生化试剂的基本知识
干生化试剂原理及应用
稍加改进的三层结构
在试剂层上加一多孔胶膜过滤层，其作用 是将样品中的杂质过滤掉，并起保护试剂 层作用。常见的是微量法测定葡萄糖的试 剂条。
三层试剂载体的测定光路是通过透明的塑 料基片，而不经过最上面的过滤层，这样 消除了样品中干扰成分的影响，保证了待 测成分测定的稳定性和准确性。
True Dry Chemistry 真正之干化学
视所采用的分析方法而定，干片的大小大致与 一枚邮票相同，显色剂层呈现的颜色深浅与待 测物浓度成正比。
Components of One Slide 干片之基本组成
Sample 标本
Spreading layer 分布扩散层 Reagent layer 试剂层
Indicator layer 指示剂层 Support layer 支持层
Dry Slide 干片
Methodology 方法学
CM/RT Slide
Colorimetric / Rate Slide
比色 / 速率法干片
Measure chemistry concentration
by color development 通过颜色的变化来测定化学物浓度
比色/速率法干片
用于生化分析的试剂载体最简单的是二层 结构，在支持层塑料基片上有一试剂层纤 维素片，在纤维素片中预固化了全部试剂。 常见的是尿生化分析试剂条：
• 尿液中的待测成分与预固相在纤维素片上 的试剂直接反应，通过反射光度计测定其 颜色的改变，从而计算待测成份的浓度。 这种方法只能对待测成分进行定性或半定 量测定，这样就限制了它在其它须准确定 量的标本的应用。
Spreading Layer 分布扩散层
Spreading layer 分布层
试剂分类三类
试剂分类三类
试剂是科研实验中必不可少的一部分，按照其化学性质、用途和制备方法等不同分类方式，试剂可以划分为三类。
第一类：无机试剂。
无机试剂是以无机化合物为原料制备的试剂，包括各种无机盐、氧化物、酸、碱、金属、卤素等。
无机试剂用途广泛，常用于化学分析、生物化学、药物研究、环境检测、工业生产等领域。
第二类：有机试剂。
有机试剂是以有机化合物为原料制备的试剂，包括有机酸、醇、酮、醛、酯、胺、腈等。
有机试剂用途广泛，常用于有机合成、分析检测、药物研究、环境检测等领域。
第三类：生化试剂。
生化试剂是以生物组分为原料制备的试剂，包括酶、抗体、细胞培养试剂、基因工程试剂等。
生化试剂主要用于生命科学领域的研究和应用，如蛋白质、核酸、细胞等的分离、纯化、检测、研究和应用。
除了以上三类试剂外，还有其他分类方式，如按照用途可以分为分析试剂、标准物质和实验室试剂等；按照制备方式可以分为天然试剂、人工合成试剂、基因重组试剂等。
不同的试剂分类方式可以更好地了解和使用试剂，提高实验效率和科研水平。
关于生化单试剂和双试剂的基本概念
生化单试剂和双试剂是生物学和化学领域内的重要概念，对于研究生物分子和细胞的结构、功能及调控过程至关重要。
在本文中，我将为您深入探讨这两个概念的基本概念，并分析它们在生物科学研究中的重要性。
1. 关于生化单试剂的基本概念生化单试剂是指一种包含多种生物化学试剂以及其它相关试剂成分的复合试剂，用于进行生物分子和细胞的结构、功能、代谢过程、调控及其它生物学过程研究的试剂。
这种试剂不仅可以进行单一目的的研究，还可以进行多种生物学过程的研究，具有广泛的应用范围和研究价值。
生化单试剂的基本概念是其包括多种试剂成分，可以在一个实验中完成多种生物学过程的研究，具有高效性和经济性。
在生化单试剂中，通常包含用于分析和检测的试剂、用于生物分子分离和检测的试剂、用于细胞培养和检测的试剂以及其它相关试剂成分等。
这些试剂的体系结构特点中包括了对生物学过程的涵盖范围具有宽广性和有效性、试剂成分之间相互配合性好等特点。
2. 关于生化双试剂的基本概念与生化单试剂相对应的是生化双试剂。
生化双试剂是指同时包含两种生物化学试剂以及其它相关试剂成分的复合试剂，用于进行生物分子和细胞的结构、功能、代谢过程、调控等生物学过程研究的试剂。
这种试剂相对于生化单试剂，其具体用途更多的是用于对两种相关生物学过程进行研究，并能达到最佳的研究效果。
生化双试剂的基本概念是其包含两种生物化学试剂成分，能够在一个实验中对两个相关生物学过程进行研究，具有高效性和经济性。
这种试剂体系结构特点中包括了对两个相关生物学过程的研究具有高效性和体系独特性、试剂成分之间相互配合性好等特点。
3. 生化单试剂和双试剂的重要性及应用前景生化单试剂和双试剂在生物学研究中具有重要的应用价值。
它们具有良好的研究灵活性，能够满足多种生物学过程的研究需求。
它们具有高效性和经济性，能够为生物学研究提供便利。
生化单试剂和双试剂在生物学研究中具有广阔的应用前景。
在未来，随着生物学研究的不断深入和发展，生化单试剂和双试剂将在生物学研究中发挥越来越重要的作用。
生化试剂常用的溶剂
生化试验中常用的溶剂我们在生化检测或者生化试验中，几乎所有的生化反应都是在溶液中完成的；那么这些生化试剂所处的溶液环境就至关重要。
所以不同类型的溶剂就有着不同的用途。
首先从极性上区分极性顺序：水(最大）>甲酰胺>三氟乙酸>DMSO>乙腈>DMF>六甲基磷酰胺>甲醇>乙醇>乙酸>异丙醇>吡啶>四甲基乙二胺>丙酮>三乙胺>正丁醇>二氧六环>四氢呋喃>甲酸甲酯>三丁胺>甲乙酮>乙酸乙酯>三辛胺>碳酸二甲酯>乙醚>异丙醚>正丁醚>三氯乙烯>二苯醚>二氯甲烷>氯仿>二氯乙烷>甲苯>苯>四氯化碳>二硫化碳>环己烷>己烷>煤油（石油醚）1、常用溶剂：DMF、氯苯、二甲苯、甲苯、乙腈、乙醇、THF、氯仿、乙酸乙酯、环己烷、丁酮、丙酮、石油醚。
2、比较常用溶剂：DMSO、六甲基磷酰胺、N-甲基吡咯烷酮、苯、环己酮、丁酮、环己酮、二氯苯、吡啶、乙酸、二氧六环、乙二醇单甲醚、1,2-二氯乙烷、乙醚、正辛烷。
3、一个好的溶剂在沸点附近对待结晶物质溶解度高而在低温下溶解度又很小。
DMF、苯、二氧六环、环己烷在低温下接近凝固点，溶解能力很差，是理想溶剂。
乙腈、氯苯、二甲苯、甲苯、丁酮、乙醇也是理想溶剂。
4、含有羟基、氨基而且熔点不太高的物质尽量不选择含氧溶剂。
因为溶质与溶剂形成分子间氢键后很难析出。
5、含有氧、氮的物质尽量不选择醇做溶剂，原因同上。
6、溶质和溶剂极性不要相差太悬殊。
通常，在我们生化试验中，主要分析的对象是血液等体液，这些分析对象主要还是水的溶液或者浊液。
所以我们生化试验中，试剂优先考虑的还是以水作为溶剂的溶液。
德晟生化科技在研发产品试剂时，也考虑到这一点，对试剂进行官能团修饰时，保证试剂都是以水作为溶剂，而且在色原底物，缓冲剂，发光剂方面，血液抗凝剂方面水溶性都做得非常好。
基础16项生化试剂的种类及意义
考核生化试剂的种类及意义一、血脂类检查项目（4项）1.总胆固醇（CHO）参考值：0～5.2mmol/L（90～200mg/dL）高胆固醇血症与动脉粥样硬化的形成有明确关系，血液胆固醇增高多见于甲状腺功能减低，糖尿病等;胆固醇降低见于营养不良，肝功能严重低下等。
血清胆固醇的测定可用作肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能和冠状动脉疾病的诊断指标。
它在高脂蛋白血症的诊断和分类方面也有着重要的意义。
血清总胆固醇超过5.70mmol/L可考虑为高胆固醇血症，高胆固醇血症容易引起动脉粥样硬化，造成堵塞性心脑血管疾病，病理性高胆固醇血症见于肾病综合症、糖尿病、甲状腺功能减退。
胆固醇降低常见于：贫血、肝硬化、甲亢、营养不良等。
因此，胆固醇的测定对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。
2.甘油三酯（TG）参考值：0.7~1.7mmol/L高甘油三酯血症为心血管疾病的危险因素,降低则见于甲状腺功能亢进,肝功能严重低下等。
测定甘油三酯的重要意义在于诊断和处理高脂血症。
这些疾病可能是原发性的，或是继发于其它疾病如肾病、糖尿病和内分泌失调。
甘油三酯增高常见于：高脂血症、肾病综合症、糖尿病、肝胆疾病、动脉粥样硬化、甲减等。
甘油三酯降低常见于：严重营养不良、脂肪消化吸收障碍、甲亢。
甘油三酯升高已被证实是冠状动脉硬化性心脏病的危险因素。
因此，甘油三酯的测定是对于血脂疾病的诊断具有重要的临床意义。
3.高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）参考值：0.77～2.25mmol/L（47～65mg/dl）降低见于急、慢性肝病,糖尿病,慢性贫血等高密度脂蛋白胆固醇的主要生理功能是转运磷脂和胆固醇，它是一种抗动脉粥样硬化的脂蛋白，是冠心病的保护因子，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量与动脉管腔狭窄程度呈显著的负相关。
临床上以不同种类脂蛋白比例的分析作为不同类型的高脂蛋白症的鉴别诊断。
高密度脂蛋白胆固醇增高常见于：饮酒、长期体力活动等。
高密度脂蛋白胆固醇降低常见于：冠心病、脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化等。
32种常用生化试剂的配制
试剂的配制（1） 2,4—二硝基苯肼溶液Ⅰ．在15 mL浓硫酸中，溶解3g 2,4—二硝基苯肼。
另在70 mL 95%乙醇里加20 mL水。
然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液。
（若有沉淀应过滤）Ⅱ．将1.2g 2,4—二硝基苯肼溶于50 mL 30%高氯酸中。
配好后储于棕色瓶中，不易变质。
I法配制的试剂2,4—二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。
Ⅱ法配制的试剂，由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水溶液中的醛且较稳定，长期贮存不易变质。
（2）饱和亚硫酸氢钠水溶液先配制40 %亚硫酸氢钠水溶液。
然后在每100 mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中，加不含醛的无水乙醇25 mL，溶液呈透明清亮状。
由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3·10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。
然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解为止。
配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。
（3）Schiff（希弗）试剂在100 mL热水里溶解0.2 g品红盐酸盐（也有叫碱性品红或盐基品红），放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2 mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释到200 mL。
或先配制10 mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加人0．2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200 mL。
此外，也可以将0.5 g品红的盐酸盐溶于100 mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加人0.5 g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500 mL。
本试剂所用的品红是para-rossaniline（或称para-fuchsin,又称假红）。
此物与另一类似物rossaniline（或称fuchsin,称洋红）不同，现以它们的盐酸盐为例，对比结构式如下：C NH2 NH2NH2CH2IH-CNH2NH2CI-++3NH2品红溶液原是桃红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂，其变化过程如下：C NH2 NH2NH2C NH2NH2+3NH2CI-+H2SO4SO3H+HCI NH2NH2 CSO3H +NHNHHC2SO2HSO2H 2SO2NH2Schiff试剂应密封贮存于暗冷处，倘若受热见光或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红色，遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。
实验室试剂分类及管理
实验室试剂分类及管理一、实验室试剂分类实验室试剂是实验室常用的化学物质，按照其性质和用途不同，可以分为以下几类：1. 无机试剂无机试剂是指化学成分中不包含碳元素的化合物。
常见的无机试剂有盐酸、硫酸、氢氧化钠等，其在化学分析、制备实验和其他实验中起着重要的作用。
2. 有机试剂有机试剂是指含有碳元素的化学物质。
常见的有机试剂有醇类、酮类、酸类等，其在有机合成、生物化学、药物研发等实验中被广泛应用。
3. 生化试剂生化试剂用于生物化学实验和生物学研究。
常见的生化试剂包括酶类、蛋白质、核酸等，在分子生物学、细胞生物学、生物工程等领域有着重要的用途。
4. 分析试剂分析试剂主要用于化学分析和检测。
常见的分析试剂有指示剂、标准溶液、试纸等，能够帮助实验人员进行定性、定量分析和判断。
二、实验室试剂管理1. 贮存环境实验室试剂的贮存环境应符合以下要求：•温度适宜：不同试剂的贮存温度要根据其性质而定，一般要求在常温下保存，避免高温或低温环境。
•防潮防湿：试剂容器应密封良好，避免受潮受湿，以防止试剂性质变化。
•防火防爆：易燃、易爆试剂要单独贮存，禁止与氧化剂混放。
实验室内要有相应的防火设施和器材，并定期检查维修。
2. 标签标识试剂容器上应标明试剂的名称、化学式、纯度、危险性等信息，以便实验人员正确识别和使用。
标签上还应有贮存时间和有效期限的提示，避免使用过期试剂。
3. 存放位置试剂的存放位置要分类放置，避免不同性质试剂混放。
可根据试剂种类或功能进行分区，如将无机试剂、有机试剂、生化试剂、分析试剂分别摆放。
同时，要将易燃、易爆试剂放在易燃物品柜中，有毒试剂放在专用柜中，确保安全性。
4. 使用记录实验室应建立试剂使用记录，记录试剂的名称、规格、批号、领用人、领用时间等关键信息，以便进行溯源和管理。
5. 废弃处理过期或废弃的试剂要进行及时处理，严禁随意倾倒。
应根据试剂的性质，采取相应的处理方式，如回收利用、交由专业机构处理或按照相关法规进行处置。
生化试剂的基础知识
生化试剂的基础知识生化试剂的基本知识一、生化试剂的分类 (4)(一)按照化学性质分类4(二)按照临床应用分类4二、反应速度特性 (5)(一)终点法试剂5(二)动力学法试剂6三、显色原理 (9)(一)NAD-NADH和NADP-NADPH系统9(二)p-NP和p-NA系统10(三)H2O2偶联的指示系统10(四)抗原抗体反应指示系统10(五)其它显色反应11四、性能评价方法 (11)(一)主要性能指标：11(二)性能评价方法12一、生化试剂的分类(一)按照化学性质分类1.酶类：包括ALT,AST,ALP,ACP,r-GT,α-HBDH,LDH,CK,CK-MB,α-AMY,MSO,ADA,ChE 等。
2.底物/代谢产物类：包括TG,TC,HDL-C,LDL-C,UA,UREA,Cr,Glu,TP,Alb ,T-Bil,TBA,NH4+,CO2等。
3.无机离子类：包括Ca,P,Mg,Cl等。
4.特种蛋白类：包括apoAl,apoB,Lp(a),C3,C4,PFB(B因子)，IgG,IgA,IgM等。
(二)按照临床应用分类1.无机离子：包括Ca，P，Mg，Cl等。
2.肝功能：包括ALT，AST，r-GT，ALP，MSO，T-Bil，D-Bil，TBA，TP，Alb等。
3.肾功能：UA，UREA，Cr等。
4.心肌酶谱：CK，CK-MB，LDH，α-HBDH，AST，MSO。
5.糖尿病：GLU等。
6.前列腺疾病：ACP，p-ACP等。
7.胰腺炎：α-AMY。
8.血脂：TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)。
9.痛风：UA。
10.有机磷中毒：ChE。
11.免疫性疾病：C3，C4，PFB(B因子)， IgG，IgA，IgM，Kappa链，Lambda链。
二、反应速度特性按照反应速度，可以分为终点法试剂和动力学试剂。
而动力学试剂又可再分为零级动力学法和一级动力学法。
(一)终点法试剂终点法，指经过一段时间(一般为几分钟)的反应，反应进行到完全，使全部底物(被测物)转变成产物，称终点法，更确切地说应称平衡法，这是最理想的分析类型。
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属于零级动力学法的试剂主要有：
ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，α-HBDH，LDH，CK， CK-MB,α-AMY，MSO，ADA，ChE ，TBA等
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全球信赖的迈瑞
A world together
反应速度特性之动力学法
一级动力学法(固定时间法）
在一定的反应时间内，反应速度与底物 浓度的一次方成正比,由于底物在不断的消耗， 因此整个反应速度在不断的减小，表现为吸 光度的增加(或降低)速度越来越小，这类反应 A 达到平衡的时间很长，理论上可以在任意时 间段进行监测，但由于血清成份复杂，反应 刚启动时反应较复杂，杂反应较多，经过一 段延迟时间才能进入稳定反应期，必需在特 定时间段内进行监测，各试剂商对这段时间 有严格规定。
作为该指示系统常用的工具酶有LDH、MDH、 GLDH和G6PDH
目前利用此指示系统进行测定的临床项目有： ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、α-HBDH 、 Glu、 UREA、NH4+ 、CO2等。
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显色原理
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p-NP和p-NA指示系统
p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收 峰，根据405nm吸光度的变化，可以测 定物质的浓度或活性。
在一固定时间间隔中，底物浓度的变化 量正比于底物的初浓度。这是一级反应的通 性。该段时间内吸光度的增加(或)降低与被测 定物的浓度成正比。
t1 t2 t3
t4 t
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A world together
反应速度特性之动力学法
属于一级动力学法的试剂主要有：
Cr（苦味酸法），UREA（紫外监测法）
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反应速度特性之动力学法
零级动力学法
指反应过程中反应速度维持不变，达到
最大，与底物浓度无关，因此，在整个反应
过程中，反应物可以匀速地生成某个产物， A
导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地
减小或增加，减小或增加的速度(△A/min)
与被测物的活性或浓度成正比，主要用于酶
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生化试剂的基本知识
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主要内容介绍
生化试剂的分类 反应速度特性 显色原理 性能评价方法
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生化试剂的分类
按照化学性质分
酶类：包括ALT，AST，ALP，ACP，r-GT，α-HBDH，LDH，CK， CK-MB,α-AMY，MSO，ADA，ChE等。
底物/代谢产物类：包括TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，UREA，Cr， Glu，TP，Alb，T-Bil，D-Bil，TBA，NH4+，CO2等。
无机离子类：包括Ca，P，Mg，Cl等。
特种蛋白类：包括apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因子)，IgG， IgA，IgM等。
目前利用此指示系统进行测定的临 床项目有ALP、ACP、r-GT、AMY等。
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显色原理
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反应速度特性
按照反应速度，可以将生化试剂分为二大类：
终点法试剂； 动力学法试剂：又可再分为零级动力学法和一
级动力学法
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反应速度特性之终点法
• 终点法
指经过一段时间(一般为几分钟)的
反应，反应进行到完全，使全部底物(被 A 测物)转变成产物，称终点法，更确切地
最理想的反应模型。
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t3
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反应速度特性之终点法
属于终点法的试剂主要有：
TG，TC，HDL-C，LDL-C，UA，Glu，TP，Alb，TBil，D-Bil，Cr（氧化酶法），NH4+，CO2 ， Ca，P， Mg，Cl ， apoA1，apoB，Lp(a)，C3，C4，PFB(B因 子)，IgG，IgA，IgM等。
活性的测定。
实际上，由于底物浓度不可能足够大，
随着反应的进行，底物消耗到一定程度后， 反应速度不再维持不变，同样从启动反应到
t1 t2 t3
tn
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达到最大速度需要一定时间。因此，零级动
力学法是针对于特定时间段而言的，各试剂
商对这段时间有严格规定。
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反应速度特性之动力学法
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生化试剂的分类
按照临床应用分
胰腺炎：α-AMY。 血脂：TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)。 痛风：UA。 有机磷中毒：ChE。 免疫性疾病：C3，C4，PFB(B因子)， IgG，IgA，IgM，
Kappa链，Lambda链。
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生化试剂的分类
按照临床应用分
无机离子：包括Ca，P，Mg，Cl等。 肝功能：包括ALT，AST，r-GT，ALP，MSO，T-Bil，
D-Bil，TBA，TP，Alb等。 肾功能：UA，UREA，Cr等。 心肌酶谱：CK，CK-MB，LDH，α-HBDH，AST，MSO。 糖尿病：GLU等。 前列腺疾病：ACP，p-ACP等。 胰腺炎：α-AMY。
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显色原理
NAD-NADH和NADP-NADPH系统 p-NP和p-NA系统
H2O2偶联的指示系统
抗原抗体反应指示系统 其它显色反应
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显色原理
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NAD-NADH和NADP-NADPH系统
NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰，而 NAD和NADP在340nm无特征性吸收峰，利用其偶联 的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可 以测定物质的浓度或活性。
说应称平衡法，这是最理想的分析类型。
整个反应达到平衡，由于正向反应的平
衡常数很大，可认为所有的被测定物已
转变为产物，反应液的吸光)程度
与被测定物的浓度成正比。 终点法对反应条件(如酶量、pH、温
t1 t2
度)小的改变不敏感，只要这种改变不影
响在一定时间内反应达到平衡即可，是