最新耳聋基因诊断
耳聋的基因诊断和咨询
在中国，每年有30000新生儿患重度或 极重度耳聋。
另有相当比例的婴幼儿患迟发性听力下 降，每年新发耳聋患儿8万名。
两千万人患各种听力疾病。
随着人类基因组计划的实施和完成， 耳聋的遗传学研究是遗传学中进步最大 的一个分支，鲜有人类常见病能象耳聋 那样有大量的疾病相关基因被定位克隆。
耳聋的临床基因诊断应运而生。
怎样去利用基因科学的巨大进步去造 福于众多的耳聋患者？
第一步：耳聋的基因诊断（突破坚硬 耳蜗外壳的限制）
第二步：耳聋的预防和产前诊断
第三步：耳聋的基因治疗
Hale Waihona Puke 耳聋基因诊断应达到的目的1. 在分子水平明确病因（意义等同于发现肺炎的 致病子）
2. 预防耳聋发生 3. 指导耳聋治疗 4. 判断预后 5. 进行耳聋遗传咨询 6. 进行产前诊断，迎接正常听力新生儿
解放军总医院聋病分子诊断中心
我们在500例耳聋患者中用此试剂盒进行了筛 查，共发现60例患者携带mtDNA A1555G突变， 患者多来自母系遗传耳聋家系，其发病多与氨 基糖甙类抗生素用药史有关，提示这一筛查的 预防性意义。
远程诊断：异地寄送DNA或外周血标本
外地病人自行送诊程序
电话电邮联系
•先天性耳聋患者中GJB2基因存在高突变率
•235delC是频率最高的致病突变
•已发现一系列新突变，表明中国人有其独特的突 变热点和频率
限制性酶切检测中国人常见GJB2 235delC突变
什么样的病人应作GJB2基因突变检测?
广义：不明原因的双侧中重度感音性 耳聋
强烈推荐：先天性双侧中重度感音性 耳聋
解放军总医院聋病分子诊断中心
大部分氨基糖甙类抗生素致聋（AAID）家系为 母系遗传方式 线粒体基因第1555 位A→G均质性点突变与 AAID关系密切 单次剂量的氨基糖甙类药物应用即可导致携带 此突变个体的重度听力损失（一针致聋！）
耳聋基因检测的项目有哪些
核子基因科技 微信号：hezijiyinDNA
耳聋基因检测的项目有哪些
新生儿常见耳聋基因检测采用飞行时间质谱 检测技术，对新生儿抽取微量血液，在基因 水平上对常见耳聋基因进行检测。
耳聋基因检测的项目有哪些
耳聋基因检测通过用一定强度的激光照射样品与基质形成的共 结晶薄膜，基质从激光中吸收能量，样品解吸附，基质-样品之 间发生电荷转移使得样品分子电离，电离的样品在电场作用下 加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测， 即测定离子的质量电荷之比（M/Z）与离子的飞行时间成正比 来检测离子，并测得样品的分子量，进而推知突变位点。
耳聋基因检测的技术
飞行时间质谱仪： 利用目标序列捕获与高通量测序技术，对外周血样本DNA中遗传性耳聋的 相关基因目标区域进行测序和生物信息分析，获取该区域基因变异信息， 并对可疑致病突变进行验证，该方法能够检测到的遗传性耳聋包括常染色 体隐性（显性）非综合征性耳聋、线粒体遗传性耳聋等各种类型综合征性 的耳聋，可检测到包括GJB2、GJB3、线粒体基因等在内的84个基因的全部 突变位点，为临床诊断和突变筛查做出参考依据。
检测耳聋基因实验报告
检测耳聋基因实验报告研究背景耳聋是一种常见的感知器官缺陷，影响着全球数百万人口的听觉能力。
据世界卫生组织的数据，约有4660万人在全球范围内患有严重的耳聋问题，其中大部分是由遗传因素引起的。
因此，了解耳聋的遗传基础对于预防和治疗耳聋至关重要。
本实验旨在检测耳聋相关基因的存在，以帮助进一步了解耳聋的遗传机制。
实验设计样本收集本实验中，我们收集了100个来自不同地区、不同年龄和性别的样本，其中包括耳聋患者和正常人群。
所有的样本采集工作均在伦理审查委员会的指导下进行，并征得了每个受试者的知情同意。
DNA提取我们从每个受试者的全血样本中提取了DNA。
采用常规的DNA提取方法，包括细胞裂解、蛋白质沉淀、DNA沉淀等步骤，最终获得高质量的DNA样本。
耳聋相关基因检测根据文献研究和数据库查询，我们选择了九个与耳聋相关的常见基因进行检测，包括GJB2、GJB3、SLC26A4、MYO7A、USH1C、CDH23、PCDH15、TMC1和TECTA。
使用聚合酶链式反应（PCR）扩增这些基因的特定区域，并进行限制性内切酶切割试验或测序分析，以检测这些基因的突变。
实验结果经过耳聋相关基因的筛选和检测，我们获得了以下结果：基因突变类型突变频率突变位点:-: :-: :-: ::GJB2 缺失3% c.35delGGJB3 基因敲除1% 多个位点SLC26A4 缺失5% c.2168delAMYO7A 点突变2% c.101T>CUSH1C 插入突变1% c.2167_2168insACDH23 缺失4% c.6326delGPCDH15 缺失2% c.3165delCTMC1 点突变3% c.1001G>ATECTA 点突变1% c.546C>T结果表明，在100个受试者中，GJB2、SLC26A4、CDH23和TMC1这四个基因的突变频率较高，分别为3%、5%、4%和3%。
而其他基因的突变频率较低，不超过2%。
耳聋基因检测 - 2
遵循常染色体隐性遗传模式
在不同人群均具有显著的高发病率
临床表现：绝大多数为先天性重度、
极重度耳聋
2
常见的致聋基因及位点
GJB3基因特点
GJB3基因是我国本土克隆的第一个遗传疾病基因
临床症状主要与GJB3突变基因的外显度有关，表现为正 常听力、轻度耳聋、中度耳聋、重度耳聋及极重度耳聋等
荧光探针法 飞行时间质谱法
测序法
耳聋基因检测常用方法比较
方法
主要设备
检测时间 所需步骤
特点
DNA测序法
PCR仪，测序仪 ＞10H
核酸提取、PCR，金标准，操作繁琐，需
电泳、纯化、测 要专门培训，结果判读
序
复杂
限制性内切酶法 PCR仪，电泳仪 约4H ARMS-PCR法
基因芯片法
P扫C描R仪仪，杂交仪，约5H
荧光PCR法
PDS基因突变 检测 试剂盒
SLC26A4：IVS7-2A>G、1174A>T、、 1229C>T、2168A>G ；
检测位点 （10个）
通量低
厦门致善
GJB2:35delG、167delT、176-
191del16、235delC、299-300delAT
； GJB3：538C>T、547G>A；
12SrRNA：1494C>T、1555A>G；
微阵列 芯片法
微阵列 芯片法
优缺点
检测位点少 （9个） 专用仪器 价格高 耗时长
检测位点 （15个） 专用仪器
价格高 耗时长
凯普
GJB2:35delG、176-191del16、235delC、299-
耳聋易感基因检测 试剂盒
耳聋基因！听力障碍的主要原因，我们可以检测
耳聋基因！听力障碍的主要原因，我们可以检测我国是世界上耳聋人数最多的国家，携带耳聋基因突变的人群达到7000-8000万，每年还新出生3万余名聋儿，防聋治聋工作任务艰巨。
研究表明有将近70%的耳聋致病原因由遗传因素引起。
已确定的耳聋基因多达200多种，而GJB2、SLC26A4、mtDNA12S rRNA引起的耳聋在耳聋致病原因中高达40%。
GJB2基因突变是最常见的致聋因素，可导致先天性重度、极重度聋。
SLC26A4基因突变是第二大致聋因素，可引起大前庭导水管综合征性耳聋。
由mtDNA12S rRNA A1555G和C1494T突变所导致的耳聋占1.87%。
耳聋遗传方式多样，有常染色体隐性，常染色体显性，伴性遗传等，临床上以常染色体隐性遗传多见。
GJB2、SLC26A4大部分病例表现为隐性遗传，即单个杂合不引起听力障碍，纯合或者复合杂合才表现出听力障碍。
正常听力人群中有5-6%的人有这两个基因的携带，如果夫妻双方都为携带状态，那么生育的孩子有25%的风险为纯合或者复合杂合，即表现为听力障碍。
mtDNA12S rRNA为氨基糖苷类抗生素敏感基因，有该基因突变的人群对氨基糖苷类的抗生素尤其敏感，如果接受了这类抗生素的注射，往往表现为“一针致聋”。
该基因是母系遗传，如果孕妇筛查出有该基因的突变，所生育的孩子均携带该基因的突变，以后应终身避免使用该类抗生素，所以该基因的筛查有强烈的预警作用。
我们常常遇到一对听力正常的夫妻带着一个听力障碍的孩子来咨询，为什么我们夫妻二人家里没有耳聋家族史也会生育出一个听力异常的孩子？这种情况经过基因检测，多数能检测出GJB2或者SLC26A4基因的杂合突变。
明确了基因缺陷的夫妻在生育二胎的时候就可以在怀孕16周的时候进行羊水穿刺产前诊断，通过对胎儿基因型的检测来预知二胎的听力情况。
理论上有相同致聋基因携带的夫妻每生育一胎，胎儿的患病风险为1/4，听力正常但有单杂合携带的风险为1/2，完全正常的概率为1/4。
耳聋基因检测方法及原理
耳聋基因检测是通过分析个体的基因组来确定与耳聋相关的遗传变异。
以下是常见的耳聋基因检测方法及其原理：
1. Sanger测序：Sanger测序是一种传统、经典的基因测序方法。
它通过将待测样本DNA片段进行扩增，然后使用DNA 聚合酶和剪切酶对扩增产物进行测序。
通过比对测序结果与参考基因组，可以鉴定个体是否携带与耳聋相关的突变。
2. 基于芯片的检测方法：这种方法使用特制的芯片或芯片阵列来同时检测多个耳聋相关基因的突变。
芯片上包含了预先设计好的探针，这些探针可以与特定的基因片段结合。
检测过程中，待测样本DNA片段与芯片上的探针发生杂交反应，通过芯片上的信号检测技术，可以确定样本中的突变情况。
3. 下一代测序（NGS）：NGS是一种高通量、高效的基因测序技术。
它通过同时测序多个DNA分子，可以快速、准确地确定个体的基因组序列。
对于耳聋基因检测，NGS可以检测多个耳聋相关基因的突变，捕捉并分析大量的遗传变异，提供更全面的基因信息。
4. RT-PCR：逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）是一种能够检测基因表达水平的方法。
在耳聋基因研究中，RT-PCR可用来
检测耳聋相关基因在耳部组织中的表达水平，以确定是否存在异常表达。
这些方法在耳聋基因检测中发挥了重要作用。
通过对个体的基因进行检测和分析，可以帮助识别与耳聋相关的遗传突变，为早期干预和治疗提供依据，并为家族遗传咨询和基因筛查提供重要参考。
需要注意的是，耳聋是一个复杂的遗传疾病，除了单基因突变外，还可能受到环境和多基因相互作用的影响，因此仅通过基因检测无法完全解释耳聋的发生机制。
耳聋相关基因
耳聋相关基因耳聋是一种常见的听力障碍，可以由许多因素导致，包括环境因素、感染、药物和遗传因素。
在遗传因素中，有许多基因与耳聋有关。
1. GJB2基因GJB2基因属于连接蛋白家族，编码跨膜蛋白connexin 26 (Cx26)。
Cx26蛋白负责细胞之间离子和分子的通信，是内耳特别是耳蜗的重要成分。
在GJB2基因突变的人中，Cx26的功能被破坏，导致神经元无法正确地传递电信号，从而导致耳聋。
GJB2基因突变是世界范围内最常见的零星单基因病变之一，更常见于亚洲和白种人种群。
GJB2基因突变的携带者越多，患耳聋的风险越高。
2. SLC26A4基因SLC26A4基因编码一种形成质子质子轴的蛋白，称为“Pendrin”。
这种蛋白运输碘化物、氯离子和离子通过耳蜗听小骨传递至听神经的平衡和听觉功能过程中所必需的物质。
突变的Pendrin蛋白可能会导致将听小骨沉积物推向内耳的螺旋管，这可能导致难治性耳聋和平衡问题，称为Pendred综合症。
3. MT-RNR1基因MT-RNR1基因编码线粒体RNA即线粒体基因表达的需要。
该基因中的突变已被证明是导致后天性感音神经性耳聋的一种罕见原因。
突变可能导致线粒体RNA水平的降低或可靠的翻译错误，从而影响耳蜗的细胞的能量转换和自由基生成。
在患者发生均以感音神经性耳聋为主的多种口眼面臂病综合症中，也可以发现MT-RNR1的相关突变。
4. MYO7A基因MYO7A基因编码肌球蛋白，是在听觉细胞内部维持形态并承受力的一种蛋白。
成人中MYO7A基因中缺陷或突变会导致Usher综合症，其特征是眼底病变、内耳损伤和与年龄相应的感音神经性耳聋。
多种耳聋相关基因的突变会导致细胞内不稳定性或蛋白功能丧失，从而导致不同类型的耳聋。
对耳聋患者基因分析可帮助对患者属于何种遗传模式进行确认。
此外，基因测序还可以用于耳聋的早期筛查，早期发现耳聋的基因缺陷，以有效预防发病，同时为耳聋的基因治疗带来了新的突破。
耳聋基因诊断与遗传咨询临床实践标准
耳聋基因诊断与遗传咨询临床实践标准耳聋是一种常见的感觉性神经性听力障碍，可能由多种原因引起，包括遗传因素、环境因素、药物毒性等。
在这些因素中，遗传因素对耳聋的发病率起着特别重要的作用。
遗传性耳聋是家族性、多样性和可辨别性特征，但由于临床医生及普通大众对耳聋遗传咨询的认识不足，导致很多家庭因为不了解遗传因素而无法及时采取预防和干预措施。
基于此，耳聋遗传基因诊断与遗传咨询的临床实践标准应该作为一个重要的医学实践规范来制定和实施。
这份标准旨在明确耳聋遗传基因诊断与遗传咨询的相关流程、技术标准和伦理规范，为医生和患者提供明确的引导和服务。
本文将结合专业知识和临床经验，就耳聋遗传基因诊断与遗传咨询临床实践标准进行探讨。
一、遗传性耳聋基因诊断1. 遗传性耳聋基因检测流程（1）临床评估：首先对耳聋家族史和临床表现进行分析和评估，包括听力检查、家族史调查等。
（2）遗传咨询：对患者及家庭成员进行遗传咨询，明确家族史、患病风险以及遗传咨询知识。
（3）基因检测：根据临床评估的结果，选择合适的基因检测技术，包括PCR、Sanger 测序、高通量测序等。
（4）结果解读：对基因检测结果进行解读和分析，明确耳聋相关基因的突变情况。
（5）遗传风险评估：结合遗传咨询和基因检测结果，对患者及家庭成员的遗传风险进行评估和提示。
2. 遗传性耳聋基因检测技术标准（1）技术标准：基因检测实验室应具备CFDA认证，具备从事遗传性耳聋基因检测的资质和技术条件，严格按照ISO15189等相关规范进行操作。
（2）专业团队：有资深的临床遗传医生和临床遗传师组成的团队，进行基因检测前的临床评估及基因检测结果的解读。
（3）质控体系：完善的质控体系，包括实验室内部的质控和外部的质控参比。
二、遗传咨询1. 遗传咨询对象（1）患者及患者家属：包括已确诊的耳聋患者及其家属，以及疑似患病或遗传风险的家庭成员。
（2）人群筛查：特定人群的遗传性耳聋筛查对象，包括新生儿、儿童及成人。