清华大学实验动物研究和使用计划(AnimalProtocol)(201312
清华大学实验动物中心屏障设施使用前培训信息表
清华大学实验动物中心屏障设施使用前培训信息表1.本人《实验动物上岗证》编号：有效期至：；2.IACUC授予本实验小组Animal Protocol编号：；3.一年内□是□否做过体检，□有□无结核、过敏等疾病；4.□是□否填写了《实验动物照料和动物实验人员医学评价表》5.本人近期□是□否在校外开展动物实验？6.本人经过培训□是□否了解了《门禁卡使用方法及相关管理规定》？7.本人经过培训□是□否熟悉了人员及物品进出屏障环境的流程？8.本人经过培训□是□否熟悉活体动物取回实验室操作的流程？9.本人□是□否已了解动物设施内安全应急办法？10.本小组实验使用区域□105检疫室□P2 □兔房，是否熟悉SOP？11.本人已由楼层组长带领熟悉了实验所属区域实验环境：1)楼层布局及人员、物流进出通道位置；2)物品传递窗的使用操作；3)人员入口登记相关信息：PI、实验者、房间、进入和退出时间等4)一更衣柜使用注意事项，二更隔离服穿戴顺序；5)禁止携带手机进入屏障，屏障内电话使用方法；6)屏障内注意要随手关门，尤其关好缓冲互锁门；7)减少屏障不同区域往返，实验思路明确；8)饲养间内要注意：①各种笼牌包括特殊笼牌使用；②分笼记住加饲料和水瓶；③抓取保定动物方法，如有逃逸动物要及时通知房间负责人；④给动物带来痛苦的创伤性实验操作要移到实验操作间；⑤利器盒的使用；⑥结束实验后要清洁台面和地面，环境喷雾消毒，脏笼盒带出屏障；9)带到洗消间的底盒、笼盖、网格、水瓶、饲料等分开放整齐，废弃饲料倒入收集袋；12.本人已经具备的动物实验技术：13.本人在本项目中还需学习的动物实验技术：14.□是□否需要麻醉、手术、术后照料以及颈椎脱臼安死术培训。
本人所在实验室PI姓名：本人姓名：手机号：门卡号：开通的饲养间：楼层组长签字：培训人签字：日期：。
大学实验动物中心SPF级大、小鼠实验管理操作规程
大学实验动物中心SPF级大、小鼠实验管理操
作规程
一、动物实验项目由实验者（乙方）向实验动物（甲方）提出申请，经实验动物中心审议并批准后，填写《大学动物实验室使用协议》方能开展动物实验。
并有《实验动物操作上岗证》持证进入实验室进行实验操作。
二、项目合作协议一式两份，由双方分别备案。
三、实验者在操作过程中，如有损坏或遗失实验室中的仪器设备等，应照价理赔；若故意损坏者，将对责任人严肃处理。
四、动物实验中，由于环境、笼具不洁、饲料变质或未能及时提供饲料、饮水等而造成动物死亡的，由甲方承担责任。
五、由于实验方案或操作不当而引起动物死亡的，由实验者承担责任。
六、由于不可预料或不可抗衡的事故发生（如大范围停水、断电、电压不稳、、设施自然损坏等）而致实失败，则由双方谅解协商解决。
七、原则上，实验室管理人员不直接参加实验操作。
八、动物发生不明原因的死亡，双方应立即相互告知,并在两小时内处理动物尸体。
九、实验者需每日在规定时间内进行动物实验或进行例行巡视，发现有异常情况应主动与实验室联系，以便及时解决。
十、实验者需严格按实验室规定的操作程序进入动物实验室操作，并遵守动物实验室管理制度，如有严重违反者,动物实验室管理者可拒绝其进入，由此造成的后果应由实验者承担。
十一、动物实验室产生的服务费用，应按规定标准收取并及时划入甲方专用帐务内，先划再用。
十二、实验者所采用的实验方法中，如使用有毒、有害材料或试剂、危害人类健康的诱导物等必须事先声明，经甲方审定后按规定程序带入，不得擅自夹带进实验室，以免影响其他实验。
清华大学试验动物研究计划
清华大学实验动物研究及使用计划（201301版）此处供委员会使用研究计划编号批准日期终止日期（请至少在预计引进、订购或领用动物之前一周申请）A.管理信息：□初次申请□3年复审，请填写已有的研究计划号：（）列出在本计划中具有使用动物资质的所有人员（请指明主要具体动物实验操作人员）：B.研究目的：以一般非生物医学背景人员为对象，简述研究目的，以及对人类或动物的健康与科学的贡献。
一般只需要描述做什么以及原因。
C.实验设计和动物实验操作步骤：简要描述实验设计及动物实验内容。
提供的内容需使校实验动物福利伦理审查委员会暨动物管理和使用委员会(下简称“校动管会”)了解开始至结束动物实验的所有过程。
内容中(根据具体情况)需包括的项目建议如下：（如需要，本部分可作为附件提交）－实验组及对照组动物类别及数量- 注射或接种（如感染性物质，佐剂等；剂量，注射，部位，体积，给药途径和给药日程）- 取血（体积、频率、部位和方法）-保定（固定动物）的方法（如保定椅，项圈，背心，锁链等）。
包括像常规取血这样的操作如何固定动物。
描述采用的镇静、适应或训练的方法。
- 其他（如存活实验，尾部活检等）- 最终可能的结果，如疼痛紧张或腹水产生等-其他潜在的紧张因素（如限制食物或饮水，有害刺激、环境压力）和监控方法。
-当实验中使用肿瘤细胞、生物制剂、感染物、放射线或有毒化合物等可以引起明显的临床症状或潜在死亡，必须明确指出实验终点的标准，如肿瘤大小、体重增加或减少的百分比、无力摄食或饮水、行为异常、临床症状或毒性指征等。
列出决定实施安乐死的标准。
如果以死亡作为实验终点，必须以科学的判断作为依据。
- 兽医护理（指出动物发生疾病时应采取的行动，如开始治疗，治疗前通知研究人员或实施安乐死）D.动物需求：E.如进行存活手术，请完成下列选项：（若无需手术，可略过此处不填）列举手术项目并简述手术步骤，包括所采用的消毒方法。
若需要重复对同一动物进行多次手术请详细说明原因：F.疼痛或紧迫反应的级别：（参考美国农业部USDA分类标准）□ USDA- C类 -实施实验的动物没有疼痛、紧张或轻微或一过性的疼痛、紧张□ USDA- D类 -实验过程中有疼痛和紧张，但实施合适的麻醉、镇痛、镇静措施□ USDA- E类 -实验过程中有疼痛和紧张，但麻醉、镇痛、镇静的应用会影响实验结果G．麻醉, 止痛, 镇静: （若无需此类处理，可略过此处不填）请指出对于相关动物使用所涉及的所有麻醉剂, 镇痛药, 镇静药或镇定剂，包括试剂名称,剂量, 给药方法和给药时间.H. 实验结束后安乐死的方法或其它处置方法:请描述本计划中动物安乐死方式及因意外损伤或其他紧急状态下实施安乐死的处置方法。
实验动物管理条例(2013年修订)-国务院令第638号
实验动物管理条例(2013年修订)正文：----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------实验动物管理条例（1988年10月31日国务院批准 1988年11月14日国家科学技术委员会令第2号发布根据2011年1月8日《国务院关于废止和修改部分行政法规的决定》第一次修订根据2013年7月18日《国务院关于废止和修改部分行政法规的决定》第二次修订）第一章总则第一条为了加强实验动物的管理工作，保证实验动物质量，适应科学研究、经济建设和社会发展的需要，制定本条例。
第二条本条例所称实验动物，是指经人工饲育，对其携带的微生物实行控制，遗传背景明确或者来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。
第三条本条例适用于从事实验动物的研究、保种、饲育、供应、应用、管理和监督的单位和个人。
第四条实验动物的管理，应当遵循统一规划、合理分工，有利于促进实验动物科学研究和应用的原则。
第五条国家科学技术委员会主管全国实验动物工作。
省、自治区、直辖市科学技术委员会主管本地区的实验动物工作。
国务院各有关部门负责管理本部门的实验动物工作。
第六条国家实行实验动物的质量监督和质量合格认证制度。
具体办法由国家科学技术委员会另行制定。
第七条实验动物遗传学、微生物学、营养学和饲育环境等方面的国家标准由国家技术监督局制定。
第二章实验动物的饲育管理第八条从事实验动物饲育工作的单位，必须根据遗传学、微生物学、营养学和饲育环境方面的标准，定期对实验动物进行质量监测。
各项作业过程和监测数据应有完整、准确的记录，并建立统计报告制度。
第九条实验动物的饲育室、实验室应设在不同区域，并进行严格隔离。
清华大学实验动物福利问题汇报表格
清华大学实验动物福利问题汇报表格
第一部分由汇报人完成
汇报的内容是：
□动物使用/Animal Protocol □繁育相关□兽医照料□职业健康安全相关□饲养服务□其他请说明
1. 汇报对象的基本信息：
PI姓名：#AP（animal protocol No.）:
动物种类：动物编号：动物数量：
动物所在房间：层房间
2. 简要描述您发现的问题：
第二部分由调查人需要完成
1.动物的健康受到不好的影响了吗？□否□是（假如是，请说明影响和采取的纠正措
施）：
2.调查人联系并讨论此问题的相关人员姓名和时间，以及讨论总结
人员一：日期：时间：
讨论总结：
人员二：日期：时间：
讨论总结：
人员三：日期：时间：
讨论总结：
3.是否违背了animal protocol？□否□是（假如是，请详细说明）：
4.采取的纠正措施是否被接受？
5.推荐IACUC采取的离措施：□召开IACUC紧急会议□是（假如是，请说明影响和采
取的措施）：
兽医签字：日期：
第三部分由IACUC完成
IACUC接收到此回报表格的时间：
IACUC第一次审查的时间：采取的措施：
IACUC第二次审查的时间：采取的措施：
IACUC第三次审查的时间：采取的措施：。
《上海交通大学实验动物研究计划(AnimalProtocol)(201901版)》
上海交通大学实验动物研究计划（Animal Protocol）(201601版)1)本研究计划是从动物伦理学角度出发，依实验动物使用的减少、替代、优化的3R原则进行填写。
2)在开展动物实验前，请首先将本计划书电子版e-mail至上海交通大学实验动物伦理与使用委员会（IACUC）工作邮箱（iacuc@）。
3)接收后将由IACUC主任指定人员进行格式审查，符合要求后，递交给IACUC委员会成员进行审核，审核意见经汇总并由IACUC工作邮箱反馈给申请者。
4)每月的最后一天为本月提交截止期限。
审核意见反馈时间一般为每月提交截止期限后20个工作日。
5)研究计划被批准后，经PI签字后正式生效。
请课题组递交一式一份纸质版到动物中心204房间，由IACUC主任审核签字，确认研究计划编号，开始订购动物。
1基本资料：□初审□复审；如果是复审，请填写已有的研究计划号（）请列出本研究计划中所有动物实验操作人员：注：上岗证编号：可为上海市或我动物中心颁发的上岗证职责可为：课题设计、主要操作、辅助操作、手术操作、实验动物管理等，要求尽量细化。
2 动物需求及购买2.1 动物研究需要：□一年□两年□三年2.2 实验类型：□体外动物研究□在体动物研究□繁殖类动物研究2.3 动物购买：所有动物委托上海交通大学实验动物中心购买，实验负责人将动物合格证复印保存。
2.4 动物需求信息：2.4.1现有动物2.4.2需购买动物2.5 动物运输：动物运输必须符合实验动物中心的规定。
如实验动物中心之间运送动物，描述运输方法及注意事项。
□请上海交通大学实验动物中心代为联系动物提供方及运输措施。
具体应使用专用的实验动物运输车，具有温湿度调控系统。
由运输商提供运输措施。
□特殊要求，请说明：3 研究目的及实验设计3.1 研究目的:3.2 动物实验计划设计背景及您查阅文献的结果：（请附2个或以上查询数据库、参考文献）3.3 使用动物理由：3.4 动物实验步骤：请详细描述动物实验步骤，提供的内容需校实验动物伦理与使用委员会(IACUC)了解动物实验从开始至结束的所有过程；请明确每只动物是如何使用的，动物使用总量应与2.4项动物数量相符。
THU-LARC清华大学实验动物中心
Laboratory Animal Research Center of Tsinghua UniversityRequisition Form for Cas9/sgRNA embryo injection ServicesDate Received (LARC Use Only)______________以下请同学们填写：Principle Investigator______________Contact Person____ _ _______Contact Phone ______________ Contact E-mailType of knockout/knockin mice (please check “√”)__ KO ___ CKO ___KnockinGene to be KO/KI_______________ GeneBank IDgRNA construct _______________ mRNA Concentration_______ _Cas9 construct________________ mRNA Concentration_____ __ ___ _Purification method_____ ____ ____Resuspension buffer used (MUST be RNAase free)_ ____Please attach a labeled photograph of the gel demonstrating the quality of the mRNA：假如gel photo表明了有可能有降解，请重新转录、纯化：说明：1.中心没有存放和处理RNA 设备，每次注射当天提前通知送注射样品，请当天上午送样之前一定要经过跑胶验证RNA质量，是否降解，同时发邮件给我们验证胶图。
下面胶图对照请参照（左KI 右KO）2. 请使用DEPC水溶解混匀。
外单位小鼠进入清华大学试验动物中心包括净化申请表
外单位小鼠进入THU实验动物中心申请表（净化通用）需要填写的资料：1.*表示必须填写；2.净化方式的选择：我们全部采用胚胎移植的方法进行净化；假如为杂合子，雄性数量≥3只并且可以和B6交配做净化，我们推荐安乐死一只雄鼠使用体外受精（IVF）的方式净化，可以有效控制净化周期，不受检栓是否见栓等因素影响。
3.净化所需时间：因实验动物品系不同，其排卵、受孕等操作存在较大差异，因此，净化所需时间每个品系有所不同。
一般为2个月后可以拿到4周龄的后代。
4.净化实验中见栓的雌鼠都会被处死取胚胎，但并不是每个见栓的小鼠都能取到发育正常的胚胎。
所以，请留够雌鼠用于繁殖，不要出现断种的情况。
5.净化对提供小鼠的要求：a)单基因修饰的小鼠，如Tg/KO/KI，假如是杂合并可以和B6、FVB、BALB/c等常见品系交配净化的，请提供至少2只雄性。
假如有3只雄鼠，可以考虑提供一直可以杀掉的阳性雄鼠（假如有3只雄鼠即可杀一只），我们取精子和B6或其他背景鼠做IVF，一次性可以得到20只以上甚至更多的后代。
b)单基因修饰的小鼠，如Tg/KO/KI，假如是纯合并不可以和B6交配净化的，只能等待繁育后再安排交配或IVF净化。
c)多基因修饰的小鼠，如TKO/DKO/cKO等，只能尽快繁育，得到后代后再做交配或IVF净化。
假如是纯合，请提供至少2只雄性，4只雌性。
6.净化后的质量检测：我们动物中心保证净化后的动物质量符合国家小鼠SPF级别标准。
委托净化方可以送检，检测符合要求，费用由委托方负责。
假如不符合要求，动物中心将免费再次做净化并承担上次检测费用，不承担之后的检测费用。
7.收费标准（以下均为清华大学内部价格）：a)净化收费标准：1000元/品系。
净化前的动物饲养费3元/笼/天，净化前指从动物到中心之日开始。
胚胎移植后的受体饲养到小鼠分笼前不收取额外费用。
小仔21天分笼后将收取饲养费4元/笼/天，请及时取走净化后的动物。
b)IVF收费标准：实验中所需B6小鼠（含激素）： 40元/只IVF：500元/次（20只B6小鼠内），如果B6数量多于20只，每增加10只B6增加100元F1受体小鼠：180元/只胚胎移植手术费：100元/只，双侧移植。
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清华大学实验动物研究及使用计划（Animal Protocol）（201312版）
此处供IACUC使用：
研究计划编号
批准日期
终止日期
1)为节省审批时间和节约纸张，请首先e-mail本申请书电子版至清华大学实验动物使用与管理委员会（IACUC）工
作邮箱（lac@）。
2)接收后将由IACUC秘书进行格式审查，假如符合要求，将递交给IACUC委员会所有成员进行审阅。
IACUC秘书将
收集修改意见反馈给申请者。
时间间隔一般为2周。
3)研究计划被批准后，PI签字后正式生效。
请递交一式一份纸质版到实验动物中心1182房间订购动物。
A.管理信息：□初次申请□3年复审，请填写已有的研究计划号：（）
列出在本计划中所有动物实验操作人员：
注：职责可为：课题设计、主要操作、辅助操作、手术操作、小鼠管理等
列出每个人相对于职责，已有的实验经验和资格
B.研究或教学的目的：
以一般非生物医学背景人员为对象，简述研究目的，以及对人类或动物的健康与解决的科学问题。
一般只需要以非科学术语描述做什么以及做这个实验的必要性。
C.危险试剂或感染性试剂：
□本计划不使用任何有害物质
□本计划使用有害物质，假如使用
危险试剂的使用需要取得清华大学生物安全委员会的认可。
危险试剂包括下列几个范畴：
□1. 放射性性物质□2. 致癌物/致突变物□3. 感染物质□4. 重组DNA
□5. 肿瘤等细胞系□6. 组织或抗血清□7.其他有害物质
1.请详细描述具体的试剂名称、拟使用剂量，以及给药或使用方式：
2. 请详细描述对人或动物的潜在毒性、并简述安全操作和处理受污染动物及材料的方法及程序：
D.
需求动物信息：
E. 疼痛（Pain ）或紧迫（Distress ）反应的级别评价及预防与减轻：
1.
疼痛或紧迫反应的级别评价（参考美国农业部（USDA ）分类标准） □ USDA- C 类 -实施实验的动物没有疼痛、紧张或轻微或一过性的疼痛、紧张 □ USDA- D 类 -实验过程中有疼痛和紧张，但实施合适的麻醉、镇痛、镇静措施 □ USDA- E 类 -实验过程中有疼痛和紧张，但麻醉、镇痛、镇静的应用会影响实验结果 2. 预防与减轻疼痛或紧迫反应的措施：
是否有更好的避免疼痛或紧迫操作的方法：□是 □否 假如是，请说明：
F. 是否存在禁食、禁水（手术前的禁食除外） □是
□否
假如是，请说明禁食、禁水的时间长度：
G. 是否存在单笼饲养：□是 □否
假如是，请说明动物环境丰富化策略，如何满足动物的社会性需求。
H.实验设计和动物实验操作步骤：
I.是否存在存活或非存活性手术：□是□否假如是，请填写以下两项内容：
1.手术执行地点和手术操作者
2.详细描述整个手术相关内容
J.实验结束后安乐死的方法或其它处置方法：
请描述本计划中动物安乐死方法及因意外损伤或其他紧急状态下实施安乐死的处置方法。
如使用化学试剂,请说明剂量及给药方法。
□CO2（大鼠、小鼠、豚鼠推荐使用，设备在中心114房间）□麻醉过量致死（兔推荐使用）** □颈椎脱臼致死* □麻醉后放血致死** □其他***
*不推荐采用颈椎脱臼安乐死，假如必须采用，请说明科学必要性：
**请说明麻醉剂名称，使用剂量、频率以及给药途径：
***请详细说明如下：
K.研究特殊要求或需求：□是□否假如是，请选择填写以下内容：
1.若由于特殊实验设备（或其他因素）而需要带实验动物活体出入实验动物中心，请详细说明原因。
2.请列出所需特殊专用笼具，及特殊动物照料（如需要特殊饲料及笼具）。
L.实验室负责人（PI）的担保书：
1. 我保证在此处提出的研究方案不是毫无意义的重复或已被报道过的研究。
2. 我保证A栏所列有权进行实验的人员已经经过北京市实验动物管理办公室的培训，并取得上岗证，且接受了生
物学、操作、动物护理方面的训练及必要的无菌手术方法和技术。
3．我保证A栏所列有资质进行实验的人员将力求限制动物使用或将不良应激减少到最小，合理使用镇痛药、镇定剂和麻醉剂。
对于本计划E栏中涉及到的USDA-D类和USDA-E类疼痛级别的动物的实验方案，本人确信已查阅相关科学文献及数据，虽然该方法会引起一定的疼痛或紧张，没有发现可以替代的方法。
本人确信将任何影响动物的非预期的实验结果告知校动管会。
任何未预期的疼痛和紧张、疾病和死亡都会向主治兽医和动管会报告。
4.我保证该研究方案会正确使用和处理危险试剂及生物材料。
若用于实验的材料取自啮齿动物，则所有材料已经
过特定检验（如MAP/RAP/HAP/PCR检测）并且保证没有被实验动物中心以外的啮齿动物污染过。
5. 假如动物出现临床症状，并安乐死的标准时，我保证接受动物中心的兽医的安排，及时的安乐死动物。
6. 我保证遵守校动管会制定的各项规章制度，且熟知并遵守国家相关方面的法规法令。
实验室负责人（PI）签名：日期：
M.兽医审查意见：
□批准□不批准□建议改进
不批准原因或建议改进意见如下：
主治兽医：谢忠忱签名：日期：
N.校动管会审阅意见：
□批准□不批准□有条件批准。
建议如下：
清华大学实验动物使用与管理委员会（IACUC）主席或指定负责人签名：
指定负责人：常在签名：日期：。