸。
不同点：AV=66KD, SA=54KD分子量：、1精彩文档．实用标准文案带正电较多，非特异性结合较强。
等电点：AV=10.5, SA=6.0, AV2、深，位阻效应较强，长臂生物素更适合。
SA的生物素结合位点较AV3、位阻效应：协同结合。
随机结合，SA4、生物素的结合：AV SA含甘氨酸丙氨酸较多，无糖和二硫键。
10%氨基酸序列：AV 含二硫键和糖，5、ELISA中的应用三、链霉亲和素在）可用于测定抗原，，ELISA酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标也可用于测定抗体。
在这种测定方法中有3可根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，记的抗原或抗体，③酶作用的底物。
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链霉亲和素琼脂糖凝胶6FF使用说明
货号：S5810
产品说明：
链霉亲和素琼脂糖凝胶6FF利用生物素与链霉亲和素配体之间的相互作用纯化生物素或生物素化的蛋白、抗体等物质。
链霉亲和素与生物之间的亲和力很强，需要在变性条件下洗脱，链霉亲和素对亚氨基生物素的亲和力相对较弱，可以在pH9.5-11.0结合，pH4.0时洗脱，不需要使用变性剂所以能更好的保持亲和素偶联物的活性。
具体性能见表1。
性能指标
基质4%琼脂糖微球
配体链霉亲和素
载量>120nmol/ml介质；生物素化白蛋白6mg/ml介质
粒径（μm）45-165
最大流速0.1MPa，1bar
PH稳定范围2-10
储存缓冲液含20%乙醇的1×PBS
储存温度2°C-8°C
纯化流程：
1.Buffer的准备
所用水和Buffer在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。
生物素或生物素化物质的纯化：
结合/洗杂Buffer：20mM NaH2PO4，0.15M NaCl，pH7.4
洗脱Buffer：8M盐酸胍，pH1.5
亚氨基生物素标签物质的纯化：
结合/洗杂Buffer：50mM碳酸铵，0.5M NaCl，pH10.0
洗脱Buffer：50mM碳酸铵，0.5M NaCl，pH4.0
2.样品准备
上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值，可以用结合/洗涤缓冲液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释，或者样品用结合/洗涤缓冲液透析。
样品在上样前建议离心或用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
3.样品纯化
（1）将链霉亲和素琼脂糖凝胶6FF装入合适的层析柱，层析用5倍柱体积的结合Buffer 进行平衡，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
（2）将样品加到平衡好的链霉亲和素琼脂糖凝胶6FF中（保证目的蛋白与链霉亲和素琼脂糖凝胶6FF充分接触，提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
（3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
（4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。
（5）依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被细菌污染。
4.SDS-PAGE检测
将使用纯化产品得到的样品（包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分）以及原始样品使用
SDS-PAGE检测纯化效果。
填料清洗：
链霉亲和素琼脂糖凝胶6FF纯化产品可以重复使用而无需再生，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
去除一些沉淀或变性物质：用2倍柱体积的0.1M NaOH或6M盐酸胍或8M尿素溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，PH7.4清洗。
去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质：用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积的1% Triton™X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，PH7.4清洗。