呼吸道合胞病毒检测方法比较
不同呼吸道病原谱抗体IgM检测方法在呼吸道感染诊断中的应用价值比较
不同呼吸道病原谱抗体IgM检测方法在呼吸道感染诊断中的应用价值比较李民① 【摘要】 目的：比较不同呼吸道病原谱抗体免疫球蛋白M（IgM）检测方法在呼吸道感染诊断中的应用价值。
方法：选取2020年1月—2022年12月于济南市第三人民医院住院的明确诊断为呼吸道感染的500例患者作为研究对象，采集血清，分别用间接免疫荧光法（IFA）、酶联免疫吸附法（ELISA）检测呼吸道合胞病毒-IgM抗体（RSV-IgM）、腺病毒-IgM 抗体（ADV-IgM）、甲型流感病毒-IgM抗体（IFZA-IgM）﹑乙型流感病毒-IgM抗体（IFZB-IgM）、副流感病毒-IgM抗体（HPIVs-IgM）、嗜肺军团菌-IgM抗体（LP-IgM）﹑肺炎衣原体-IgM抗体（CP-IgM）﹑肺炎支原体-IgM抗体（MP-IgM）。
以直接免疫荧光法（DFA）结果为金标准，比较IFA、ELISA检测上述指标的符合率，比较IFA和ELISA对不同标本采集时间病原体IgM抗体检测的符合率。
比较IFA和ELISA对不同疾病类型患者病原体IgM抗体检测的符合率。
结果：以DFA 结果为金标准，IFA检测CP-IgM、MP-IgM阳性符合率高于ELISA，差异有统计学意义（P<0.05）。
IFA、ELISA在7~14 d、15~21 d、>21 d的阳性符合率明显高于<7 d，差异有统计学意义（P<0.05）。
IFA检测支气管炎的阳性符合率高于咽峡炎，毛细支气管炎阳性符合率高于咽峡炎，差异有统计学意义（P<0.05）；ELISA检测支气管炎的阳性符合率高于肺炎、咽峡炎，差异有统计学意义（P<0.05）。
结论：IFA与ELISA均可快速检测血清lgM抗体，明确感染源，对指导治疗有积极的意义，有较高的价值。
但检测结果受发病时间、疾病类型的影响，应引起重视。
【关键词】 抗体IgM 间接免疫荧光法 酶联免疫吸附法 呼吸道感染 价值 doi：10.14033/ki.cfmr.2023.32.019 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2023）32-0073-04 Comparison of the Application Value of Different Respiratory Pathogen Spectrum Antibody IgM Detection Methods in the Diagnosis of Respiratory Infection/LI Min. //Chinese and Foreign Medical Research, 2023, 21(32): 73-76 [Abstract] Objective: To compare the application value of different respiratory pathogen spectrum antibody immunoglobulin M (IgM) detection methods in the diagnosis of respiratory infections. Method: A total of 500 patients who were hospitalized at Jinan Third People's Hospital from January 2020 to December 2022 and were diagnosed with respiratory tract infections were selected as the research subjects. Serum samples were collected, indirect immunofluorescence assay (IFA) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were used to detect respiratory syncytial virus-IgM antibodies (RSV-IgM), adenovirus-IgM antibodies (ADV-IgM), influenza A virus-IgM antibodies (IFZA-IgM), influenza B virus-IgM antibodies (IFZB-IgM), parainfluenza virus-IgM antibodies (HPIVs-IgM), legionella pneumophila-IgM antibodies (LP-IgM), chlamydia pneumoniae-IgM antibodies (CP-IgM), and mycoplasma pneumoniae-IgM antibodies (MP-IgM). Using direct immunofluorescence assay (DFA) results as the gold standard, IFA and ELISA were used to compare the coincidence rates of the above indicators, and IFA and ELISA were used to compare the coincidence rates of pathogen IgM antibody detection in different specimen collection times. The coincidence rate of IFA and ELISA for detection of pathogen IgM antibody in patients with different disease types was compared. Result: Using DFA results as the gold standard, the positive coincidence rate of CP-IgM and MP-IgM detected by IFA were higher than those by ELISA, and the differences were statistically significant (P<0.05). The positive coincidence rate of IFA and ELISA at 7-14 d, 15-21 d and >21 d were significantly higher than those at <7 d, and the differences were statistically significant (P<0.05). The positive coincidence rate of IFA in detecting bronchitis was higher than that of angina, and the positive coincidence rate of bronchiolitis was higher than that of angina, the differences were statistically significant (P<0.05). The positive coincidence rate of ELISA for bronchitis was higher than that for pneumonia and angina, and the difference was statistically significant (P<0.05). Conclusion: Both IFA and ELISA can quickly detect serum lgM antibody and identify the source of infection, which has positive significance for guiding treatment and has high value. However, the test results are affected by the time of onset and the type of disease, and should be paid attention to. [Key words] Antibody IgM Indirect immunofluorescence Enzyme-linked immunosorbent assay Respiratory tract infection Value First-author's address: Jinan Third People's Hospital, Jinan 250132, China①济南市第三人民医院 山东 济南 250132- 73 - 病原体引起的呼吸道感染是呼吸内科的常见病，不同病原体引起呼吸道感染可引起不同的临床症状，也可引起相同的症状，而同种病原体也可引起不同的呼吸道感染症状，所以快速诊断感染病原体对个体化治疗具有积极的指导意义[1]。
呼吸道感染的病原体检测与筛查方法
呼吸道感染的病原体检测与筛查方法呼吸道感染是指引起鼻咽、喉、气管和肺部炎症的疾病。
病原体多样化，包括病毒、细菌和真菌等。
为了准确诊断和及时采取治疗措施，呼吸道感染的病原体检测与筛查方法至关重要。
本文将介绍几种常用的呼吸道感染的病原体检测与筛查方法。
一、病毒核酸检测法病毒是引起呼吸道感染的主要病原体之一。
核酸检测法可通过提取样本中的病毒核酸，并采用PCR技术进行扩增和分析，从而确定感染的病毒类型。
这种方法检测速度快、敏感性高，能够精确识别呼吸道病毒感染，例如流感病毒、冠状病毒等。
此外，核酸检测法还有助于判断病毒的基因型和耐药性，为治疗提供依据。
二、细菌培养法细菌感染是呼吸道感染的另一个主要原因。
细菌培养法是通过将样本分离培养于不同培养基中，培养出细菌菌落，并通过形态学和生理学特征进行鉴定。
这种方法适用于检测多种呼吸道细菌感染，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等。
细菌培养法虽然耗时较长，但结果准确可靠，可用于指导临床合理使用抗生素。
三、快速免疫学检测法快速免疫学检测法是通过检测呼吸道感染病人体液中的特定抗体或抗原，来确定病原体的存在。
这种方法操作简单、迅速，结果可在数分钟内得出。
对于流行病学调查和大规模筛查非常有用。
例如，利用快速免疫学检测法可以检测出呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒等病原体。
四、荧光定量PCR法荧光定量PCR法是在常规PCR技术的基础上发展起来的一种高通量方法。
它采用特定的引物和探针结合荧光信号的定量分析，可同时检测多种呼吸道病原体。
这种方法的优势在于高通量、高效率和高灵敏度，提高了检测效率和准确性，对于大规模筛查和快速诊断非常有意义。
五、新型检测方法的研发随着科学技术的不断进步，新型的呼吸道感染病原体检测方法也在不断研发中。
例如，基因芯片技术可以同时检测数百种病原体，为快速诊断提供有力的支持。
此外，基于质谱技术的代谢组学分析和微生物组学研究也在广泛应用于呼吸道感染的病原体检测与筛查领域。
总结起来，呼吸道感染的病原体检测与筛查方法是非常重要的临床实践，有助于准确诊断、采取针对性的治疗措施，并对疫情的控制和预防起到关键作用。
两种快速检测呼吸道合胞病毒抗原的方法比较
供可靠 的诊断依据 。 目前 ， 床 上检 测 Ｒ Ｖ 的方 法 很 多 ， 直 接 荧 临 Ｓ 有
光免疫 法 （ ｉｃ ｍ ｎｆｏｅｅ ｓａ， Ｆ ） 间接 荧 Ｄｒ ｔｍ ｕｏｕｒ ｅａ ｙＤ Ａ 、 ｅ ｉ ｌ ｓ ｓ 光免 疫 法 、 联 酶 标 免 疫 法 、 ＬＳ 病 毒 分 离 、 Ｔ 桥 Ｅ ＩＡ、 Ｒ－ Ｐ Ｒ及核 酸杂 交 法 等 。但 均 需 要 特 殊 的仪 器设 备 ， Ｃ 且 出结果 相对 较慢 。本研 究是 用一 种免疫 层 析分 析
技术 （ｍ ｕ ｏｈｏ ａ ｇ ｐ ｉ ａｓｙ ＩＡ） 检 测 Ｒ Ｖ Ｉｍ ｎｅｒｍ ｔ ｒ ｈｃ ｓａ ，Ｃ 来 ｏａ Ｓ
抗原 ， 将此种 新方 法与 临床 常 用 的 Ｄ Ａ法 进行 比 并 Ｆ 较 分析 ， 从而找 出一种 快 速 、 确 、 便 的检 测方 法 。 准 方
１ 资 料 与方法
无 菌 操 作 取 约 １ｍ 转 运 培 养 物 于 ｌ
次性 试 管 中 ， 心 １ ｉ（８０转 ／ ｉ）弃 上 清 ， 离 ０ｍｎ １０ ｍｎ ，
管 口用 滤 纸 吸 干 。加 Ｐ Ｓ３至 ４滴 ， 散 管 底 ， Ｂ 打 加 Ｐ Ｓ至 ４Ｈｌ离 心 １ ｌ （８０转 ／ ｉ）弃 上 清 ， Ｂ ｌ ， ０Ⅱｎ １０ ｉ ｍｎ ， 管 口用滤 纸 吸干 。再 加 １ Ｐ Ｓ 打散 细胞 ， 吸头滴 滴 Ｂ， 用 加 在玻 片孔 内 ， 显微 镜观察 上皮 ， 用 细胞 少 的情况 要 注明 。待 片子 自然 干燥 后 将 片 子放 入 平 皿 ， 丙酮 用 浸没 片子 ， ２Ｃ一８Ｃ，０ｍｎ固定 。将 玻 片 晾干 ， 放 ￣ ￣ １ ｉ 放 ２Ｃ一８Ｃ ￣ ￣保存 待 染色 。染 色 时 ， 先将 片 子 放置 室 温 ， 加 染 液 １滴 ， 湿 盒 ３￣ 浴 ， 持 ３ ｉ。 滴 放 ７Ｃ温 保 ０ｍｎ Ｐ Ｓ冲洗后 ， 用 Ｐ Ｓ泡 １ ｉ。用 Ｐ Ｓ冲洗 几 次 Ｂ 再 Ｂ ０ｍｎ Ｂ 后吹 干片 子 。滴 封 固剂 盖 片 。用荧 光显 微 镜 观察 。 结果 判读 ： 细胞 浆呈苹 果绿 色荧 光 即为 阳性 细胞 ； 而
胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析
胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析伊洁;肖艳;刘亚昆;徐英春【摘要】Objective To investigate the sensitivity and specificity of colloidal gold immunochromatography assay in rapid detection of respiratory syncytial virus (RSV)antigen.Methods A total of 197 nasal-pharyngeal swabs (NPs)or nasal-pharyngeal aspirates (NPAs ) obtained from patients were tested by RSV assay kits, i. e., colloidal gold immunochromatography assay.The results determined by reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)were taken as pared to the results of RT-PCR,the sensitivity of the kit was different when testing different types of specimens or specimensobtained from patients of different ages.Results A total of 95 (48.2%)samples were positive for RSV tested by RT-PCR.The sensitivity and specificity of colloidal gold immunochromatography assay were 34.7% and 100%, respectively compared with RT-PCR results.The positive rate of the assay was higher in testing NPAs than NPs (36.2% vs 8.6%,P < 0.01 ), which was the same in the sensitivity (22.1% vs 12.6%). The positive rate of colloidal gold year old,RT-PCR method should be used for RSV detection in clinical practice to avoid missed diagnosis.%目的：分析胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒（RSV）抗原快速检测的灵敏度和特异度。
呼吸道合胞病感染的临床诊治指南
呼吸道合胞病感染的临床诊治指南呼吸道合胞病感染，又称为RSV感染，是一种常见的呼吸道疾病，主要由呼吸道合胞病病毒（RSV）引起。
该病毒主要感染婴幼儿和老年人，并可导致严重的呼吸道症状。
为了有效地诊断和治疗呼吸道合胞病感染，制定一份合理的临床诊治指南至关重要。
一、临床表现呼吸道合胞病感染的临床表现多样，常见症状包括咳嗽、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、发热等。
儿童常伴有食欲不振、哭闹、疲乏、呼吸急促等症状。
老年人可能出现咳出带黏液的咳痰、呼吸困难等严重症状。
对于出现呼吸道感染症状的患者，应高度怀疑呼吸道合胞病感染。
二、实验室检查在临床诊断中，实验室检查起着重要的作用。
对于可疑的呼吸道合胞病感染患者，可以通过咽拭子或鼻拭子来采集样本，使用融合抑制试验（Fusion Inhibition Test）或免疫荧光抗体染色试验（Immunofluorescence Assay）来检测RSV的抗原。
此外，也可以通过核酸检测方法，如PCR（聚合酶链反应）来检测RSV的核酸。
三、诊断标准呼吸道合胞病感染的诊断需符合以下标准：临床症状典型、病毒学检查阳性、排除其他呼吸道病原体感染。
在进行临床诊断时，需要综合考虑患者的临床表现、实验室检查结果以及流行病学资料。
四、治疗原则针对呼吸道合胞病感染，治疗的原则主要包括对症治疗和预防措施。
1. 对症治疗：a. 对于轻型病例，一般无需特殊治疗，休息、饮食调理、多喝水等措施即可缓解症状。
b. 对于中重型病例，可使用抗病毒药物治疗，如瑞德西韦，对症状有明显改善作用。
同时，应密切观察患者的呼吸情况，如有持续呼吸困难或氧合不足等严重症状，需及时给予氧疗、呼吸支持等治疗。
2. 预防措施：a. 对于免疫力低下的患者，如婴幼儿、老年人和慢性病患者，应加强个人卫生习惯，勤洗手、避免接触病毒源等。
b. 对于家庭中有感染者的家庭成员，应注意隔离措施，保持室内空气流通，使用口罩等。
c. 对于医疗保健工作者，应加强自身防护，戴口罩、手套等，避免交叉感染。
2020版：儿童呼吸道合胞病毒感染诊断、治疗和预防专家共识(全文)
2020版：儿童呼吸道合胞病毒感染诊断、治疗和预防专家共识(全文)和流行概况呼吸道合胞病毒是全球范围内最常见的儿童急性下呼吸道感染病原，尤其对五岁以下的儿童造成严重威胁。
早产儿、患有先天性心脏病或原发免疫缺陷的婴幼儿更容易受到感染，病情也更加严重。
然而，目前还没有RSV疫苗或有效的抗病毒药物用于治疗该病毒感染。
唯一可用于预防RSV感染的人源化特异性抗体帕利珠单抗尚未引进国内临床应用。
因此，我们需要进一步规范儿童RSV感染的诊断、治疗及预防。
2儿童RSV感染的病理生理特点及致病机制2.1病理生理特点RSV感染主要侵犯呼吸道上皮细胞，引起炎症反应和细胞死亡。
这些病理生理特点可能导致上呼吸道感染、下呼吸道感染、肺炎等严重疾病。
2.2致病机制RSV感染的致病机制包括直接细胞毒性和免疫反应。
RSV感染会激活宿主细胞的免疫系统，导致炎症反应和细胞损伤。
此外，RSV感染还可以干扰宿主免疫系统的正常功能，进一步加重病情。
3儿童RSV感染的诊断标准3.1临床表现儿童RSV感染的临床表现包括上呼吸道感染、下呼吸道感染、肺炎等症状。
常见的症状包括发热、咳嗽、喘息、呼吸急促等。
3.2实验室检查实验室检查可以帮助诊断儿童RSV感染，包括鼻咽拭子或喉拭子的RSV抗原检测、呼吸道分泌物的病毒核酸检测等。
4儿童RSV感染的治疗方法目前，尚无特效的抗病毒药物用于治疗儿童RSV感染。
临床上采用对症治疗和支持治疗的方法，包括保持水分平衡、氧疗、支气管扩张剂等。
5儿童RSV感染的预防措施5.1个体预防个体预防措施包括避免接触已感染的人、勤洗手、保持室内通风等。
5.2集体预防集体预防措施包括加强儿童疫苗接种、加强儿童医疗机构的感染控制措施等。
帕利珠单抗是一种有效的预防RSV感染的方法，但目前尚未引进国内临床应用。
RSV是最常见的婴幼儿ALRTI病原，其感染率随年龄增长而上升。
根据血清流行病学调查，人群抗RSVIgG抗体阳性率从1到6个月龄为71%，随后逐渐上升，在6到12个月龄、1到3岁、3到6岁和6岁以上分别为84%、89%、96%和98%，20岁以上则达到100%。
如何区分呼吸道合胞病毒和流感
呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，简称RSV）和流感（Influenza）都是常见的呼吸道感染病原体，它们在症状、传播途径和预防措施等方面有一定的相似性。
然而，它们之间还是存在一些区别的。
本文将从以下几个方面对呼吸道合胞病毒和流感进行区分：1. 病原体特点呼吸道合胞病毒是一种属于副黏液病毒科的单链负链RNA病毒，其特点是在电镜下观察到的病毒颗粒呈圆形或椭圆形，表面有类似皇冠状的突起。
呼吸道合胞病毒主要通过飞沫、密切接触和空气气溶胶传播。
流感是由A、B、C三种流感病毒引起的急性呼吸道传染病，其中A型和B型流感病毒对人类健康影响较大。
流感病毒也是单链负链RNA病毒，但其形态与呼吸道合胞病毒有所不同，流感病毒颗粒呈球形或六角形，表面有类似刺突的结构。
流感病毒主要通过飞沫、空气气溶胶和直接接触传播。
2. 症状特点呼吸道合胞病毒感染的症状主要包括咳嗽、喘息、鼻塞、流涕、发热等，病程一般为1-3周。
婴幼儿感染后可能出现呼吸急促、喂养困难等症状，严重时可能导致肺炎、支气管炎等并发症。
流感的症状与呼吸道合胞病毒感染相似，但通常更为严重。
流感的典型症状包括高热、寒战、咳嗽、喉咙痛、鼻塞、流涕、肌肉疼痛、头痛等。
部分患者可能出现恶心、呕吐和腹泻等消化道症状。
流感病程通常为1-2周，但部分患者可能出现并发症，如肺炎、心肌炎等。
3. 易感人群呼吸道合胞病毒感染主要发生在婴幼儿和儿童中，尤其是6个月以下的婴儿。
老年人和免疫功能低下的人群也容易感染呼吸道合胞病毒。
流感对各年龄段人群普遍易感，但儿童、老年人和免疫功能低下的人群感染后病情较重，并发症风险较高。
此外，孕妇感染流感后可能对胎儿造成不良影响。
4. 预防措施针对呼吸道合胞病毒和流感的预防措施主要包括疫苗接种、保持良好的个人卫生习惯和加强免疫力。
对于婴幼儿和高风险人群，建议接种相应的疫苗以降低感染风险。
此外，保持室内空气流通、勤洗手、避免拥挤的公共场所等也有助于降低感染风险。
呼吸道病毒九联检技术讲解
样本结果判断
阴性结果：可观察到军团菌、肺炎衣原体 和立克次体无荧光，支原体、腺病毒、甲 型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和副 流感病毒的细胞呈现红色。
临床灵敏度和特异性
病原体 嗜肺军团菌 肺炎支原体 Q热立克次体 肺炎衣原体 腺病毒 呼吸道合胞病毒 甲型流感病毒 乙型流感病毒 副流感病毒
对比方法 IFA ELISA IFA IFA ELISA ELISA ELISA ELISA ELISA
呼吸道病毒九联检技术
九项呼吸道感染病原体IgM抗体
采用间接免疫荧光法（IFA） 同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体
的IgM抗体 用于呼吸道感染疾病的辅助诊断。
可检的病原体包括： 嗜肺军团菌血清1型、 肺炎支原体、 Q热立克次体、 肺炎衣原体、 腺病毒、 呼吸道合胞病毒、 甲型流感病毒、 乙型流感病毒 副流感病毒1、2和3型。
结果判断
有效性判断 每一次试验都应设立阳性和阴性对照，以确认试验和试
剂盒的有效性。观察到的荧光模式应为： 阳性对照：腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流
感病毒对阳性质控的1-15%细胞出现苹果绿细胞核、胞 浆或胞膜荧光（在副流感病毒和呼吸道合胞病毒中能同 时观察到着色的合胞）；军团菌、衣原体或立克次体中 所有的细菌呈现出苹果绿荧光；支原体对阳性质控在细 胞外围呈现苹果绿色荧光。 阴性对照：军团菌、肺炎衣原体和立克次体无荧光，支 原体、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒 和副流感病毒的细胞呈现红色。
样本数量 82 62 74 61 74 97 46 40 36
阳性符合率 94.4% 96.8% 100.0% 100.0% 85.7% 93.8% 94.1% 100.0% 100.0%