生物化学习题集题库
糖
一、名词解释
1、直链淀粉：是由α―D―葡萄糖通过1，4―糖苷键连接而成的，没有分支的长链多糖分子。
2、支链淀粉：指组成淀粉的D－葡萄糖除由α－1,4糖苷键连接成糖链外还有α－1，6糖苷键连接成分支。
3、构型：指一个化合物分子中原子的空间排列。这种排列的改变会关系到共价键的破坏，但与氢键无关。例氨基酸的D型与L型，单糖的α—型和β—型。
4、蛋白聚糖：由蛋白质和糖胺聚糖通过共价键相连的化合物，与糖蛋白相比，蛋白聚糖的糖是一种长而不分支的多糖链，即糖胺聚糖，其一定部位上与若干肽链连接，糖含量可超过95%，其总体性质与多糖更相近。
5、糖蛋白：糖与蛋白质之间，以蛋白质为主，其一定部位以共价键与若干糖分子链相连所构成的分子称糖蛋白，其总体性质更接近蛋白质。
二、选择
*1、生物化学研究的内容有（ABCD）
A 研究生物体的物质组成
B 研究生物体的代谢变化及其调节
C 研究生物的信息及其传递
D 研究生物体内的结构
E 研究疾病诊断方法
2、直链淀粉的构象是（Ａ）
A螺旋状 B带状 C环状 D折叠状
三、判断
1、D-型葡萄糖一定具有正旋光性，L-型葡萄糖一定具有负旋光性。（×）
2、所有糖分子中氢和氧原子数之比都是2:1。（×）#
3、人体既能利用D-型葡萄糖，也能利用L-型葡萄糖。（×）
4、D-型单糖光学活性不一定都是右旋。（√）
5、血糖是指血液中的葡萄糖含量。（√）
四、填空
1、直链淀粉遇碘呈色，支链淀粉遇碘呈色，糖原与碘作用呈棕红色。（紫蓝紫红）
2、蛋白聚糖是
指
。
(蛋白质和糖胺聚糖通过共价键连接而成的化合物) 3、糖原、淀粉和纤维素都是由组成的均一多糖。(葡萄糖)
脂类、生物膜的组成与结构
一、名词解释
1、脂肪与类脂：脂类包括脂肪与类脂两大类。脂肪就是甘油三酯，是能量储存的主要形
式，类脂包括磷脂，糖脂。固醇类。是构成生物膜
的重要成分。
2、生物膜：细胞的外周膜和内膜系统统称为生物膜。
#3、外周蛋白：外周蛋白是膜蛋白的一部分，分布
于膜的脂双层表面，通过静电力或范德华引力与膜
结合，约占膜蛋白质的20—30%。
二、选择
1、磷脂作为生物膜主要成分，这类物质的分子最重
要的特点是：（A）
A 两性分子
B 能与蛋白质共价结合
C 能替代胆固醇
D 能与糖结合
2、生物膜含最多的脂类是（ C ）
A.甘油三酯
B.糖脂
C.磷脂
3、下列那种物质不是脂类物质（Ｄ）
A前列腺素 B甾类化合物 C胆固醇 D鞘
氨醇
4、“流体镶嵌”模型是何人提出的？（ D ）
A、Gorter和Grendel
B、Danielli和 Davson
C、Robertson
D、Singer和Nicolson
5、下列哪一种脂蛋白的密度最低（ A ）
A、乳糜微粒
B、β-脂蛋白
C、β-前
脂蛋白 D、α-脂蛋白
*6、生物膜中分子之间不起主要作用的力有（ D
E ）
A、静电力
B、疏水力
C、范得华力
D、
氢键 E、碱基堆积力
三、判断
生物膜内含的脂质有磷脂、胆固醇、糖脂等，其中
以糖脂为主要成分。（×）
2、生物膜在一般条件下，都呈现脂双层结构，但在
某些生理条件下，也可能出现非双
层结构。（√）
3、甘油三酯在室温下为液体者是脂，是固体者为油。（×）
4、生物膜质的流动性主要决定于磷脂。（√）
5、植物细胞膜脂的主要成分是甘油磷脂，动物细胞
膜脂的主要成分是鞘磷脂。（×）
6、生物膜的流动性是指膜脂的流动性。（×）
四、填空
生物膜主要由、、组成。（蛋白质脂质多糖）
2、磷脂分子结构的特点是含一个的头部和两
个尾部。（极性非极性）
3、生物膜主要由蛋白质、脂质、多糖组成。
4、根据磷脂分子所含的醇类，磷脂可分为
和两种。
（甘油磷脂，鞘氨醇磷脂）
5、生物膜的流动性，既包括，也包括
的运动状态。（膜脂，膜蛋白）
蛋白质
一、名词解释
#1、免疫球蛋白：是一类具有抗体活性的动物糖蛋白。主要存在于血浆中，也见于其它体液及组织分泌物中。一般可分为五种。
2、超二级结构：在蛋白质尤其是球蛋白中，存在着若干相邻的二级结构单位（α－螺旋、
β－折叠片段、β－转角等）组合在一起，彼此相互作用，形成有规则的、在空间能辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件，称为超二级结构
3、纤维状蛋白：纤维状蛋白分子结构比较有规律，分子极不对称，呈极细的纤维状，溶解性能差，在生物体内具保护、支持、结缔的功能，如毛发中的角蛋白，血纤维蛋白等。
4、盐析作用：向蛋白质溶液中加入大量中性盐，可以破坏蛋白质胶体周围的水膜，同时又中和了蛋白质分子的电荷，因此使蛋白质产生沉淀，这种加盐使蛋白质沉淀析出的现象，称盐析作用。
5、球状蛋白：球状蛋白的空间结构远比纤维状蛋白复杂，分子呈球形或椭圆形，溶解性能好，如血红蛋白、清蛋白、激素蛋白等。
#6、疏水相互作用：蛋白质分子某些疏水基团有自然避开水相的趋势而自相黏附，使蛋白质折叠趋於形成球状蛋白质结构时，总是倾向将非极性基团埋在分子内部，这一现象称为疏水相互作用。
7、简单蛋白与结合蛋白
简单蛋白：完全由氨基酸组成的蛋白质称为简单蛋白。
结合蛋白：除了蛋白质部分外，还有非蛋白成分，这种蛋白叫结合蛋白。
8、别构现象：当有些蛋白质表现其生理功能时，其构象发生变化，从而改变了整个分子的性质，这种现象称别构现象。
9、分子病：指某种蛋白质分子一级结构的氨基酸排列顺序与正常的有所不同的遗传病。
10、多肽链：多个氨基酸以肽键相互连接形成多肽，多肽为链状结构，又叫多肽链。
11、桑格（Sanger）反应：即2，4二硝基氟苯与α—氨基酸中氨基反应生成DNP-氨基酸，是黄色二硝基苯衍生物。用此反应可以N-端氨基酸的种类。是生化学家Sanger创用，故称桑格反应。
12、等电点：当调节氨基酸溶液的pH值，使氨基酸分子上的－NH2和－COOH的解离度完全相等，即氨基酸所带净电荷为零，在电场中既不向正极移动，也不向负极移动，此时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。
13、氨基酸残基：组成多肽链的氨基酸单位已不是完整的氨基酸分子，其中每一个
－NH－CH－CO－
│单位称为氨基酸残基。
R
14、别构现象：当有些蛋白质分子表现其生物功能时，其构象发生改变，从而改变了整个分子的性质，这种现象称为别构现象。
15、肽键平面：组成肽键（酰胺键）的六个原子（C,N,O,H,α-C,α-C）位于同一平面，呈刚性平面结构，其中C-N键具有偏双键性质， C=O, N-H为反式排布，这种平面称肽键平面又称酰胺平面。
16、结构域：在超二级结构基础上，多肽链（40-400个氨基酸范围）再折叠成相对独立的三维实体，称为结构域。一般由100-200个氨基酸残基组成，大蛋白质分子由2-3个结构域形成三级结构，较小蛋白质的三级结构即是单结构域。
17、蛋白质的变性作用：天然蛋白质因受物理的或化学的因素影响，其分子内部原有的高度规律性结构发生变化，致使蛋白质的理化性质和生物学性质都有所改变，但并不导致蛋白质一级结构的破坏，这种现象叫蛋白质的变性作用
18、氨基酸残基：组成多肽链的氨基酸单位已不是完整的氨基酸分子，因此每一个-NH-CH-CO- 残基称为氨基酸残基。
#19、透析：利用胶体对半透膜的不可渗透性，可将蛋白质溶液中低分子量的杂质与蛋白质分离开，因而得到较为纯净的蛋白质，这种以半透膜提纯蛋白质的方法称透析。
二、选择
1、每个蛋白质分子必定有 (C)
A. α-螺旋结构
B. β-片层结构
C. 三级结构
D. 四级结构
E. 辅基
2、关于肽键的下列描述,错误的是 (E)
A. 具有部分双键性质
B. 可为蛋白酶所水解
C. 是蛋白质分子中主要的共价键
D. 是一种酰胺键，稳定性高
E. 以上都不对
*3、下列氨基酸中具有亲水侧链的是（A C E）
A 苏氨酸
B 亮氨酸
C 丝氨酸
D 丙氨酸
E 谷氨酸
酰胺平面中具有部分双键性质的单键是：（B）
A C-Cα
B C-N
C N-H
D N-Cα
5、与氨基酸相似的蛋白质的性质是 (D)
A. 高分子性质
B. 胶体性质
C. 沉淀性质
D. 两性性质
E. 变性性质
6、含有色氨酸的蛋白质所特有的显色反应是：（D）
A 双缩脲反应
B 黄色反应
C 米伦氏反应
D 乙醛酸反应
E 坂口反应
F 福林试剂反应
7、一种蛋白质的营养价值高低主要决定于（C）
A 是否好吃可口
B 来源是否丰富
C 所含必需氨基酸的种类是否完全和相对数量的
多少
D 市场价格的贵贱
*8、肽键平面的结构特点是：（ABD）
A 4个原子处于一个平面
B 肽键中的C-N键具有双键的性质
C 肽键中的C-N键可以自由旋转
D 只有α-碳原子形成的单键可以自由旋转
E 肽键平面是蛋白质一级结构的基本单位
*9、分离纯化蛋白质主要根据蛋白质的哪些性质（ACE）
A 分子的形状和大小
B 粘度不同
C 溶解度不同
D 溶液的pH值
E 电荷不同
*10、可用来鉴定蛋白质肽链N-末端氨基酸的试剂是：（DE）
A 茚三酮
B 亚硝酸
C 甲醛
D 2，4二硝基氟苯
E 异硫氰酸苯酯
11、跨膜蛋白与膜脂在膜内结合部分的氨基酸残基（C）
A 大部分是酸性
B 大部分是碱性
C 大部分疏水性
D 大部分是糖基化
*12、变性蛋白中未被破坏的化学键是：（DE）
A 氢键
B 盐键
C 疏水键
D 肽键
E 二硫键
F 范得华力
*13、下列关于蛋白质的三级结构的叙述哪些是正确的（ B D）
A．一条多肽链和一个辅基连成的紧密型结构。B．蛋白质分子中含有α－螺旋、?－片层折叠结构和?－转角。
C．其辅基通过氨基酸残基与分子内部相连。
D．大部分非极性基团位於蛋白质分子内部。
14、含有精氨酸的蛋白质特有的呈色反应是：(E)
A. 双缩脲反应
B. 黄色反应
C. 米伦氏反应
D. 乙醛酸反应
E. 坂口反应
F. 福林试剂反应
15、含有精氨酸的蛋白质特有的呈色反应是：(E)
A. 双缩脲反应
B. 黄色反应
C. 米伦氏反应
D. 乙醛酸反应
E. 坂口反应
F. 福林试剂反应
*16、含有酪氨酸的蛋白质能引起的呈色反应是：（ A, B, C, F.）
A.双缩脲反应
B.黄色反应
C.米伦氏反应
D.乙醛酸反应
E.坂口反应
F.福林试剂反应
*17.下列关于蛋白质三级结构的叙述，哪些是正确的（B,D）
A.一条多肽链和一个辅基连成的紧密球形结构
B.蛋白质分子中含有α－螺旋，?－片层折叠和?－转角
C.其辅基通过氨基酸残基与分子内部相连
D.大部分非极性基团位於蛋白质分子内部
*18.在pH6-7的溶液中带负电荷的氨基酸有：（A, C）
A. Asp
B. Arg
C. Glu
D. Gln
E. His
F. Lys
*19、可用来判断蛋白质水解程度的反应是：（B C）A 茚三酮反应 B 亚硝酸反应 C 甲醛反应
D 2，4-二硝基氟苯反应
E 异硫氰酸苯酯反应
20、胰岛素A链与B链的交联靠：(C)
A 氢键
B 盐键
C 二硫键
D 酯键
E 范德华力
*21、在pH6-7范围内带下电荷的氨基酸有：（B E F）
A、Asp
B、Arg
C、Glu
D、Gln
E、His
F、Lys
22、含有精氨酸的蛋白质的特有的显色反应是：（E）
A 双缩尿反应
B 黄色反应
C 米伦氏反应
D 乙醛酸反应
E 坂口反应
F 福林试剂反应
23、蛋白质一级结构与功能关系的特点是:（B）
A 相同氨基酸组成的蛋白质功能一定相同
B 一级结构相近的蛋白质其功能类似性越大
C 一级结构中任何氨基酸的改变,其生物活性就丧失
D 不同生物来源的同种蛋白质.其一级结构完全相同
E 一级结构中氨基酸残基任何改变,都不会影响其功能
24、在下列肽链主干原子排列中,符合肽链结构的是：（E）
A C—N—N—C
B N—C—C—N
C N—C—N—C
D C—C—C—N
E C—C—N—C
F C—O—N—H
25、蛋白质平均含氮量为：（D）
A 10%
B 12%
C 14%
D 16%
E 18%
F 20%
*26、蛋白质胶体溶液的稳定因素是：（B D）
A 蛋白质颗粒在溶液中进行布朗运动，促使其扩散
B 蛋白质分子表面有水膜
C 蛋白质溶液粒度大
D 蛋白质分子带有同性电荷
27、蛋白质空间构象的特征主要取决于: (A )
A. 氨基酸的排列次序
B. 次级键的维持力
C. 温度, pH, 离子强度
D. 肽链内和肽链间的二硫键
28、蛋白质二级结构的主要维系力是
( D )
A、盐键
B、疏水键
C、氢键
D、二硫键
*29、非蛋白质氨基酸是：（A、B ）
A、Orn
B、Cit
C、Asp
D、Arg
E、Glu
F、Lys
30、具有四级结构的蛋白质是（ E ）
Ａ、α‐角蛋白Ｂ、β‐角蛋白Ｃ、肌红蛋白Ｄ、细胞色素ＣＥ、血红蛋白
31、在酰胺平面中具有部分双键性质的单键是
（ B ）
Ａ、Ｃα－ＣＢ、Ｃ－Ｎ
Ｃ、Ｎ－ＨＤ、Ｎ－Ｃα
*32、可用来判断蛋白质水解程度的反应是（ B C ）
A、茚三酮反应
B、亚硝酸反应
C、甲醛反应
D、2，4–二硝基氟苯反应
E、异硫氰酸苯酯反应#33、α–螺旋表示的通式是（ B ）
A、3.010
B、3.613
C、2.27
D、4.616
三、判断
1、血红蛋白与肌红蛋白均为氧的载体, 前者是一个典型的变构蛋白, 而后者却不是。(√)
2、蛋白质的变性是蛋白质分子空间结构的破坏, 因此常涉及肽键的断裂。(×)
3、芳香氨基酸均为必需氨基酸。（×）
#4、凝胶过滤法测定蛋白质分子量是根据不同蛋白质带电荷多少进行的。（×）
#5、用透析法可解开蛋白质中的二硫键。(×)
#6、SDS-PAGE测定蛋白质分子量的方法是根据蛋白质分子所带电荷不同。(×)
7、蛋白质分子中的肽键是单键, 因此能够自由旋转.( × )
8、变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的（×）
#9、一个蛋白质样品经酸水解后，能用氨基酸自动分析仪准确测定它的所有氨基酸（×）
10、双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。（×）#11、可用8M尿素拆开蛋白质分子中的二硫键（×）
12、维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键（×）
13、多数蛋白质的主要带电基团是它N-末端的氨基和C－末端的羧基组成。（×）
14、在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。(√)
15、天然氨基酸都具有一个不对称α－碳原子。（×）
16、亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。(√)
17、自然界的蛋白质和多肽类物质均由L-型氨基酸组成。（×）
18、蛋白质在pI（等电点）时，其溶解度最小。(√)
19、蛋白质多肽链的骨架是CCNCCNCCN---。(√)
20、一氨基一羧基氨基酸pI为中性，因为－COOH
和NH3+ 解离度相同。（×）
21、构型的改变必须有共价键的破坏。(√)
#22、纸电泳分离氨基酸是基于它们的极性性质。（×）
四、填空
1、蛋白质溶液在280nm波长处有吸收峰, 这是由于蛋白质分子中存在着_________, ___________和
__________残基。
（苯丙氨酸酪氨酸色氨酸）
2、胰蛋白酶是一种____ ____酶, 专一性地水解肽链中_______和_________残基的羧基端形成的肽键。
（水解酶赖氨酸精氨酸）
3、一般说来, 球状蛋白分子含有___ __氨基酸残基在其分子内部, 含________氨基酸残基在其分子的表面. （非极性极性）
4、血浆脂蛋白包
括、、、
、。（乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、极高密度脂蛋白）
5、蛋白质按分子形状分为
和；按分子组成分为
和。（纤维状蛋白球状蛋白简
单蛋白结合蛋白）
6、蛋白质的变性作用最主要的特征
是，变性作用是由于蛋白质分子发生改变所引起的。（生
物学性质的改变内部高度规律性结构）
7、β-折叠结构的特点是：（1）肽段伸展呈
；（2）在片层中个肽段走向可以是；也可以
是；（3）氢键是在之间形成；（4）R伸向锯齿的
方。
（锯齿状平行反平行相邻肽链主链上的
-C=O与—N—H 前）
8、组成蛋白质的20中氨基酸中，除外，均为α-氨基酸；除外，氨基酸分子中的α-碳原子，都有旋光异构体；天然蛋白质分子中，只存在氨基酸。
（Pro Gly L-）
9、能形成二硫键的氨基酸是___________。（半胱氨酸）
10、蛋白质的二级结构
有、、和
等类型。
（α-螺旋β-折叠β转角自由回转）11、根据组成蛋白质20种氨基酸侧链R基的化学结构，，可将蛋白质分为四大类：
___________, __________, ___________,
______________。
（脂肪氨基酸，芳香氨基酸，杂环氨基酸，杂环亚氨基酸）
12、蛋白质多肽链主链形成的局部空间结构称为二级结构. 这些二级结构进一步排列一些有规则的模块称之为___________或叫作____________.
（超二级结构，折迭单元）
13、一个氨基酸的α－羧基与另一个氨基酸的α－氨基脱水缩合而成的化合物______
肽。氨基酸脱水后形成的键叫_____键，又称______键。
（二肽肽酰胺键）
14、稳定蛋白质胶体系统的因素是________和
___________.(水膜，电荷)
15、GSH由_________和____________，___________组成的。
（Glu， Cys， Gly，）
16、-螺旋是蛋白质二级结构的主要形式之一，其结构特点是：（1）螺旋盘绕手性为；（2）上升一圈为 nm；（3）一圈中含氨基酸残基数为，每个残基沿轴上升 nm；（4）螺旋圈与圈之间靠
而稳定；（5）螺旋中R伸向。
（右手 0.54 3.6 0.15 氢键外侧）
17、α-螺旋是蛋白质级结构的主要形式之一，该模型每隔个氨基酸残基，螺旋上升一圈。α-螺旋稳定的主要因素，是相邻螺圈三种形成。β-折叠结构有以及两种形式，稳定β-折叠的主要因素是。
（二 3.6 氢键平行式反平行式氢
键）
18、蛋白质具有各种各样的生物功能，例如有，，，，。
（催化运动结构基础防御营养）
19、多肽链的正链是由许多_ __平面组成.平面
之间以原子相互隔开,并以该原子为顶点作
运动。（_酰胺C旋转）
#20、常用的拆开蛋白质分子中二硫键的方法有(1).
________法,常用的试剂为_________.
(2).___________法,常用的试剂为_________或
_________。
（氧化过氧甲酸还原巯基乙醇巯基
乙酸）
21、1、蛋白质变性作用最主要的特征
是，变性作用是由于
蛋白质分子中的被破坏，引
起。
（生物学性质的改变，次级键，天然构象的解体）22、蛋白质的一级结构是由共价键形成的，如
和；而维持蛋白质空间构象的稳定性的是
次级键，如、、
和等。
（肽键，二硫键；氢键，盐键，疏水键，范德华力）
#23、最早提出蛋白质变性理论的是____________。（吴宪）
24、蛋白质的二级结构
有、、和
等类型。
(α–螺旋，β–折叠，β–转角,自由回转)
25、破坏蛋白质的和中和了蛋
白质的，则蛋白质胶体溶液就不
稳定而出现沉淀现象，蛋白质可因加
入、、和
等类试剂而产生沉淀。
（水膜，电荷，高浓度盐类，有机溶剂，重金属盐，
某些酸）
26、在下列空格中填入合适的氨基酸名称：
(1)________是带芳香族侧链的极性氨基酸。
(2)________和_________是带芳香族侧链的非极性
氨基酸。
(3)________是含硫的极性氨基酸。
(4)在一些酶的活性中心中起重要作用并含羟基的
极性较小的氨基酸是__________。
(1) Tyr (2) Trp、Phe (3) Cys (4) Ser
五、计算
1、某一蛋白质的多肽链在一些区段为α螺旋构象,在另一些区段为β构象，该蛋白质的分子量为240000,多肽链外形的长度为5.06x10-5厘米,试计算：α螺旋体占分子的百分比?(假设β构象中重复单位为0.7nm,即0.35nm长/残基。氨基酸残基平均分子量以120为计)
解：
设：α－螺旋体占分子的X％
该蛋白质应含有的氨基酸残基数为：
240,000/120=2,000个
根据多肽链的结构，建立以下方程式：
0.15nm * 2000* X％＋0.35nm * 2,000 *（100-X）％＝5.06*10－5cm
则：3X+700- 7X= 5.06x10-5x107
4X=194
X=48.5
答：该蛋白质分子中α－螺旋体占分子的48.5％
2、测得一个蛋白质中色氨酸的残基占总量的0.29%，计算蛋白质的最低分子量。（色氨酸残基的分子量
为186）（2分）
解：M=186*100/0.29=64138
3、肌红蛋白含铁量为0.335%，其最小分子量是多少？血红蛋白含铁量也是0.335%。试求其分子量。解：肌红蛋白的分子量为：
100：0.335=M：56 M=100*56/0.335=16716.4 血红蛋白的分子量为：
100：0.335=M：（4*56） M=66865.7
4、一个大肠杆菌的细胞中含106个蛋白质分子，假设每个蛋白质分子平均分子量约为40000，并且所有的分子都处于α-螺旋构象，计算每个大肠杆菌细胞中的蛋白质多肽链的总长度。（假设氨基酸残基的
平均分子量为118）
解：（106*40000/118）*0.15*10-7=5.08（cm）
5、测得一个蛋白质的样品的含氮量为10克，计算其蛋白质含量。
解：1克氮=6.25克蛋白质 10*6.25=62.5克
6、试计算油100个氨基酸残基组成的肽链的α.－螺旋的轴长长度。（2.5分）
解：0.15nmx100=15nm
7、下列氨基酸的混合物在pH3.9时进行电泳，指出哪些氨基酸朝正极移动？哪些氨基酸朝负极移动？（3分）
Ala（pI＝6.0） Leu（pI=6.02）Phe（pI=5.48） Arg（pI=10.76 ） Asp（pI=2.77）
His（pI=7.59）
解：朝负极移动者：Ala， Leu， Phe， Arg， His。朝正极移动者：Asp
8、计算100个氨基酸残基组成的肽链的α—螺旋的轴长度。15nm
9、已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%(按重量算),
色氨酸分子量为204。
(1)计算最低分子量；
(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白分子量大约为7万,问该分子中含有几个Trp残基。
解答：（1）设：当该牛血清白蛋白只含一个Trp时
的最低分子量为M
则:204/M=0.58%
M=0.58%/204=35172(约35000为计)（2）该分子中应含Trp残基个数为：
70000/35000=2
答：(1)该牛血清白蛋白最低分子量约是35000。
(2)当分子量为70000时，该分子含有二
个Trp残基。
六、问答
1、一个A肽：经酸解分析得知由Lys, His, Asp, Glu2, Ala, 以及Val, Tyr和两个NH3分子组成。当A肽与FDNB试剂反应后,得DNP-Asp; 当用羧肽酶处理后得游离缬氨酸。如果我们在试验中将A肽用胰蛋白酶
降解时, 得到二肽, 其中一种( Lys, Asp, Glu, Ala, Tyr)在pH6.4时, 净电荷为零, 另一种(His,Glu,以及Val)可给出DNP-His, 在pH6.4时,带正电荷. 此外, A肽用糜蛋白酶降解时,也得到二种肽, 其中一种(Asp, Ala, Tyr)在pH6.4时呈中性, 另一种(Lys, His, Glu2,以及Val)在pH6.4时,带正电荷，问A
肽的氨基酸顺序如何?（10分）
答：由题意可知A肽为八肽，由Lys、His、Asp、Glu2、Ala、Val、Tyr组成。且其中包括二个酰胺；
由FDNB及羧肽酶反应可知N端为Asp，C端为Val；
由胰蛋白酶解、pH＝6.4时电荷情况、生成
DNP-His知所得二个肽段应为： Asp－Glu、Ala、Tyr、Lys－（Glu、Asp 其中有一个酰胺）
－His－Gln－Val
再由糜蛋白酶解、pH＝6.4时电荷情况知所得肽段应为：
Asn－Ala－Tyr－
－Glu－Lys－His－Gln－Val
所以整个八肽的氨基酸顺序应为：
Asn－Ala－Tyr－Glu－Lys－His－Gln－Val
2、将含有Asp(pI=2.98), Gly(pI=5.97),
Thr(pI=6.53), Leu(pI=5.98)和Lys(pI=9.74)的pH ＝3.0的柠檬酸缓冲液,加到预先用同样缓冲液平衡过的Dowex-50阳离子交换树脂中,随后用该缓冲液
洗脱此柱,并分部的收集洗出液,,这五种氨基酸将
按什么次序洗脱下来?（8分）
答：氨基酸在离子交换层析中被洗脱下的次序取决
于氨基酸在该条件下所带电荷的种类、大小以及分
子本身的极性等。因此以上五种氨基酸在pH＝3.0
缓冲液洗脱，洗脱下来的次序是：
Asp－Thr－Glu－Leu－Lys 先……………………后
3、有一个七肽, 经分析它的氨基酸组成是: Lys, Gly, Arg, Phe, Ala, Tyr, 和Ser. 此肽未经糜蛋白酶处理时, 与FDNB反应不产生α-DNP-氨基酸. 经糜蛋白酶作用后, 此肽断裂成两个肽段, 其氨基酸组成
分别为Ala, Tyr, Ser, 和Gly, Phe, Lys, Arg. 这两个肽段分别与FDNB反应, 可分别产生DNP-Ser和DNP-Lys. 此肽与胰蛋白酶反应, 同样能生成两个肽段, 它们的氨基酸组成分别是Arg, Gly, 和Phe, Tyr, Lys, Ser, Ala. 试问此七肽的一级结构是怎样的? 答因为此肽未经糜蛋白酶处理时与FDNB反应不产
生α-DNP-氨基酸可推断为：环七肽
从经糜蛋白酶水解成的两个片段及它们与FDNB的反应产物可知该两片段可能为：
－Ser－Ala－Tyr－（1）
－Lys－Gly、Arg、Phe－（20）
此肽与胰蛋白酶反应生成的两个片段应是：
－Gly－Arg－（3）
－Phe、Tyr、Ser、Ala、Lys－（40）
（20）肽段结合（3）肽段综合分析应为：
－Lys－Gly－Arg－Phe－（2）
（40）与（1）肽段综合分析应为:
－Phe－Ser－Ala－Tyr－Lys－（4）
综合（2）与（4）肽段，此肽应为：
Gly－Arg－Phe－Ser－Ala
?
?
Lys ________________Tyr
4、下列氨基酸的混合物在pH3.9时进行电泳，指出哪些氨基酸朝正极移动？哪些氨基酸朝负极移动？Ala（pI＝6.0） Leu（pI=6.02） Phe（pI=5.48）Arg（pI=10.76 ） Asp（pI=2.77） His（pI=7.59）解：向负极移动者：Ala， Leu， Arg， Phe， His. 向正极移动者：Asp
5、某多肽的氨基酸顺序如下:
Glu-Val-Lys-Asn-Cys-Phe-Arg-Trp-Asp-Leu-Gly-Ser-Leu-Glu-Ala-Thr-Cys-Arg--His-Met-Asp-Gln
-Cys-Tyr-Pro-Gly-Glu-Glu-Lys. 如用胰蛋白酶处理,此多肽将产生几个小肽?（假设无二硫键存在）答：产生四个小肽
1. Glu－Val－Lys
2. Asn－Cys－Phe－Arg
3. Trp－Asp－Leu－Gly－Ser－Leu－Glu－Ala－Thr－Cys－Arg
4. His－Met－Asp－Glu－Cys－Tyr－Pro－Gly－Glu－Glu－Lys
6、比较下列各题两个多肽之间溶解度的大小
（1）〔Gly〕20和〔Glu〕20，在pH7.0时
（2）〔Lys－Ala〕3和〔Phe－Met〕3，在pH7.0时（3）〔Ala－Ser－Gly〕5和〔Asn－Ser－His〕5，在pH9.0时
（4）〔Ala－Asp－Gly〕5和〔Asn－Ser－His〕5，在pH3.0时
答：多肽在水中的溶解度主要取决它们侧链R基团
大概相对极性，特别是离子化基团的数目，离子化
基团愈多，多肽在水中的溶解度就愈大。因此在下
列各题中：
（1）pH7.0时，〔Gly〕20的溶解度大于〔Gly〕20 （2）pH7.0时，〔Lys－Ala〕3的溶解度大于〔Phe
－Met〕3
（3）pH9.0时，〔Asn－Ser－His〕5 溶解度大于〔Ala －Ser－Gly〕5
（4）pH3.0时，〔Asn－Ser－His〕5 溶解度大于〔A la－Asp－Gly〕5
7、一种酶分子量为360,000, 在酸性环境中可解离为二个不同成分, 其中一个成分分子量为120,000, 另一个为60,000. 大的占总蛋白的三分之二, 具有催化活性; 小的无活性. 用β-巯基乙醇处理时, 大的颗粒即失去催化活性, 并且它的沉降系数减小,
但沉降图案上只呈现一个峰. 关于该酶的结构可做
出什么结论?
答：从题中已知酸水解结果可初步推测:
该酶有具有催化活性的大亚基，分子量为120000,
并含有二个（360000x2/3＝240000，
240000/120000=2）,
还有分子量为6000无催化活性的小亚基，
个数也为二个,因（360000-120000x2）/6000=2
再从β－巯基处理结果又知在两个大亚基内有二硫键。
酶
一、名词解释
#1、K cat：酶的转换数，即每秒钟每个酶分子，转换底物的微摩尔数。
#2、限制酶：在细菌的细胞内有一类识别并水解外源DNA的酶，称为限制性内切酶。
3、活性中心和必需基团
活性中心：是指酶分子中直接和底物结合，并和酶催化作用直接有关的部位。
必需基团：酶分子中有很多基团，但并不是所有基团都与酶的活性有关。其中有些基团若经化学修饰使其改变，则酶的活性丧失，这些基团称必需基团。
4、酶原：某些酶，特别与消化有关的酶，在最初合成和分泌时，没有催化活性，这种没有催化活性的酶的前体称为酶原。
5、同工酶：是指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构、组成却有所不同的一组酶。
#6、巯基酶：某些含有巯基的酶，在体内需要有自由的巯基存在时，才能发挥催化活性，若自由巯基发生改变，则酶的活性受到抑制或失去活性，这类酶叫巯基酶。
7、酶原激活：酶原在一定的条件下经适当的物质作用，可转变成有活性的酶。酶原转变成酶的过程成为酶原激活。这个过程实质上是酶活性部位形成或暴露的过程。
8、酶工程：指酶制剂在工业上的大规模生产及应用。
9、固定化酶：通过吸附、偶联、交联和包埋或化学方法做成仍具有酶催化活性的水不溶酶。
#10、中间产物学说：酶在催化反应，酶首先与底物结合成一个不稳定的中间产物，然后中间产物再分解成产物和原来的酶，此学说称中间产物学说。
11、金属酶：酶分子中含有金属元素的酶类
12、别构效应剂：能够与酶分子中的别构中心结合，诱导出或稳定住酶分子的某种构象，使酶活动中心对底物的结合与催化作用受到影响，从而调节酶的催化反应速度及代谢过程的物质。
13、诱导酶：某些物质能促进细胞内含量极微的酶迅速增加，这种是诱导生成的，称为诱导酶。
14、比活性：指单位重量样品中的酶活力，即U数/mg蛋白质或Kat数/kg蛋白质。
15、协同效应：在别构酶参与的酶促反应中，底物与酶结合后，引起了调节酶分子构象发生了变化，从而使酶分子上其它与底物结合部位与后继的底物的亲和力发生变化，或结合更容易，称为正协同效应，相反称为负协同效应。
#16、KNF模型：称为别构酶的序变模型，该学说认为酶分子中的亚基结合小分子物质（底物或调节物）后，亚基构象各个依次变化，从而实现催化功能。
17、别构酶：由于酶分子构相的变化而影响酶的催化活性，从而对代谢反应起调节作用的酶。
18、全酶与蛋白酶：一些结合蛋白质酶类，除蛋白组分，还含有一对热稳定的非蛋白小分子物质，前者称为酶蛋白，后者称为辅因子，只有两者结合成完整体系才具有活力，此完整酶分子称为全酶。19、共价修饰调节：一类调节酶可由于其它酶对其结构进行共价修饰，而使其在活性形式与非活性形式之间相互转变，称为共价修饰调节。
20、多酶体系：在完整的细胞内的某一代谢过程中，由几个酶形成的反应链体系，称为多酶体系。
21、辅基：结合酶中与酶蛋白结合较紧的，用透析法不易除去的小分子物质称为辅基。
22、诱导契合学说：该学说认为酶分子活性中心的结构原来并非和底物的结构互相吻合，但酶的活性中心不是僵硬的结构，它具有一定的柔性，当底物与酶相遇时，可诱导酶蛋白的构象发生相应的变化，使活性中心上有关的各个基团达到正确的排列和定向，因而使酶和底物契合而结合成中间络合物，并引起底物发生反应。
23、核糖酶：具有催化功能的RNA分子称为核糖酶。
24、酶原：没有活性的酶的前体称为“酶原”。
25、酶的反馈抑制：酶作用的产物对酶本身的活性产生抑制作用，称为酶的反馈抑制。
#26、MWC模型：称为别构酶的齐变模型或对称模型，该模型认为别构酶的所有亚基，或者全部呈坚固紧密、不利于结合底物的“T”状态，或全是松散的、有利于结合底物的“R”状态，这两种状态的转变对于每个亚基是同时、齐步发生的。
二、选择
1、核酶的化学本质是（ A ）
Ａ、核糖核酸Ｂ、粘多糖
Ｃ、蛋白质Ｄ、核糖核酸和蛋白质的复合物2、乳酸脱氢酶经过透析后，其活性大大降低或消失，这是因为：（C）
A 亚基解聚
B 酶蛋白变性
C 失去辅酶
D 缺乏底物与酶结合所需要的能量
E 以上都不对
3、下列对酶的叙述，哪一项是正确的？（E）
A 所有的蛋白质都是酶
B 所有的酶均以有机化合物作为底物
C 所有的酶均需特异的辅助因子
D 所有的酶对其底物都具绝对特异性
E 上述都不对
#4、测酶活性时，反应速度对底物应呈：（A）
A 一级反应
B 混合级反应
C 零级反应
D 二级反应
5、在效应物作用下，蛋白质产生的变构（或别构）效应是蛋白质的（C）
A 一级结构发生变化
B 构型发生变化
C 构象发生变化
D 氨基酸顺序发生变化
6、温度对酶活性的影响是：（D）
A.低温可使酶失活
B.催化的反应速度随温度的升高而升高
C.最适温度是酶的特征性常数
D.最适温度随反应的时间而有所变化
E.以上都不对
*7、在嘧啶核苷酸的合成途径中，CTP可以使天冬氨酸转氨甲酰酶产生别构效应的事实属于下列哪种情况：（ B, E）
A. 别构抑制
B. 别构激活
C.酶的诱导生成作用
D. 非共价作用
E. 前体活化作用
*8、非竞争抑制作用是：(B,C,D)
A. 抑制剂与酶活性中心外的部位结合
B. 酶与抑制剂结合后，还可与底物结合
C. 酶与底物结合后，还可与抑制剂结合
D. 酶－底物－抑制剂复合物不能进一步释放产物
E. 以上都不对
9、关于研究酶反应速度应以初速度为准的原因中，哪项不对？（ E ）
A.反应速度随时间的延长而下降，
B.产物浓度的增加对反应速度呈负反馈作用，
C.底物浓度与反应速度成正比，
D.温度和pH有可能引起部分酶失活，
E.测定初速度比较简单方便
10、酶促反应达最大速度后，增加底物浓度不能加快反应速度的原因是：（A）
A.全部酶与底物结合成E-S复合体
B.过量底物对酶有负反馈抑制
C. 过量底物与激活剂结合影响底物与酶的结合
D.改变了化学反应的平衡点
E.以上都不是
11、底物浓度饱和后，再增加底物浓度，则（ D ）
A.反应速度随底物浓度的增加而增加
B.随着底物浓度的增加酶逐渐失活
C.酶的结合部位被更多的底物占据
D.再增加酶的浓度反应速度不再增加
E .形成酶—底物复合体增加
12、有机磷农药（ E ）
A.对酶有可逆性抑制作用
B.可与酶活性中心上组氨酸的咪唑基结合，使酶失活
C.可与酶活性中心上半胱氨酸的巯基结合使，酶失活
D.能抑制胆碱乙酰化酶
E.能抑制胆碱酯酶
13、非竞争性抑制剂的存在，使酶促反应动力学改变为：(C)
A V不变，km变小
B V不变，km变大
C V变小，km变大
D V变小，km不变
E V变小，km变小
F V变大，km变大
14、含唾液淀粉酶的唾液经透析后，水解淀粉的能力显著下降，其原因是：（B）
A、酶变性失活
B、失去Cl—
C、失去Ca2+
D、失去辅酶
*15、受共价修饰调节的酶有（A B）
A 糖原磷酸化酶
B 谷氨酰胺合成酶
C β—半乳糖苷酶
D 精氨酸酶
E 色氨酸合成酶
F 乙酰辅酶A羧化酶
16、竞争性抑制剂的存在,使酶促反应的动力学改变为：（B）
A V不变,Km变小
B V不变,Km变大
C V变小,Km变大
D V变小,Km不变
E V和Km都变小
F V和Km都变大
17、有机磷农药的杀菌机理是：（D）
A 是酶的可逆性抑制作用
B 可与酶的活性中心上组氨酸的？？基结合使酶失活
C 可与酶活性中心上半胱氨酸的巯基结合使酶失活
D 能抑制胆碱脂酶
E 能抑制胆碱乙酰化酶
18、pH对酶促反应速度的影响，下列哪能项是正确的：(B)
A pH对酶促反应速度影响不大
B 不同的酶有其不同的最适pH
C 酶的最适pH都在中性即pH=7左右
D 酶的活性随pH的提高而增大
E pH对酶促反应速度影响最大的主要在于影响酶的等电点
19、在对酶的抑制中，Vmax 不变，Km增加的是（ A ）
Ａ、竞争性抑制Ｂ、非竞争性抑制
Ｃ、反竞争性抑制Ｄ、不可逆抑制
20、根据国际系统命名法原则，以下哪一个属转移酶类（ A ）
Ａ、ＥＣ２.7.1.126 B、ＥＣ１.7.1.126
Ｃ、ＥＣ３.7.1.126 Ｄ、ＥＣ６.7.1.126 21、1、下列有关酶蛋白的叙述，哪个是不正确的？（ C ）
Ａ、属于结合酶的组成部分Ｂ、为高分子化合物Ｃ、与酶的特异性无关Ｄ、不耐热
Ｅ、不能透过半透膜
22、关于变构酶的结构特点的错误叙述是：
（ D ）
Ａ、有多个亚基组成Ｂ、有与底物结合的部位Ｃ、有与变构剂结合的部位
Ｄ、催化部位与别构部位都处于同一亚基上
Ｅ、催化部位与别构部位既可处于同一亚基也可处于不同亚基上
*23、酶蛋白和辅酶之间有下列关系（B D E ）
A、两者以共价键相结合,二者不可缺一
B、只有全酶才有催化活性
C、在酶促反应中两者具有相同的任务
D、一种酶蛋白通常只需一种辅酶
E、不同的酶蛋白可使用相同辅酶，催化不同的反应*24、关于别构酶，正确的表达是（ A C F ）
A、它们一般是寡聚酶
B、它们一般是单体酶
C、当效应剂与别构酶非共价结合后，引起别构效应。
D、当效应剂与别构酶共价结合后，引起别构效应。
E、别构酶的动力学性质符合米氏方程式。
F、别构酶的动力学性质不符合米氏方程式。
25、酶促作用对反应过程能量的影响在于（B）
A、提高活化能
B、降低活化能
C、提高产物的能阈
D、降低产物的能阈
E、降低反应的自由能
26、下列哪一个酶的催化活性需要金属离子？（ B ）
A、溶菌酶
B、羧肽酶
C、胰凝乳蛋白酶
D、胰蛋白酶
三、判断
1、同一种辅酶与酶蛋白之间可有共价和非共价两种不同类型的结合方式。(×)
2、Km值仅由酶和底物的相互关系决定，而不受其它因素影响。（×）
3、酶的敏感性就是指酶对能使蛋白质变性的因素极为敏感。（√）
4、人体生理的pH值是体内各种酶的最适pH值。(×)
5、Km可近似表示酶对底物亲和力的大小，Km愈大，表明亲和力愈大。(×)
6、激活剂对酶具有激活作用，激活剂浓度越高，则酶活性越大。(×)
7、非竞争性抑制中，一旦酶与抑制剂结合后，则再不能与底物结合。(×)
8、毒气DFP为不可逆型抑制剂。(√)
5、溶菌酶和辅酶NAD和NADP是名种脱羧酶的辅酶。(×)
6、胰蛋白酶均属单体酶。(√)
7、酶促反应的初速度与底物浓度无关。（×）
8、酶的Km值是酶的特征常数，它不随测定的pH和温度而改变。（×）
9、别构酶动力学曲线的特点都是呈S形曲线。（×）
10、不可逆抑制作用中抑制剂通常以共价键与酶蛋白中的基团结合。( √ )
11、反竞争抑制中，酶只有与底物结合后，才能与抑制剂结合。(√)
12、酶活性中心是亲水的介电区域。(×)
13、溶菌酶的实现催化功能需金属离子Mg2+参与。(√)
14、抗体酶既具有专一结合抗原的性质，又具有酶的催化功能。 (√)
15、溶菌酶的实现催化功能需金属离子Mg2+参与。(√)
16、抗体酶既具有专一结合抗原的性质，又具有酶的催化功能。 (√)
17、诱导酶是指在加入诱导物后本身构象发生变化，趋向于易和底物结合的一类酶。(×)
18、溶菌酶和胰蛋白酶均属单体酶。(√)
19、辅助因子都可用透析法去除。(×)
20、在酶分离纯化过程中，有时需在抽提溶剂中加入少量的巯基乙醇，这是为了防止酶蛋白的-SH被氧化。(√)
21、在稳态平衡假说中，产物和酶结合形成复合物的速度极小。(√)
22、Km可近似表示酶对底物亲和力的大小，Km愈大，表明亲和力愈大。(×)
23、人体生理的pH值是体内各种酶的最适pH值。(×)
24、诱导酶是指在加入诱导物后本身构象发生变化，趋向于易和底物结合的一类酶。(×)
25、抑制剂对酶的抑制作用是酶变性失活的结果。(×)
26、在酶分离纯化过程中，有时需在抽提溶剂中加入少量的巯基乙醇，这是为了防止酶蛋白的-SH被氧化。(√)
27、在稳态平衡假说中，产物和酶结合形成复合物的速度极小。(√)
28、辅助因子都可用透析法去除。(×)
四、填空
使酶具有高催化效率的主要因素有__ _,_ _,__ _和____
_ 。
（酶与底物的靠近及定向效应酶与底物发生变形作用共价催化酸碱催化_）
2、结合蛋白酶类必须和相结合才有活性，此完整的酶分子称为。（酶蛋白
辅因子全酶）
3、酶原
是
。酶原变成酶的过程称为。这个过程实质上是酶的部位或
的过程，某些酶以酶原的形式存在，其生物学意义是
。
没有催化活性的前体酶原的激活活性形成暴露保护组织细胞不被水解破坏
4、酶活性部位上的基团可分为两类
和。酶的活性部位不仅决定酶的，同时也对酶的催化性质起决定作用。
结合基团催化基团专一性
5、根据蛋白质结构上的特点，可把酶分为三类：、
和。
单体酶寡聚酶多酶复合物
6、要使酶反应速度达到Vmax的80%，此时底物浓度应是此酶Km值的 1/4倍。
7、和一般化学反应相同，测定酶促反应速度有两种方法，（1）_________________(2)
________________。
（单位时间内底物的消耗量，单位时间内产物的生成量，）
8、米氏常数是酶的____________常数，可用来近似地表示_________________,Km愈
大，则表示酶与底物________________
（酶的特征物理常数酶对底物亲和力的大小酶与底物亲和力愈小）
9、酶的非竞争性抑制动力学特点是
_________Vmax ，而Km_________。
( 减小不变 )
10、关于酶与底物的结合，现在普遍认为的是
____________学说，该学说能较好地解释
酶催化作用的________；而酶催化作用的高效率可用__________和___________解释。
（诱导契合学说专一性能阀学说中间产物学说）
11、Mechaelis和Menten根据___________推导了__________的公式，称为________。
（中间产物学说表示底物浓度与反应速度之间的关系米氏方程）
12、可逆性抑制作用分为__________和___________两种主要类型，前者是_______改变而不改变______可通过___________方法来消除这种抑制作用；后者改变_______而不改变________。
（竞争性抑制，非竞争性抑制， Km， V, 增加底物浓度， V, Km）
13、酶活性部位上的基团可分为两类：
和。酶的活性部位不仅决定酶
的，同时也对酶的起决定性作用。
（结合基团催化基团专一性催化性质）14、米氏常数Km是常数，可用来近似表示。Km愈大，则表
示，愈小则表
示。
（酶的特征性物理酶对底物亲和力的大小酶对底物亲和力小酶对底物亲和力大）
15、根据酶催化反应的类型,把酶分为六大类,它们是、、、
、、。
（氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂解酶、异构酶、合成酶）
16、酶具有高催化效率的因素主要
是、、、
。
邻近定位效应、张力与变形、酸碱催化、共价催化17、当_ 时，酶促反应速度与[E]成正比。（底物过量）
18、酶活性中心的两个功能部位为__ 和__ 。
（结合中心催化中心）
19、酶的负协同效应使酶的对
不敏感。
（反应速度底物浓度）
20、酶的辅助因子在酶促反应中起作用，而酶蛋白决定酶的。
（催化作用专一性）
21、蛋白水解酶类可分为、和三类。
（肽链内切酶肽链外切酶二肽酶）22、根据酶蛋白分子结构的特点，可把酶分为三类：、、。
（单体酶、寡聚酶、多酶络和物）
23、酶对底物的专一性可以分为两种情况：
和。
（结构专一性，立体异构专一性）
24、影响酶促反应速度的因素
有、、、
、、
和等。（酶浓度，底物浓度，PH，温度，激活剂，抑制剂）
25、作为生物催化剂的酶与无机催化剂不同的特点是：（1）、（2）
（3）
（4）。（催化效率高，专
一性强，酶易失活，酶活力的可调性）
26、竞争性抑制剂使 Vmax ,
Km 。非竞争性抑制的酶反应中Vmax___ __,Km_____ ____。（不变，增加，减小，不变）
五、计算
1、某酶制剂的比活力为42单位/mg蛋白质,每ml
含12mg蛋白质,
(1) 计算1ml反应液中含5μl酶制剂时的反应初速
度
(2) 若1ml反应液内含5μl酶制剂,在10分钟内消
耗底物多少?
解：
1个酶活力单位为特定条件下,1分钟内能转化1μ
mol底物的量.
反应初速度v=5×10-3×12×42 =2.52（μ
mol/L/min）
(2) 10分钟内消耗底物: 2.52μ
mol/L/min×10min=25.2μmol
2、某酶的Km为4.7*10-3M，如果该反应的Vmax是
22μmol*L-1*min-1,在底物浓度为2*10-4M和抑制的浓
度为5*10-4M的情况下在：
竞争性抑制，其反应速度将是多大？
非竞争性，其反应速度又将是多大？（Ki在这两种
情况下都是3*10-4）（共3分）
解：（1）v=Vmax[S]/{ Km(1+[I]/ Ki)+[S]}
=22*10-6*2*10-4/{4.7*10-3*(1+5*10-4/3*10-4)+2*10-4
}
=3.46*10-7(mol*L-1*min-1)
v=( Vmax/(1+[I]/ Ki) [S])/( Km+ [S])
=3.57*10-7(mol*L-1*min-1
3、某一符合米氏方程的酶，当[S]=2Km时，其反应
速度Vmax等于多少？
v=Vmax[S]/(Km+[S])
v=Vmax*2Km/(Km+2Km)
v=2/3Vmax
即此时反应速度为最大反应速度2/3
#4、某酶的Km为4.0×10-4mol/L,Vmax=24μ
mol/L/min，计算出当底物浓度为2×10-4mol/L，非竞争性抑制剂浓度为6.0×10-4 mol/L,Ki为
3.0×10-4 mol/L时的抑制百分数。
有抑制剂存时：
v=Vmax[S]/(1+[I]/Ki)(Km+[S])
v=24
*2×10-4/(1+6.0×10-4/3.0×10-4)( 4.0×10-4+2×1 0-4)
v=24 *2×10-4/18
v=8/3×10-4(μmol/L/min)
无抑制剂存时：
v=Vmax[S]/(Km+[S])
v=24 *2×10-4/( 4.0×10-4+2×10-4)
v=8×10-4(μmol/L/min)
[1-8/3×10-4(μmol/L/min)/ 8×10-4(μ
mol/L/min)]*100%=66.7%
即有非况争性抑制剂存在时,其抑制百分数为66.7% 5、已知1亳升酶溶液中含蛋白质量为0.625mg，每亳升酶溶液所含酶单位为250，些酶的活性是多少？（3’）
250/0.625=400U/mg
6、一酶促反应的速度为Vmax的80%,在Km与[S]之间有何关系?
Km=[S]/4
7、某一酶促80反应的速度从最大速度的10%提高到90%时，底物浓度要做多少改变？
需提高80倍
8、一种纯酶按重量算含Leu 1.65%和Ile 2.48%,问该酶最低分子量为多少?
解：设该酶的最低分子量为M, 最少含X个Leu残基, 含Y个Ile残基
则：XMLeu/M=1.65% YMIle/M=2.48%
因为 MLeu ＝ MIle ＝131
所以X/Y=1.65/2.48＝2/3
即X＝2 Y＝3
代入公式：2x131/M=1.65% M=2x131/1.65%=15800 答该酶最低分子量为15800
9、过氧化氢酶Km值为2.5*10-2克分子/升，当底物过氧化氢浓度为100毫克分子/升时，求在此浓度下，过氧化氢酶被底物所饱和的百分数（即V/Vmax=？）解答：V=Vmax[S]/（Km+[S]）
故V/Vmax=[S]/（Km+[S]）=100*10-3/（2.5*10-2+10-1）=0.1/0.125*100%=80%
10、某酶的Km为4.0×10-4mol/L,Vmax=24μ
mol/L/min，计算出当底物浓度为2×10-4mol/L，非竞争性抑制剂浓度为6.0×10-4 mol/L,Ki为
3.0×10-4 mol/L时的抑制百分数。
解答：有抑制剂存在时：
v=Vmax[S]/(1+[I]/Ki)(Km+[S])
v=24
*2×10-4/(1+6.0×10-4/3.0×10-4)( 4.0×10-4+2×1 0-4)
v=24 *2×10-4/18
v=8/3×10-4(μmol/L/min)
无抑制剂存在时：
v=Vmax[S]/(Km+[S])
v=24 *2×10-4/( 4.0×10-4+2×10-4)
v=8×10-4(μmol/L/min)
[1-8/3×10-4(μmol/L/min)/ 8×10-4(μ
mol/L/min)]*100%=66.7%
即有非竞争性抑制剂存在时,其抑制百分数为66.7%
六、问答
1、同工酶有何生理意义？
同工酶指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白分子结构组成却不同的一组酶。同工酶可能是生命有机体对环境变化或代谢变化的另一种调节方式，即当一种同工酶受抑制或破坏时，其他同工酶仍起作用，从而保证代谢的正常进行。
#2、简述多底物反应的几种机理。
多底物反应有：依次反衣机理，即产生的底物随酶催化反应依次释放；随机反应机理，即底物以随机的方式释放；乒乓反应机理。
3、如何解释酶活性与pH的变化关系，假如其最大活性在pH=4或pH=11时，酶活性可能涉及那些氨基酸侧链？
解答：(1)过酸、过碱影响酶蛋白的构象，甚至使酶变性失活。
(2)PH改变不剧烈时，影响底物分子的解离状态和酶分子的解离状态，从而影响酶对底物的结合与催化。
(3)PH影响酶分子中另一些基团的解离，这些基团的解离状态与酶的专一性及酶分子的活性中心构象有关。
如果酶的最大活性在PH=4时，可能涉及酸性氨基酸：天冬氨酸、谷氨酸；
如果酶的最大活性在PH=11时，可能涉及碱性氨基酸：赖氨酸、组氨酸和精氨酸。
述酶活性调控的几种机制。
解答：酶活性调控的机制有：别构效应的调控，可逆共价修饰调控，酶原的激活和激促蛋白或抑制蛋白质的调控。
5、运用生化理论，试分析下述现象：绝大多数酶溶解在纯水中会失活，为什么？
解答：酶溶解在蒸馏水中，（1）不能为酶催化反应提供最适的PH环境，特别是当反应过程中，PH发生变化时，不能起缓冲作用；（2）在蒸馏水中蛋白质容易变性；（3）酶在净水溶液中缺乏必需的离子，且对温度变化敏感，所以对酶来说在蒸馏水中容易失活。核酸
一、名词解释
1、cAMP和cGMP：分别是环腺苷酸和环鸟苷酸，它们是与激素作用密切相关的代谢调节物。
#2、断裂基因
断裂基因：真核生物的基因由于内含子的存在，而使基因呈不连续状态，这种基因称为断裂基因。
3结构基因：为多肽或RNA编码的基因叫结构基因。
4、假尿苷：在tRNA中存在的一种5-核糖尿嘧啶，属于一种碳苷，其C1‘与尿嘧啶的C5相连接。
#5、Southern印迹法：把样品DNA切割成大小不等的片段，进行凝胶电泳，将电泳分离后的DNA片段从凝胶转移到硝酸纤维素膜上，再用杂交技术与探针进行杂交，称Southern印迹法。
6、核酸的变性：高温，酸，碱以及某些变性剂（如尿素）能破坏核酸中的氢键，使有规律的螺旋型双链结构变成单链的无规则的“线团”，此种作用称为核酸的变性。
7、核酸的变性：高温、酸、碱以及某些变性剂（如尿素）能破坏核酸种的氢键，使有规律的双螺旋结构变成单链，似无规则的“线团”，此谓核酸的变性。
8、内含子：基因中不为蛋白质、核酸编码的居间序列，称为内含子。
9、假尿苷：tRNA分子中存在一种核糖尿嘧啶，其
C1’是与尿嘧啶的第三个碳原子相连。
10、增色效应：核酸变性或降解时其紫外线吸收增加的现象。
11、hnRNA：称为核不均一RNA，是细胞质mRNA的前体。
12、退火：变性核酸复性时需缓慢冷却，这种缓慢冷却处理的过程，叫退火。
13、复制子：基因组能独立进行复制的单位称为复制子。原核生物只有一个复制子，真核生物有多个复制子。
14、增色效应：DNA或RNA变性或降解时其紫外吸收值增加的现象称增色效应。
15、减色效应：DNA或RNA复性时其紫外吸收值减少的现象称减色效应。
16、Northern印迹法：将电泳分离后的RNA吸印到纤维素膜上再进行分子杂交的技术，称Northern印迹法。
17、解链温度：DNA的加热变性一般在较窄的温度范围内发生，通常把DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为DNA的解链温度。
二、选择
#1、把RNA转移到硝酸纤维素膜上的技术叫：（B）
A Southern blotting
B Northern blotting
C Western blotting
D Eastern blotting 2、外显子代表：（
E ） A 一段可转录的DNA 序列 B 一段转录调节序列 C 一段基因序列 D 一段非编码的DNA 序列 E 一段编码的DNA 序列 3、脱氧核糖的测定采用（ B ） A 、地衣酚法 B 、二苯胺法 C 、福林-酚法 D 、费林热滴定法 *4、在DNA 双螺旋二级结构模型中，正确的表达是：（C
F ） A 两条链方向相同，都是右手螺旋 B 两条链方向相同，都是左手螺旋 C 两条链方向相反，都是右手螺旋 D 两条链方向相反，都是左手螺旋 E 两条链的碱基顺序相同 F 两条链的碱基顺序互补 5、可见于核酸分子的碱基是：（A ） A 5-甲基胞嘧啶 B 2-硫尿嘧啶 C 5-氟尿嘧啶 D 四氧嘧啶 E 6-氮杂尿嘧啶 6、下列描述中哪项对热变性后的DNA ： ( A ) A 紫外吸收增加 B 磷酸二酯键断裂 C 形成三股螺旋 D （G-C ）%含量增加 7、双链DNA Tm 值比较高的是由于下列那组核苷酸含量高所致：（B ） A G+A B C+
G C A+T D C+T E A+C 8、核酸分子中的共价键包括：（A ） A 嘌呤碱基第9位N 与核糖第1位C 之间连接的β-糖苷键 B 磷酸与磷酸之间的磷酸酯键 C 磷酸与核糖第一位C 之间连接的磷酸酯键 D 核糖与核糖之间连接的糖苷键 9、可见于核酸分子的碱基是（ A ） Ａ、５－甲基胞嘧啶 Ｂ、２－硫尿嘧啶 Ｃ、５－硫尿嘧啶 Ｄ、四氧嘧啶 Ｅ、６－氮杂尿嘧啶 *10、Watson 和Crick 提出DNA 双螺旋学说的主要依据是（ D E ） A 、DNA 是细菌的转化因子 B 、细胞的自我复制 C 、一切细胞都含有DNA D 、DNA 碱基组成的定量分析 E 、对DNA 纤维和DNA 晶体的X 光衍射分析 F 、以上都不是主要依据
11、多数核苷酸对紫外光的最大吸收峰位于：（C ）
A 、220 nm 附近
B 、240 nm 附近
C 、260 nm 附近
D 、280 nm 附近
E 、300 nm 附近
F 、320 nm 附近 12、含有稀有碱基比例较多的核酸是：（C ） Ａ、胞核DNA Ｂ、线粒体DNA Ｃ、ｔRNA Ｄ、ｍRNA Ｅ、ｒRNA Ｆ、hnRNA 13、自然界游离核苷酸中的磷酸最常连于戊糖的(C) A 、C-2’ B 、C-3’ C 、 C-5’ D 、C-2’及C-3’C -2 E 、 C-2’及C-5’ *14、在DNA 双螺旋二级结构中，正确的表达是（C F ） A 、两条链方向相同，都是右手螺旋。 B 、两条链方向相同，都是左手螺旋。 C 、两条链方向相反，都是右手螺旋。 D 、两条链方向相反，都是左手螺旋。 E 、两条链的碱基顺序相同。 F 、两条链的碱基顺序互补。 15、核酸分子储存、传递遗传信息的关键部分是：C ） A. 磷酸戊糖 B. 核苷 C. 碱基序列 D. 戊糖磷酸骨架 E. 磷酸二酯键 16、嘌呤核苷中嘌呤与戊糖的连接键是：（A ）
A ．N 9－C ?1 B. C 8－C ?1 C. N 1－ C ?
1
D. N 7－C ?1
E. N 1－C ?1
F. C 5－C ?
1 17、可用於测量生物样品中核酸含量的元素是：（ B ） A. N B. P C. C D. H E. O F. S 18、X 和Y 两种核酸提取物，经紫外线检测，提取物X 的A 260/A 280 =2, 提取物YA 260/A 280 =1，该结果表明： （ B ） A.提取物X 的纯度低於提取物Y B.提取物Y 的纯度低於提取物X
C.提取物X 和Y 的纯度都低
D.提取物X 和Y 的纯度都高
E.不能表明二者的纯度 三、判断 1、Tm 值高的DNA 分子中（C=G ）%含量高。(√) 由于RNA 不是双链，因此所有的RNA 分子中都没有双螺旋结构。(×) 3、Tm 值低的DNA 分子中（A=T ）%含量高。 (√) 4、由于RNA 不是双链，因此所有的RNA 分子中都没有双螺旋结构。(×) 5、DNA 碱基摩尔比规律仅适合于双链，而不适合于单链。（是） 6、二苯胺法测定DNA 含量必须用同源的DNA 作标准样品。
(×)
7、起始浓度高、含重复序列多的DNA片段复性速度快。 (√)
8、核苷酸的等电点的大小取决于核糖上的羟基与磷酸基的解离。(×)
9、核苷酸的碱基和糖相连的糖苷键是C-O型。(×)
10、DNA碱基摩尔比规律仅适合于双链，而不适合于单链。(√)
四、填空
1、天然DNA的负超螺旋是由于DNA双螺旋中两条链引起的，为手超螺旋。正超螺旋是由于DNA 双螺旋中两条链引起的，为
手超螺旋。
松弛（少绕）右扭紧（多绕）左
2、可利用和这两种糖的特殊颜色反应区别DNA和RNA，或作为两者定量测定的基础。（苔黑酚二苯胺）
3、建立DNA双螺旋模型的主要实验依据
是、
和。
X-光衍射数据，关于碱基对的证据，电位滴定行为
4、mRNA约占细胞总RNA的，其分子量为
道尔顿，在细胞质中常与结合。（3~5%
0.2-2.0*106核糖体）
5、3’，5’-环鸟苷酸的代号为，是生物体内与密切相关的代谢调节物。类似的化合物还有和。（cGMP 激素作用 cAMP cCMP）
6、DNA双螺旋结构模型是_________和___________於__________年提出的。这个结构
模型认为DNA分子是由两条_____________的多核苷酸链构成。_______和________
排列在外侧，形成了两条向____盘旋的主链，两条主链的横档代表一对_______排列
在外侧，它们彼此_______键相连。
. （ Wanton， Crick 1953 反向平行磷酸
核糖右碱基氢）
7、DNA的复性速度与、
以及DNA片段的大小有关。
(起始浓度重复序列的多少)
8、因紫外光照射而引起的DNA破坏的修复系统有
_________和____________两种。
(光复活修复切除修复)
9、tRNA的二级结构是___________型，其结构中与蛋白质生物合成关系最密切的是____________和
______________。
（三叶草叶，氨基酸臂，反密码环）10、DNA的复性速度与、以及DNA片段的大小有关。
(起始浓度重复序列的多少)
11、原核生物核糖体的沉降系数约70S。它是由30S 亚基和50S亚基构成的。这两个亚基中所包含的rRNA的沉降系数分别为16S、5S 和23S。
12、tRNA的二级结构是三叶草型,其结构中与蛋白质生物合成关系最密切的是
和。（氨基酸臂反密码环）
13、结构基因为和编码。（多肽
RNA）
14、DNA双螺旋结构模型是和于年提出的.这个结构模型认为DNA分子是由两条
多核苷酸链构成的和排列在外侧构成
两条向盘旋的主链,两条链的横档代表一对
排列在内侧,它们彼此以相连。
（Watson Crick 1953 反向平行磷酸脱氧核糖右手碱基氢键）
15、从E.coli中分离的DNA样品内含有20%的腺嘌呤（A），那么T= %，G+C
= %。（20 60）
16、生物基因的功能主要有二个方面：
（1）；（2）。（通过复制将遗传物质从亲代传给子代通过转录和翻译进行基因表达）
17、真核mRNA一般是顺反子。其前体
是，在成熟过程中，其5‘端加上帽子结构，在3‘端加上尾巴结
构，并通过分子的帮助除去和拼接。
（单不均一核RNA 7-甲基鸟苷多聚腺苷酸小核RNA 内含子外显子）
18、原核细胞中rRNA的前体是 ,经过甲基化作用和酶的作用转变成成熟的rRNA。（前核糖体RNA 专一核酸内切）
19、嘌呤环上的第位氮原子与戊糖的第
位碳原子相连形成，通过这种
相连而成的化合物叫。（9 5’ 糖苷键糖苷键嘌呤核苷）
五、计算
1、有一噬菌体的突变株其DNA长度为15μm，而野生型的DNA长度为17μm，问该突变体的DNA中有多少个碱基缺失？
解：因为相邻碱基对之间的距离是0.34nm，所以该突变体的DNA中碱基缺失数为：
（17-15）*1000/0.34=5.88*103个