最新酶工程考试重点整理

标志酶:通常可以将只分布于细胞内某个特定组分的酶称为标志酶,可以将1

它作为细胞组分鉴别的依据,甚至可以判别组织或器官是否发生病变.

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必需水:在有机介质中,酶分子需要一层水化层以维持其完整的空间构象,一3

般将维持酶分子完整空间构象所必须的最低水含量称为必需水

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沉淀分离:是通过改变某些条件或添加某些物质,使酶的溶解度降低,从溶液5

中沉淀析出与其他溶质分离的技术过程

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超滤:需要增加流体的静压力,改变天然过程的方向,才可能发生含有低分子7

量化合物的溶剂流通过膜,此时的推动力是流体静压力与渗透压的压差

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差速离心:是指采用不同的离心速度和离心时间,使不同沉降速度的颗粒分9

批分离的方法

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非竞争性抑制:抑制剂与底物分别于酶分子上的不同点结合而引起酶活性降11

低的抑制作用

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反竞争性抑制:在底物与酶分子结合生成中间复合物后,抑制剂在于中间复13

合物结合而引起的抑制作用

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反渗透:是一种以压力差为推动力,从溶液中分离出溶剂的膜分离操作,孔径15

范围在< 20Å;(由于分离的溶剂分子往往很小,不能忽略渗透压的作用,故而成为16

反渗透)

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反胶束：当体系中水浓度低于有机溶剂时,形成胶束的表面活性剂的极性端18

朝向胶束的中部,而非极性端则朝向胶束的外侧,水就被包在了胶束的内部,此时19

的胶束就叫反胶束

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固定化酶:与水不溶性载体结合,在一定的空间范围内起催化作用的酶.优点: 21

纯化简单,提高产物质量,应用范围广,多次使用,可以装塔连续反应.缺点:首次22

投入成本高大分子底物较困难.方法:吸附法.包埋法(凝胶/半透膜包埋法).结合23

法(离子键/共价键结合法)交联法.热处理法。影响固定化酶性质的因素:酶本身24

的变化.载体的影响.固定化方法的影响。固定化酶活性损失的原因:酶本身的失25

活.酶从载体上脱落.载体的破碎或溶解。固定化酶的性质:固定化对酶活性的影26

响.固定化对酶稳定性的影响.最适pH的变化.最适温度变化.底物特异性与游离27

酶不同.米氏常数Km的变化

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共阻遏物:酶催化作用的产物或代谢物途径的末端产物使该酶的生物合成受29

阻.引起反馈阻遏的物质,称为共阻遏物

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竞争性抑制:指抑制剂和底物竞争与酶分子结合而引起带的抑制作用,它与31

酶作用底物的结构相似,与酶分子结合以后,底物分子就不能与酶分子结合,从而32

对酶的催化到抑制作用

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金属离子置换修饰:把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子,使酶的催34

化特性发生改变的修饰方法

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聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE):是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法36

PAGE应用广泛,可用于蛋白质.酶.核酸等生物分子的分离.定性.定量及少量的37

制备,还可测定分子量.等电点等

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酶工程:酶的生产.改性与应用技术过程

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酶活力:酶的催化能力,以酶促反应速度来衡量.测定条件:适宜的特定的反40

应条件,样品的适当处理,底物浓度足够大

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酶活力单位:指酶促反应在单位时间(s,min,h)内生成一定量(mg,μg,μmol) 42

的产物或只记的分支结构可能消耗一定量的底物所需的酶量.酶活力测定方法如43

化学测定法,光学测定法,气体测定法等

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酶的抑制剂:能够使酶的催化活性降低或者丧失的物质,在抑制剂作用下,酶45

的催化活性降低甚至丧失,从而影响没的催化功能,有可逆和不可逆抑制剂,酶的46

可逆抑制剂分为竞争性抑制,非竞争抑制,反竞争抑制

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酶的发酵生产:经过预先设计,通过人工操作,利用微生物的生命活动获得所48

需的酶的技术过程,称为酶的发酵生产

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酶的提取:是指在一定的条件下,用适当的溶剂或溶液处理含酶原料,使酶充50

分溶解到溶剂或溶液中的过程.也称为酶的抽提

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酶的分离纯化:是采用各种生化分离技术,诸如:离心分离.过滤与膜分离.萃52

取分离.沉淀分离.层析分离.电泳分离.以及浓缩.结晶.干燥等,使酶与各种杂质53

分离,达到所需的纯度,以满足使用的要求

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酶反应器:酶和固定化酶在体外进行催化反应时,都必需在一定的反应容器55

中进行,以便控制酶催化反应的各种条件和催化反应的速度.用于酶进行催化反56

应的容器及其附属设备称为酶反应器.酶反应器是用于完成酶促反应的核心装置.

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它为酶催化反应提供合适的场所和最佳的反应条件,以便在酶的催化下,使底物58

(原料)最大限度地转化成产物.它处于酶催化应过程的中心地位,是连接原料和59

产物的桥梁.类别:分批搅拌反应器.连续流搅拌桶反应器.连续搅拌桶-超滤反应60

器.填充床反应器.循环反应器.流化床反应器

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酶传感器:是间接型传感器,它不是直接测定待测物质的浓度,而是利用酶的62

催化作用,在常温常压下将糖类.醇类.有机酸.氨基酸等生物分子氧化或分解,然63

后通过测定与反应有关的物质浓度,进而推出相应的生物物质浓度

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酶定向进化技术:是模拟自然进化过程,在体外进行基因的随机突变,建立突65

变基因库,通过人工控制条件的特殊环境,定向选择得到具有优良特性的酶的突66

变体的技术过程.它不需要是想了解酶的结构催化功能,作用机制等有关信息,应67

用面广,通过易错PCR,DNA重排,基因重排等技术,在体外人为的进行基因的随机68

突变,短时间内可以获得大量不同的突变基因,建立突变基因库,在人工控制条件69