化学药品检验中应注意的问题

面版灯不亮 泵头漏液
• 2、压力高
现 象 判 断 故 障 排 除 设定正确的流速 使用恰当的流动相 冲洗 稀释或改变流动相
泵流速设定太高
压
流动相使用不恰当 缓冲结晶盐沉淀
力
样品与流动相不互溶
柱温太低
升高温度
换柱
值
色谱柱性能下降
溶剂贮液器中过滤器脏
清洗
冲洗，必要时更换
高
链接管路阻塞
进样阀阻塞
冲洗进样器
系统没有达到平衡
保 留 时 间 不 变 化 柱被污染
分析之前应有足够的时间使系统 平衡
冲洗柱或更换柱 清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口 过滤器、使用HPLC级试剂 检查并进行维修 清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口 过滤器、使用HPLC级试剂 使用柱温箱、将系统置于恒温、 空气对流小的环境 设置正确的温度
流动相被污染
• 常用的烧杯、三角瓶、量筒等一般玻璃仪器洗涤时，先用自来 水冲去灰尘，再用毛刷蘸取洗衣粉等洗涤剂直接刷洗内外表面。 最后用自来水冲洗干净，用纯化水淋洗三次。
• 滴定管、比色管、容量瓶和移液管等量器不用毛刷刷洗，根据 油污程度选择适当的洗涤剂清洗。 • 新购买的玻璃器皿可先用0.5%的去污剂洗刷，再用自来水洗净， 然后浸泡在1%～2%盐酸溶液中过夜（不可少于4小时），再用 自来水冲洗，最后用纯化水冲洗两次。
所引起的压力变化是正常的 排气泡，溶剂需脱气
泵密封垫损坏
压力波动
更换密封垫 清洗或更换混合器
拧紧接口 更换
溶剂混合器故障
连接口太松 漏 液 管路损坏
• （二）从色谱图的异常情况推测
• 1、峰前延
现 象 判 断 故 障 排 除
峰
前
柱性能下降
保护柱失效
更换色谱柱
换柱芯
延
进样体积太大或样 品浓度太高
降低进样体积或降低 样品浓度
用标准品对照、检查样品处理过程，换新样品 增加分析时间或梯度洗脱、提高流速、如问题 仍存在，两次进样间用强溶剂冲洗色谱柱 清洗注射器、冲洗进样口 清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入口过滤器、使用 HPLC级试剂 清洗柱或更换柱 清洗六通阀 清晰检测器 冲洗 使用无防腐溶剂
• 8、保留时间变化
现 象 判 断 故 障 排 除
• • • • •
谷维素片（含量应为标示量的95.0%~105.0% ) 不同振摇时间对实验结果的影响 10min 93.4% 30min 96.2% 100min 97.0%
• 阿司匹林片中游离水杨酸 • 由于阿司匹林非常容易分解，所以时间控制很重要。必须是临 用新配。
二、溶出度实验中应注意的问题
化学药品检验中应注意的问题
安康市食品药品检验检测中心 朱清丽 2014.3
实验准备与操作中应注意的问题
溶出度实验中应注意的问题
高效液相色谱常见故障及解决方案
滴定实验中的注意事项
一、实验准备与操作中应注意的问题
• 1、玻璃仪器的清洗及干燥 • ①清洗
• 标准：内壁上附着的水膜均匀，既不聚成水滴，也不成股流下。
从杯架板杯孔往水浴箱里注入蒸馏水，并使水位达到红色标线
• （2）溶出介质脱气的影响 • a、溶液中的气泡在转篮中聚集，会堵塞转篮孔隙，改变 了筛网的孔隙率，从而影响了药物的溶出。 • b、气泡与药物相连降低了与溶剂接触的表面，或改变了 • 比重而使崩解和解聚过程改变。 • c、气泡与聚集颗粒结合，使溶剂部颗粒的浓度及颗粒均 • 匀度随意改变。 • d、溶入的气体有时会明显改变有效成分的性质。 • e、温度改变时小气泡释放出，对液体流型产生影响。 • f、改变溶出介质的pH值。
•
• （4）转篮与转杆的影响
• a、转动时杆是否在溶出杯的正中央。 • b、转篮洁净程度：转篮孔隙如有堵塞可用水或其他溶剂 超声处理、洗净。 • c、浆板厚度：一般规定浆板的厚度均为4.0±1.0mm，浆 板越厚产生的物理机械力就越大。 • （5）转速的影响 • 低转速有时差异明显 • （6）药片位置效应的影响 • a、投放过程中要避免与桨杆或桨叶发生碰撞。 • b、样品在溶出杯中位置应处于底部中心位置，如有差异 距底部中心距离≤1cm
脱气重新平衡系统
漂
流动相配比不当或流速变化 更改配比或流速
移 柱被污染 冲洗柱或更换柱
现 象
判 固定相流失
断
故 障
排 除
基 检测池被污染或有气体 线 测定的波长选择有误 漂 系统泄漏
为说明问题存在，用一段连接 管路代替色谱柱，通流动相检 测基线
• 4、影响实验的各种因素
• • • • • • • • • • 仪器：比对、测试条件 操作：严格按标准要求规范 对照品：来源、纯度、水分、换算、对照品溶液的稳定性 样品：贮存条件、均一性 滴定液及试剂：重新标化、更换试剂并重新配备 eg.奥美拉唑肠溶胶囊释放度问题 用不同厂家试剂配制的0.235mol/L磷酸氢二钠溶液实验结果： 上海某一厂 20% 国药集团 90% 广东金砂 90%
系统不稳或未达 到平衡 保 留 时 间 不 重 复 室温波动大 柱被污染 溶剂配比不合适
分析之前应有足够的时间使系 统平衡 使用柱温箱、将系统置于恒温、 空气对流小的环境 冲洗柱或更换柱 调节溶剂配比 减小进样体积
进样体积太大或 样品浓度太高
现 象
判 流速变化
断
故
障
排
除
重新设定流速,检查泵 是否正常 工作
• 3、压力低
现 压 象 判 断 故 障 排 除 设定正确的流速 更换恰当的色谱柱 降低柱温
泵流速设定太低 色谱柱选择不恰当 柱温过高
力
值
系统漏液
流动相使用不当
检查漏液位置并维修
改变流动相
低
Biblioteka Baidu • 4、压力不稳定
现 象 判 断 故 障 排 除
压力变化重现性好 泵内有气泡
采用的方法是梯度 溶剂脱气不适当
• （7）配制溶出介质的试剂和试液 • a、无机盐或有机溶剂，一般因不会厂商不同而产生显著 性差异。 • b、水，有时会由于来源各异，pH值有所不同，从而导致 测定结果的差异。
• c、表面活性剂——SDS（十二烷基磺酸钠 ）、吐温—80等 会因生产厂商的不同测定结果有差异。 • d、缓冲液调节pH值至规定pH值±0.05之内。
• ②干燥
• 控干干燥法：又叫风干，是最简单易行的干燥方法 • 烘干干燥法：将仪器放入烘箱中，控制温度在105℃左右烘干。 （容量瓶等精密刻度玻璃仪器不适用） • 吹干干燥法：用电吹风快速吹干玻璃器皿。 • 烤干干燥法：用酒精灯或红外灯加热烤干玻璃器皿。 • 有机溶剂干燥：对一些不能加热的厚壁或有精密刻度的仪器， 如试剂瓶、吸滤瓶、容量瓶、滴定管等，可加入少量易挥发且 与水互溶的有机溶液（如无水乙醇、甲醇等），转动仪器使溶 剂浸润内壁后倒出。如此反复操作2～3次，便可借助残余溶剂 的挥发将水分带走。
出现所有 负峰
使用的流动相吸收高
自动进样器注射进空气
使用流动相稀释样品
清洗自动进样器
• 7、鬼峰
现 象 判 断 故 障 排 除 样品前处理时产生降 解或混入杂质 色 谱 图 出 现 鬼 峰 前一次进样的洗脱物 注射器脏 流动相被污染 柱被污染 六通阀污染 检测器污染 管路污染 流动相中含有稳定剂 或稳定剂变化
柱性能下降
保护柱失效 色谱柱或保护柱被污染 峰
更换色谱柱
色谱柱选择不当
流动相选择不当 流动相流速太低 缓冲液浓度太低 系统没到达平衡 进样器问题 环境温度变化
选择恰当的色谱柱
选择恰当的流动相 调节流速 增加浓度 使系统到达平衡 检查进样器 使用柱温箱
变
宽
漏夜
检查漏夜的位置并维修
出现两个或多个未被完全分 选择其它色谱条件以改善分离 离的物质的峰 效果 检测器时间常数太大 使用较小的时间常数
• 1、溶出度（释放度）的基本概念
• （1）溶出度：指活性药物成分从片剂、胶囊剂或颗粒剂等制剂 在规定条件下溶出的速率和程度。——《中国药典》2010年版 • （2）溶出度试验：是一种控制药物制剂质量的体外检测方法， 是以实验为基础，以溶解为理论，并用数学分析手段处理溶出 度试验数据，是研究固体制剂以及半固体制剂所含主药的晶型 、粒度、处方组成、辅料品种和性质、生产工艺等对制剂质量 统一性的方法。 • （3）溶出度测定法：是将某种固体制剂的一定量分别置于溶出 度仪的转篮（或溶出杯）中，在37℃±0.5℃恒温下，在规定的 转速、溶出介质中依法操作。——《中国药品检验标准操作规 范》2010年版
无
设置正确的检测器 参数
检查样品配制过程， 更换样品 检查进样器 加样品 检查并正确链接
样品降解
自动进样器故障 无样品 检测器与数据处理装置链接故障
峰
• 6、负峰
现象 判断 连接数据处理系统信号线接反 记录仪或检测器信号极性相反 离子对分离体系对峰的影响 出现一个 或几个 负峰 故障排除 正确连接 改变极性设置 在流动相中溶解样品
• • • • • •
脱气的方法： a、煮沸法：煮沸15分钟 b、抽滤法：加热至约41℃，趁热减压0.45μm过滤 c、超声法：减压超声脱气5分钟以上 d、真空脱气：取溶出介质在缓慢搅拌加热至41℃，并在 真空条件下不断搅拌5分钟以上(真空脱气仪）
• （3）投样与取样操作的影响 • a、投样 • 篮法：分别置于干燥转篮中，同时投入六个杯中，自接触 溶出介质时开始计时。 • 浆法与小杯法：逐片投入溶出杯中，在30秒内完成投样自第 一个样品接触溶出介质开始启动搅拌并计时。 • b、取样 • 在达到该品种规定的溶出时间时，应在仪器开动的情况下取 样。 • 自6杯中完成取样，时间一般应在1min内。 • 取样至滤过应在30s内完成。 • c、滤膜吸附影响 • 过滤时滤膜与主成分间存在着一个吸附饱和过程，滤膜吸附 一定量后达到饱和，不再吸附。（滤膜用蒸馏水浸泡） • 吸附量2%以下时可忽略不计；如果滤膜的吸附较大，可以 将滤膜在水中煮沸1h以上，如果吸附仍很大，应改用其他滤膜 或滤材。必要时可将微孔滤膜滤过改为离心操作，取上清液测 定。
三、高效液相色谱常见故障及解决方案
压力
色谱图
数据结果
• （一）压力
• 1、无压力
现 象 判 电源不通 接头松脱 接口太松 泵密封垫磨损 泵头有气泡 使用的溶剂黏性太高 泵不送溶剂 溶剂贮液器中过滤器脏 排空阀打开 控制器设定不正确 流动相不够 断 故 障 排 除 检查电源 拧紧接头 拧紧泵头螺丝 更换密封垫 排气泡，溶剂需脱气 换低黏性溶剂 清洗贮液瓶、过滤器 关闭排空阀 设置正确 补足流动相
• 2、取样
• 要求具有科学性、真实性与代表性 • 取样量：设样品总件数为X • 当X≤3时，每件取样； • 当3＜X≤300时，按 X 1 随机取样；
•
当X＞300时，按 X / 2 1 随机取样；
• 3、滤纸的选择
• 类型：定量分析滤纸、定性分析滤纸、层析定性分析滤纸
• 定量分析滤纸：用于定量化学分析中重量法分析试验和相应的 分析试验。 • 定性分析滤纸：用于定性化学分析和相应的过滤分析。
• 2、峰拖尾
现 象 判 柱性能下降 峰 保护柱失效 拖 色谱柱或保护柱被污染 色谱柱选择不当 尾 流动相选择不当 选择恰当的流动相 换柱芯 清洗柱或保护柱， 必要时更换 选择恰当的色谱柱 断 故 障 排 除 更换色谱柱
• 3、峰变宽
现 象 判 断 故 换柱芯 清洗柱或保护柱，必要时更换 障 排 除
系统泄漏 流动相脱气不够充分 室温变化 柱恒温箱设置有误
• 9、基线漂移
现 象 判 断 故 障 排 除
基
系统不稳或没有达到平衡
室温不稳
分析之前应有足够的时间使系 统平衡
使用柱温箱、将系统置于恒温、 空气对流小的环境
线
流动相污染或分解
流动相脱气不充分
清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入 口过滤器、使用HPLC级试剂
• 4、峰分叉
现 象 判断 柱性能下降 峰 故障排除 更换色普柱
保护柱失效
分 色谱柱或保护柱被污染 进样体积太大或样品浓 度太高
换柱芯
清洗柱或保护柱，必要 时更换 降低进样体积或降低样 品浓度 改变溶剂或采用流动相 溶解样品
叉
样品溶剂不溶流动相
• 5、无峰
现 象 判 断 故 障 排 除
检测器参数设置错误
• 2、影响溶出度的因素
药物 性质
影响 溶出度 的因素
制 剂
工 艺
试验 条件
溶出试验 条件的影响
温度 的影响
溶出 介质 脱气 的影响
投样 取样 操作 的影响
转篮 转杆 的影响
转速 的影响
药片 位置 效应 的影响
配置溶 出介质 的试剂 的影响
• （1）温度的影响 • a、外围水浴高度应超过溶出杯里液面的高度，保证杯中溶出介 • 质的温度； • b、当溶出介质中有机相比例较大时，注意预热和试验过程中介 • 质挥发，需要使用密封性良好的溶出仪。