紫外吸收光谱测定蒽醌(精)
紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量..
（2）单色器：由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱
镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置。 （3）吸收池（或比色皿）：一般有石英和玻璃两种。石英比 色皿适合用于可见-紫外区的测量。玻璃池只用于可见区。 为了减少反射损失，吸收池的光学面必须完全垂直于光束 方向。容器的光程一般为0.5～10厘米 （4）检测器：检测光信号，测量单色光通过溶液后光强度的
波长的光的吸收能力。
同一浓度的待测溶液对不同波长的光有不同的吸光度（定性 分析依据）;不论浓度大小如何，曲线的形状完全相同； 同一待测溶液，浓度愈大，吸光度也愈大（定量分析依据）。
3. 紫外-可见分光光度法的特点
灵敏度高：可进行微量分析10-5-10-6mol/L。
准确度高：误差为2-5%，符合微量分析的要求。 操作简便、分析速度快：几分钟
6.
思考题
范围内定性测定一份蒽醌标准溶液的紫外吸收光谱。
3．在选定波长下，以乙醇为参比，测定蒽醌标液吸
光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标
准曲线；计算此波长处的κ值。
4、根据蒽醌试液的吸光度，在标准曲线上查对应浓
度，计算蒽醌试样中蒽醌的含量，实现对试样中
蒽醌的定量分析
（五）实验结果处理和思考
1、绘制蒽醌吸收光谱图、绘制蒽醌标准曲线，求 出蒽醌摩尔吸收系数
变化，并将光信号转变成电信号。
（5）数据处理及记录：发展较快。较高级的光度计， 常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将 图谱、数据和操作条件都显示出来。
5、仪器类型
单波长单光束直读式分光光度计 单波长双光束自动记录式分光光度计 双波长双光束分光光度计。
二、紫外吸收光谱 测定蒽醌试样中蒽醌的含量
蒽醌色谱及药理
蒽酮类成分大多有抗菌活性，且苷元作用大于蒽醌苷类。 在常见苷元中，大黄酸的抗菌作用最强,另外还有大黄 素、芦荟大黄素。
3．抗肿瘤作用
蒽醌类化合物有一定的抗肿瘤活性。
含蒽醌中药实例—大黄
大黄为重要中药之一，具通里攻下、清热解毒、活血 通瘀等各种功能。其化学成分较复杂，有游离羟基蒽 醌、蒽苷、 苷及鞣苷等，其中以蒽苷含量为最高，还 有少量土大黄苷。通常认为含有土大黄苷的大黄质次。 此外，还含树脂类物质、碳水化合物及有机酸等多类 成分。
1. 芦荟大黄素 2. 大黄酸 3. 大黄素 4. 大黄酚 5.大黄素甲醚
HPLC含量测定结果
蒽醌类化合物的生物活性
1．泻下作用 （主要生物活性）
番泻叶、生大黄等常作为泻药应用于临床，泻下作用的 主要活性成分是蒽醌类，经研究分析大黄中各种蒽醌成 分的泻下作用，具有二蒽酮结构的番泻苷类泻下作用最 强，通过其代谢产物大黄酸蒽酮而起作用。
对照药材溶液: 大黄对照药材0.1g，同法制成。
展开条件：吸取上述两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶G薄层
板上，用石油醚-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展 开，取出，晾干，至紫外灯（365cm）下检视。
结果：供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的5个
橙黄色荧光斑点，置氨蒸气中熏后，日光灯下检视，斑点变为红色。
对照品溶液：另取大黄素对照品，加甲醇制成每1mL含0.1mg的
溶液作为对照品溶液。
薄层扫描：吸取供试品8µL、对照品溶液2µL与6µL，交叉点于同
一硅胶G薄层板上，正己烷-醋酸乙酯-甲酸（6：2：0.1）为展开剂， 展开取出，晾干。薄层扫描测定吸收度积分值。
薄层扫描含量测定结果
实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数
实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数一、实验目的1.掌握紫外吸收光谱法测定物质含量的原理和方法。
2.学习使用紫外分光光度计进行定量和定性分析。
3.通过实验测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。
二、实验原理紫外吸收光谱法是一种基于物质分子吸收紫外光后产生的特定波长处的吸光度与物质浓度的关系来进行定量分析的方法。
在本实验中，蒽醌分子在紫外光照射下会产生特征吸收，其吸光度与浓度之间存在线性关系。
通过测定试样在特定波长处的吸光度，可以计算出蒽醌的含量。
同时，通过标准曲线法，可以测定出该波长下蒽醌的摩尔吸光系数。
三、实验步骤1.准备实验仪器和试剂：紫外分光光度计、100mL容量瓶、电子天平、蒽醌标准品、蒽醌试样、实验用水。
2.配制标准溶液：分别称取一定量的蒽醌标准品，用实验用水溶解并定容至100mL容量瓶中，得到不同浓度的蒽醌标准溶液。
3.绘制标准曲线：分别测定不同浓度蒽醌标准溶液在特定波长处的吸光度，绘制吸光度与浓度之间的标准曲线。
4.测定试样：将蒽醌试样用实验用水溶解，并定容至100mL容量瓶中。
测定试样在特定波长处的吸光度。
5.数据处理：根据标准曲线，计算试样中蒽醌的含量；同时，通过摩尔吸光系数的计算公式，得出试样中蒽醌的摩尔吸光系数。
四、结果与讨论1.结果：实验数据包括标准曲线的数据以及试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。
通过线性回归分析，可以得出标准曲线的斜率和截距，进而计算出试样中蒽醌的含量。
摩尔吸光系数的计算公式为：ε = (斜率/截距) × 100% × 稀释倍数。
2.讨论：本实验通过紫外吸收光谱法成功地测定了蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。
这种方法具有操作简便、快速、准确度高等优点，适用于各种化合物的定量和定性分析。
此外，实验过程中需要注意以下几点：（1）在选择波长时，应选择具有最大摩尔吸光系数的波长进行测定，以提高测定的灵敏度和准确性。
紫外吸收光谱测定蒽醌
实验八紫外吸收光谱测定蒽醌粗品中蒽醌的含量和摩尔吸收系数ε实验目的1．学习应用紫外吸收光谱进行定量分析方法及ε的测定方法；2．掌握测定粗蒽醌试样时测定波长的选择方法。
基本原理利用紫外吸收光谱进行定量分析，同样须借助郎伯—比耳定律，而选择合适的测定波长是紫外吸收光谱定量分析的重要环节。
在蒽醌粗品中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图10-6所示，图10-6 蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱恩醌在波长251nm处有一强烈吸收蜂（ε 4.6×104），在波长323nm 处有一中等强度的吸收蜂（ε 4.7×103）。
若考虑测定灵敏度，似应选择251nm作为测定恩醌的波长，但是在251nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax224nm（ε 3.3×104）,测定将受到严重干扰。
而在323波长处邻苯二甲酸酐却无吸收，为此选用323nm波长作为蒽醌定量分析的测定波长更为合适。
摩尔吸光系数ε是吸收光度分析中的一个重要参数，在吸收蜂的最大吸收波长处的ε，既可用于定性鉴定，也可用于衡量物质对光的吸收能力，且是衡量吸光度定量分析方法灵敏程度的重要指标，其值通常利用求取标准曲线斜率的方法求得。
一、仪器730G型紫外—可见光分光光度计，或其它型号仪器二、试剂1．蒽醌、乙醇、邻苯二甲酸酐均为分析纯2．蒽醌粗品生产厂提供3．蒽醌标准储备液（2.000mg.ml-1）准确称取0.2000g蒽醌置于100mL烧杯中，用乙醇溶解后，转移到100mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用4．蒽醌标准使用液（0.040mg.mL-1）吸取1mL上述蒽醌标准储备液于50mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用三、实验条件蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱绘制蒽醌的定量分析及ε测定1．测定波长 323.0nm2．狭缝 0.01～2mm3. 参比溶液乙醇四、实验步骤1. 配制蒽醌标准溶液系列用吸量管分别吸取0.00mL，2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL上述蒽醌标准使用液于6只10mL容量瓶中，然后分别用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。
紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸收系数
实验7 紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸收系数一、实验目的1.掌握紫外吸收光谱法测定摩尔吸收系数的方法；2.了解紫外吸收光度法定量分析的过程；3.进一步学习科TU1901双光束紫外分光光度计的使用方法；二、实验原理利用紫外吸收光谱进行定量分析时，必须选择合适的测定波长。
在蒽醌试样中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图2-2-4所示。
由于在蒽醌分子结构中的双键共扼体系大于邻苯二甲酸酐，因此蒽醌的吸收峰红移比邻苯二甲酸酐大，且两者的吸收峰及其最大吸收波长各不相同，蒽醌在波长251nm处有一强烈吸收峰（κ=4.6×104L∙mol-1）在波长323nm处有一中等强度的吸收峰（κ=4.7×103L∙mol-1∙cm-1），而在251nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax(κ=3.3×104L∙mol-1∙cm-1 )，为了避开其干扰，选用323nm波长作为测定蒽醌的工作波长。
由于甲醇在250~350nm无吸收干扰，因此可用甲醇为参比溶液。
摩尔吸收系数κ是衡量吸收度定量分析方法灵敏度的重要指标，可利用求标准曲线斜率的方法求得。
三、仪器与试剂1.仪器：TU－1900双光束紫外可见分光光度计。
1cm 石英比色皿2.试剂（1）蒽醌、甲醇、邻苯二甲酸酐；（2）蒽醌试样；（3）4.0g∙L-1蒽醌标准贮备液：准确称取0.4000g蒽醌置于100mL烧杯中，用甲醇溶解后，转移到100mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀。
（4）0.0400 g∙L-1蒽醌标准溶液：吸取1.0mL上述蒽醌贮备液于100mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀。
四、实验步骤1. 蒽醌系列标准溶液的配制：在5只10mL容量瓶中，分别加入2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL蒽醌标准溶液（0.0400g∙L-1），然后用甲醇稀释到刻度，摇匀备用。
2. 称取0.1000g蒽醌试样于小烧杯中，用甲醇溶解后，转移至50mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀备用。
紫外光谱测定蒽醌含量流程
紫外光谱测定蒽醌含量流程英文回答：UV spectroscopy is a commonly used technique for determining the concentration of a compound in a sample. In the case of anthraquinone, a UV-visible spectrophotometer can be used to measure the absorbance of light at specific wavelengths. This absorbance is directly proportional tothe concentration of anthraquinone in the sample.To begin the analysis, a calibration curve is first constructed using known concentrations of anthraquinone. This curve relates the absorbance of light to the concentration of anthraquinone. By measuring the absorbance of the sample at the same wavelength, the concentration of anthraquinone can be determined using the calibration curve.The next step is to prepare the sample for analysis. This involves dissolving the anthraquinone in a suitable solvent, such as ethanol or methanol, to obtain a knownconcentration. The sample is then placed in a cuvette and inserted into the UV-visible spectrophotometer.Once the sample is in the spectrophotometer, the instrument is set to the desired wavelength for analysis. In the case of anthraquinone, a common wavelength used is around 254 nm. The spectrophotometer measures the absorbance of light at this wavelength and provides a reading.Using the calibration curve, the absorbance reading obtained from the sample can be converted into the concentration of anthraquinone. This concentration is then reported as the result of the analysis.In summary, the UV spectroscopy method for determining anthraquinone concentration involves constructing a calibration curve using known concentrations of the compound, preparing the sample for analysis, measuring the absorbance of light at a specific wavelength, and converting the absorbance reading into the concentration using the calibration curve.中文回答：紫外光谱是一种常用的测定样品中化合物浓度的技术。
紫外吸收光谱测定蒽醌实验报告
一、实验目的1. 熟悉紫外-可见分光光度计的仪器结构和工作原理。
2. 掌握紫外-可见吸收光谱的基本原理和应用。
3. 通过实验，测定蒽醌在紫外-可见光区域的吸收光谱，分析其分子结构对吸收光谱的影响。
二、实验原理紫外-可见吸收光谱法是一种基于物质分子对紫外-可见光的选择性吸收而建立起来的分析方法。
当分子中的电子从基态跃迁到激发态时，会吸收特定波长的光，产生吸收光谱。
蒽醌分子中含有共轭体系，其紫外-可见吸收光谱可以反映分子结构的信息。
实验中，通过将蒽醌溶液置于紫外-可见分光光度计中，测定其在不同波长下的吸光度，绘制出吸收光谱曲线。
根据吸收光谱曲线，可以分析蒽醌的分子结构，确定其最大吸收波长（λmax）和摩尔吸光系数（ε）。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、移液器、容量瓶、比色皿、电子天平、电子分析天平。
2. 试剂：蒽醌标准品、无水乙醇、蒸馏水。
四、实验步骤1. 配制标准溶液：准确称取一定量的蒽醌标准品，用无水乙醇溶解，配制成一系列不同浓度的标准溶液。
2. 比色皿清洗与干燥：使用蒸馏水清洗比色皿，然后用无水乙醇清洗并干燥。
3. 吸收光谱测定：将标准溶液分别倒入比色皿中，将比色皿置于紫外-可见分光光度计的样品池中，在波长范围为200-400nm内进行扫描，记录吸光度。
4. 绘制吸收光谱曲线：以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准溶液的吸收光谱曲线。
5. 未知样品测定：将待测样品用无水乙醇溶解，按照标准溶液的步骤进行吸光度测定，根据吸收光谱曲线，确定未知样品的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准溶液吸收光谱曲线：根据实验结果，绘制出标准溶液的吸收光谱曲线，可以看出蒽醌在约258nm处有一个明显的吸收峰。
2. 未知样品浓度测定：根据吸收光谱曲线，确定未知样品的浓度为C1。
3. 结果讨论：通过实验结果可以看出，蒽醌在紫外-可见光区域有明显的吸收峰，这与其分子结构中的共轭体系有关。
实验结果与文献报道相符，证明了实验方法的可行性。
紫法测定外分光光度蒽醌含量
紫外分光光度法测定蒽醌含量实验目的①学习紫外光谱测定蒽醌含量的原理和方法。
②了解当样品中有干扰物质存在时，入射光波长的选择方法。
③熟练使用紫外-可见分光光度计。
实验原理在一定波长和一定比色皿厚度下，绘制工作曲线，由工作曲线找出未知试样中蒽醌含量即可。
仪器与试剂（1）仪器紫外-可见分光光度计；石英吸收池；1000mL、50mL容量瓶各一个；10mL容量瓶10个。
（2）试剂蒽醌；邻苯二甲酸；甲醇（均为分析纯）；工业品蒽醌试样。
实验内容与操作步骤①0.100mg·mL﹣¹的蒽醌标准溶液：准确称取0.1000g蒽醌，加甲醇溶解后，定量转移至1000mL容量瓶中，用甲醇稀释至标线，摇匀。
②0.0400mg·mL﹣¹的蒽醌标准溶液：移取20.00mL质量浓度为0.100mgmg·mL ﹣¹的蒽醌标准溶液于50mL容量瓶中，用甲醇稀至标线，混匀。
③0.0900mg·mL﹣¹邻苯二甲酸标准溶液：准确称取0.900g邻苯二甲酸酐，加甲醇溶解后，定量转移至1000mL容量瓶中，用甲醇稀释至标线，摇匀。
（2）仪器使用前准备①打开样品室盖，取出样品室内干燥剂，接通电源，预热20min并点亮氘灯。
②检查仪器波长示值准确性。
清洗石英吸收池，进行成套性检验。
③将仪器调试至工作状态。
（3）绘制吸收曲线①蒽醌吸收曲线的绘制：移取0.0400mg·mL﹣¹的蒽醌标准溶液2.00mL于10mL 容量瓶中，用甲醇稀至标线，摇匀。
用1cm吸收池，以甲醇为参比，在200~380nm 波段，每隔10nm测定一次吸光度（峰值附近每隔2nm测一次）绘出吸收曲线，确定最大吸收波长。
②邻苯二甲酸酐吸收曲线绘制：取0.0900mg·mL﹣¹的邻苯二甲酸酐标准溶液于1cm吸收池中，以甲醇为参比，在240~330nm波段，每隔10nm测定一次吸光度（峰值附近每隔2nm测一次），绘出吸收曲线，确定最大吸收波长。
紫外吸收光谱法测量蒽醌教案
紫外吸收光谱法测量蒽醌教案教学目标：1.了解紫外吸收光谱法的基本原理和仪器装置。
2.理解蒽醌分子的结构和特性。
3.掌握使用紫外吸收光谱法测量蒽醌浓度的步骤和方法。
4.培养学生的实验设计和数据分析能力。
教学内容：1.紫外吸收光谱法的基本原理和仪器装置介绍。
2.蒽醌分子的结构和特性。
3.测量蒽醌浓度的实验步骤和方法。
4.实验设计和数据分析。
教学过程：一、导入（10分钟）1.引入光谱学的基本概念和重要性。
2.提问：你知道如何利用光谱学进行物质测量吗？二、理论讲解（30分钟）1.紫外吸收光谱法的基本原理：讲解分子能级跃迁和吸收光谱。
2.仪器装置介绍：讲解紫外可见分光光度计的组成和工作原理。
3.蒽醌的结构和特性：简要介绍其化学结构和一些重要特性。
三、实验步骤和方法（40分钟）1.实验前准备：清洗仪器、配置标准溶液。
2.标定曲线的制备：取一系列浓度已知的蒽醌溶液进行测量，绘制吸光度和浓度的标定曲线。
3.样品测量：取待测样品，通过测定其吸光度，并利用标定曲线计算出蒽醌浓度。
四、实验设计（30分钟）1.学生自行设计一个实验方案，包括实验材料、步骤和数据处理方法。
2.学生之间互相交流和讨论，改进实验方案。
五、数据分析与讨论（20分钟）1.学生组织实验数据，绘制标定曲线和样品浓度。
2.讨论实验结果的准确性和可靠性。
3.学生提出改进实验方法的意见和建议。
六、总结（10分钟）1.回顾实验的目的、步骤和结果。
2.总结紫外吸收光谱法测量蒽醌的关键点和注意事项。
教学反思：通过本次教案的设计和实施，学生能够全面了解紫外吸收光谱法的基本原理和仪器装置，并掌握使用该方法测量蒽醌浓度的步骤和方法。
通过实验设计和数据分析，学生的实验设计和数据处理能力得到了锻炼。
需要注意的是，在实验设计环节应给予学生足够的自由度和支持，鼓励他们创新思考和合作讨论。
紫外光谱测定蒽醌含量流程
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实验八紫外吸收光谱测定蒽醌
粗品中蒽醌的含量和摩尔吸收系数ε
实验目的
1．学习应用紫外吸收光谱进行定量分析方法及ε的测定方法；2．掌握测定粗蒽醌试样时测定波长的选择方法。
基本原理
利用紫外吸收光谱进行定量分析，同样须借助郎伯—比耳定律，而选择合适的测定波长是紫外吸收光谱定量分析的重要环节。
在蒽醌粗品中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图10-6所示，
图10-6 蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱
恩醌在波长251nm处有一强烈吸收蜂（ε4.6×104），在波长323nm 处有一中等强度的吸收蜂（ε4.7×103）。
若考虑测定灵敏度，似应选择251nm作为测定恩醌的波长，但是在251nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax224nm（ε3.3×104）,测定
将受到严重干扰。
而在323波长处邻苯二甲酸酐却无吸收，为此选用323nm波长作为蒽醌定量分析的测定波长更为合适。
摩尔吸光系数ε是吸收光度分析中的一个重要参数，在吸收蜂的最大吸收波长处的ε，既可用于定性鉴定，也可用于衡量物质对光的吸收能力，且是衡量吸光度定量分析方法灵敏程度的重要指标，其值通常利用求取标准曲线斜率的方法求得。
一、仪器
730G型紫外—可见光分光光度计，或其它型号仪器
二、试剂
1．蒽醌、乙醇、邻苯二甲酸酐均为分析纯
2．蒽醌粗品生产厂提供
3．蒽醌标准储备液（2.000mg.ml-1）准确称取0.2000g蒽醌置于100mL烧杯中，用乙醇溶解后，转移到100mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用
4．蒽醌标准使用液（0.040mg.mL-1）吸取1mL上述蒽醌标准储备液于50mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用
三、实验条件
蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱绘制
蒽醌的定量分析及ε测定
1．测定波长 323.0nm
2．狭缝 0.01～2mm
3. 参比溶液乙醇
四、实验步骤
1. 配制蒽醌标准溶液系列用吸量管分别吸取0.00mL，
2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL上述蒽醌标准使用液于6只10mL容量瓶中，然后分别用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。
2. 称取0.0500g蒽醌粗品于50mL烧杯中，用乙醇溶解，然后转移到25mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。
3. 根据实验条件，将730G型分光光度计或或其它型号仪器按其操作步骤进行调节。
4. 取蒽醌标准溶液系列中一份溶液，以乙醇做参比溶液，测量蒽醌的紫外吸收光谱。
5. 配制浓度为0.01mg.mL-1邻苯二甲酸酐的乙醇溶液10mL,并测绘其紫外吸收光谱（以乙醇作参比溶液）。
6.以乙醇为参考,在323.0nm处测量蒽醌标准溶液系列和蒽醌粗品试液的吸光度。
五、数据及处理
1．记录实验条件
（1）测定波长（2）狭缝（3）光源（4）光电管（5）石英（6）参比溶液（7）仪器型号
2．比较绘制得到蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外吸收光谱，并与图10-6对照，说明选择测定波长的依据。
3．以蒽醌标准溶液系列的吸光度为纵坐标，质量浓度为横坐标绘制蒽醌的标准曲线。
计算线性回归方程，求蒽醌标准曲线的斜率a、截距b和相关系数r,并计算蒽醌的ε。
4．根据蒽醌粗品试液的吸光度，通过线性回归方程求出其质量浓度，并根据试样配制情况，计算蒽醌粗品中蒽醌的质量分数。
思考题
1.简述利用紫外线吸收光谱进行定量分析的基本步骤.
2.在紫外线吸收光谱定量分析时测绘吸收光谱(即紫外线光谱)有何意义?
3.简述紫外线吸收光谱定量分析时选择测量波长的原则.
4.在光度分析中参比溶液的作用是什么？
5．本实验为什么要用乙醇作参比溶液，可否用其它溶剂（如水）来代替，为什么？
6．在光度分析中测绘物质的吸收光谱有何意义？
思考题答案:
1.简述利用紫外线吸收光谱进行定量分析的基本步骤.
（1）开启主机和计算机,进入紫外软件操作系统,待仪器自检完成后
（2）将待测样品组分的标准溶液配成一定浓度的溶液，做紫外可见光谱，找出最大吸收波长。
（3）将波长固定在最大吸收波长处。
测定一系列不同浓度待测样品组分的标准溶液的吸光度。
以溶液浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，做标准工作曲线。
（4）未知样品用相同溶剂配成合适浓度的溶液，在最大吸收波长处测定其。
吸光度A
未
（5）在标准工作曲线上找出对应A
的浓度，再计算未知样品中待测组分
未
的含量。
2.在紫外线吸收光谱定量分析时测绘吸收光谱(即紫外线光谱)有何意义?
用定性分析来确定该物质的最大吸收吸光值,在做定量分析时就选最大吸光值的波长来做定量扫描.因为只有在紫外—可见光区（200～800nm）有吸收的物质才可以做定量分析，ε值越大越有利于紫外—可见光谱进行定量分析。
3.简述紫外线吸收光谱定量分析时选择测量波长的原则.
先测绘吸收光谱,在吸收光谱图中选择最大吸收峰的波长做测量波长,如果最大吸收峰处和杂质的紫外吸收峰有严重干扰,要选择其他无干扰的特征吸收峰波长作为测量波长.
4.在光度分析中参比溶液的作用是什么？
参比溶液是为了不受到溶剂吸收的干扰，所以测定时应该选用纯溶剂作空白。
因为有的溶剂本身在紫外光谱区也有一定的吸收波长范围。
5．本实验为什么要用乙醇作参比溶液，可否用其它溶剂（如水）来代替，为什么？
不行,因为有的溶剂本身在紫外光谱区也有一定的吸收波长范围，参比溶液是为了使不受到溶剂吸收的干扰，所以测定时应该选用纯溶剂作空白。