百日咳疫苗免疫后的抗体检测方法
百日咳实验室诊断标准
百日咳实验室诊断标准引言：百日咳是一种由百日咳杆菌引起的传染病，主要通过飞沫传播。
由于百日咳症状多变、病程长，并且可能与其他呼吸道感染混淆，因此确诊百日咳需要依赖实验室诊断标准。
本文将为您介绍百日咳实验室诊断标准的详细内容。
一、病原学检测：1. 咽拭子采集及培养：采集咽拭子进行百日咳杆菌的培养。
培养结果呈阳性，能够证实百日咳杆菌的存在。
2. PCR检测：采用聚合酶链反应技术，检测咽拭子中百日咳杆菌的特异性基因。
若PCR结果呈阳性，可确诊百日咳感染。
二、血清学检测：1. 抗百日咳抗体检测：通过血清学检测，测定患者体内针对百日咳杆菌的特异性抗体水平变化。
常见的检测方法包括ELISA和免疫荧光法等。
2. IgA抗体测定：通过测定患者血清中的百日咳IgA抗体水平，以及抗百日咳抗体滴度，从而判断患者是否感染百日咳。
三、特殊检测方法：1. 纤维支气管镜检查：通过纤维支气管镜检查，可观察到百日咳引起的支气管粘膜炎症状况。
此项检查特异性较高，但操作较为复杂。
2. 细菌毒力因子检测：通过检测百日咳杆菌产生的毒力因子，如百日咳毒素等，可以进一步确认百日咳感染。
四、诊断根据：根据上述实验室检测结果，结合患者的临床症状及流行病学史，可以进行百日咳的确诊。
1. 临床症状：百日咳的典型症状包括持续的咳嗽、咳出稠厚的白色或黏液状痰，呼吸困难等。
但部分患者可能仅表现为轻度咳嗽，并有可能与其他呼吸道感染混淆。
2. 流行病学史：百日咳主要通过飞沫传播，因此密切接触患者或流行病区的历史对于诊断具有重要意义。
结论：百日咳是一种需要依靠实验室检测来确诊的传染病。
通过病原学检测、血清学检测以及特殊检测方法，结合患者的临床症状和流行病学史，可以准确判断患者是否感染百日咳。
在实际诊断过程中，医生需要综合各项检测结果做出最终诊断，并及时对患者进行治疗，以减少疾病的传播和并发症的发生。
百日咳疫苗在青少年和成人中的免疫效果评估
百日咳疫苗在青少年和成人中的免疫效果评估百日咳（Pertussis），又称为百日咳病，是由百日咳杆菌引起的一种呼吸道传染病。
百日咳可引起长时间持续的咳嗽发作，严重时可能导致呼吸困难、肺部感染以及并发症如肺炎、脑炎等。
该疾病主要对婴儿和幼儿造成威胁，但成人和青少年也可能受到感染，传播给未接种疫苗的婴幼儿。
为了预防百日咳的传播和减轻患者症状，百日咳疫苗的广泛接种成为一项重要的公共卫生措施。
本文将对百日咳疫苗在青少年和成人中的免疫效果进行评估。
百日咳疫苗主要有两种类型，一种是百日咳细胞百白破联合疫苗（DTaP），用于婴儿和幼儿接种；另一种是百日咳成人无细胞百白破疫苗（Tdap），用于成人和青少年接种。
这两种疫苗的主要成分是对百日咳杆菌的毒素或外膜蛋白的抗原，能够激活人体的免疫系统，并产生特异性的免疫应答。
接种疫苗后，人体会产生抗百日咳的抗体和免疫记忆细胞，从而在接触到百日咳病原体时迅速产生保护性的免疫应答。
研究表明，百日咳疫苗在青少年和成人中具有良好的免疫效果。
根据美国疾病控制和预防中心（CDC）的数据，接种Tdap疫苗后，青少年和成人的百日咳感染风险显著降低。
根据一项针对14至18岁美国青少年的研究，疫苗接种后的第一年，百日咳的发病率降低了77%。
此外，成人接种百日咳疫苗对于保护婴儿和幼儿免受感染也非常重要。
因为成人可能是未接种疫苗的婴儿和幼儿感染百日咳的主要来源，他们接种疫苗后不仅自身受益，还能够减少传播给婴幼儿的风险。
然而，尽管百日咳疫苗在青少年和成人中的免疫效果被广泛认可，但疫苗的保护效果可能会随时间的推移而减弱。
一项追踪研究发现，在接种Tdap疫苗后的4至6年内，免疫效果逐渐下降。
这意味着接种者可能需要定期接种以保持持久的免疫保护。
此外，疫苗的保护效果在个体之间可能存在差异，部分人可能对疫苗产生较弱的免疫应答。
因此，定期进行免疫效果评估，以及改善疫苗的免疫原性和持久性，是保持人群免疫水平的关键。
人百日咳(PT)酶联免疫分析
人百日咳（PT）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
96T使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中百日咳（PT）表达。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人百日咳（PT）表达。
用纯化的人百日咳（PT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中百日咳（PT）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的百日咳（PT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人百日咳（PT）的存在与否。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。
然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
抗体检测方法都有哪些
抗体检测方法都有哪些
抗体检测方法常用的有以下几种：
1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：在试验中，将待检测抗体与特定抗原结合，然后通过标记抗体的酶来检测抗体的存在。
该方法广泛应用于许多领域，包括医学诊断和科学研究。
2. 免疫荧光法：使用特定荧光标记的抗体来检测抗体与抗原的结合。
当抗体与抗原结合时，荧光信号被激活，可以使用荧光显微镜观察。
3. 免疫印迹法（Western blot）：通过将待检测抗体与蛋白质混合，然后通过电泳将混合物分离出不同的带，再用特定抗体探测特定的带，从而确定抗体的存在与否。
4. 中和试验：将抗体与病原体或毒素混合，观察它们是否可以相互中和。
这种方法常用于研究抗体对病原体的保护作用，以及对疫苗的效果评估。
5. 聚合酶链反应（PCR）：通过扩增特定的DNA序列来检测是否存在特定的抗体。
这种方法通常用于检测病原体或其他生物分子的存在。
6. 微阵列技术（Microarray）：通过将大量特定抗原固定在固定基质上，然后与待检测抗体反应，从而快速同时检测多个抗体。
7. 化学发光法：将特定化学物质标记的抗体与待测样品中的抗体反应，然后通过检测化学发光信号来确定抗体的存在与否。
这种方法常用于高通量筛选和体外诊断。
百日咳实验室诊断方法比较_pdf
断病例１００例，其中３例百日咳鲍特菌分离培养阳性，８８例ＩＳ４８１ ＰＣＲ阳性，３４例ｐＴｏｌｇＧ阳性，
ａｓｓａｙ；Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ
日咳鲍特菌分离培养、特异性ＰＣＲ及血清ＰＴ－ＩｇＧ检 测，并分析确诊百Ｅｔ咳病例的实验室检测结果。
材料与方法
百日咳是由百日咳鲍特菌引起的儿童急性传染 病，我国在实施计划免疫后，其发病率快速下降至目 前的报告发病率＜１／１０万。然而在全球较多疫苗高 覆盖率的发达国家甚至一些发展中国家，百Ｅｔ咳的 发病呈现增多趋势，这一现象被称为“百Ｅｔ咳重 现”［Ｉ－３］０目前百日咳实验室诊断主要依靠病原学诊 断、鼻咽拭子ＰＣＲ检测以及血清百日咳毒素ＩｇＧ （ＰＴ－ＩｇＧ）检测，而我国对百日咳的实验室检测尚未 普及。为此本研究针对临床疑似百日咳病例采用百
ｃａｓｅｓ
１００ ｏｕｔ ｏｆｔｈｅ １４８
ｏｒ
ｃａｓｅｓ
ｗｅｒｅ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉａｌｌｙ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ．
ｃａｓｅｓ
ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ，ｔｈｒｏｕｇｈ ｃｕｌｔｕｒｅ，ＰＣＲ
ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ ｔｏｘｉｎ ＩｇＧ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．２２
ｗｅｒｅ ｂｏｔｈ ＰＣＲ ａｎｄ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ ｔｏｘｉｎ ＩｇＧ ｐｏｓｉｔｉｖｅ．Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＩＳ４８１ ＰＣＲ．ｄａｙｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｏｎｓｅｔ ｏｆ ｓｙｍｐｔｏｍｓ（Ｐ＜０．０１）ａｎｄ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＰＴ－ＩｇＧ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄａｙｓ ｆｒｏｍ ｏｎｓｅｔ ｏｆ １）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｓｉｎｃｅ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｎ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ ｗａｓ ｌＯＷ，
百日咳PT、FHA和Prn血清抗体检测方法的建立及验证_613
在未接种百日咳疫苗的0-3月健康婴儿血清中分别添加已知的抗PT抗体167.5 IU/ml（或抗FHA抗体65IU/ml，抗Prn抗体分别为32.5IU/ml），再进行ELISA检测，每种抗体至少检测10份样品，计算抗PT（或FHA和Prn）抗体含量，根据公式（回收率（%）=测得值/真实值×100%）最后得出回收率。
Key words:Pertussis, ELISA, Quantitatively analysis, Acellular pertussis vaccine
百日咳是由百日咳杆菌引起的一种严重急性呼吸道传染病，传染性较强，人群普遍易感，其中尤以婴幼儿多见，是严重威胁人类健康的主要传染病之一[1]。百日咳毒素（pertussis toxin, PT）、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin, FHA）和百日咳粘附素（pertactin, Prn）是百日咳杆菌生产过程中产生的生物活性物质,与百日咳杆菌粘附和定居在宿主呼吸道的上皮细胞、引起患者临床症状有关，是百日咳杆菌致病的重要毒力因子[2]。同时PT、FHA和Prn还具有较强的免疫原性，能刺激机体免疫系统产生特异的保护性抗体，至今，已被世界上很多国家作为无细胞百日咳疫苗的组成成分[3]。本实验目的是建立定量检测抗PT、FHA和Prn抗体的酶标免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法，并进行方法学验证，应用于无细胞百日咳疫苗临床试验免疫原性评价，为无细胞百日咳疫苗的质量控制、百日咳诊断和流行病学研究提供物质基础。
4精密度
重复性试验结果显示抗PT、FHA和Prn抗体三种检测ELISA方法的平均批内变异系数（CV）分别为9.99%、11.01%和9.00%，平均批间变异系数分别为11.555.1与国外同类方法比较
百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体检测试剂盒(胶体金法)
百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体检测试剂盒（胶体金法）说明书【产品名称】通用名称：百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体检测试剂盒（胶体金法）【包装规格】条型：100人份/盒（25人份/筒×4）【预期用途】本产品用于体外定性检测人血清、血浆或全血样本中的百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体。
适用于百日咳杆菌感染的辅助诊断，检测抗百日咳类毒素和丝状血凝素IgG抗体。
百日咳是由革兰氏阴性的百日咳杆菌引起的呼吸道传染病，主要表现为迁延数周的咳嗽，以有吸气性“尾声”的剧烈阵发性痉咳为特征，婴幼儿的临床表现最为严重。
百日咳的病原体为百日咳鲍特菌，是一种小的、营养需求苛刻的革兰氏阴性球杆菌，专门附着在人呼吸道的粘膜层。
有时，其他传染源，尤其是副百日咳鲍特菌，也可引起百日咳样疾病。
鲍特氏菌属可因环境条件改变而发生表型变化，毒力因子的表达也可不同。
这些因子包括百日咳毒素（PT）、丝状血凝素（FHA）、百日咳粘着素（PRN）、菌毛（FIM）2型和3型、腺苷酸环化酶毒素（ACT）、气管细胞毒素（TCT）、脂低聚糖和百日咳鲍特菌内毒素。
虽然百日咳的发病机制尚不完全清楚，但FHA、PRN和菌毛可帮助细菌粘附在宿主细胞上，PT、TCT和ACT可使细菌破坏上皮层，并躲避宿主的免疫系统。
这些都是重要的致病因素。
百日咳的病原体仅在发病早期患者的鼻咽部可以检出，经9～10 天（范围：6~20 天）的潜伏期，患者出现卡他症状（包括咳嗽）。
1～2周内，出现阵发性痉挛性咳嗽，并带有特征性的鸡鸣样尾音。
典型表现是夜间咳嗽特别严重，咳后常伴有呕吐。
在婴幼儿中，百日咳可引发呼吸暂停和发绀，但可无咳嗽；在青少年和成人中，非特异性的、经久不愈的咳嗽可能是惟一的临床表现。
疾病的卡他期、阵发期和恢复期可持续数月。
虽然大部分临床上可辨别的百日咳病例发生在1～5 岁的儿童，但报告的严重病例和死亡病例主要发生于出生后数周或数月。
在大龄儿童、青少年和成人中，由于其病程常常不典型，通常未被辨识为百日咳。
测抗体的方法
测抗体的方法
1. 免疫组化法（Immunohistochemistry，IHC）：将标记有特定抗体的染色剂与组织样本中的目标抗原结合，通过显色或荧光等方式观察抗原的存在和定位。
2. 免疫荧光法（Immunofluorescence，IF）：使用荧光标记的
抗体与组织样本中的抗原结合，通过荧光显微镜观察抗原的存在和定位。
3. 酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）：将目标抗原与固相载体结合后，使用特异性抗体进
行检测，通过底物的酶反应生成显色或荧光信号来定量测定抗体的含量。
4. 免疫印迹法（Western Blot，WB）：通过将蛋白质样本经SDS-PAGE电泳分离后，将目标蛋白迁移到膜上，然后使用特异性抗体与目标蛋白结合，通过显色剂检测抗体和蛋白质的结合情况。
5. 流式细胞术（Flow Cytometry）：将荧光标记的抗体与单个
细胞或细胞悬液中的目标抗原结合，通过流式细胞术仪器检测细胞的荧光强度和分布，分析抗体的亲和力和细胞表面蛋白的表达情况。
6. 中和试验（Neutralization Assay）：用抗体与病原微生物进
行体外中和反应，观察抗体对病原微生物感染能力的抑制作用。
以上仅为常用的几种测量抗体的方法，具体的方法选择要根据研究目的和实验条件来确定。
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百日咳疫苗免疫后的抗体检测方法
侯启明1, 梁雅文1, 张路民1, 秦进才1, 林燕华2, 李正英2
( 11 中国药品生物制品检定所, 北京 100050; 21 新疆生产建设兵团农二师医院, 新疆维吾尔自治区 库尔勒 841000)
表 1 疑似百日咳病人血清中抗 PT、FHA、AGGs 抗体检测结果
血清 编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9
月龄
18 19
4 5 3 41 5 3 成人 12 岁
抗- P T
( EU / ml) 1 5931 8 4511 2 281 1 2391 5 1211 8 141 2 1 9391 0 61 8 1131 2
结果
我们用纯化 PT 和 FHA 抗原 稀释成 1Lg PN/ ml 包被 96 孔酶标板, 以抗 PT 和抗 FHA 人免疫球 蛋白参考品为标准, 测定了疑似百日咳病人血清、未 接种过 DPT 婴幼儿的阴性血清和接种过 DPT 婴幼 儿的阳性血清中百日咳特异性抗体。 1 疑似百日咳病人血清抗体检测结果
收稿日期: 2000- 06- 20; 修回日期: 2000- 11- 30 作者简介: 侯启明( 1955- ) , 女, 河北省武强县人, 中国药品生物 制品检定所副研究员, 理学学士, 主要从事百日咳疫苗质量控制和质 量检定工作, 以及有关百日咳的研究工作。
该试剂盒能达到临床诊断快速、灵敏的效果。
抗- FHA ( GM T ? S)
( EU / ml)
抗- AG Gs ( GM T ? S) 效价
( 1: )
71 21 ? 31 264
81
71 70 ? 31 340
69
71 17 ? 31 254
106
11 61 ? 01 168
98
11 77 ? 01 153
105
11 52 ? 01 132
如表 1 所示, 在 9 份疑似百日咳病人血清中, 有 4 份血清抗 PT 和抗 FHA 抗体的酶标单位都超过了 百日咳 患者 恢复 期 20 ~ 30EU/ ml 的抗 体 阳性 指 标[ 7] , 2 份抗 PT 抗体超过阳性指标, 1 份抗 FHA 抗 体超过阳性指标, 共有 7 份血清与临床诊断相吻合, 其阳性率为 7718% 。在 9 份血清中采用常 规凝集 方法测定只有 3 份抗 AGGs 抗体达到了 1: 320 的抗 体阳性水平, 与临床诊断吻合率为 3313% 。说明测 定抗 PT 和抗 FHA 抗体的 EL ISA 诊断试剂盒在用 于百日咳诊断上比常规凝集方法敏感、准确。 2 未接种过 DPT 婴幼儿阴性血清的不同次检测结 果
材料与方法
1 抗 百日咳毒素 ( PT) 和 抗丝 状血 凝素 ( FHA) 人免 疫球 蛋 白参考品 丹麦世界卫生组织( WHO) 国际生 物制剂标准 实 验室国际参考品 JN IH- 10。含量为抗 PT 抗体 250EU/ ml; 抗 FHA 抗体 400EU / ml, 以测定的最高 OD 值等于 21 0 的稀 释 度为最佳稀释度。 2 抗原 冻 干的 纯 化 PT 抗原 ( 浓 度: 60Lg PN/ 支) 和 纯 化 FHA 抗原( 浓度: 60LgPN / 支) , 按 Sekura 和 Sato 法制备及 纯 化, 稀释成 1LgP N/ ml 包被 96 孔酶标板。 3 试剂 辣根 过氧化 物酶标 记结合物 羊抗人 Ig G( 工作 浓 度 1B280) , 底物为邻苯二氨基( O PD) , 抗 原包被液( pH91 6) , PBS- 吐温 20 洗涤液( pH714) , 2mol/ L H2SO4 终止液。 4 ELISA 诊断试剂盒血清学验证 41 1 血清样本 9 份 疑似百 日咳 病人 的血 清, 由北 京市 卫 生防疫站和中 国中医 研究 院西 苑医 院提 供。309 份 未接 种 过 DPT 婴幼儿的阴性血 清, 293 份接种过 DPT 婴幼 儿的 阳 性血清, 均由浙江省余杭市卫生防疫站提供。 41 2 微量凝集试验 按常规方法测定百日咳抗凝集原抗 体
摘要: 为了解决百日咳杆菌感染早期诊断不能及时准 确的难 题, 研 制了测 定百日 咳特异 性抗体的 酶联免 疫吸附 试 验( EL ISA) 诊断试剂盒。经采用 9 份疑似百日咳病人 的血清、309 份 未接种 过百白破 混合制 剂( DPT ) 的 婴幼儿 的 阴性 血清、293 份接种过 DPT 的婴幼儿的阳性血清验证, 证明 EL ISA 诊断试剂 盒测定百日 咳特异性 抗体的敏感 性 和准确性都高于常规的凝集试验, 能达到临床诊 断快速、灵敏的效果。 关键词: 酶联免疫吸附试验诊断试剂盒; 凝集试验; 抗百日 咳毒素抗体; 抗丝状血凝素抗体; 抗凝集原抗体 中图分类号: R5161 6 文献标识码: A 文章编号: 1006- 916X( 2001) 03- 0165- 03
Establishment of an ELISA Diagnostic Kit for Detecting Specific Antibodies of Pertussis HOU Q-i ming, LIANG Ya-wen, ZHANG Lu-min, et al. N ati onal Inst it ute f or t he Cont rol of Phar maceutical and Biological Pr oduct s, Beij ing 100050, Chi na.
的敏感性。
中国计划免疫 2001 年 6 月第 7 卷第 3 期
表 2 不同次测定 阴性血清中抗 PT、抗 FHA 和
抗 AGGs 抗体的结果
血清 份数
102 87 63 84
抗- PT ( GMT ? S)
( EU / ml) 51 30 ? 31 550 61 63 ? 31 589 91 72 ? 11 761
抗- FH A
( EU / ml) 831 2 101 7 121 7
2511 5 131 0 911 8
4341 6 281 4 481 8
抗-AG Gs 效价( 1: )
80 40 160 160 40 320 320 80 1 280
接种史
不详 不详
1 1 0 1 0 不详 不详
是同一人上一份血清间隔 1 个月后的第 2 份血清。
87
351 12 ? 21307
84
641 45 ? 11 758
81
351 48 ? 21 016
90
1431 2 ? 01 490
表 3 显示, 使用 ELISA 试剂盒测定阳性血清可 以明显看出, 在接种过 DPT 婴幼儿体内已经产生具 有抵抗百日咳杆菌侵袭的抗 PT 、抗 FHA 保护性抗 体, 抗体水平超过了百日咳患者恢复期 20~ 30EU/ ml 的抗体阳性指标[ 7] 。而抗 A GGs 抗体的 GMT 仅 为 1: 143, 其中 \1: 320 者占 3617% 。说明在某些 情况下抗 AGGs 抗体不能反映了体内是否具有抗百 日咳杆菌感 染的 保护力 水平, 因此 应采 用敏 感的 EL ISA 试剂盒测定百日咳特异抗体, 用于判定接种 百日咳疫苗的效果。
讨论
在许多教科书上一般采用咳喋法或鼻咽拭子法 采集百日咳杆菌的标本, 再经过特殊培养基的培养, 根据细菌的形态和生化特征作为诊断百日咳杆菌感 染的临床判定依据[ 8] 。然而这种细菌 培养法在症 状不明显的患病早期无剧烈咳嗽时或年龄较小的婴 儿的情况下不易获得成功, 同时易染杂菌, 检出阳性 率不高。而且, 由于百日咳潜伏期和卡他期临床症 状只类似于上呼吸道的轻微感染, 临床医生很易忽 略是百日咳感染, 极难掌握采集ablished an EL ISA diagnost ic kit f or detect ing specif ic ant ibodies of pert ussis w hich solved the problem of early diagnosis of B. Pertussis infect ion. 9 sera of pertussis patients in doubt, 309 neg at ive and 293 positive sera of pertussis were det ect ed by this kit . T he result s show ed t hat t he EL ISA diagnost ic kit is sensit ive and accurat e w hen compared w it h the convent ional agglut ination t est. Key words: EL ISA diagnost ic kit; Agg lutination test; Ant-i P T ant ibody; Ant-i FHA ant ibody; Ant-i AGGs ant ibody .
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( 抗- AGGs) 滴度[ 5] 。 413 特异 性 抗 体 测 定 采 用 EL ISA 法 测 定 抗 P T 和 抗 FHA 特异性百日咳抗体。 5 结果 分析 使 用 IBM- PC SBL 软件[ 6] , 计算 抗 P T 和抗 FHA 抗体的酶标单位( EU / ml) 。
鲍特氏百日咳杆菌是引起 人类百日咳的 病原 菌。自 20 世纪 70 年代开始实施扩大免疫规划后, 百白破混合制剂( DPT ) 的免疫覆盖率明显提高, 有 效地阻止了百日咳的流行。但近几年一些国家百日 咳暴发的报道屡有出现, 主要发生在未免疫或免疫 不完全以及免疫后 10 年左右的青少年人群中[ 1~ 3] , 我国近期也 有在 局部 地区百 日咳 流行 的报 道[ 4] 。 目前, 百日咳杆菌感染的早期诊断是临床治疗时亟 需解决的一个问题, 一般使用的测定凝集抗体的方 法时间长、准确度不够, 百日咳疑似病人的诊断结果 与临床症状吻合性差。而免疫接种后的凝集抗体水 平与疫苗本身的凝集原含量有关, 又不能代表真正 的免疫效果。为此我们研制了测定百日咳菌特异性 抗体的酶联免疫吸附试验( EL ISA) 诊断试剂盒, 用 于测定百日咳菌所产生的特异性抗体。经初步测试