细胞工程
细胞工程名词
细胞工程名词解释细胞工程 (cell engineering)是以细胞生物学和分子生物学为基础理论，采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性，以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物，并发展有关理论和技术方法的学科。
动物细胞培养（animal cell culture）：是指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞后，模拟动物体内的生理条件，在体外无菌、适当的温度、湿度、酸碱度、气体环境及一定营养条件下，使其不断地生长、增殖并维持其正常的结构和功能的一种技术。
动物器官培养（organ culture）：是指对离体的整个器官、器官芽基或器官的一部分进行体外培养，构成器官的不同组织仍保持着它们原来的结构与功能，因而培养的器官在结构、功能上与体内相应的器官非常相近。
动物组织培养（tissue culture）：是指取自动物体的某种组织，不经细胞分散处理，对组织团块直接进行体外培养，组织中的细胞与其邻近的细胞、细胞外基质仍然保持着原本的联系，且细胞一直保持原本已分化的特征，组织的结构和功能在培养过程中无明显的变化。
原代培养（primary culture）：从有机体取得的材料（细胞、组织或器官）在培养容器培养到第一次传代前，即为原代培养或初代培养。
汇合（confluent）：指在培养容器中培养的细胞彼此汇合形成单层。
接触抑制(contact inhibition)：体外培养的正常动物细胞，在生长过程中达到相互接触时停止分裂和运动的现象。
外植快（explant）：用于初始体外培养而切下的一小块组织或器官。
传代（passage）：将细胞从一个培养容器移植到另一个培养容器中，也称为传代培养或再培养（subculture）。
细胞系（cell line）：原代培养物经首次传代成功后即为细胞系。
如果细胞系不能继续传代或传代次数有限，称为有限细胞系（finite cell line)。
第二讲细胞工程-PPT
3、2、2、1 制片技术
1)超薄切片
通常以锇酸与戊二醛固定样品,以环氧树脂包埋,以 热膨胀或螺旋推进得方式推进样品切片,切片厚度 20~50nm,切片采用重金属盐染色,以增大反差,图
2)负染技术
负染就就是用重金属盐(如磷钨酸、醋酸双氧铀) 对铺展在载网上得样品进行染色;吸去染料,样品干 燥后,样品凹陷处铺了一薄层重金属盐,而凸得出地 方则没有染料沉积,从而出现负染效果,分辨力可达 1、5nm左右,图
3、2、4 扫描隧道显微镜
扫描隧道显微镜由Binnig等1981年发明,根据量子 力学原理中得隧道效应而设计。当原子尺度得针 尖在不到一个纳米得高度上扫描样品时,此处电子 云重叠,外加一电压,针尖与样品之间产生隧道效应 而有电子逸出,形成隧道电流。电流强度与针尖与 样品间得距离有函数关系,当探针沿物质表面按给 定高度扫描时,因样品表面原子凹凸不平,使探针与 物质表面间得距离不断发生改变,从而引起电流不 断发生改变。将电流得这种改变图像化即可显示 出原子水平得凹凸形态。扫描隧道显微镜得分辨 率很高,横向为0、1~0、2nm,纵向可达0、001nm。
基中添加较高浓度得生长素类激素使植物 重新处于旺盛得有丝分裂状态
6、1、3 继代增殖阶段 6、1、4 生根发芽阶段 6、1、5移栽成活阶段 植物组织培养过程 转基因植物培育过程
6、2 植物细胞原生质体得制备与融合
6、2、1原生质体得制备 植物细胞原生质体就是指那些已去除全部
细胞壁得细胞
原生质体得制备包括取材与除菌、酶解、 分离、鉴定5个步骤
激光共聚焦扫描显微镜
激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细 胞形态,也可以用于细胞内生化成分得定量 分析、光密度统计以及细胞形态得测量,其 原理就是利用激光作扫描光源,逐点、逐行、 逐面快速扫描成像,由于激光束得波长较短, 光束很细,所以共焦激光扫描显微镜有较高 得分辨力,大约就是普通光学显微镜得3倍
细胞工程的名词解释是什么
细胞工程的名词解释是什么细胞工程，是一门通过应用生物技术和工程原理研究和利用细胞的学科。
它将工程学和生物学相结合，旨在改变细胞的特征、功能或行为，以满足各种实际需求。
细胞工程在医学、农业、食品工业等领域具有广泛的应用前景。
一、细胞工程的基本原理细胞工程的核心在于对细胞的改造和设计。
研究人员通过基因工程技术、细胞培养和细胞分化等手段，对细胞进行修饰和改变，使其具备特定的功能和特性。
这种方式在基因治疗、组织工程和器官移植等领域具有重大意义。
基因工程技术是细胞工程的重要工具之一。
通过插入、删除或修改细胞的基因序列，研究人员可以改变细胞的生理特征和功能。
基因治疗便是细胞工程的一个应用领域，通过提供、修复或替换功能缺失的基因，治疗一些遗传性疾病。
细胞培养是细胞工程的另一个主要手段。
研究人员将细胞在实验室中繁殖和培养，以满足大规模生产和应用的需要。
细胞培养技术广泛应用于药物研发、生物制造和组织工程等领域，为人类健康和生产提供了重要的支持。
细胞分化是细胞工程的重要环节。
通过控制和引导细胞的分化方向，研究人员能够使其发展成为特定类型的细胞或组织。
这对于再生医学和组织工程等领域来说非常关键，为细胞材料的修复和替代提供了可能。
二、细胞工程的应用领域细胞工程在医学领域具有巨大的潜力。
通过细胞工程技术，研究人员可以设计和构建人工器官，替代或辅助受损的组织和器官，为病患提供重要的帮助。
此外，细胞工程还可以用于研发新型药物和治疗方法，提高疗效和降低副作用。
农业领域也是细胞工程的重要应用领域之一。
通过改造作物细胞的基因，在作物中增加耐虫性、抗病性或提高产量等特征，可以有效提高农作物的质量和产量，减少对化学农药的依赖，实现可持续农业的发展。
此外，细胞工程还在食品工业中起到重要的作用。
研究人员通过细胞工程技术，培育高营养价值和功能性的食品材料。
这不仅可以满足人们对于健康食品的需求，还有助于解决全球食品供应和营养不足的问题。
三、细胞工程面临的挑战与展望尽管细胞工程在多个领域已经取得了显著的进展，但仍然面临着许多挑战。
(细胞工程)名词解释
一、名词解释细胞工程:是应用细胞生物学和分子生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。
通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。
外植体:是指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。
植物组织培养：（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
（狭义）组培指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。
胚状体〔embroid〕:—对应于胚〔embryo〕，在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。
离体无性繁殖：是在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖的技术。
跟常规的繁殖方法相比它是一种微型操作过程，因此，有时就直接称之为微繁继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。
细胞分化:指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。
细胞脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分化组织状态的过程。
细胞再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
人工种子:亦称体细胞种子。
早期的人工种子概念是：体细胞胚经过人工种皮包被后而形成的体细胞种子。
现在指任何一种经人工种皮包被或裸露的，具有形成完整植株能力的繁殖体均可称之为人工种子。
植物细胞全能性:指每个植物细胞都具有形成完整植株的能力，因为每个细胞都具有全套的遗传基因，无论是性细胞还是体细胞在特定条件下可以进行表达。
细胞工程名词解释
细胞工程名词解释细胞工程是一门跨学科的科学，涉及生物学、工程学和医学等领域。
它利用细胞和细胞内部的分子机制来改变或控制细胞的行为和功能，旨在开发新的治疗方法、生产新的药物和材料，甚至重新构建组织和器官。
细胞工程中涉及的名词有很多，下面将逐个进行详细解释。
1. 细胞：细胞是生物体的基本单位。
它由细胞膜、细胞质和细胞核组成。
不同类型的细胞具有不同的结构和功能，包括神经细胞、肌肉细胞、免疫细胞等。
2. 细胞培养：细胞培养是指将细胞从生物体中分离出来，并在人工培养基中提供适宜的环境条件以维持其生长和繁殖。
细胞培养是细胞工程研究的基础，也是生产细胞和组织相关产品的必要过程。
3. 细胞系：细胞系是指从同一来源的细胞分离出的并能无限传代的细胞群。
细胞系的建立对于细胞研究和应用非常重要，可以提供大量相同的细胞用于实验和生产。
4. 基因工程：基因工程是指通过改变细胞或生物体中的基因来获得新的性状或功能。
在细胞工程中，基因工程被广泛应用于构建基因表达系统、改良细胞的代谢途径或增强细胞分泌功能等。
5. 组织工程：组织工程是利用细胞和支架材料构建人工组织或器官。
通过将细胞种植到支架材料上，并提供适宜的生长条件，可以使细胞自组织形成功能性的组织结构。
6. 干细胞：干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜力的细胞。
干细胞可以分化为各种不同类型的细胞，包括神经细胞、心肌细胞等。
在细胞工程中，干细胞被广泛研究和应用于再生医学和组织工程。
7. 基因治疗：基因治疗是一种通过引入或修复患者体内的遗传物质来治疗疾病的方法。
在细胞工程中，基因治疗被用于修复或增强细胞的功能，以实现治疗效果。
8. 生物反应器：生物反应器是用于在控制条件下培养细胞的设备或系统。
生物反应器的设计和优化对于细胞工程研究和应用至关重要，可以提高细胞的产量和质量。
9. 细胞活力评估：细胞活力评估是用于确定细胞的生存状态和活力水平的方法。
通过测量细胞的代谢活性、细胞膜完整性、细胞数量等指标，可以评估细胞的健康状态和响应。
细胞工程简介PPT课件
基因编辑的基本原理
基因编辑是一种通过修改生物体 的基因序列来改变其遗传信息的
精确技术。
它利用特定的核酸酶，如 CRISPR-Cas9系统，来识别和 切割DNA的特定位点，以达到
修改基因序列的目的。
基因编辑技术可以用于纠正缺陷 基因、引入有益基因或删除有害 基因，以改善生物体的性状或治
疗遗传性疾病。
利用干细胞的免疫调节功能 ，可以用于治疗各种免疫系 统疾病，如系统性红斑狼疮 、类风湿性关节炎等。同时 ，通过基因编辑技术可以将 干细胞改造为能够治疗遗传 性疾病或癌症的细胞。
干细胞的抗衰老作用为其在 美容和保健领域的应用提供 了可能，如用于生产美容护 肤品或开发抗衰老疗法。
04
基因编辑与细胞治疗
在适宜的环境和营养条件下，细胞能够进行自我复制和分化，形 成新的组织和器官。
细胞对环境敏感
细胞对周围环境中的物理、化学和生物因子非常敏感，这些因子可 以影响细胞的生长、分裂和分化。
细胞间的相互作用
细胞之间存在相互作用，可以通过信号传递等方式影响彼此的生物 学行为。
细胞培养的方法与技术
原代细胞培养
传代细胞培养
细胞工程简介
目录
• 细胞工程概述 • 细胞培养技术 • 干细胞工程 • 基因编辑与细胞治疗 • 细胞工程的前景与挑战
01
细胞工程概述
定义与分类
定义
细胞工程是以细胞为基本单位，在体 外或体内通过人工操作获得细胞、组 织或器官的技术。
分类
根据操作对象和应用目的，细胞工程 可分为动物细胞工程和植物细胞工程 两大类。
可以模拟体内环境，研究细胞的生物学行为；可以大量生产细胞和蛋白质；可 用于药物筛选和毒理学研究等。
缺点
细胞工程名词解释
细胞工程名词解释细胞工程(Cell Engineering)：是指按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。
MTT比色法：线粒体脱氢酶能将染料MTT还原为难溶的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中，经酸性异丙醇溶解后测定其OD值，可反映活细胞的代谢水平活体染色：是利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构，而不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化引起细胞的死亡。
接触抑制定义：由于细胞接触而抑制细胞运动的现象。
由于接触抑制，正常细胞不互相重叠于其上生长，而是呈单层细胞生长。
密度抑制：细胞接触汇合成片后，虽发生接触抑制，但只要营养充分，细胞仍然能够增殖分裂，数量仍在增多，但当细胞密度进一步增大，培养液中的营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，则发生密度抑制，导致细胞分裂停止。
细胞周期：是指一个母细胞分裂结束后形成的细胞至下一次再分裂结束形成两个子细胞的时期，可分为G1期、S期、G2期和M期。
细胞系：由原代培养经初步纯化，获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。
细胞株：从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。
抗原：一类能激发机体产生免疫应答，并能与相应的免疫应答产物（抗体或致敏淋巴细胞）发生特异性结合的物质，包括蛋白质、多糖、核酸、病毒、细菌等。
抗体：抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，即抗体。
单克隆抗体：当机体受抗原刺激时，抗原上的多个决定簇分别激活不同的B细胞。
其中，每一个B细胞分裂增殖形成的浆细胞群就是一个纯系，即单克隆，只针对某一特定抗原决定簇起作用。
（由单克隆产生的只针对一个抗原决定簇的抗体叫做单克隆抗体（McAb），简称单抗。
）多克隆抗体：在体液免疫反应中，由于一个抗原分子上有多个决定簇，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，简称多抗。
第十七章 细胞工程(胡以平)
4.灌注培养系统（perfusion culture system） • 可使细胞始终处于一个较好的营养状态和生存环境 • 可以在 “旧”培养基中连续收集培养细胞所分泌
的某些产物
• 可以根据特殊的要求，通过改变培养液的组成实现 对于细胞状态的人为调控
BB CC
DD
AA
（三）影响细胞生长的因素
1.量化评估大规模培养细胞的营养需求 2.探索大规模培养细胞合适的生存环境 3.鉴定细胞的健康状况
GCS technology enables life science researchers to mimic in vivo morphology in an in vitro environment
Glass Ball Spinner System
（2）中空纤维（hollow fiber ）
胞团细胞为供核细胞获得克隆后代。 • 1984年， Willadsen，世界上第一只以未分化的胚
胎细胞为供核细胞的核移植绵羊。 • 1995年7月，Wilmut等，已分化的胚胎细胞作为供
核细胞，克隆了Megan和Morag。
克隆羊Megan和Morag
2．成体细胞核移植
• 1962年，Gorden，紫外线照射方法，非洲爪蟾 的未受精的卵细胞的核失活，同种爪蟾的小肠 上皮细胞的核植入其中，结果约1％的重组卵发 育为成熟的爪蟾。这一成功，标志着由体细胞 核培育动物的技术体系在两栖类获得了成功。
二、核移植（nuclear transfer）
是指利用显微注射装置，将一个细胞的核植入于另 一个已经去核的细胞中，以得到重组细胞的技术。通常 所说的核移植，则是指将一个二倍体的细胞核植入于另 一个已经去核的细胞（受精卵或处于MⅡ期的卵母细胞） 中，以得到重组细胞，并使其在一定环境中生长发育， 最后获得新的个体的综合技术体系。
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细胞工程学复习资料一、名词解释1、细胞工程按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。
2、接触抑制由于细胞的移动而互相靠近发生接触时，细胞不再移动的现象。
其实质是由于细胞接触而抑制细胞运动的现象。
3、密度抑制当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分的减少，代谢产物的增多。
细胞因营养的枯竭和代谢物的影响而导致细胞分裂停止的现象。
4、无血清培养基是指不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。
5、原代培养即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。
由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大，是检测药物很好的实验对象。
6、传代培养当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。
此时就需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养。
这个过程就称为传代培养。
7、饲养细胞也称滋养细胞，是一层经过射线照射或丝裂霉素C作用后失去分裂能力，供其他细胞附着的细胞层。
8.细胞系原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。
9.细胞株从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选购方法,由单细胞增殖形成的细胞群.10.单克隆抗体技术又称为杂交瘤技术: 单克隆抗体技术的核心是用骨髓瘤细胞与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能象骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。
11.外植体把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。
12.愈伤组织脱分化的细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性、松散的细胞团。
是植物细胞体外再生的第一步，关键一步。
13.继代培养指培养组织在培养基上生长一段时间后，营养物质枯竭，水分散失，并已积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上，这种转移称为继代培养。
14脱分化：分化的细胞在一定条件下，可以转变为胚性状态，重新获得分裂能力。
15再分化：是脱分化后的分生细胞在一定的条件下，重新分化为各种类型的细胞，并进一步发育成完整植株。
16组织工程是指应用工程学和生命科学的原理和方法来研究正常或病理状况下哺乳动物组织的结构、功能和生长的机制，研究开发能够修复、维持或改善损伤组织的人工生物替代物的一门学科。
其核心是有种子细胞核生物活性材料构成的三维空间复合体。
17顶体反应是指精子在进入卵丘细胞后由精子头部释放顶体小泡中的内含物，有助于精子穿过透明带的反应过程。
18胚胎发育阻滞是指体外受精的早期胚胎在体外发育中，往往会停止在某一阶段不在发育，这种现象及胚胎发育阻滞。
二、填空题1、以细胞工程为基础，发展派生出了不少以工程冠名的新领域，如组织工程、胚胎工程、染色体工程等2、动物细胞工程实验室的设置严格要求无菌环境，避免微生物及其它有害因素的影响。
一般分为六个工作方面：无菌操作、培养、制备、清洗、消毒灭菌处理和储藏。
3、理想的无菌操作室应划分为更衣间、缓冲间及操作间。
4、植物的细胞工程实验室设置特有光照培养室、试管苗培养的温室、移植驯化室。
5、实验室的生物安全保护必须有房租致病性微生物扩散的制度和人体防护措施。
即包括物理性防护和制度性防护。
其中物理性防护包括隔离的设备、实验室的设计及实验实施三方面。
6、玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤。
其中浸酸的组成是重铬酸钾、浓盐酸、蒸馏水。
7、根据离体细胞在体外生长时是否贴壁的性质，将其分为贴壁型和悬浮型两类。
贴壁型细胞包括上皮细胞型、成纤维细胞型、游走细胞型、多形型细胞。
8、无血清培养基包括基础培养液及添加成分两大部分。
9、组织细胞的分离方法主要为机械法和消化法。
机械法包括离心、切割、机械分散等方法；消化法包括胰蛋白酶、胶原酶、螯合剂消化法。
10、培养方法包括组织块培养法、单层细胞培养、悬浮细胞培养。
11、细胞的复苏冻存基本原则是慢冻快融。
12、细胞的运输方法有贴身运输、冰瓶运输、液氮罐运输。
13、胚胎发育的基本过程有生殖细胞的发生、受精、卵裂、囊胚的形成、原肠胚的形成、中胚层及体腔的形成、胚层分化。
14、人工种子包埋方法：A干燥包埋法 B 液胶包埋法C 水凝胶法15、人工种子的组成：人工种皮、人工胚乳、体细胞胚。
16、幼胚培养中，常见的生长方式有胚性发育、早熟萌发、愈伤组织。
17、器官的发生和胚状体形成是愈伤组织再分化形成植株的两个途径。
三、简答题1、超净工作台的分类？它们的特点（原理）各是什么？答：超净工作台分为侧流式和外流式两类。
原理：侧流式净化后的空气从气流由左侧或右侧通过工作台面流向两侧，也有从上向下或从下向上流向对侧，从而形成气流屏障以保持工作区无菌。
外流式使净化后的空气面向操作者流动，因而外方气流不致混入操作区，但如进行有毒物质的实验操作则对操作者不利，外流式多为开放式方便取放实验物品。
2、倒置显微镜的使用优点？电热干燥箱使用注意事项？答：（1）倒置显微镜的使用优点：可以从培养皿的下方检查培养物，减少观察对细胞生产的影响。
（2）电热干燥箱使用注意：①消毒后，不能立即打开箱门以免骤冷而致玻璃器皿损坏，应该等候温度自然下降至100℃以下方可打开。
②电热干燥时温度不宜过高，过高的温度可导致包裹的纸或棉花烧焦，从而影响细胞的生长。
3、细胞培养室常见的消毒方法有哪些？答：消毒的方法分为物理灭菌法（紫外线、电离辐射、湿热、干热、过滤）和化学消毒法（各种化学消毒剂）4、如何实现无菌操作技术及其关键流程？答：无菌操作技术是细胞体外培养的基本技术，也是最易被感染的。
因此，防止污染是决定细胞培养成败的关键。
无菌概念和无菌操作必须贯穿整个培养过程的始终。
（1）实验器具和材料的准备根据实验要求，将所需要的实验器具和材料准备好，以合适的方法进行消毒和灭菌。
（2）培养室和超净工作台的消毒用70%～75%酒精擦洗工作台面后，将已消毒灭菌的实验用品取出，并将操作器械放置在无菌器械支架上，然后开始实验操作。
在实验操作过程中，对所有操作器械每次使用后都要进行灭菌，常采用酒精灯火焰灼烧灭菌。
（3）洗手和着装进入层流操作室进行实验操作，应完成缓冲准备区内的淋浴、一次更换灭菌衣帽、拖鞋；手臂消毒、二次更换灭菌防护衣帽、手套、拖鞋等；再在风淋区进行无菌风淋后方可进入层流操作室。
进入无菌操作区后，再用70%～75%的酒精擦拭双手和前臂，完成无菌操作准备工作。
（4）无菌培养操作①操作时，动作要准确敏捷，但不宜过快，以防止空气流动，增加污染机会。
②操作有条不紊，合理布局保持一定操作顺序，尽量减少不必要的身体与器皿的接触，防止交叉污染。
③操作时切勿大声讲话和咳嗽，以免不必要的细菌污染带入工作台面。
5、常见的细胞培养液体答：（1）水水为细胞培养所必需，细胞所需的化学成分、生存环境、营养物质都必须用水溶解才能吸收，其代谢产物也必须溶解于水才能被排泄。
水还能维持细胞形态、调节渗透压及平衡PH值有一定作用。
（2）平衡盐溶液是Ringer生理盐水发展起来的，是组织细胞培养中常用的基本液体。
BSS 可以调节PH、维持渗透压以及供给细胞生存所需的能量和无机离子成分，主要作为合成培养基的基础液及用于洗涤组织、细胞等。
（3）消化液常用的消化液有胰蛋白酶溶液、二乙烯四乙烯二钠溶液（EDTA—Na）及胶原酶溶液，这些溶液可单独使用也可混合使用。
（4）消化酶抑制液在无血清培养时必须使用消化酶抑制剂，以保护细胞免受残留的消化酶的过度消化而损坏。
（5）PH调整液常用的有NaHCO3溶液和HEPES溶液。
（6）抗生素液培养液内加入适量的抗生素，可以预防由于操作不慎而产生的微生物污染。
常用的抗生素有青霉素、链霉素、卡那霉素和庆大霉素等。
（7）谷氨酰胺补充液谷氨酰胺在细胞的代谢过程中起着重要作用，因而合成培养基都需要添加。
6、天然培养基中添加的血清有哪些作用？缺点？P46—47（百度）血清含许多对细胞有利成分，能够提供丰富的营养组分；有促生长效果。
成分不明确；血清保存期短（至多一年），不能排除血清中含有易变物质；使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态，血清可能促进某些细胞的生长(成纤维细胞)同时抑制另一类细胞生长(表皮细胞)，血清含一些对细胞产生毒性的物质，影响细胞生长，甚至造成细胞死亡。
取材中可能带入支原体、病毒，对细胞产生潜在影响，可能导致实验失败或实验结果不可靠性。
血清制作过程复杂、批间差异大，成分不能保持一致，使用使得实验和生产的标准化困难，其中的蛋白质使得某些转基因蛋白生物药品生产中分离纯化工作很难完成。
质量不稳定，价格昂贵，进出口管制影响盈利.，使用不方便。
7、常见的培养技术及各自特点？P56-63答：（1）悬滴培养也称组织块悬滴培养，是最早建立的体外培养技术。
优点是活体观察时可直接使用油浸物镜，缺点是操作时生长基质盖片即容易破碎又容易污染。
（2）培养瓶培养是将拟培养对象直接接种在培养瓶内再入培养箱进行培养的方法。
（3）旋转管培养就是将所培养的组织细胞接种在一管状培养器皿内，再将旋转管固定在一可以旋转的装置上，边旋转进培养的一种培养方法。
（4）克隆培养法即纯化培养，又称单细胞分离培养法。
就是将从细胞悬液中获得的单个细胞用于培养，使之重新繁衍成一个新的细胞群体的培养技术。
所获得的后裔细胞属于一个共同祖细胞，称细胞株。
（5）细胞同步化培养是指自然或人工方法获得的细胞群体的细胞周期同步化生长。
分为选择细胞同步化和诱导细胞同步化。
前者包含M期细胞震摇脱落法、离心洗脱法、梯度沉降法；后者有血清饥饿法、异亮氨酸营养缺乏法、DNA合成抑制剂阻断法、秋水仙素阻断法。
（6）动物细胞的大规模培养一般分为分批式操作、流加式操作、半连续式操作、连续式操作和灌流式操作五种操作模式。
8、常用的动物细胞大规模培养主要有哪些操作模式？各有哪些优缺点？答：操作模式：可采用分批式操作、流加式操作、半连续式操作、连续式操作和灌流式操作等多种操作方式进行培养。
分批式操作：将细胞扩大培养后，一次性将细胞和培养液投入生物反应器内进行培养，在培养过程中其体积不变，不添加其他成分，待细胞增长和产物积累到适当的时间，一次性对细胞、产物、培养基进行收获，从中分离所需物质。
该操作简单、培养周期短、污染和细胞突变的风险小，既能直观地反应细胞生长代谢的过程，又可直接放大，是进行动物细胞培养工艺条件研究常用的手段。
流加式操作：细胞持续生长至较高的密度，整个培养过程没有流出或回收，细胞或产物达到所需指标后终止培养，一次性回收整个反应体系，分离纯化产品。