PCR实验室设计说明
PCR实验室设计说明

PCR实验室设计说明PCR实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。
工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,四区域分别为:1.试剂配制区nﻫ2.样品处理区nﻫ3.核酸扩增区n4.产物分析区n如使用全自动分析仪,区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。
各区的功能是:1.1.1 试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。
1.1.2 样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。
1.1.3 扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
1.2扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。
1.4 在满足下列操作1.3 使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
ﻫ和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内:1.4.2每个实验人员、实验组分别使用各自的1.4.1 在生物安全柜内操作。
ﻫ1.4.3盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。
ﻫ1.4.4用有效试剂及耗材。
ﻫ的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
设计要求:PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。
完成一组PCR 实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。
ﻫ一、分散形式PCR实验室ﻫ所谓分散形式PCR实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。
对于这种布置形式的PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求。
二、组合形式PCR实验室所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式。
对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。
各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。
PCR实验室设计

PCR实验室设计PCR实验室是进行聚合酶链反应(PCR)的地方,它是生物学研究中非常重要的一个实验室,用于复制和扩增DNA片段。
设计一个高效的PCR实验室,不仅需要考虑实验室的空间大小、设备等基本因素,还需要考虑实验室的安全性、环境条件和实验流程等细节。
下面将详细介绍如何设计一个高效的PCR实验室。
一、实验室布局:1.实验室面积:根据实验人员数量和需要进行PCR实验的频率确定实验室的面积,通常每个实验员需要4-6平方米的工作空间。
2.工作流程:实验室的布局应该考虑实验流程的合理性和高效性,例如将实验室分为样品准备区、PCR反应区和实验结果分析区等不同功能区域,便于实验员分工合作。
3.设备安放:PCR实验室需要安放PCR仪器、振荡器、离心机等设备,要确保设备之间有足够的空间,且易于实验员操作和维护。
4.实验室设施:实验室应该有充足的通风系统和洁净工作台,确保实验环境的清洁和无菌。
二、实验室设备:1.PCR仪器:PCR实验室必备的设备是PCR仪,用于DNA片段的扩增和复制,选择品牌好、性能稳定的PCR仪器。
2.离心机:用于离心PCR反应液,分离DNA片段和其他细胞成分,选择转速稳定、操作简单的离心机。
3.振荡器:用于振荡PCR反应管中的混合液,促使反应液均匀混合,选择振幅可调、操作便捷的振荡器。
4.电泳仪:用于检测PCR反应结果,分析DNA片段的长度和浓度,选择具有高分辨率、高灵敏度的电泳仪。
5.冰箱和冰盒:用于暂存PCR反应物和样品,确保PCR反应的成功进行。
6.光谱仪:用于检测PCR反应结果的准确性和一致性,选择灵敏度高、准确性好的光谱仪。
三、实验室安全:1.实验员培训:所有进入PCR实验室的人员都需要接受PCR实验操作的培训,了解实验室的安全规范和操作流程。
2.实验室标志:实验室内应该有清晰的标志和警示标识,提醒实验员注意实验室的安全规定。
3.废物处理:PCR实验产生的废物需要正确处理,避免对环境和人员造成危害。
PCR实验室设计解释

PCR实验室设计说明PCR实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。
工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,四区域分别为:1.试剂配制区n2.样品处理区n3.核酸扩增区n4.产物分析区n如使用全自动分析仪,区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。
各区的功能是:1.1.1 试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。
1.1.2 样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。
1.1.3 扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
1.2 扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。
1.3 使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
1.4 在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内:1.4.1 在生物安全柜内操作。
1.4.2 每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材。
1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。
1.4.4 用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
设计要求:PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。
完成一组PCR 实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式PCR实验室所谓分散形式PCR实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。
对于这种布置形式的PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求。
二、组合形式PCR实验室所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式。
对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。
各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。
PCR实验室设计

PCR实验室设计PCR(聚合酶链式反应)是一种常用的分子生物学技术,用于在体外扩增特定DNA序列。
PCR实验室的设计需要充分考虑实验操作的安全性、便捷性和效率。
以下是一个PCR实验室的设计,以确保实验的高质量和可靠性。
一、实验室的布局与功能分区:1.实验准备区:包括实验布局和设备准备、试剂制备等工作台2.样本处理区:用于样本预处理和DNA/RNA提取,配备组织破碎器、离心机等设备3.反应体制备区:用于PCR反应混合液的制备,包括试剂台和标本分发器4.PCR扩增区:用于PCR反应,包括PCR仪和相应的电源、稳定器等设备5.分析区:用于PCR产物分析,包括凝胶电泳仪和镜下分析设备6.洗涤区:用于实验工具和试剂的清洗,包括洗涤槽和滤水装置7.废物处理区:用于废弃物和污染物的处理,包括污染物容器和化学废液处理设备二、实验室设备和仪器选择:1.PCR仪:根据实验室需要选择合适的PCR仪,可以同时进行多个PCR反应。
2.离心机:用于样本离心和试剂混合液离心。
3.能量稳定器:保证PCR反应的稳定温度。
4.凝胶电泳仪:用于PCR产物的凝胶电泳和分析。
5.UV照射装置:用于观察凝胶电泳结果。
6.温度控制设备:用于样本处理、制备反应液等过程中的温度控制。
7.洗涤设备:包括洗涤槽和滤水装置,用于实验工具和试剂的清洗。
8.试剂和试剂盒:根据实验需要选择合适的PCR试剂和试剂盒。
三、实验室安全防护:1.实验室操作人员必须熟悉PCR实验的操作流程和安全规范,并穿戴符合实验要求的防护服和个人防护装备。
2.实验室内的工作台面和器材应保持清洁,定期进行消毒处理。
3.实验室应设有紫外线灯,用于灭菌PCR仪和操作面的工作区域。
4.实验室内要有火灾报警器、灭火设备和紧急出口标识,以应对紧急情况。
5.明确废弃物的处理方法,遵循实验室废弃物处理规范。
四、实验室标识和操作指导:1.实验室应有明确的标识,包括实验室名称、实验室规章制度和安全提醒等标识。
PCR实验室设计说明(东北农大)

PCR实验室设计说明:1.围护结构:本工程所设计的隔断、吊顶采用50mm系列机制玻美彩钢夹芯板。
洁净门规格:800*2000;固定窗规格:1500*1000(均为实际使用尺寸);板材优点是机械强度高,表面平整光滑,耐腐蚀,易清洁,隔热隔音安装方便;洁净区内部顶棚与墙面以及墙面与地面之间夹角均采用R50mm弧形铝材连接封闭,所有铝材均为优质电泳型材,防止铝材氧化。
2.地面:实验室地面采用PVC塑胶卷材地板,板缝为焊接对接,不藏细菌;具有耐酸碱、防腐蚀、耐磨防滑、回弹性好等优点,比环氧树脂地板使用寿命更长色泽更艳丽,是各种公共场合及医院实验室等首选。
3.照明、照度、消毒:本工程实验室照明均采用专业净化灯具,密封性好,不积尘易清洁,不锈钢边框经久耐用,镜面反光材料,使实验室照度达到300LUX。
实验室各房间灭菌灯为无臭氧石英玻璃灯管,采用不锈钢灯具,杀菌率高耐腐蚀。
4.配电:采用三相四线制配电系统,各电气线路均暗敷设于彩钢板吊顶之上和夹芯层内,穿套阻燃管;室内各用电点位置和高度在施工时可按用户要求调节。
气密式净化灯具吸顶安装,插座安装后用密封胶密实。
5.室内参数1)洁净区概要及要求:本工程为东北农业大学动物疾病与有毒有害物质检验检测中心实验室,净化级别万级(动态);吊顶高度为2.4米,换气次数为30次/h。
2)空调设计:四个实验室的空调分成3个系统采用3台风冷管道空调机组提供冷(热)风再经过中效加压风机送至各洁净室,以保证室内空调温湿度及压力梯度。
温度18℃—26℃湿度:45%—65%6.洁净区设计万级(美国联邦标准209E)洁净室采用了新风初效,混合回风中效及末端高效送风,三级过滤器的净化空调系统,洁净室内气流组织上采用顶部送风,下侧面回风(排风)气流形式,回风量为送风量的80%,排风量≤50%以保证房间的压力梯度。
C 正压:净化区对室外≥10pa高级别对低级别≥5pa负压:净化区对室外≤20pa高级别对低级别≤5paD 室内噪声:≤65db(A )E 洁净区照度:净化区150~300LX,非净化区100~150LX根据技术要求,综合考虑洁净室的等级要求,本设计净化区域为防止人流,物流对洁净室的影响,需对人流,物流采取换鞋,更衣,缓冲,吹淋,传递等有效措施,以免各种微粒子、微生物、致病菌等进入洁净区。
pcr实验室设计标准

pcr实验室设计标准PCR实验室设计标准是保证PCR实验室正常运行和实验结果准确可靠的基础。
PCR(聚合酶链反应)是一种基因分析技术,广泛应用于分子生物学、医学诊断、犯罪侦查等领域。
为了确保PCR实验的可靠性和重复性,合理设计PCR实验室的空间布局、设备配置、环境条件等是至关重要的。
本文将从空间布局、设备配置和环境条件三个方面,详细探讨PCR实验室设计标准。
一、空间布局PCR实验室的空间布局应充分考虑操作流程和安全要求。
首先,应将整个实验流程划分为不同区域,包括样本处理区、试剂配制区、反应体系制备区和扩增反应区等。
各个区域之间要有明确的界限,避免交叉污染。
其次,在样本处理区设置洗手池,并配备充足的洗手液和纸巾供使用者清洁双手。
此外,在试剂配制区设置专用台面,并配备必要的试剂瓶架和称量设备,保证试剂配制过程无误差。
为了确保PCR实验的准确性,反应体系制备区应与样本处理区和试剂配制区隔离开,以避免样本和试剂的交叉污染。
反应体系制备区应配备必要的实验仪器,如电动移液器、离心机等。
同时,为了减少实验误差,反应体系制备区内要保持整洁,并定期清理和消毒。
扩增反应区是PCR实验室的核心区域。
为了保证扩增反应的准确性和可重复性,扩增反应区要与其他实验室设备隔离开,并且在温度、湿度等环境条件上进行严格控制。
在扩增反应区内设置PCR仪器,并配备必要的试剂、耗材等。
二、设备配置PCR实验室的设备配置是保证实验结果准确可靠的重要保障。
首先,PCR仪是PCR实验室不可或缺的核心设备之一。
在选择PCR仪时,需要考虑其温度控制精度、均匀性以及操作便捷性等因素。
其次,在样本处理和试剂配制过程中需要使用电动移液器、离心机等常规分析仪器。
为了避免交叉污染,PCR实验室应配置专用的试剂瓶架、试剂瓶盖、移液枪等。
试剂瓶架应具备防滴漏功能,避免试剂的外泄。
移液枪应具备可调节容量的功能,以满足不同实验需求。
此外,PCR实验室还需要配备必要的消毒设备和生物安全柜。
pcr实验室建设指南

pcr实验室建设指南PCR实验室建设指南PCR(聚合酶链式反应)是现代生物学中一项重要的实验技术,广泛应用于基因检测、基因工程、疾病诊断等领域。
为了保证PCR实验的准确性和可靠性,建设一套完善的PCR实验室是非常重要的。
本文将为您介绍PCR实验室建设的指南,帮助您打造一间高效、安全、符合质控要求的PCR实验室。
一、实验室位置选择PCR实验室应选择在相对安静、无污染源的环境中,避免阳光直射和强光照射。
实验室应位于干燥、通风良好的地方,远离易燃易爆物品。
同时,实验室内应安装紫外线灯,用于消毒工作台和实验器械。
二、实验室布局设计PCR实验室的布局设计应合理,能够满足实验操作流程的要求。
通常可将实验室分为样品处理区、试剂制备区、PCR反应区和结果分析区。
样品处理区应与试剂制备区隔离开,避免交叉污染。
PCR反应区应具备防止扩散污染的设施,例如风机、负压防护罩等。
结果分析区应设有放射性物质废弃物容器和分类垃圾桶,方便废弃物的处理。
三、实验室设备选购PCR实验室的设备选购应根据实验需求和经费预算进行。
常见的PCR 实验室设备包括:PCR仪、离心机、电泳仪、超净工作台等。
在选购设备时,应选择质量可靠、性能稳定的品牌,确保实验结果的准确性。
四、实验室试剂准备PCR实验所需的试剂应按照实验需求准备充足,并储存在干燥、阴凉的地方。
试剂的配制应严格按照配方比例进行,避免误差。
同时,试剂的标签应清晰明了,包括试剂名称、配制日期、有效期等信息。
五、实验操作规范PCR实验操作应遵循一定的规范和标准操作程序,以确保实验结果的准确性和可重复性。
实验操作时,要注意手部卫生,穿戴实验服、手套和口罩,避免引入外源性污染。
同时,实验器械应进行彻底的消毒和清洁,避免交叉污染。
六、实验室质控PCR实验室建设过程中,质控是非常重要的环节。
实验室应建立完善的质量管理体系,包括试剂质量控制、实验操作规范、实验记录和结果分析等方面。
实验过程中要进行质量控制样品的并行实验,以验证实验结果的准确性。
PCR实验室

PCR实验室PCR实验室设计方案一、设计要求1.概述PCR实验室是用于临床基因扩增实验的专门实验室,可检测艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病。
该实验方法具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,但需要配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。
本文主要从实验室平面布局、空调通风系统设计、气流控制和污染防制几个方面对PCR实验室进行设计。
2.PCR实验室平面布局为避免交叉污染,实验室应分为四个单独的工作区域:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。
各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。
3.实验室空调通风系统设计及压力控制为保证各实验区的压力要求和避免交叉污染,宜采用全送全排的气流组织形式,并严格控制送、排风的比例。
4.污染的预防与控制实验室应采用防护措施,如安装紫外线灯、使用消毒剂等,避免污染的发生。
二、设计方案根据设计要求,实验室平面布局应分为四个单独的工作区域。
各区域之间应通过传递窗进行试剂及样品传递,避免交叉污染的可能性。
空调通风系统应采用全送全排的气流组织形式,并严格控制送、排风的比例,以保证各实验区的压力要求。
同时,实验室应采用防护措施,如安装紫外线灯、使用消毒剂等,避免污染的发生。
三、设计图纸1.平面布局图2.风口平面图3.通风管道布局图4.照明线路分布图5.插座线路分布图6.电力系统图1.严格控制实验室人员进出,非实验相关人员禁止随意进出,必要时应设置独立通道和进出门。
2.实验区域应使用带有明显标志的工作服,不得将本区工作服带至其他区域。
3.尽量减少在实验区内不必要的走动,以减少交叉污染的可能性。
4.扩增产物分析区是最主要的污染来源,废液和一次性材料应经消毒液浸泡后远离实验室处理。
5.扩增产物分析区可能用到有毒物质,应特别注意实验人员的安全防护。
完备的实验室配套设施是保证实验工作必要条件,应根据实验内容配备相应设备和仪器,如超净工作台、离心机、加样器等。
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PCR实验室设计说明PCR实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同得工作区域使用不同得工作服(例如不同得颜色)、工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,四区域分别为: 1。
试剂配制区nﻫ2。
样品处理区n3。
核酸扩增区n4。
产物分析区nﻫ如使用全自动分析仪,区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析、1、1、1 试剂准备区:扩增试剂得配制、分装与保存。
各区得功能就是:ﻫ1。
1。
2 样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存与加样、1。
1、3 扩增产物分析区:扩增产物得测定、结果分析、登记及报告。
1。
2 扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同得房间,两区之间最好有一定得间隔。
1。
4 在满足下列操1、3使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
ﻫ1、4、1 在生物作与清洁处理要求得前提下样品处理区与试剂准备区可设在同一房间内:ﻫ安全柜内操作。
1、4.2 每个实验人员、实验组分别使用各自得试剂及耗材。
ﻫ1.4、3盛放污染材料得器皿密封并一次性使用、1.4、4 用有效得方法对操作区域与共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
设计要求:PCR实验室可以就是分散形式,也可以就是组合形式,现要主要就是以组合形式为主流。
完成一组PCR实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式PCR实验室所谓分散形式PCR实验室,就是指完成上述实验过程得实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式、对于这种布置形式得PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求。
二、组合形式PCR实验室所谓组合形式PCR实验室, 就是指完成PCR四个实验过程得实验用房相邻布置,组成独立实验区域得形式。
对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定得要求、各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换、试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶得空气进入,造成污染,可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果、核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸得气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。
在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内、PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到指定定点,且高度为地面铺装好后2600mm处、如果使用荧光PCR仪,扩增室与产物分析室可以合并。
若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。
需要指出得就是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。
各个区域之间应具备单向得实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程得保护屏障,避免实验之间得相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
实验室得墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀得要求。
如果使用荧光PCR仪,扩增室与产物分析室可以合并。
若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。
需要指出得就是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。
各个区域之间应具备单向得实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程得保护屏障,避免实验之间得相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
ﻫ实验室得墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀得要求。
主要设备试剂准备区仪器设备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平与离心机等,加样器、天平除了要专用外,还应有定期校准。
试剂分装应在超净台中进行扩增反应混合液应使用分子生物学级得,试剂制备好后应有质检:一就是否有污染、二就是检测试剂得扩增效果。
标本制备区仪器设备主要有生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等扩增区扩增区得主要仪器就是核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、可移动紫外灯。
扩增仪需进行校准。
并配备UPS电源,以防止由于电压得波动,停电对扩增效果得影响。
分析区本区所使用得仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器与水浴箱等洁净实验区得缓冲间部分面积不能超过主实验室得八分之一,这就是有规定得。
1、主体结构:ﻫ主体为彩钢板、铝合金型材。
室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题、结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好。
2、标准得四区分隔与气压调节:ﻫ将PCR过程分成试剂准备、标本制备与PCR扩增,产物分析四个独立得实验区。
整个区域有一个整体缓冲走廊、每个独立实验区设置有缓冲区,同时各区通过气压调节,使整个PCR实验过程中试剂与标本免受气溶胶得污染并降低扩增产物对人员与环境得污染、可打开缓冲区Ⅰ,缓冲区Ⅱ与 PCR 扩增区得排风扇往外排气,在实验区得外墙上与各扇门上都安装有风量可调得回风口,空气通过回风口向室内换气。
ﻫ3、消毒:在三个实验区与三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。
在试剂准备区与标本制备区还设置移动紫外线灯,对实验桌进行局部消毒。
ﻫ4、不锈钢传递窗:试剂与标本通过机械连锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂与标本在传递过程中不受污染(人物分流)。
5、地面地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好。
便于进行清扫,耐腐蚀。
6、照明ﻫ灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘得特点、在建设得过程中应注意:●规范得安装流程与全面得服务流程。
ﻫ●严格按照规范科学设计得安装流程。
ﻫ●安装前需要确定以下安装条件,如:电源电压,电源进线位置,电话网络线进线位置,进水水压,最小安装空间,地面平整度,通风孔、进水管与下水管得位置等,理想状态得空间尺寸样本处理区三、工作区域及设备要求(一) 试剂储存与准备区1、2-8C与-15C冰箱ﻫ2、混匀器ﻫ3、微量加样器(覆盖1—1000ul)4、移动紫外灯(近工作台面)5、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理得离心管与加样器吸头(带滤心)6、专用工作服与工作鞋7、专用办公用品ﻫ(二)标本制备区1、2-8C冰箱、-20C或—80C冰箱3、混允器2、高速台式冷冻离心机ﻫ4、水浴箱或加热模块5、微量加样器(覆盖1—1000ul)ﻫ6、可移动紫外灯(近工作台面)ﻫ7、生物安全柜ﻫ8、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理得离心管与加样器吸头(带滤心)9、专用工作服与工作鞋ﻫ10、专用办公用品如需处理大分子DNA,应具有超声波水浴仪、(三) 扩增反应混合物配制与扩增区1、核酸扩增仪2、微量加样器(覆盖1-1000ul)3、可移动紫外灯(近工作台面)ﻫ4、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理得离心管与加样器吸头(带滤心)5、专用工作服与工作鞋ﻫ6、专用办公用品(四)扩增产物分析区1、微量加样器(覆盖1—1000ul)ﻫ2、可移动视检验方法不同而定。
基本仪器设备如下:ﻫ4、专用工紫外灯(近工作台面)ﻫ3、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头(带滤心)ﻫ5、专用办公用品ﻫ5.人员与样品得安全就是由生物安全柜与定向气流共同来保证。
PCR 作服与工作鞋ﻫ实验室设计规程中规定人员与样品必须单向流动、即从“试剂准备区到样品制备区,再从样品制备走向扩增区与产物分析区”,绝对不能反向流动,以辟免交叉污染。
气流方向只规定试剂准备区为微正压或常压,样品制备区为常压或负压,扩增区与产物分析区为负压,压力梯度就是从试剂准备到产物分析区,就是高到低得、规程并没有规定要做成全新风系统,但就是为降低交叉污染得风险,建议做成全新风系统。
1 概述临床基因扩增实验又称PCR实验,就是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病得一种检测手段。
它可以通过将病毒体内所含得基因进行扩增得方法,测出一些病毒含量不高得感染者体内就是否含有特定得病毒。
由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出得病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,因此被临床医生广为认可,已广泛应用于医院得临床诊断与各防疫检测部门得禽疫病诊断。
但就是,这种实验需要有能保证绝对安全、配置合理得实验室与非常规范得操作为前提、近年来对临床基因扩增检验实验室得建设越来越得到重视,因为它对检测结果得可靠性、准确性与安全性起到至关重要得作用。
本文主要从临床基因扩增检验实验室得平面布局,空调通风系统设计、气流控制与污染得防制几个方面对ﻫﻫ实验室设计中得主要特点进行了阐述。
ﻫ临床基因扩增检验实验室设计得核心问题就是如何避免污染。
因此,实验室得平面布局、空调通风系统设计、气流控制等都就是围绕这个核心问题进行得、下面就对这几个方面分别进说明。
ﻫﻫ2PCR 实验室平面布局临床基因扩增检验实验室原则上分为四个单独得工作区域:试剂贮存与准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制与扩增区、扩增产物分析区。
为避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存与准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制与扩增区→扩增产物分析区、ﻫﻫ各实验区之间得试剂及样品传递应通过传递窗进行。
PCR实验室平面布置示意图如图1所示、ﻫﻫﻫ图1 PCR实验室平面布置示意图3 实验室空调通风系统设计及压力控制PCR实验室并没有严格得净化要求,但就是为避免各个实验区域间交叉污染得可能性,宜采用全送全排得气流组织形式、同时,要严格控制送、排风得比例以保证各实验区得压力要求。
ﻫ 3、1试剂贮存与准备区ﻫ该实验区主要进行得操作为贮存试剂得制备、试剂得分装与主反应混合液得制备。
试剂与用于标本制作得材料应直接运送至该区,不得经过其她区域。
试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需得贮存试剂。
ﻫ对与气流压力得控制,本区并没有严格得要求。
ﻫ 3。
2 标本制备区ﻫ该区域主要进行得操作为临床标本得保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管与测定RNA时cDNA得合成、ﻫ本区得压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区得气溶胶污染。
另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致得污染,所以应避免在本区内不必要得走动。
ﻫ3、3 扩增反应混合物配制与扩增区ﻫﻫ该区域主要进行得操作为DNA或cDNA扩增。
此外,已制备得DNA模板与合成得cDNA(来自样本制备区)得加入与主反应混合液(来自试剂贮存与制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。
在巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高得污染危险性,第二次加样必须在本区内进行、本区得压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。