微生物实验室的生物安全分类(1)
实验室生物安全等级分类
实验室生物安全等级分类新型冠状病毒感染的肺炎疫情牵动着全球关注，至今已感染超过1700万人，世界多个国家和地区正在合力战“疫”。
国内疫情虽趋于平稳，人民的生活也逐渐恢复正常，但北京疫情出现反弹，确诊例数不断增加；此外，今年非洲的“埃博拉病毒”疫情复燃后于6月底才宣告结束；巴西发现了“新型寨卡病毒”；我国也发现了“新型猪流感病毒（G4）”；7月初新加坡因“登革病毒”引起的登革热才刚开始流行。
“病毒”这个名词一次又次绷紧了人们的心弦。
随着各地新建符合安全级别的PCR实验室与核酸检测技术的普及，加之各地检验医学队进京驰援，北京大规模的核酸筛查拉开帷幕，截至7月3日，北京市具备核酸检测能力的机构已达到175所。
新冠病毒的核酸检测工作也从应急转为常态化，给全国临床实验室带来了新的挑战，加强生物安全实验室的建设迫在眉睫！为了能更全面的理解新型冠状病毒等病原微生物的相对危险性，本文带您进一步了解实验室生物安全防护水平等级与基本知识。
病原微生物等级分类对比世界卫生组织（WHO）一直非常重视生物实验室安全问题，早在1983年就发布《实验室生物安全手册》（当前版为2004年修订的第三版），对各个国家作为参考和指南，有助于各国制订并建立微生物学操作规范，确保微生物资源的安全，进而确保其可用于临床、研究和流行病学等各项工作。
我国也于2004年颁布了国家标准《实验室生物安全通用要求》（GB 19489）（新修订于2008）和《病原微生物实验室生物安全管理条例》（新修订于2018年）。
此外，为了维护国家安全，防范和应对生物威胁，保障人民生命健康，促进生物技术健康发展，保护生物资源和生态环境，促进社会和谐发展，推动构建人类命运共同体，我国今年已将生物安全纳入国家安全体系，《中华人民共和国生物安全法（草案）》也已通过二审，有望今年年底出台。
WHO根据感染性微生物的相对危害程度制订了危险度等级，分为四级，危险度四级最危险；我国根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类，一类最危险。
微生物实验室的分类及要求
这类微生物通常对个体危害中等，群体危害程序较 轻，一般不会导致人和动物死亡，但也存在个例。 第3类病原微生物是最为常见的导致食品中毒的危 害微生物，也是食品实验室重点检测的目标，这类 微生物包括：沙门氏菌、单增李氏菌、空肠弯曲杆 菌、布鲁氏杆菌、葡萄球菌等。 第4类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人 类或者动物疾病的微生物。
二、微生物实验室的分类
1.病毒类实验室
实验活动所需生物安全实验室级别 病原微生物 危害程度 第一级 第二级 第三级 第四级
—— —— 病毒培养 未经培养的感染 材料的操作 —— 灭活材料的操作 无感染性材料的操作
BSL-2 BSL-1 BSL-1 BSL-1
BSL-1 BSL-1 BSL-1 BSL-1
微生物实验室的分类及要求
李 磊
一、微生物实验室的生物安全等级
我国在《病原微生物实验室生物安全管理条例》第七条 中根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害 程度，将病原微生物分为4类： 第1类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾 病，对个体、群体危害严重，无有效的疫苗防治的微生物： 如霍乱、鼠疫、埃博拉病毒等。 第2类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病， 比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间 传播的，个体危害严重、群体危害中等，有疫苗或有比较的 药物治疗的微生物；如SARS病毒等。 第3类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一 般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有 限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和 预防措施的微生物；
BSL-2 BSL-2 BSL-1
BSL-2 BSL-1
2.细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺 旋体、真菌类实验室：
微生物和生物医学实验室生物安全通用准则
微生物和生物医学实验室生物安全通用准则一、实验室环境安全实验室环境安全是生物安全的基础，包括实验室的建设和管理等方面。
首先，实验室应设置在专门的实验室场所，有良好的通风设备和消毒设备，实验室内的地面和墙壁应采用耐腐蚀的材料，易清洁和无缝隙。
实验室必须定期进行消毒和清洁，保持实验室的整洁和干燥。
实验室管理者应设立实验室安全管理制度，明确实验室生物安全的责任和义务，制定实验室安全操作规程，实施管理制度和操作程序等。
二、生物安全级别分类根据微生物的种类和病原性程度，将实验室生物安全级别进行分类，分为Biosafety Level 1（BSL-1）、Biosafety Level 2（BSL-2）、Biosafety Level 3（BSL-3）和Biosafety Level 4（BSL-4）四个级别。
BSL-1级别适用于微生物无病原性的实验，BSL-2级别适用于微生物具有一定病原性的实验，BSL-3级别适用于病原微生物的实验，BSL-4级别适用于高致病性微生物或生物恐怖威胁代理的实验。
实验室在进行实验前必须确定实验所处的生物安全级别，采取相应的防护措施。
三、实验操作规范实验室操作规范是保证实验操作安全的关键，包括实验操作前的准备工作、操作中的安全措施和操作后的处理等。
首先，在进行实验前必须进行必要的安全检查，确保实验室设备和防护装备完好、无损坏。
实验人员在进入实验室前必须穿戴合适的防护装备，包括实验服、手套、眼罩和口罩等。
实验中必须遵守消毒措施，保持操作区的干净和无菌。
实验后，实验人员必须及时清洁实验室设备和工作台等，确保无残留和细菌滋生。
四、废物处理规范废物处理是实验室生物安全的重要环节，包括废液、废液和废气的处理。
废液必须经过消毒处理后再排放，废液的消毒方式可选择物理方法如高温消毒和化学方法如使用消毒剂等。
废液的排放必须符合当地的环境规定和相关法律法规要求。
实验室产生的废液和废气必须储存和处理，防止对环境和人体产生危害。
生物安全实验室分类
生物安全实验室分类一、病原微生物分类根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，可以将病原微生物分为四类。
1.第一类：能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。
2.第二类：能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。
3.第三类：能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。
4.第四类：在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。
其中，第一类和第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。
二、生物安全实验室防护分级根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家相关标准的规定，将实验室分为一级（biosafety level 1，BSL- 1）、二级（BSL -2）、三级（BSL-3）和四级（BSL- 4）。
1.一级适用于操作在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。
2.二级适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。
按照实验室是否具备机械通风系统，将BSL -2实验室分为普通型BSL -2实验室和加强型BSL- 2实验室。
3.三级适用于操作能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。
4.四级适用于操作能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。
三、生物安全实验室防护分类以BSL -1、BSL- 2、BSL -3和BSL -4表示仅从事体外操作的实验室的相应生物安全防护水平。
根据实验活动、采用的个体防护装备和基础隔离设施的不同，实验室分为：1.操作通常认为非经空气传播致病性生物因子的实验室。
实验室安全考试生物安全类 (1)
1、[判断题]由于紫外线透过物质能力很差，不适于室内空气或物体表面消毒。
（分值）你未作答标准答案：错误2、[判断题]根据所操作的生物因子的危害程度和应采取的防护措施，将生物安全的防护水平分为四级，1级防护水平最低，4级防护水平最高。
以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平。
（分值）你未作答标准答案：正确3、[判断题]生物医学实验室内任何死亡动物尸体、组织碎块，要先高温高压灭菌后密封在塑料袋交专门机构进行处理。
（分值）你未作答标准答案：正确4、[判断题]初次进入实验室的操作人员应了解实验室具体的潜在危险，认真阅读、理解安全手册和操作手册。
（分值）你未作答标准答案：正确5、[判断题]当实验室活动涉及传染性或潜在传染性生物因子时，不需要进行危害程度评估。
（分值）你未作答标准答案：错误6、[判断题]工作人员在进入BSL-2以上级别实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其他防护服。
工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。
可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。
（分值）你未作答标准答案：正确7、[判断题]学生进入生化医药类实验室可以不穿统一的实验服（白大褂）。
（分值）你未作答标准答案：错误8、[判断题]生物实验室里可以烹煮食物、聚餐，学生可以在实验室留宿。
（分值）你未作答标准答案：错误9、[判断题]在微生物实验中，一些不要的菌种等，一定要消毒和高压灭菌处理后方可弃掉。
（分值）你未作答标准答案：正确10、[判断题]生物安全三级、四级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。
（分值）你未作答标准答案：错误11、[判断题]生物安全等级实验室必须按照国家规定要求建设，其中生物安全一级（BSL－1）、二级（BSL－2）实验室应向省级主管部门备案，生物安全三级（BSL－3）、四级（BSL－4）实验室必须取得国家认可的资质。
（分值）你未作答标准答案：正确12、[判断题]实验废弃的生物活性实验材料特别是细胞和微生物（细菌、真菌和病毒等）必须及时灭活和消毒处理。
微生物实验室的生物安全分类（1）
微生物实验室的生物安全分类（1）兽医微生物实验室的生物安全分类（2005年版）凡涉及微生物及其提取物或基因工程产物操作的实验室，根据对病原微生物不同种类的生物安全要求。
实验室的设计、设施也有所不同。
目前国际公认的微生物实验室分为生物安全（biosafety level，BSL）1至4级。
其中BSL-1最低，BSL-4最高。
BSL-1~4俗称P1~4。
BSL-1实验室可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害的、有明确特征的微生物实验工作。
实验室与建筑物中的一般通道不隔开，一般在试验台上操作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。
BSL-2实验室与BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中度可能危害的微生物实验工作。
其不同点在于：工作人员要经过操作病原因子的专门培训，并由能够胜任的专业人员进行指导和管理；工作时限制外人进入实验室；某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他封闭设备内进行；对污染的锐器采取高度防护措施。
凡从事微生物基因的操作，均需在BSL-2实验室进行。
BSL-3实验室供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸入途径引起严重的或致死性疾病病原体的实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或检测的实验室BSL-3实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门培训，并由有关专家进行监督管理。
传染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内进行，工作人员要穿适宜的防护服。
BSL-3实验室要经过专业的设计和建造。
BSL-4实验室有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达到BSL-4的安全水平。
BSL-4实验室对防止微生物扩散到环境中有特殊的工程和设计要求。
每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特殊和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。
实验室主任要严格控制进入实验室的人员。
实验室均应是毒力的建筑物或是建筑物内的隔离区。
微生物和生物医学实验室生物安全通用准则.doc
微生物和生物医学实验室生物安全通用准则1.实验室的分类、分级及合用范围分类一般生物安全防备实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫 )。
实验脊椎动物生物安全防备实验室。
分级每类生物安全防备实验室依据所办理的微生物及其毒素的危害程度各分为四级。
各级实验室的生物安全防备要求挨次为：一级最低，四级最高。
合用范围一般生物安全防备实验室一级生物安全防备实验室实验室构造和设备、安全操作规程、安全设备合用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教课的一般微生物实验室等。
二级生物安全防备实验室实验室构造和设备、安全操作规程、安全设备合用于对人或环境拥有中等潜伏危害的微生物。
三级生物安全防备实验室实验室构造和设备、安全操作规程、安全设备合用于主要经过呼吸门路令人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，往常已有预防传染的疫苗。
艾滋病病毒的研究(血清学实验除外)应在三级生物安全防备实验室中进行。
四级生物安全防备实验室实验室构造和设备、安全操作规程、安全设备合用于对人体拥有高度的危险性，经过气溶胶门路流传或流传门路不明，当前还没有有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。
与上述状况近似的不明微生物，也一定在四级生物安全防备实验室中进行。
待有充足数据后再决定此种微生物或毒素应在四级仍是在较初级其余实验室中办理。
实验脊椎动物生物安全防备实验室，其合用微生物范围与同级的一般生物安全防护实验室同样。
2．一般生物安全防备实验室的基本要求2.1 一级生物安全防备实验室安全设备和个体防备一般不必使用生物安全柜等专用安全设备。
工作人员在实验时应穿工作服，戴防备眼镜。
工作人员手上有皮肤损坏或皮疹时应戴手套。
2.1.2 实验室设计和建筑的特别要求每个实验室应设洗手池，宜设置在凑近出口处。
实验室围护构造内表面应易于洁净。
地面应防滑、无空隙，不得铺设地毯。
实验台表面应不透水，耐腐化、耐热。
实验室中的家具应坚固。
为易于洁净，各样家具和设备之间应保持必定空隙。
微生物实验室生物安全手册
微生物实验室生物安全管理手册宽城区疾病预防控制中心生物安全管理体系文件目录一、实验室人员和项目准入制度1.目的规范生物安全二级实验室的使用和管理，保证操作人员，实验对象和环境安全，确保检测结果准确可靠。
2.适用范围适用于生物安全二级实验室安全运转及在此环境下的所有检测工作。
3.职责进入生物安全二级实验室从事检测工作的所有人员严格按照本规定执行。
4.具体要求：4.1概述4.1.1生物安全二级实验室用于对检验者和环境有中度潜在危险样品的各项实验，必须符合下列规定：4.1.1.1具备操作资质的人员可在生物安全二级实验室内工作，其他任何人未经许可禁止进入实验室。
4.1.1.2在实验室内的一切活动，必须遵照生物安全手册的规定进行。
4.1.1.3实验室内污染的空气需通过高效过滤器后方能排出室外。
4.1.1.4实验室内产生的污水，必须经过消毒后方可进入公共污水系统。
4.1.1.5实验室的所有废弃品，必须通过高压灭菌后才能处理和清洗。
必须携出实验室的中间实验材料、更换维修的仪器设备、也只有在确保无病原微生物污染的条件下，才能携出实验室。
4.1.1.6实验室内准备二级全排式生物安全柜，所有可能造成污染的能够置于生物安全柜内的实验操作，置其内进行，以保证实验室内空间的安全。
4.1.2实验室运行的安全性要求本手册规定的各项要求，首先是为了保证实验室的安全运行，包括防止实验室工作人员的感染、防止实验室操作的病原微生物对环境的污染、防止检测样品的污染，保证实验结果的准确可靠。
4.1.3实验室工作的质量要求本手册规定的各项要求，同时也是为了保证实验室的工作质量，即：实验产生的各项结果和数据，必须准确可靠：实验室出具的检验报告，必须明确完整。
4.2实验室操作规程4.2.1启动实验室开始工作前半小时。
开启实验室主电源，使实验室及生物安全柜投入运行。
开启顺序：①开启屋顶风机②开启全排风③开启空调④开启安全柜⑤打开房间紫外线灯。
4.2.2个人防护工作人员按照下列要求进行个人防护，才能进入实验室区域：（1）在更衣室中换穿工作服和工作鞋。
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兽医微生物实验室的生物安全分类（2005年版）凡涉及微生物及其提取物或基因工程产物操作的实验室，根据对病原微生物不同种类的生物安全要求。
实验室的设计、设施也有所不同。
目前国际公认的微生物实验室分为生物安全（biosafety level，BSL）1至4级。
其中BSL-1最低，BSL-4最高。
BSL-1~4俗称P1~4。
BSL-1实验室可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害的、有明确特征的微生物实验工作。
实验室与建筑物中的一般通道不隔开，一般在试验台上操作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。
BSL-2实验室与BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中度可能危害的微生物实验工作。
其不同点在于：工作人员要经过操作病原因子的专门培训，并由能够胜任的专业人员进行指导和管理；工作时限制外人进入实验室；某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他封闭设备内进行；对污染的锐器采取高度防护措施。
凡从事微生物基因的操作，均需在BSL-2实验室进行。
BSL-3实验室供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸入途径引起严重的或致死性疾病病原体的实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或检测的实验室BSL-3实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门培训，并由有关专家进行监督管理。
传染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内进行，工作人员要穿适宜的防护服。
BSL-3实验室要经过专业的设计和建造。
BSL-4实验室有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达到BSL-4的安全水平。
BSL-4实验室对防止微生物扩散到环境中有特殊的工程和设计要求。
每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特殊和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。
实验室主任要严格控制进入实验室的人员。
实验室均应是毒力的建筑物或是建筑物内的隔离区。
要实施特殊的实验室安全工作细则。
在此种实验室的工作区内，所有的工作都要限制在II级生物安全柜或者是安全柜与一套由生命维持系统工期的正压个人工作服联合使用。
动物病原微生物的分类
根据病原微生物的传染性、感染人和（或）动物的危害程度，世界动物卫生组织（OIE）将动物病原分为1至4类。
其中1类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制的、实验室释放存在高危险性的病原微生物。
2类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划的、实验室释放中有中等危险的病原微生物。
3类动物病原为外来或导致地方性流行的、并列入官方控制计划但实验室扩散风险低的致病微生物。
4类动物病原为可导致地方性流行、但不列入官方控制计划的病原微生物。
我国农业部于2005年颁布了动物病原微生物分类名录，其中一类病原微生物危害最大，依次类推，四类最小。
有少数寄生虫也列在名单之中。
一类动物病原微生物口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水疱病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽瘟病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原。
二类动物病原微生物猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘/山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔出血症病毒、炭疽芽孢杆菌、布氏杆菌
三类动物病原微生物多种动物共患病病原微生物：低致病性禽流感病毒、伪狂犬病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分枝杆菌、副结核分枝杆菌、致病性大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气荚膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽胞杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体
牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻/黏膜病病毒、胎儿弯曲菌性病原亚种（牛生殖器弯曲菌）、日本血吸虫。
绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎/脑脊髓炎病毒、维士纳/梅迪病毒、传染性脓疱皮炎（羊口疮）病毒。
猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪短螺旋体（猪密螺旋体）。
马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽杆菌、类鼻疽杆菌、假皮疽组织胞浆菌、溃疡性淋巴管炎假结核棒状杆菌禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性囊病病毒、鸡马立克病病毒、禽白血病/肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡
传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合症病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫。
兔病病原微生物：兔黏液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫。
水生动物病病原微生物：略
蜜蜂病病原微生物：略
其他动物病病原微生物：犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、猫泛白细胞减少症病毒、水貂阿留申病毒、水貂病毒性肠炎病毒。
四类动物病原微生物是指危险性小、低致病力、实验室感染机会少的兽用生物制品、疫苗生产用的各种弱毒病原微生物以及不属于第一、二、三类的各种低致病力的病原微生物。