脐血单个核细胞
NK细胞无血清培养套装使用说明书——脐血2L体系
NK 细胞无血清培养套装使用说明书——脐血2L 体系【适用范围】【试剂准备】【使用步骤】【产品组成】【脐血PBMC 分离】用于脐带血体外诱导扩增NK 细胞。
如用采血袋采集，由于采血袋中含有抗凝剂，务必保证血样净含量50mL （不包括抗凝剂体积），否则在接种细胞时细胞的总数量达不到接种要求，最终收获不到理想细胞数。
2L 培养体系套装：适用于50mL 脐带血的样本量，使用2L 培养基。
分离单个核细胞前，应将脐血、PBS （生理盐水）和淋巴细胞分离液室温平衡至20℃。
将脐带血平均分装到50 mL 离心管中，于室温下700g 离心15 min （离心机升速8，降速4）， 取上层淡黄色血浆至新的50mL 离心管中（下层红色液体用于提取单个核细胞），于水浴锅中 56℃灭活30min ，然后900g 离心10min ，取上清，置于-20℃，15min ，再次900g 离心10min ， 取上清，置于4℃保存。
（900g 离心时离心机的升降速均调节至最高即可） 1. 第0天T175培养瓶包被:先将15mL PBS 加入T175瓶中，再将一支YC00A 添加于T175瓶中，充分混 匀后，37℃孵育2h ，弃去上清，并用15mL PBS 清洗一次,弃清洗液后备用。
接种45mL 培养 基A ，细胞密度2-3E6/mL ，添加诱导因子一支YC00B ， 添加10%比例的自体血浆。
2. 第3天补加100mL 培养基B ，添加5%的自体血浆，动作轻柔、不可将贴壁细胞晃起。
3. 第5天补加150mL 培养基B ，添加1%的自体血浆，分成两个T175进行培养，分瓶时轻轻将底部细胞 团吹起，单个的贴壁细胞不用过度吹打。
4. 第7天补加300mL 培养基B ，添加1%的自体血浆，轻轻地将细胞团晃起后把所有细胞转移至细胞培 养袋，原瓶中各添加50mL 新鲜培养基B 。
原瓶中的单个贴壁细胞不用过度吹打。
(1) 取上一步血浆提取中得到的下层红色液体用生理盐水1：2稀释，混匀，备用。
PHA—M体外诱导脐血单个核细胞分化为内皮细胞的实验研究
１２ １ 人 Ｕ ＭＮ 的 分 离 和 培 养 ．． Ｂ Ｃ
用 无 菌 血 袋 采 集 足 月 妊
在 电镜 下 观 察 内 皮 细 胞 特 异 性 的 Ｗｅ ｅ—ａ ｄ （ Ｐ 小 体 。 ｉ ｌ ｌ ｅ Ｗ— ） ｂ Ｐａ 结 果 ： Ｐ Ａ 的诱 导 下 ，Ｕ ＭＮ 可 分 化 为 典 型 的 梭 形 内 皮 在 Ｈ Ｂ Ｃ 细胞 。Ｆ Ｍ 检 测 诱 导 分 化 效 率 达 ６ ％ 以 上 ；电 镜 观 察 发 现 ， Ｃ ０ 在 胞 质 中 含 有 内 皮 细 胞 特 异 性 的 Ｗ— Ｐ小 体 。 结 论 ：Ｕ ＭＮ Ｂ Ｃ 在 Ｐ Ａ 的诱 导 下 ， 定 向 分 化 为 内 皮 细 胞 ，为 用 脐 血 治疗 缺 Ｈ 可
血 性 疾 病 的 可 能 性 提供 了 实 验 依 据 。
娠 、 常 分 娩 的 新 鲜 脐 血 ８ Ｌ 含抗 凝 剂 Ｃ Ｄ Ａ２ Ｌ ， 正 ０ｍ （ Ｐ — ８ｍ ） 按 等 比例 加 入 到 用 ３ ／ ０ｇ Ｌ明 胶 沉 淀 的 红 细 胞 中 ， 温 静 ３ ｉ。 室 ０ｍ ｎ 收 集上 层 富 含 有 核 细 胞 的 血 浆 ， 入 ＦｃｌＨ ｐｑ ｅ分 离 液进 加 ｉ ｌ ｙａ ｕ ｏ— 行 密度 梯 度 离 心 （ ０ ／ ｎ ３ ｉ） 吸 取 梯 度 界 面 上 的 ２０ ０ ｒｍｉ， ０ ｍ ｎ 。 Ｕ Ｍ Ｃ 以 Ｐ Ｓ洗 ３次 ，置 于 塑 料 平 皿 内 。加 含 １０ｍＬ Ｌ胎 Ｂ Ｎ Ｂ ０ ／
Ｐ ＨＡ． 体 外 诱 导 脐 血 单 个 核 细 胞 分 化 为 内皮 细 胞 的 实 验 研 究 Ｍ
徐 建 萍 ，卓光 生 （ 福建医科大学 ： 医学技术与工程学院检验系， ‘ 附属第一医院血液科， 福建 福州 ３００ ） ５０４
脐血单个核细胞体外分离和定向分化为神经干细胞的实验研究
１ ０ ）ａ ｌｓｂ ｅ ｔｉｕ ａｉｎｏ ｅ ｙ ｈ ｐ ｅ （ ｅ ｓｔ ． ７ ／ １ ｄ ｎ ｉｙｇ ａ ｉｎ ｎ ｈ ｎａ ｈ ｒ ｎ ｕｔ ａｅ Ｏｏ ｔｉ Ｓ ０ ｍ１ｓ ｍｐｅ ｙ ｃｎ ｒｆｇ ｔ ｖ ｒｌｍｐ ｏ ｒｐ ｄ ｎ ｉｙ１ ０ ７ ｍ ） ｅ ｓｔ ｒ ｄｅ ｔａ ｄｔ ｅ ｄ ｅ ｅ ｔｃ ｌｖ ｔｄｔ ｂａｎＭ Ｃｓ ｏ ｉ
（ ｐ ｔ ｎ ｆ ｕ ｏｏ ｙ， ｐｉｇ Ｈｏｐｉ ｌ Ｔ＾ Ｄｅ ａｒｍｅ ｔ Ｎｅ ｒ ｌｇ Ｄａ ｎ ｓ ｔ ， ｏ ａ
Ｍｉｉａ ｙ Ｍｅ ｃ ｌＵｎ ｖ ｒｉｙ， ｈ ｎ ｑｎ ０ ０ ２ Ｃｈ ｎ ） ｌｔ ｒ ｄｉａ ｉｅｓｔ Ｃ ｏ ｇ ｉ ｇ ４ ０ ４ 。 ｉａ
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１ ４６ ２
重庆 医学 ２０ ０ ７年 ７月 第 ３ ６卷 第 １ 期 ３
・
论
著 ・
脐血 单 个核 细 胞体 外分 离 和 定 向分 化 为神 经 干 细胞 的 实验 研 究
向 静 ， 昌 铭 ， 景 周△ 王 王
（ 第三 军 医大学 大坪 医院野 战 外科 研 究所神 经 内科 ， 庆 ４ ０ ４ ） 重 ０ ０ ２
ｃｏ ｅ ． ｏ ｏ ｅ ｖ ｈｅ ｓ ｐｅ ｂ ｉｒ ｓ ｏｐ ｎ Ｏ ｅ ｍ ｉ ｈｅ ｐｈ ｎｏ ｙ ｅ ｆｔ ｅｌ ｌ ｌ ｎｉｓ Ｔ ｂｓ ｒ ｅ ｔ ｈａ ｙ ｍ ｃ ｏ ｃ ｅ ａ ｄ ｔ ｘａ ｎｅｔ ｅ ｔ ｐ ｓ ｏ ｈｅ ｃ ｌ ｂｙ ｆ ｏｗ ｙｔ ｍ ｅ ｒ ｔ ｅｎ ｉ ｓ ｃ ｏ ｔ ｙ， ｈ ｎｄｕ ｅ ｉｈ Ｎ ＧＦ ｃ ｄｗ ｔ ａ ｎｄ ＲＡ ｎ ｖ ｔｏ． ｉ ｉｒ Ｔｈｅ ｅ ｒ ｅｔ ａ ｃ ｉ ｔ ｓ ｌ ｍ ｅ ａ ｅ ｃ ａ ｎ ｒ ａ ｔｏｎ（ ｎ ｒ ｖｅ ｓ ｒ ｎｓ ｒｐ ａ ｅｐｏ ｙ ｒ ｓ ｈ ｉ ｅ ｃ ｉ ＲＴ— ＰＣＲ） ｏｒｎ ｓ ｉ ｎ ｕ ａ ｈｉ１ ａ ｉ ｎ ｒ ｒｏｒ ｅ Ｏ ｆ ｅ ｔｎ ａ ｄ ｍ ｓ ｓ 一 ｎｔｇｅ ｗｅ ｅｐｅ ｆ ｍ ｄ ｔ ｃ ｆｒ ｓ ｌ ｎｄ ｍ ｕ ａ ｈｉ ａ ｔｇｅ ｘｐ ｅ ｓｏｎ ｉ ＳＣｓ Ｒｅ ｕｌｓ Ａ ｆｅ ｄｈｅ ｅ ｕｌｉ ｔｏｎ， ｏ ｔｃ ｌｓ ｂ ｃ ｍ ｅ ｒ ｍ ｂ ｃ， ｎ ｆ ｏｎ ｉｍ ｎｅ ｔｎ ａ ｓ ｓ 一１ ｎ ｉ ｎ ｅ ｒ ｓ ｉ ｎ Ｍ ． ｓ ｔ ｔｒａ ｒ ｎｔｃ ｔｖａ ｉ ｍ ｓ ｅｌ ｅ ａ ｈｏ ｉ ａ ｄ ｄｉ— ｆ ｒ ｎｔａ ｅ ｎｔ ｅ ｏｎ ｌｋｅ ｃ ｌ ｆｅ ｎｄｕ ｔｏｎ， ｘｐ ｅ ｓｎｇ ＣＤ ２ ｅ ｅ ｉ ｔｄ ｉ ｏ ｎ ｕｒ —ｉ ｅｌｓａ ｔ ｒ ｉ ｃｉ ｅ ｒｓ ｉ ９ ｂｕｔｎ ｏ ＣＤ３４． ＣＤ ｎｄ ＣＤ ｂ．ＲＴ＿ ｌ１ａ ａ １１ ＰＣＲ ｍ ｏｎ ｔａ ｅ ｍ ａ１ ｄｅ ｓｒｔｄ ｓ ｌ
脐血单个核细胞成功培养的相关影响因素
是神 经等 多种 细胞 的丰富来 源 。 本 实验拟 通 过 分 别 按 １ × １ ０ 。 ， ５ ｘ ｌ ０ 。 ， １ × １ ０ 的 密度 置 于 Ｔ 一 ７ ５
体 外实 验 条件 下获 取 脐血单 个 核 细胞 ， 探 讨 脐 培养 瓶 ， 以 未加 细胞 因子 作 为 对 照组 ， 在无 血
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侯
萍， 等． 脐血单个核细胞成功培养的相关影响因素
￣ ． ｚ ｇ Ｉ ｌ Ｓ ｃ Ｓ ｋ ｆ Ｎ１ ． ｃ ｏ ｍ ６ ７ ３ ｋ － ｆ ２ ８ ３ ２ ３ ２ ８ ５ ５ ０ Ｃ ８ ３ Ｎ ＠ ２ ｓ １ ． ｉ ｎ １ ａ ５ ３ ｃ ９ ｏ ／ ｒ Ｒ ｎ
课 题 背 景 ：课 题 为 沈 阳 市 科 学技
术 计 划 项 目
（ １ ０６ ３ ２３ ９ ． ３ ． ０ ０）
侯萍 ， 宋志国 ， 赵 冬阳 ， 刘英杰 ， 李剑 平． 脐血单个核细 胞成功培养 的相 关影 响因素【 Ｊ 】 ． 中国组织工程研究与临床康复 ， ２ ０ ０ ７ 。 １ １ （ ３ ７ ） ： ７ ３ ７ ７ ． ７ ３ ８ ０ 【 ｗ ｗ ｗ ． ｚ ｇ ｌ ｃ ｋ ｆ ． ｃ ｏ ｍｌ ｚ ｇ ｌ ｃ ｋ ｆ ｌ ｅ ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｌ ｕ ｐ ｉ ｆ ｌ ｅ ｓ ／ ０ ７ － ３ ７ ／ ３ ７ ｋ － ７ ３ ７ ７ （ ｐ ｓ ） ． ｐ ｄ ｆ ］
淋 巴 细胞 分 离 液 （ １ ． ０ ７ ７ ｇ ／ ｃ ｍ。 ， 天 津 津 脉有 限
公司） ； 无 血清 ＤＭＥ Ｍ／ Ｆ １ ２培 养液 （ Ｈ ｙ ｃ ｌ ｏ ｎ ｅ ） 。 ２ 结 果 设计 、 实施 、 评估 者 ： 实 验 设 计 为 第 五 作 者， 干 预实 施 、 结 果 评估 为 全部 作者 ， 均 经 过 系 ２ ． １ 脐 血 细胞 的生 长及 形 态特征 脐 血 单 个 统 培训 ， 实验 过程 中 未使用 盲法评 估 。
外周血单个核细胞的分离
外周血单个核细胞的分离
概述
外周血单个核细胞是一种白细胞。
通过分离单个核细胞，可以进行多种分子生物学实验和临床应用。
本文将介绍两种分离外周血单个核细胞的方法。
方法
密度梯度离心
1.将外周血收集到 EDTA 管中。
2.将 3 毫升 Ficoll-Paque™ PLUS 加入到 15 毫升离心管中。
3.轻轻加入同等体积的外周血到离心管，保持液面平整。
4.以 400g 的速度离心 40 分钟。
在离心温度达到室温前离心室门不得
打开。
5.用温和的力度将上清液吸出到新的离心管中，并在 1200g 的速度下
洗涤 2-3 次。
6.已经分离的单个核细胞可以在非抗凝血样上重悬。
此过程中加入生长
培养基以维持细胞质稳定。
磁性负选择法
1.将外周血收集到 EDTA 管中。
2.加入红细胞淋巴细胞分离液，根据厂家指南染色。
3.加入磁性微珠混合液，使单个核细胞与微珠组合。
4.放入磁场中过滤掉未与微珠组合的细胞及其他血细胞。
5.经过多次洗涤和离心，单个核细胞可以在非抗凝血样上重悬。
此过程
中加入生长培养基以维持细胞质稳定。
密度梯度离心法和磁性负选择法是分离外周血单个核细胞的两种有效方法。
这些方法对于多种分子生物学实验和临床应用都非常有用。
【国家自然科学基金】_脐血单个核细胞_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
科研热词 脐血 自然杀伤细胞 细胞培养 细胞因子诱导杀伤细胞 细胞因子 单个核细胞 nod/scid小鼠 集落 间充质干细胞 间允质十细胞 重症肌无力 造血干细胞,脐血 造血干 适应性反应 过继免疫治疗 许旺细胞 血管内皮细胞 血小板生成素 脐血间充质干细胞 脐血干细胞移植 脐血单核细胞 脐血单个核细胞 脐血cd34+细胞 脐带血 脊髓损伤 胸腺移植 胎肺间充质干细胞 肝样细胞 肝损伤 细胞移植 纤维连接蛋白 红细胞生成素受体 移植 神经细胞 祖细胞 破骨样细胞 牙周膜细胞 热休克蛋白10(hsp10) 氢醌 植入 树突状细胞瘤苗 无血清培养 持续静压力 抗肿瘤活性 扩增 微胶囊 微环境 彗星试验 巨核细胞 多抗甲素 外周血单个核细胞 基因甲基化
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2011年 科研热词 推荐指数 脐血 3 内皮祖细胞 3 脐血单个核细胞 2 单个核细胞 2 黏附 1 铁超负荷 1 金黄色葡萄球菌超抗原样蛋白-5 1 造血细胞 1 造血干祖细胞 1 造血功能 1 脑白质 1 脐带血 1 胸腺上皮细胞 1 肝细胞 1 缺氧缺血 1 细胞毒性 1 细胞分化 1 组织工程心脏瓣膜 1 组织工程 1 种子细胞 1 白介素2 1 白介素15 1 活性氧 1 氧化性应激 1 植入 1 枸杞 1 新生大鼠 1 当归 1 归巢 1 基质细胞 1 内皮集落形成细胞 1 体外分离与培养 1 人脐血 1 t细胞亚群 1 p-选择素糖蛋白配体-1 1 nk细胞 1 k562细胞 1 jurkat细胞 1
科研热词 脐血 间充质干细胞 贴壁筛选法 羟乙基淀粉 密度梯度离心 髓系来源抑制细胞 阿司匹林 间质干细胞 铁超负荷 脐血间充质干细胞 脐血单个核细胞 脐带血 脐带 胎牛血清 肿瘤 耐药基因abcg2 缺氧缺血性脑损伤 细胞因子诱导杀伤细胞 神经营养因子 神经生长因子 神经损伤 激活型表面标志物 活性氧物质 新生大鼠 抑制型表面标志物 少突胶质祖细胞 宫内感染 外周血 单个核细胞 内皮祖细胞 信号传导 促红细胞生成素 人脐血清 乳腺癌 t细胞 tlr3 stat3 hbv polyi:c cbmcs
密度梯度离心法分离脐血单个核细胞方法的优化
密度梯度离心法分离脐血单个核细胞方法的优化任思坡;吴秀娟;罗小虎;李全双;韩光宇;谭昆;拾莉;耿跃春【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2012(027)001【摘要】目的对密度梯度离心法分离脐血单个核细胞的方法进行优化,以提高该方法分离脐血单个核细胞的收率.方法脐血40份,每份40 ml,分为常规组和优化组,每组20份.常规组脐血与NS1∶1混合稀释后,直接通过Ficoll分离液分离单个核细胞；优化组通过先将脐血洗涤一次,加入等量NS充分吹打混匀,200目筛网过滤,保持细胞悬液和Ficoll分离液1:1的体积比进行分离操作.对每份分离得到的脐血单个核细胞通过白细胞稀释液稀释后计数.结果常规组分离后的白膜层有11份界面不清晰,同时均混有少量的红细胞.优化组分离后的白膜层有1份界面不清晰,仅有极少的红细胞混入.两种方法收集的脐血单个核细胞数比较,优化组多于常规组(P＜0.01).结论通过对密度梯度离心法的步骤进行优化,可提高脐血单个核细胞的分离效果.【总页数】3页(P101-103)【作者】任思坡;吴秀娟;罗小虎;李全双;韩光宇;谭昆;拾莉;耿跃春【作者单位】徐州市医学科学研究所,江苏徐州221006;徐州医学院,江苏徐州221002;徐州医学院,江苏徐州221002;徐州市医学科学研究所,江苏徐州221006;徐州市医学科学研究所,江苏徐州221006;徐州市医学科学研究所,江苏徐州221006;徐州市医学科学研究所,江苏徐州221006;徐州市医学科学研究所,江苏徐州221006【正文语种】中文【中图分类】R446.113【相关文献】1.密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞方法的优化 [J], 郝洪波;任思坡;谢晓东2.密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞方法的优化 [J], 郝洪波;任思坡;谢晓东;3.Ficoll密度梯度离心法分离腹水单个核细胞方法的优化 [J], 杨永强;张巧玲4.密度梯度离心法分离单采浓缩白细胞悬液中单个核细胞方法探讨 [J], 王富英; 廖群艳5.Ficoll密度梯度离心法分离猪外周血单个核细胞条件的探讨 [J], 张素华;林丹丹;张美娟;陈雪松;徐进梅;单昊;吴观陵;吴海玮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脐带血有必要保存吗？科学认识脐带血不要被不实言论误导
脐带血有必要保存吗？科学认识脐带血不要被不实言论误导现如今，已经有越来越多的家长选择为孩子保存脐带血，因为脐带血含有丰富的造血干细胞，是重要的人类生命资源。
将孩子脐带血保存起来可以说是给孩子一份健康保障。
但是还是有很多人并不完全了解脐带血，对于“脐带血有必要保存吗”这个问题，下面就为大家详细解答一下。
首先，要想知道脐带血有没有必要保存，就必须要正确地认识脐带血的价值。
脐带血含有丰富的造血干细胞，具有重建血液系统和免疫系统的功能，是造血干细胞的重要来源之一。
造血干细胞移植技术目前已经广泛应用于临床治疗，是成熟的医疗技术。
自1988年第一例脐带血移植在法国成功治疗范科尼贫血后，全球目前脐带血治疗已经超过50000个案例，在北京已经有超过280，000家庭储存脐带血。
世界首例脐带血移植专家，美国杜克大学临床和转化细胞治疗项目的首席医学官兼科学家Joanne Kurtzberg教授介绍了美国在脐带血研究和应用方面的前沿实践与经验。
Joanne Kurtzberg教授展示了一张31年前接受脐带血移植的患者照片。
当时，图片上的小男孩接受了他同胞妹妹脐带血的移植，脐带血中的造血干细胞可以替代骨髓中的造血干细胞为他造血。
至今经过31年，这位病人妹妹的干细胞仍然在他的体内持续植入，并发挥正常造血功能。
事情远远没有这么简单，脐带血的价值也不仅限于造血干细胞。
经研究发现，脐带血中不仅含有可以造血的造血干细胞，还含有淋巴细胞、单核细胞等单个核细胞。
脐带血中的单个核细胞是可用于治疗脑损伤，包括脑瘫、中风等的重要组成部分。
“我们发现脐带血在神经功能方面有多种非常神奇的效果，我们将会进行更多的研究，来弄清楚脐带血治疗神经功能损伤的机理，扩大适应证。
”Joanne Kurtzberg教授说。
脐带血是孩子来到这个世界上带给自己的珍贵礼物，一生只有一次保存机会。
所以保存脐带血已经成为一种趋势，希望广大家长为孩子积极保存，切勿随意抛弃。
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可能是利用了脐血清中丰富的抗体进行了初步的病原体灭
除。
二次世界大战期间，苏联战地医院的的血液供给极其紧张，
情急之下苏联Ascoli医生首次大胆的使用了血型相合的脐
血进行了静脉输注，挽救了部分战士的生命。
历史应用
脐血优势
1）脐血来源丰富，取之不尽，用之不竭； 2）采集方便，对产妇和胎儿无任何损害； 3）脐血是以实物的形式保存，不会被供者拒绝； 4）寻找HLA相合脐血所需时间短，可根据患者需要及时进行移植； 5）脐血中早期造血干细胞含量丰富，一份脐血可满足30~40kg体重的儿童造 血重建，也能满足部分成人移植的需要；
脐血单个核细胞
（Cord Blood Mononuclear Cell，CB-MNC）
报告人：陈莉 2014-9-20
主要内容
一、脐血介绍 二、脐血临床应用历史 三、脐血MNC治疗病种 四、脐血MNC治疗原理 五、脐血MNC分离及保存 六、脐血MNC治疗常用回输方式及日程
一、脐血介绍
脐血MNC移植后向病变部位组织渗透融合，一些移植的
脐血多能干细胞在新的环境下分化成需要的细胞，表达细 胞特有表型，替代损伤细胞，重建功能细胞群，达到恢复 组织功能的目的。
2.内皮修补机制
脐血MNC可向内皮细胞分化；EPC可向损伤区归巢，参与
构建毛细血管网并分泌血管形成因子，具有多分化潜能的
脐血MNC可增殖并增补EPC，脐血MNC中的EPC可直接参
三、脐血MNC治疗病种
神经系统疾病：脊髓损伤、脑瘫、脑梗塞、脑出血、肌营
养不良、老年痴呆、脑卒中
呼吸系统疾病：呼吸窘迫综合症
消化系统疾病：肝衰竭、肝硬化
内分泌疾病：卵巢早衰、糖尿病、糖尿病足 心脏疾病：心肌梗塞 其他疾病：小儿脑瘫、创口修复
四、脐血MNC治疗原理
1. 替代机制：
二、脐血临床应用历史
早在公元1590年李时珍《本草纲目》中就记载了蒸食脐带 和胎盘能够促进产妇下乳的现象，我们知道在自然界中的 野生动物如长颈鹿、角马和羚羊等动物也在分娩后立即吃 掉胎盘和胎衣等，现在的科研证明，胎盘和脐带中含有丰 富的促乳素并确定了其分子量和生物学活性。
历史应用
《本草纲目》中记载了使用脐血滴眼治疗眼疾的疗法，这
六、脐血MNC治疗常用回输方式及日程
一：静脉输注 二：局部注射
肌 肉 椎 管 脑 室
三：经脉管介入
回输日程
脐血MNC回输治疗一般1-2次回输。如果患者要求， 可与医生讨论，改变回输次数和间隔。回输结束后， 可判定临床治疗效果后，再决定是否继续治疗。
白细胞
干细胞Βιβλιοθήκη MNC脐血采集脐血MNC分离
羟乙基淀粉(HES)沉淀法 密度梯度离心法：Ficoll
单克隆抗体加流式细胞仪分析法
免疫磁珠分选法
脐血MNC分离指标
流式细胞仪：CD34+细胞数 单个核细胞数：细胞数 3-5*108 台酚蓝染色：细胞活力 99%以上
脐血MNC保存
与受损局部血管的形成及损伤修复过程。
3.免疫内分泌刺激机制
脐血MNC可对机体产生免疫刺激作用，刺激机体的内分泌 系统产生反应，促进组织损伤的修复。
五、脐血MNC分离及保存
红细胞 血小板
嗜中性粒细胞 嗜碱性粒细胞 嗜酸性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 造血干细胞 间充质干细胞 脂肪、神经干细胞 ……
脐血
6）脐血中免疫细胞不成熟，移植后急、慢性GVHD的发生率低且严重程度较 轻，可耐受较大的HLA差异；
7）脐血中各种病毒感染的机会较小，移植术后病毒性疾病发生率低；
8）可针对少数民族人群收集相应的脐血，可避免因种族不同而造成不易找到 合适的造血干细胞来源。
近年来，全世界许多国家和地区相继建立了脐血库，仅欧 洲和美国目前保存的脐血已超过65，000份，中国保存脐 血数量达20，000份以上。据不完全计, 迄今为止全世界已 进行了3000例以上脐血移植, 仅欧洲和美国纽约血液中心 就为无血缘脐血移植提供了2000余份脐血。
胎儿附件是指在正常分娩过程中，所产生的胎盘、脐带和脐 带血。
脐血是指胎儿出生时脐带内及胎盘近胎儿一侧血管内的血 液，含有丰富的干细胞和祖细胞，主要包含造血干细胞和 间充质干细胞。 脐带血采集的质量和数量受多种因素的影响，如产妇自身 因素、胎盘大小、脐带有无水肿和粗细情况、胎儿体重、 护士采血技术的熟练程度、采血时间的及时把握等。